學(xué)報(bào)，2012, 27 (1)，32-35.)，公眾可 從野外采集，也可從北京農(nóng)學(xué)院獲得，該生物材料只為重復(fù)本發(fā)明的相關(guān)實(shí)驗(yàn)所用，不可作 為其它用途使用。本申請中簡稱李干腐病菌。
[0029] 下述實(shí)施例中的白菜黑斑病菌（Alternariabrassicae)(任娜敏，馬煥普，劉志 民.拮抗放線菌F1發(fā)酵液抑菌譜及穩(wěn)定性分析，北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012, 27 (1)，32-35.)， 公眾可從野外采集，也可從北京農(nóng)學(xué)院獲得，該生物材料只為重復(fù)本發(fā)明的相關(guān)實(shí)驗(yàn)所用， 不可作為其它用途使用。本申請中簡稱白菜黑斑病菌。
[0030] 下述實(shí)施例中的馬鈴薯干腐病菌（Pythiumcoeruleum)(卜春亞等.瑞香狼毒中 抑制植物病原真菌活性物質(zhì)研究.植物保護(hù).北方園藝.2013(19) :120-123)，公眾可從野 外采集，也可從北京農(nóng)學(xué)院獲得，該生物材料只為重復(fù)本發(fā)明的相關(guān)實(shí)驗(yàn)所用，不可作為其 它用途使用。本申請中簡稱馬鈴薯干腐病菌。
[0031] 下述實(shí)施例中的金銀木假尾孢葉斑病菌（PseudocercosporaIonicericola)(任 娜敏，馬煥普，劉志民.拮抗放線菌F1發(fā)酵液抑菌譜及穩(wěn)定性分析，北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2012, 27 (1)，32-35.)，公眾可從野外采集，也可從北京農(nóng)學(xué)院獲得，該生物材料只為重復(fù)本 發(fā)明的相關(guān)實(shí)驗(yàn)所用，不可作為其它用途使用。本申請中簡稱金銀木假尾孢葉斑病菌。
[0032] 下述實(shí)施例中的棉花紅點(diǎn)病菌（Fusariummonihforme)(任娜敏，馬煥普，劉志 民.拮抗放線菌F1發(fā)酵液抑菌譜及穩(wěn)定性分析，北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012, 27 (1)，32-35.)， 公眾可從野外采集，也可從北京農(nóng)學(xué)院獲得，該生物材料只為重復(fù)本發(fā)明的相關(guān)實(shí)驗(yàn)所用， 不可作為其它用途使用。本申請中簡稱棉花紅點(diǎn)病菌。
[0033] 下述實(shí)施例中的大花紅景天（Rhodiolacrenulata)的干燥根，產(chǎn)地西藏，購買自 安徽亳州中藥材市場。
[0034] 下述實(shí)施例中的高山紅景天（Rhodiolasachalinensis)的干燥根，產(chǎn)地長春，購 買自安徽亳州中藥材市場。
[0035] 下述實(shí)施例中的小花紅景天的干燥根，產(chǎn)地西藏，購買自安徽亳州中藥材市場。
[0036] 下述實(shí)施例中的95%乙醇水溶液是乙醇體積百分含量為95%的水溶液。下述實(shí) 施例中紅景天提取物的制備均在20-25°C進(jìn)行。
[0037]實(shí)施例1、紅景天提取物的制備及其抑制植物病原真菌實(shí)驗(yàn)
[0038] 1、紅景天提取物的制備
[0039] 本步驟制備了下述14種紅景天提取物：大花紅景天95%乙醇提取物、小花紅景天 95%乙醇提取物、高山紅景天95%乙醇提取物、大花紅景天石油醚萃取物、大花紅景天乙酸 乙酯萃取物、大花紅景天水溶物、大花紅景天乙酸乙酯-石油醚洗脫物、大花紅景天乙酸乙 酯洗脫物、小花紅景天石油醚萃取物、小花紅景天乙酸乙酯萃取物、小花紅景天水溶物、高 山紅景天石油醚萃取物、高山紅景天乙酸乙酯萃取物、高山紅景天水溶物。具體制備方法如 下：
[0040] 1. 1大花紅景天提取物的制備
[0041] 1)將大花紅景天的干燥根在液氮中研磨粉碎后，加入95%乙醇水溶液進(jìn)行提取， 收集提取液，減壓濃縮除去所述提取液中的乙醇得到浸膏，該浸膏即為大花紅景天95%乙 醇提取物；
[0042] 2)將步驟1)的大花紅景天95%乙醇提取物用水分散成混懸液，用石油醚萃取該 混懸液，分別收集石油醚相和水相，減壓濃縮除去該石油醚相中的石油醚即得到大花紅景 天石油醚萃取物；
[0043] 3)用乙酸乙酯萃取步驟2)的水相，分別收集乙酸乙酯相和水相，減壓濃縮除去該 乙酸乙酯相中的乙酸乙酯即得到大花紅景天乙酸乙酯萃取物，減壓濃縮除去該水相中的水 即得到大花紅景天水溶物；
