一種黃花貍藻的快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及一種植物繁殖方法，特別是一種黃花貍藻的快速繁殖方法。
【背景技術(shù)】
[0002]黃花貍藻(Utricularia aurea Lour.)為貍藻科，一年生草本植物。多生長(zhǎng)在水田中或靜水池塘的淺水地方。在大型水體上設(shè)置立體綠化或水面綠化的區(qū)域種植，可增加水體的景觀多樣性。但其栽培較難，要求水質(zhì)清潔，無(wú)污染。為了防止黃花貍藻野生資源滅絕，保證黃花貍藻資源的可持續(xù)利用，需要對(duì)黃花貍藻進(jìn)行種苗繁育技術(shù)研究，以保障充足的種苗為園林水體景觀大規(guī)模使用?，F(xiàn)有技術(shù)中未見黃花貍的組織培養(yǎng)技術(shù)報(bào)到。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種黃花貍藻的快速繁殖方法，能夠有效快速地生產(chǎn)黃花貍藻種苗，實(shí)現(xiàn)黃花貍藻種苗的工廠化育苗，以滿足生產(chǎn)上的需要。
[0004]本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案達(dá)到上述目的:一種黃花貍藻組培苗的快速繁殖方法，包括以下步驟:
[0005](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用2￥八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來(lái)水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升0.lv/v%升汞消毒8-10min、無(wú)菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無(wú)菌水為經(jīng)高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0006](2)獲得無(wú)菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺(tái)上接種到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，后獲得無(wú)菌試管苗，其中培養(yǎng)基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，
[0007](3)試管苗快速繁殖培養(yǎng):將步驟(2)中得到的無(wú)菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天得到試管苗，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加1.0-3.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.3-1.0mg/L的激動(dòng)素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8。
[0008](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內(nèi)打開瓶蓋，在瓶中加入自來(lái)水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養(yǎng)基，移植至水草水簇箱。
[0009]本發(fā)明的突出優(yōu)點(diǎn)在于:
[0010](1)采用組織培養(yǎng)技術(shù)繁育黃花貍藻種苗具有繁殖速度快、種苗質(zhì)量均一，且不受時(shí)間、空間、季節(jié)限制等突出優(yōu)點(diǎn)，縮短了種苗繁育周期，提高了種苗質(zhì)量，實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，滿足生產(chǎn)上的需要。
[0011](2)采用本發(fā)明所述的培養(yǎng)方法得到的黃花貍藻試管苗繁殖系數(shù)達(dá)到30-50倍，移植至水草水簇箱成活率達(dá)到95-98 %。
【具體實(shí)施方式】
[0012]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)一步說(shuō)明。
[0013]實(shí)施例1
[0014]本發(fā)明所述黃花貍藻的快速繁殖方法的一個(gè)實(shí)例，包括以下步驟:
[0015](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用27八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來(lái)水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升0.lv/v%升汞消毒8-10min、無(wú)菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無(wú)菌水為經(jīng)高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0016](2)獲得無(wú)菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺(tái)上接種到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，后獲得無(wú)菌試管苗，其中培養(yǎng)基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，
[0017](3)試管苗快速繁殖培養(yǎng):將步驟(2)中得到的無(wú)菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天得到試管苗，其繁殖系數(shù)達(dá)到30倍，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加1.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.1mg/L的吲哚乙酸IAA、0.3mg/L的激動(dòng)素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8。
[0018](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內(nèi)打開瓶蓋，在瓶中加入自來(lái)水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養(yǎng)基，移植至水草水簇箱，成活率達(dá)到95 %。
[0019]實(shí)施例2
[0020]本發(fā)明所述黃花貍藻的快速繁殖方法的一個(gè)實(shí)例，包括以下步驟:
[0021](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用27八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來(lái)水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升0 Λν/ν%升汞消毒8-10min、無(wú)菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無(wú)菌水為經(jīng)高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0022](2)獲得無(wú)菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺(tái)上接種到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，后獲得無(wú)菌試管苗，其中培養(yǎng)基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，
[0023](3)試管苗快速繁殖培養(yǎng):將步驟(2)中得到的無(wú)菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天得到試管苗，其繁殖系數(shù)達(dá)到50倍，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加2.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、
