尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種魚類遠(yuǎn)緣雜交育種方法，尤其涉及尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧不同屬間魚類的雜交育種方法，屬于水產(chǎn)動(dòng)物雜交育種技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]尖頭塘體(Eleotrisoxycephala)隸屬于解形目(Perciformes)、鰕虎魚亞目(Gob1idei )、塘體科(Eleotridae)、塘體屬(Eleotris)的魚類，俗名黑輿殼、什拋、竹殼、黑淋哥，是一種較為名貴的淡水小型經(jīng)濟(jì)魚類。在我國(guó)大陸，其主要分布于上海、江蘇、浙江、福建、廣東、廣西、海南等，屬于暖水性魚類。尖頭塘鱧個(gè)體較小，I齡體重一般15-50克/尾，體重250克以上極為少見(jiàn)，但肉質(zhì)好，市場(chǎng)價(jià)格高，規(guī)格150g/尾以上達(dá)140元/kg，深受消費(fèi)者的青睞。但由于生長(zhǎng)速度慢，產(chǎn)量低，人工養(yǎng)殖性能差，難以開(kāi)展規(guī)?；B(yǎng)殖生產(chǎn)。因此，如何通過(guò)基因改良，提高其生長(zhǎng)速度及養(yǎng)殖性能是其產(chǎn)業(yè)化、規(guī)?；l(fā)展的關(guān)鍵所在。
[0003]云斑尖塘體(OxyeleotrismarmoratusBleeker),俗名泰國(guó)輿殼魚(Marblegoby)，屬塘體科(Eleotridae)、尖塘體屬(Oxyeleotris)，我國(guó)自上1986年從東南亞引種以來(lái)，現(xiàn)已成為我國(guó)珠三角地區(qū)的重要淡水養(yǎng)殖對(duì)象。其體型大、生長(zhǎng)速度快，適宜條件下I齡體重可達(dá)500g/尾，是熱帶、亞熱帶地區(qū)的優(yōu)質(zhì)暖水性魚類。目前未見(jiàn)有關(guān)于尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種方法。
[0005]為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種方法，包括以下步驟:
O親魚的選擇
選擇I齡以上、體重50~150g、并處于性腺發(fā)育成熟期的尖頭塘鱧和2~3齡、體重500g以上、并處于性腺發(fā)育成熟期的云斑尖塘鱧作為雜交繁育親本；
2)親魚的強(qiáng)化培育
尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧親魚分池培育，每萬(wàn)尾親魚一次性投放活飼料魚3000?4000kg，之后每15d每萬(wàn)尾親魚補(bǔ)充1500?2000kg活飼料魚；或者投喂冰鮮魚漿和人工飼料，同時(shí)添加維生素與礦物質(zhì)，每日投喂兩次，日投飼量為親魚重量的8?12%，投喂量上午占1/3，下午占2/3 ；
3)親魚的雌雄鑒別與性比
進(jìn)入繁殖季節(jié)，鑒別親魚的性別，雌魚腹部膨大，卵巢輪廓明顯，生殖突末端圓鈍呈扇形、淡紅色，生殖孔兩側(cè)隆起、無(wú)黑色素點(diǎn)；雄魚體色深，腹部膨大不明顯，生殖突末端尖細(xì)呈三角形、白色，泄殖孔周邊有黑色素點(diǎn)，擠壓腹部有乳白色精液流出；挑選尖頭塘鱧為母本，云斑尖塘鱧為父本，兩者雌雄配對(duì)為2~3:1 ; 4)人工催產(chǎn)與受精
人工催產(chǎn)采用一針注射法，尖頭塘鱧雌魚注射促黃體素釋放激素類似物2號(hào)和馬來(lái)酸地歐酮，云斑尖塘鱧雄魚注射人絨毛膜促性腺性激素，在水溫28?30°C時(shí)48?54h達(dá)效應(yīng)時(shí)間；
人工催產(chǎn)達(dá)到效應(yīng)時(shí)間后，擠壓卵巢，取出批量卵子，放于盛有生理鹽水的魚碟上，然后通過(guò)擠壓精巢，加入精液，并用雞毛攪拌或抖動(dòng)魚碟，使受精均勻，之后均勻倒于盛有淡水的20cm*30cm的40目網(wǎng)片上，每張網(wǎng)片10000~15000粒受精卵，受精過(guò)程5min內(nèi)完成；
5)受精卵的孵化
受精卵附著網(wǎng)片后，用孵化用水清洗2~3遍，將網(wǎng)片浸泡于高錳酸鉀溶液中消毒2~3min,消毒后將其懸掛在孵化池中，孵化過(guò)程保持充氣，孵化池水溫25~30°C，溶解氧大于5mg/L，pH值7.5-8.5 ;經(jīng)過(guò)35~40h孵化出膜，再經(jīng)45~50h卵黃囊消失，開(kāi)始平游，進(jìn)入魚苗培育期；
6)1.2cm魚苗培育
魚苗培育階段在孵化池或移到培育池中進(jìn)行，培育池面積2m*4m，水深1.0-1.2m，每平方放入仔魚20~30萬(wàn)尾；平游后仔魚12~24h內(nèi)開(kāi)口攝食，每日早晚各投喂S型臂尾輪蟲I次，投喂密度40~50個(gè)/mL ;開(kāi)口后第5~7d，投喂L型臂尾輪蟲、枝角類和橈足類幼體；每天排污和換水I次，每次換水1/5 ;苗種出膜后，經(jīng)培育10~15d，仔魚生長(zhǎng)至1.0-1.5cm，分疏轉(zhuǎn)入3.0cm魚苗培育階段；