[0044] 4)將步驟3)的大花紅景天乙酸乙酯萃取物進(jìn)行硅膠柱層析得到大花紅景天乙酸 乙酯洗脫物；所述硅膠柱層析的洗脫是先用乙酸乙酯-石油醚進(jìn)行洗脫然后再用乙酸乙酯 進(jìn)行洗脫，收集用乙酸乙酯洗脫得到的洗脫液，得到大花紅景天乙酸乙酯洗脫物；所述乙酸 乙酯-石油醚是乙酸乙酯和石油醚按照1:1的體積比混合得到的混合物。具體方法如下：
[0045] 采用瑞典biotage公司的色譜儀（SP1-B2B0)、采用瑞典biotage公司的目錄號為 FSK0-1107-0100的SNAPCartridgeKP-Sil100g的層析柱進(jìn)行硅膠柱層析。其中，色譜儀 帶有紫外檢測器，目錄號為FSK0-1107-0100的SNAPCartridgeKP-Sil100g的層析柱的 柱長為16cm，內(nèi)徑為4cm，層析介質(zhì)為硅膠（200-300目），該層析柱中的硅膠質(zhì)量為100g， 該層析柱的柱床體積為145ml。
[0046] 將步驟3)的大花紅景天乙酸乙酯萃取物與硅膠（200-300目）按質(zhì)量比1:1拌樣， 將該樣品上完樣后，用上述乙酸乙酯-石油醚洗脫至254nm不再出現(xiàn)色譜峰，共用20個(gè)柱 體積的乙酸乙酯-石油醚洗柱，流速為20ml/min，收集該20個(gè)柱體積的乙酸乙酯-石油醚 洗脫出的液體，將該液體稱為大花紅景天乙酸乙酯-石油醚洗脫液，減壓濃縮除去該大花 紅景天乙酸乙酯-石油醚洗脫液中的乙酸乙酯-石油醚，得到大花紅景天乙酸乙酯-石油 醚洗脫物；接著再用乙酸乙酯洗脫至254nm不再出現(xiàn)色譜峰，共用7個(gè)柱體積的乙酸乙酯洗 脫，流速為20ml/min，收集該7個(gè)柱體積的乙酸乙酯洗脫出的液體，將該液體稱為大花紅景 天乙酸乙酯洗脫液，減壓濃縮除去該大花紅景天乙酸乙酯洗脫液中的乙酸乙酯，得到大花 紅景天乙酸乙酯洗脫物。
[0047] 1. 2小花紅景天提取物的制備
[0048] 1)將小花紅景天的干燥根在液氮中研磨粉碎后，加入95%乙醇水溶液進(jìn)行提取， 收集提取液，減壓濃縮除去所述提取液中的乙醇得到浸膏，該浸膏即為小花紅景天95%乙 醇提取物；
[0049] 2)將步驟1)的小花紅景天95%乙醇提取物用水分散成混懸液，用石油醚萃取該 混懸液，分別收集石油醚相和水相，減壓濃縮除去該石油醚相中的石油醚即得到小花紅景 天石油醚萃取物；
[0050] 3)用乙酸乙酯萃取步驟2)的水相，分別收集乙酸乙酯相和水相，減壓濃縮除去該 乙酸乙酯相中的乙酸乙酯即得到小花紅景天乙酸乙酯萃取物，減壓濃縮除去該水相中的水 即得到小花紅景天水溶物。
[0051] 1. 3高山紅景天提取物的制備
[0052] 1)將高山紅景天的干燥根在液氮中研磨粉碎后，加入95%乙醇水溶液進(jìn)行提取， 收集提取液，減壓濃縮除去所述提取液中的乙醇得到浸膏，該浸膏即為高山紅景天95%乙 醇提取物；
[0053] 2)將步驟1)的高山紅景天95%乙醇提取物用水分散成混懸液后，用石油醚萃取 該混懸液，分別收集石油醚相和水相，減壓濃縮除去該石油醚相中的石油醚即得到高山紅 景天石油醚萃取物；
[0054] 3)用乙酸乙酯萃取步驟2)的水相，分別收集乙酸乙酯相和水相，減壓濃縮除去該 乙酸乙酯相中的乙酸乙酯即得到高山紅景天乙酸乙酯萃取物，減壓濃縮除去該水相中的水 即得到高山紅景天水溶物。
[0055] 2、紅景天提取物抑制植物病原真菌的活性
[0056] 分別以番茄灰霉病菌、桃褐腐病菌、李干腐病菌、白菜黑斑病菌、馬鈴薯干腐病菌、 金銀木假尾孢葉斑病菌和棉花紅點(diǎn)病菌這7種真菌菌株中的一種菌株為供試菌株，按照下 述實(shí)驗(yàn)方法測定步驟1的14種紅景天提取物的抑制植物病原真菌的活性：
[0057] 將步驟1中除大花紅景天95%乙醇提取物、小花紅景天95%乙醇提取物和高山紅 景天95 %乙醇提取物外的11種紅景天提取物中的每一種紅景天提取物分別單獨(dú)溶于二甲 基亞砜（DMSO)中，使每一種紅景天提取物的濃度均為10mg/mL，得到濃度均為lOmg/mL的以 下11種紅景天提取物二甲基亞砜溶液：10mg/mL的大花紅景天石油醚萃取物二甲基亞砜溶 液、lOmg/mL大花紅景天乙酸乙酯萃取物二甲基亞砜溶液、lOmg/mL大花紅景天水溶物二甲 基亞砜溶液、lOmg/mL大花紅景天乙酸乙酯-石油醚洗脫物二甲基亞砜溶液、lOmg/mL大花 紅景天乙酸乙酯洗脫物二甲基亞砜溶液，lOmg/mL小花紅景天石油醚萃取物二甲基亞砜溶 液、lOmg/mL小花紅景天乙酸乙酯萃取物二甲基亞砜溶液、lOmg/mL小花紅景天水溶物二甲 基亞砜溶液、lOmg/mL高山紅景天石油醚萃取物二甲基亞砜溶液，lOmg/mL高山紅景天乙酸 乙酯萃取物二甲基亞砜溶液、lOmg/mL高山紅景天水溶物二甲基亞砜溶液。
[0058] 將步驟1中的大花紅景天95%乙醇提取物、小花紅景天95%乙醇提取物和高山紅 景天95 %乙醇提取物分別單獨(dú)溶于二甲基亞砜（DMSO)中，使每一種紅景天提取物的濃度 均