一種四倍體玉米的育種方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物育種領域，尤其設及一種四倍體玉米的育種方法。
【背景技術】
[0002] 人工誘變育種已成為現(xiàn)代育種學的重要手段之一，在農業(yè)生產中發(fā)揮了巨大的作 用。因此近幾十年來，人們對多倍體進行了深入研究，不僅為進化提供大量證據(jù)，而且在生 產實踐上有著廣泛的應用價值。隨著玉米雜種優(yōu)勢研究和利用的進一步深入，對育種材料 的要求越來越高，玉米四倍體顆粒大、產量高，有很好的增產前景，將誘變育種應用于實際 的玉米育種工作中是目前育種工作的重點之一。但是現(xiàn)在所采用的誘變劑大多成分簡單， 對植株的誘變準確性不高，且容易造成植株生長緩慢，容易出現(xiàn)爛苗、死苗現(xiàn)象，難W實現(xiàn) 玉米四倍體的精確誘導。因此，有必要開發(fā)一種能夠精確誘導產生玉米四倍體的育種方法， W滿足市場的需求。
[0003] 中國專利CN201310566078. 5公開了一種利用摩擦禾的未減數(shù)配子特性培育玉米 異源多倍體的方法，屬于玉米遠緣雜交領域。本發(fā)明WMTF-1為母本，W玉米或四倍體多年 生類玉米為父本雜交，然后選擇能越冬、分葉數(shù)在15個W上，且染色體數(shù)為母本染色體數(shù) 與父本雄配子染色體數(shù)之和的雜交后代植株，即為新的玉米異源多倍體。但是，該培育方法 容易導致植株出現(xiàn)爛苗、死苗現(xiàn)象，質量不穩(wěn)定。
[0004] 中國專利CN201310115490. 5公開了一種利用空間誘變選育玉米強優(yōu)勢雜交組合 親本的方法，步驟為：利用返回式衛(wèi)星搭載玉米自交系或雜交種；回收當代種子單粒播種， 不間苗，全部自交；自交一代按穗行種植，先選擇優(yōu)良穗行，再在優(yōu)良穗行中選擇優(yōu)良單株 自交；自交二代加大種植群體，增加選擇壓力，繼續(xù)優(yōu)中選優(yōu)自交；自交Ξ代采用雙列雜交 配制組合，誘變系繼續(xù)自交；多點種植鑒定雜交組合，通過配合力分析選擇綜合性狀表現(xiàn)優(yōu) 良的誘變株系和特殊配合力高的雜交組合。但是該方法不能實現(xiàn)精確誘變，制備失敗率高， 制作成本高。
[0005] 因此急需一種誘變成功率高、能夠精確誘導、不爛苗的玉米四倍體的育種方法。

【發(fā)明內容】

[0006] 本發(fā)明針對上述問題，提供一種四倍體玉米的育種方法，育種方法包括選種、種 子萌發(fā)培育、誘變和幼苗培育；誘變?yōu)椴捎没瘜W誘變的方式進行；本發(fā)明玉米四倍體的誘 變方法，誘變成功率高、不爛苗；化學誘變采用的誘變劑包括：秋水仙素、異生長素、糞拼乙 燒、甲基橫酸乙醋、乙締亞胺、亞硝基乙基脈燒、亞硝基甲基脈燒、硫酸二乙醋、重氮絲氨酸、 絲裂毒素C的混合劑，誘變劑的重量份組成為：秋水仙素0. 1份~0. 3份、異生長素0. 1份 ~0. 3份、糞拼乙燒0. 1份~0. 3份、甲基橫酸乙醋0. 1份~0. 3份、乙締亞胺0. 1份~0. 3份、 亞硝基乙基脈燒0. 1份~0. 3份、亞硝基甲基脈燒0. 1份~0. 3份、硫酸二乙醋0. 1份~0. 3 份、重氮絲氨酸1份~3份、絲裂毒素C1份~5份、純凈水1000份~5000份。采用的化學誘 變劑經過精密的配比，能夠實現(xiàn)四倍體玉米的精確誘導。