7)3cm規(guī)格魚苗培育
待魚苗長(zhǎng)至1.0-1.5cm時(shí)，選擇室內(nèi)16m2以上水泥池或室外土池進(jìn)行培育，室內(nèi)水泥池培育密度為1500~2000尾/m2，投喂水艇蚓或活飼料魚，每天排污和換水I次，每次換水1/4 ;室外土池培育密度600~800尾/m2，投喂水蚯蚓或活飼料魚，每日加、換水；經(jīng)15~20d培育，魚苗生長(zhǎng)至2.5-3.5cm，分篩分規(guī)格轉(zhuǎn)入魚種培育階段；
8)魚種培育
將魚苗收捕分規(guī)格轉(zhuǎn)入36m2以上水泥池或室外土池中進(jìn)行魚種培育，室內(nèi)水泥池培育密度為600~800尾/m2，室外土池培育密度為250~300尾/m2，投喂冰鮮魚漿、水蚯蚓或活飼料魚，每日加、換水，再經(jīng)20~30d后培育成主體規(guī)格8cm以上魚種，過(guò)篩分級(jí)轉(zhuǎn)入成魚養(yǎng)殖池。
[0006]進(jìn)一步地，所述活飼料魚是鯪魚。
[0007]進(jìn)一步地，所述冰鮮魚漿是魷魚。
[0008]進(jìn)一步地，所述人工催產(chǎn)與受精中，每千克尖頭塘鱧雌魚注射40~60 μ g促黃體素釋放激素類似物2號(hào)和15~20mg馬來(lái)酸地歐酮，每千克云斑尖塘鱧雄魚注射400~600IU人絨毛膜促性腺性激素。
[0009]進(jìn)一步地，所述受精卵的孵化中，網(wǎng)片在孵化池的間距為20cm，行距為30cm。
[0010]進(jìn)一步地，所述受精卵的孵化中，高錳酸鉀溶液的濃度是lppm。
[0011]進(jìn)一步地，所述1.2cm魚苗培育中，魚苗移入培育池時(shí)，要求孵化池和培育池水體pH值相差0.3之內(nèi)，溫度相差2°C之內(nèi)。
[0012]進(jìn)一步地，該方法還包括步驟9)商品魚養(yǎng)成:在土塘中養(yǎng)殖，餌料為小型魚蝦或冰鮮魚漿，經(jīng)過(guò)6~12個(gè)月的養(yǎng)殖，體重達(dá)150g以上，即達(dá)商品魚規(guī)格。
[0013]本發(fā)明具有以下有益效果:
本發(fā)明采用人工調(diào)控手段，選擇尖頭塘鱧母本與云斑尖塘鱧父本進(jìn)行遠(yuǎn)緣雜交，以利用雜交優(yōu)勢(shì)提高尖頭塘鱧雜交種的生長(zhǎng)速度和養(yǎng)殖性能，使雜交子代具備體色好、生長(zhǎng)速度快、適溫能力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)，培育出塘鱧科魚類新品種，為其規(guī)模化、產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供有效途徑與技術(shù)支持。
[0014]尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧為同科不同屬魚類，外表體形十分相似，兩者的雜交繁育所得到的雜交種生長(zhǎng)速度明顯優(yōu)于尖頭塘鱧，I齡體重可達(dá)150克/尾以上，體色明顯優(yōu)于尖頭塘鱧，而且抗寒寒能力比云斑尖塘鱧提高2~3°C，養(yǎng)殖性能等以明顯提高。本發(fā)明為塘鱧科魚類遺傳、雜交選育研究提供了重要的途徑和方法，為推動(dòng)及實(shí)現(xiàn)本土化的塘鱧科魚類人工繁殖、產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供了理論基礎(chǔ)及實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，具有重大的意義。
【具體實(shí)施方式】
[0015]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明:
實(shí)施例1
按照以下步驟進(jìn)行尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧雜交育種:
1)親魚的選擇
選擇I齡以上、體重50~150g、并處于性腺發(fā)育成熟期的尖頭塘鱧和2~3齡、體重500g以上、并處于性腺發(fā)育成熟期的云斑尖塘鱧作為雜交繁育親本；
2)親魚的強(qiáng)化培育
尖頭塘鱧與云斑尖塘鱧親魚分池培育，每萬(wàn)尾親魚一次性投放活飼料魚3000?4000kg，之后每15d每萬(wàn)尾親魚補(bǔ)充1500?2000kg ；
3)親魚的雌雄鑒別與性比
進(jìn)入繁殖季節(jié)，鑒別親魚的性別，雌魚腹部膨大，卵巢輪廓明顯，生殖突末端圓鈍呈扇形、淡紅色，生殖孔兩側(cè)隆起、無(wú)黑色素點(diǎn)；雄魚體色較深，腹部膨大不明顯，生殖突末端尖細(xì)呈三角形、白色，泄殖孔周邊有黑色素點(diǎn)，輕輕擠壓腹部有乳白色精液流出；挑選尖頭塘鱧為母本，云斑尖塘鱧為父本，兩者雌雄配對(duì)為2~3:1 ;