0.3mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.5mg/L的激動(dòng)素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為
5.8ο
[0024](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內(nèi)打開瓶蓋，在瓶中加入自來(lái)水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養(yǎng)基，移植至水草水簇箱，成活率達(dá)到98 %。
[0025]實(shí)施例3
[0026]本發(fā)明所述黃花貍藻的快速繁殖方法的一個(gè)實(shí)例，包括以下步驟:
[0027](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用2￥八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來(lái)水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升Ο.lv/v%升汞消毒8-10min、無(wú)菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無(wú)菌水為經(jīng)高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0028](2)獲得無(wú)菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺(tái)上接種到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，后獲得無(wú)菌試管苗，其中培養(yǎng)基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，
[0029](3)試管苗快速繁殖培養(yǎng):將步驟(2)中得到的無(wú)菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天得到試管苗，其繁殖系數(shù)達(dá)到43倍，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加2.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、0.5mg/L的吲哚乙酸ΙΑΑ、1.0mg/L的激動(dòng)素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8。
[0030](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內(nèi)打開瓶蓋，在瓶中加入自來(lái)水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養(yǎng)基，移植至水草水簇箱，成活率達(dá)到97 %。[0031 ] 實(shí)施例4
[0032]本發(fā)明所述黃花貍藻的快速繁殖方法的一個(gè)實(shí)例，包括以下步驟:
[0033](1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用27八％洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來(lái)水沖洗15-30min、添加了 2_3滴吐溫-20的100毫升0 Λν/ν%升汞消毒8-10min、無(wú)菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無(wú)菌水為經(jīng)高溫高壓滅菌的蒸餾水，
[0034](2)獲得無(wú)菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺(tái)上接種到MS+1.0mg/L6_BA+0.5mg/LNAA培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，后獲得無(wú)菌試管苗，其中培養(yǎng)基中添加30g//L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8，
[0035](3)試管苗快速繁殖培養(yǎng):將步驟(2)中得到的無(wú)菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天得到試管苗，其繁殖系數(shù)達(dá)到39倍，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加3.0mg/L的芐基腺嘌呤6-BA、
0.5mg/L的吲哚乙酸IAA、1.0mg/L的激動(dòng)素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為
5.8ο
[0036](4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20_30°C的室內(nèi)打開瓶蓋，在瓶中加入自來(lái)水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養(yǎng)基，移植至水草水簇箱，成活率達(dá)到96.3%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種黃花貍藻的快速繁殖方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)外植體的選擇與消毒:取黃花貍藻的枝葉作為外植體，依次用2v/v%洗潔精水溶液浸泡5min、線狀自來(lái)水沖洗15-30min、添加了 2-3滴吐溫-20的100毫升0.1￥八％升汞消毒8-lOmin、無(wú)菌水沖洗3-5次，最后用消毒濾紙除去表面水分，得到外植體，其中無(wú)菌水為經(jīng)高溫高壓滅菌的蒸餾水， (2)獲得無(wú)菌試管苗步驟(1)得到的外植體在超凈工作臺(tái)上接種到MS+1.0mg/L6-BA+.0.5mg/LNAA培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天，獲得無(wú)菌試管苗，其中培養(yǎng)基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8， (3)試管苗快速繁殖培養(yǎng):將步驟(2)中得到的無(wú)菌試管苗置于MS繁殖培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強(qiáng)度15001ux，光照時(shí)間為8-10小時(shí)/天的條件下培養(yǎng)30天得到試管苗，其中MS繁殖培養(yǎng)基中添加1.0-3.011^/1的芐基腺嘌呤6-84、0.1-0.511^/1的吲哚乙酸ΙΑΑ、0.3-1.0mg/L的激動(dòng)素KT、30g/L蔗糖和3.4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5.8， (4)煉苗與移栽:步驟(3)獲得的試管苗，在室溫為20-30°C的室內(nèi)打開瓶蓋，在瓶中加入自來(lái)水至容積的2/3，煉苗2-4天，洗凈培養(yǎng)基，移植至水草水簇箱。
【專利摘要】一種黃花貍藻的快速繁殖方法，包括如下步驟：(1)取黃花貍藻枝葉為外植體進(jìn)行消毒；(2)將消毒后的外植體接種到MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA培養(yǎng)基上誘導(dǎo)發(fā)芽得到無(wú)菌試管苗；(3)將所述無(wú)菌試管苗分株置于繁殖培養(yǎng)基中進(jìn)行試管苗快速繁殖培養(yǎng)獲得大量試管苗；(4)將試管苗進(jìn)行煉苗后移植至水草水簇箱。采用本發(fā)明所述的繁殖方法黃花貍藻試管苗繁殖系數(shù)達(dá)到30-50倍，移植至水草水簇箱成活率達(dá)到95-98％，有效解決了黃花貍藻的規(guī)模化育苗問(wèn)題。
【IPC分類】A01H4/00
【公開號(hào)】CN105475134
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510860634
【發(fā)明人】李林軒, 韋坤華, 韋范, 繆劍華, 李翠, 韋瑩, 王一諾, 肖東
【申請(qǐng)人】廣西壯族自治區(qū)藥用植物園
【公開日】2016年4月13日
【申請(qǐng)日】2015年11月30日