白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物組培快繁技術(shù)領(lǐng)域；具體是一種白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]白及(Bletilla striata)為蘭科白及屬植物，產(chǎn)陜西南部、甘肅東南部、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、廣東、廣西、四川和貴州等地。生于海拔100-3200米的常綠闊葉林下、棟樹(shù)林或針葉林下以及路邊草叢或巖石縫中。其干燥塊莖是著名中藥，用藥歷史久遠(yuǎn)。性苦、澀、甘，微寒，入歸肺、肝、胃經(jīng)，有收斂止血、清熱消濕、消腫生肌、抗菌等功效。臨床上廣泛用于治療體內(nèi)外出血證如咳血吐血、外傷出血、皮膚皸裂、肺結(jié)核咳血、潰瘍病出血；瘡瘍腫毒；燒燙傷；免疫調(diào)節(jié)；腫瘤等，療效顯著。因此，白及具有很高的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。傳統(tǒng)上，白及用藥主要利用野生資源，隨著利用強(qiáng)度的加深，資源已逐漸萎縮，目前白及已被列為國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物，資源供求矛盾較為突出。因此，白及人工規(guī)?；N植是解決白及資源可持續(xù)利用、滿(mǎn)足現(xiàn)實(shí)需求的必由之路。白及為多年生草本，雖然能開(kāi)花結(jié)果，但種子無(wú)胚乳，在自然狀態(tài)下，極少萌發(fā)成苗。傳統(tǒng)上，藥農(nóng)主要依靠塊莖繁殖，繁殖效率低，塊莖消耗量大，種植成本高。國(guó)內(nèi)外學(xué)者嘗試組培快繁技術(shù)進(jìn)行白及種苗繁育，但傳統(tǒng)組培技術(shù)存在組培接種環(huán)節(jié)多，成本高等弊端。因此，如何優(yōu)化完善白及組培快繁技術(shù)，降低種苗生產(chǎn)成本，具有較大的現(xiàn)實(shí)意義和價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足提供一種白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基，采用該培養(yǎng)基能利用種子一次接種培養(yǎng)獲得根、假鱗莖、葉分化齊全的白及無(wú)菌苗，以解決白及種子不含胚乳，自然狀態(tài)下難以萌發(fā)或萌發(fā)率極低，傳統(tǒng)上通過(guò)種子無(wú)菌培養(yǎng)生產(chǎn)白及無(wú)菌苗，接種步驟較多，生產(chǎn)成本高的問(wèn)題。
[0004]本發(fā)明采用的技術(shù)方案:白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基組成為:包含調(diào)整的MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基、100-150ml/L椰子汁、0-2mg/L 6-BA、0_2mg/L NAA的特定固體培養(yǎng)基。
[0005]一種采用白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基進(jìn)行白及種子無(wú)菌培養(yǎng)萌發(fā)的方法，包括以下步驟:
(I)將采集的白及蒴果用自來(lái)水、84消毒液、75%酒精、無(wú)菌蒸餾水進(jìn)行組合消毒滅菌。
[0006](2)將白及種子播種于無(wú)菌培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基組成為:包含調(diào)整的MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基、100-150ml/L 椰子汁、0-2mg/L 6-BA、0_2mg/L NAA 的特定固體培養(yǎng)基。
[0007](3)將播有種子的培養(yǎng)瓶置于1600-2000LX的光照強(qiáng)度、室溫20_30°C的環(huán)境條件下，培養(yǎng)4-5個(gè)月，獲得根、假鱗莖、葉分化齊全的白及組培瓶苗。
[0008](4)將瓶苗轉(zhuǎn)移到栽培基質(zhì)中進(jìn)行煉苗栽培；控制白天生長(zhǎng)溫度為15 — 25° C，空氣相對(duì)濕度保持在70%以上，室外煉苗上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽(yáng)網(wǎng)適當(dāng)遮陰；
(5)獲得健壯種苗。
[0009]采用本發(fā)明的白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基，將白及種子在平衡培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)一次接種培養(yǎng)可以獲得根、假鱗莖、葉分化齊全的白及無(wú)菌苗，萌發(fā)率達(dá)到90%以上。本發(fā)明有效解決了白及種子無(wú)菌培養(yǎng)接種步驟較多的問(wèn)題，降低勞動(dòng)強(qiáng)度并降低生產(chǎn)成本，可用于白及種苗規(guī)?；a(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0010]實(shí)施例1
(I)于8月底采集成熟未開(kāi)裂的白及蒴果，用自來(lái)水沖洗數(shù)次；84消毒液消毒30分鐘、75%酒精消毒10分鐘、無(wú)菌蒸餾水洗3次，進(jìn)行組合消毒滅菌。