[0007] 進一步地，選種為：選擇外觀形狀好、無病蟲害、無損傷、無腐爛斑點、無崎形的玉 米種子，種植后經人工授粉培育出成熟的玉米種子。
[0008] 更進一步地，種子萌發(fā)培育為：將玉米種子浸泡在水中，放入培養(yǎng)房中培養(yǎng) 4她~72h，至種子發(fā)芽，培養(yǎng)房的溫度為35°C~45°C。
[0009] 更進一步地，誘變?yōu)椋哼x用長15cm的幼芽，移栽到行距為50cm~80cm，間距為 50cm~80cm的基質上進行誘變培養(yǎng)，培養(yǎng)3天~5天后在幼芽上砍Ξ排魚鱗口，魚鱗口間隔 3cm~5cm，將砍好魚鱗口的幼芽固定于培育袋中，在幼芽的各個創(chuàng)口處均勻的涂抹誘變劑， 每隔12小時涂抹一次，連續(xù)涂抹10~20次。本發(fā)明操作簡單，育種時間短，育種效率高。
[0010] 更進一步地，基質為銀末和河沙拌勻后噴水潮濕，其中銀末與河沙的體積比為2 : 1〇
[0011] 更進一步地，基質還需要控制濕度為709?^85%。
[0012] 更進一步地，誘變培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為：溫度25°C~3(TC，每天日照她~12h，光照強 度 60μmol·m2 ·S1-100μmol·m2 ·S1。
[0013] 進一步地，幼苗培育為：將誘變后的幼苗連同基質一起移栽到試驗田中，1~3天繼 續(xù)涂抹誘變劑，每天一次，3天后自然生長。
[0014] 進一步地，誘變劑的配置過程為：將按劑量份的秋水仙素溶于按劑量份的純凈水 中，然后依次加入異生長素、糞拼乙燒、甲基橫酸乙醋、乙締亞胺、亞硝基乙基脈燒、亞硝基 甲基脈燒、硫酸二乙醋、重氮絲氨酸、絲裂毒素C，最后用飽和肥1溶液和飽和化0H溶液調節(jié) 誘變劑溶液的pH，至抑為7. 0~7. 5。誘變劑保存方便，可連續(xù)使用，誘變劑配置后的穩(wěn)定性 好。
[0015] 進一步地，誘變劑配置好后，放在0°C~4°C避光保存。
[001引本發(fā)明的優(yōu)點是： 1. 本發(fā)明玉米四倍體的誘變方法，誘變成功率高、不爛苗，有著廣泛的市場前景； 2. 本發(fā)明玉米四倍體的誘變方法采用的化學誘變劑經過精密的配比，能夠實現(xiàn)四倍體 玉米的精確誘導； 3. 本發(fā)明育種方法處理的玉米成長后產量高、生長周期短，具有競爭優(yōu)勢； 4. 本發(fā)明育種方法操作簡單，易于大范圍推廣。
[0017] 除了上面所描述的目的、特征和優(yōu)點之外，本發(fā)明還有其它的目的、特征和優(yōu)點。 下面將參照【具體實施方式】，對本發(fā)明作進一步詳細的說明。
【具體實施方式】
[0018]W下結合實施例對本發(fā)明進行詳細說明，但是本發(fā)明可W由權利要求限定和覆蓋 的多種不同方式實施。