[0011](2)將白及種子播種于無(wú)菌培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基組成為:包含調(diào)整的MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基、150ml/L椰子汁、Omg/L 6_BA、0mg/L NAA的特定固體培養(yǎng)基；
(3)將播有種子的培養(yǎng)瓶置于光照強(qiáng)度1500-2000LX、溫度20-30°C環(huán)境條件下，培養(yǎng)4-5個(gè)月，獲得根、假鱗莖、葉分化齊全的白及組培瓶苗，萌發(fā)率達(dá)到90% ;
(4)將種苗轉(zhuǎn)移到栽培基質(zhì)中進(jìn)行煉苗栽培；控制白天生長(zhǎng)溫度為15— 25°C，空氣相對(duì)濕度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽(yáng)網(wǎng)適當(dāng)遮陰；
(5)獲得健壯種苗。
[0012]實(shí)施例2
(I)于8月底采集成熟未開(kāi)裂的白及蒴果，用自來(lái)水沖洗數(shù)次；84消毒液消毒30分鐘、75%酒精消毒10分鐘、無(wú)菌蒸餾水洗3次，進(jìn)行組合消毒滅菌。
[0013](2)將白及種子播種于無(wú)菌培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基組成為:包含調(diào)整的MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基、150ml/L椰子汁、0.05mg/L 6_BA、0.lmg/L NAA的特定固體培養(yǎng)基；
(3)將播有種子的培養(yǎng)瓶置于光照強(qiáng)度1500-2000LX、溫度20-30°C環(huán)境條件下，培養(yǎng)4-5個(gè)月，獲得根、假鱗莖、葉分化齊全的白及組培瓶苗，萌發(fā)率達(dá)到90% ;
(4)將種苗轉(zhuǎn)移到栽培基質(zhì)中進(jìn)行煉苗栽培；控制白天生長(zhǎng)溫度為15— 25°C，空氣相對(duì)濕度保持在70%以上，上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽(yáng)網(wǎng)適當(dāng)遮陰；
(5)獲得健壯種苗。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基，其特征是:所述培養(yǎng)基組成為:包含調(diào)整的MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基、100-150ml/L椰子汁、0-2mg/L 6-BA、0_2mg/L NAA的特定固體培養(yǎng)基。2.一種采用白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基進(jìn)行白及種子無(wú)菌培養(yǎng)萌發(fā)的方法，其特征是:包括以下步驟: (1)將采集的白及蒴果用自來(lái)水、84消毒液、75%酒精、無(wú)菌蒸餾水進(jìn)行組合消毒滅菌； (2)將白及種子播種于無(wú)菌培養(yǎng)基上，所述培養(yǎng)基組成為:包含調(diào)整的MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基、100-150ml/L椰子汁、0-2mg/L 6-BA、0_2mg/L NAA的特定固體培養(yǎng)基； (3)將播有種子的培養(yǎng)瓶置于1600-2000LX的光照強(qiáng)度、室溫20-30°C的環(huán)境條件下，培養(yǎng)4-5個(gè)月，獲得根、假鱗莖、葉分化齊全的白及組培瓶苗； (4)將瓶苗轉(zhuǎn)移到栽培基質(zhì)中進(jìn)行煉苗栽培；控制白天生長(zhǎng)溫度為15— 25° C，空氣相對(duì)濕度保持在70%以上，室外煉苗上方用塑料薄膜覆蓋，并設(shè)置遮陽(yáng)網(wǎng)適當(dāng)遮陰； (5)獲得健壯種苗。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基。所述培養(yǎng)基組成為：包含調(diào)整的MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基、100-150ml/L椰子汁、0-2mg/L？6-BA、0-2mg/L？NAA的特定固體培養(yǎng)基。采用本發(fā)明的白及種子無(wú)菌萌發(fā)平衡培養(yǎng)基，將白及種子在平衡培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)一次接種培養(yǎng)可以獲得根、假鱗莖、葉分化齊全的白及無(wú)菌苗，萌發(fā)率達(dá)到90%以上。本發(fā)明能有效解決白及種子無(wú)菌培養(yǎng)接種步驟較多的問(wèn)題，降低勞動(dòng)強(qiáng)度并降低生產(chǎn)成本，可用于白及種苗規(guī)?；a(chǎn)。
【IPC分類(lèi)】A01H4/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105210884
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510758526
【發(fā)明人】張朝陽(yáng), 付雨薇, 陳永霞, 何俊梅
【申請(qǐng)人】貴州省中國(guó)科學(xué)院天然產(chǎn)物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室
【公開(kāi)日】2016年1月6日
【申請(qǐng)日】2015年11月10日