[001引 實施例1 一種四倍體玉米的育種方法 具體步驟包括選種、種子萌發(fā)培育、誘變和幼苗培育。誘變?yōu)椴捎没瘜W誘變的方式進 行；化學誘變采用的誘變劑包括：秋水仙素0. 1份、異生長素0. 1份、糞拼乙燒0. 1份、甲基 橫酸乙醋0. 1份、乙締亞胺0. 1份、亞硝基乙基脈燒0. 1份、亞硝基甲基脈燒0. 1份、硫酸二 乙醋0. 1份、重氮絲氨酸1份、絲裂毒素C1份、純凈水1000份。誘變劑的配置過程為：將按 劑量份的秋水仙素溶于按劑量份的純凈水中，然后依次加入異生長素、糞拼乙燒、甲基橫酸 乙醋、乙締亞胺、亞硝基乙基脈燒、亞硝基甲基脈燒、硫酸二乙醋、重氮絲氨酸、絲裂毒素C， 最后用飽和肥1溶液和飽和化0H溶液調節(jié)誘變劑溶液的抑，至抑為7. 0 ;誘變劑配置好 后，放在0°C避光保存。選種為：選擇外觀形狀好、無病蟲害、無損傷、無腐爛斑點、無崎形的 玉米種子，種植后經人工授粉培育出成熟的玉米種子。種子萌發(fā)培育為：將玉米種子浸泡在 水中，放入培養(yǎng)房中培養(yǎng)4她，至種子發(fā)芽，培養(yǎng)房的溫度為35Γ。誘變?yōu)椋哼x用長15cm的 幼芽，移栽到行距為50畑1，間距為50cm的基質上進行誘變培養(yǎng)，培養(yǎng)3天后在幼芽上砍Ξ 排魚鱗口，魚鱗口間隔3cm，將砍好魚鱗口的幼芽固定于培育袋中，在幼芽的各個創(chuàng)口處均 勻的涂抹誘變劑，每隔12小時涂抹一次，連續(xù)涂抹10次；基質為銀末和河沙拌勻后噴水潮 濕，控制濕度為70%，其中銀末與河沙的體積比為2 :1。誘變培養(yǎng)的培養(yǎng)條件為：溫度25°C， 每天日照化，光照強度60μmol·m2 ·S1。幼苗培育為：將誘變后的幼苗連同基質一起移 栽到試驗田中，1~3天繼續(xù)涂抹誘變劑，每天一次，3天后自然生長。
[0020] 實施例2 一種四倍體玉米的育種方法 具體步驟包括選種、種子萌發(fā)培育、誘變和幼苗培育。誘變?yōu)椴捎没瘜W誘變的方式進 行；化學誘變采用的誘變劑包括：秋水仙素0. 3份、異生長素0. 3份、糞拼乙燒0. 3份、甲基 橫酸乙醋0. 3份、乙締亞胺0. 3份、亞硝基乙基脈燒0. 3份、亞硝基甲基脈燒0. 3份、硫酸二 乙醋0. 3份、重氮絲氨酸3份、絲裂毒素巧份、純凈水5000份。誘變劑的配置過程為：將按 劑量份的秋水仙素溶于按劑量份的純凈水中，然后依次加入異生長素、糞拼乙燒、甲基橫酸 乙醋、乙締亞胺、亞硝基乙基脈燒、亞硝基甲基脈燒、硫酸二乙醋、重氮絲氨酸、絲裂毒素C， 最后用飽和肥1溶液和飽和化0H溶液調節(jié)誘變劑溶液的抑，至抑為7. 5 ;誘變劑配置好 后，放在4°C避光保存。選種為：選擇外觀形狀好、無病蟲害、無損傷、無腐爛斑點、無崎形的 玉米種子，種植后經人工授粉培育出成熟的玉米種子。種子萌發(fā)培育為：將玉米種子浸泡在 水中，放入培養(yǎng)房中培養(yǎng)72h，至種子發(fā)芽，培養(yǎng)房的溫度為45Γ。誘變?yōu)椋哼x用長15cm的 幼芽，移栽到行距為80畑1，間距為80cm的基質上進行誘變培養(yǎng)，培養(yǎng)3天~5天后在幼芽上 砍Ξ排魚鱗口，魚鱗口間隔3cm~5cm，將砍好魚鱗口的幼芽固定于培育袋中，在幼芽的各個 創(chuàng)口處均勻的涂抹誘變劑，每隔12小時涂抹一次，連續(xù)涂抹20次；基質為銀末和河沙拌勻 后噴水潮濕，控制濕度為85%，其中銀