本發(fā)明屬于農(nóng)作物栽培，具體是一種利于藍(lán)莓栽培的菌根真菌基質(zhì)及菌根化栽培方法。

背景技術(shù)：

1、藍(lán)莓屬杜鵑花科，是越桔屬叢生灌木植物，其果實(shí)售價(jià)高昂，深受消費(fèi)者喜愛(ài)。藍(lán)莓喜酸性土壤，適于在山地栽培，它不僅收益高，而且在坡耕地退化生態(tài)系統(tǒng)植被恢復(fù)、改善生態(tài)環(huán)境等方面均表現(xiàn)較好，是能夠兼顧社會(huì)效益、經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的理想經(jīng)濟(jì)樹種。

2、貴州山地占總面積的92.4％，坡耕地面占耕地面積的90％，受限于地形地勢(shì)，曾長(zhǎng)期以低效的玉米為主要耕作作物，投入產(chǎn)出率低，對(duì)農(nóng)民增收的貢獻(xiàn)極為有限，且坡耕地耕作方式粗放，水土流失嚴(yán)重,生態(tài)環(huán)境脆弱，生態(tài)系統(tǒng)退化。

3、由于坡耕地長(zhǎng)期耕作造成化肥和農(nóng)藥殘留，土壤中缺乏與藍(lán)莓高效共生的菌群，限制了藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)的發(fā)展；藍(lán)莓根系沒(méi)有根毛，需要與同科植物菌根真菌形成共生菌根，才能有效吸收養(yǎng)分，促進(jìn)植物生長(zhǎng)，改善果實(shí)品質(zhì)，提高植株抗性；在沒(méi)有菌根共生的情況下，藍(lán)莓的生長(zhǎng)發(fā)育受到極大影響，甚至死亡。在藍(lán)莓的基質(zhì)栽培中，由于幼苗根系所攜帶的育苗基質(zhì)與栽培基質(zhì)不一致，可能導(dǎo)致水肥不能在基質(zhì)中快速擴(kuò)散。此外，育苗基質(zhì)與根頸部的接觸可能導(dǎo)致水分運(yùn)移障礙，引發(fā)病菌侵染和植株死亡。

4、為了解決上述問(wèn)題，有必要提出一種利于藍(lán)莓栽培的菌根真菌基質(zhì)及菌根化栽培方法，利用貴州野生杜鵑菌根真菌，建立高效菌根-藍(lán)莓共生體，保證藍(lán)莓成活率、提高生產(chǎn)量、發(fā)展生態(tài)藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)和恢復(fù)坡耕地退化生態(tài)系統(tǒng)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提出一種利于藍(lán)莓栽培的菌根真菌基質(zhì)及菌根化栽培方法，利用貴州野生杜鵑菌根真菌，建立高效菌根-藍(lán)莓共生體，保證藍(lán)莓成活率、提高生產(chǎn)量、發(fā)展生態(tài)藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)和恢復(fù)坡耕地退化生態(tài)系統(tǒng)。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：一種利于藍(lán)莓栽培的菌根真菌基質(zhì)，其制備方法包括以下步驟：

3、s1.貴州野生杜鵑花科菌根真菌采集和分離培養(yǎng)；

4、s1-1.采集不同地區(qū)、不同種類的杜鵑花科與藍(lán)莓植物根系和根周圍土壤；

5、s1-2.采用純培養(yǎng)和高通量測(cè)序技術(shù)，分離培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)野生杜鵑菌根真菌，以藍(lán)莓為材料進(jìn)行回接試驗(yàn)，測(cè)定菌根真菌和接種苗的生理生化指標(biāo)，篩選適合藍(lán)莓共生的優(yōu)良菌根真菌；

6、菌根真菌培養(yǎng)方法為：用洗衣粉清洗掉藍(lán)莓根系中的土壤，然后置于流水中沖洗10min，在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中進(jìn)行消毒處理，即使用75％酒精浸泡1min后用無(wú)菌水反復(fù)沖洗3次，再用1‰升汞溶液浸泡10min后用無(wú)菌水反復(fù)沖洗3次；選取消毒好的幼根部分，用已滅菌的剪刀將其剪為0.5cm的根段，隨即放進(jìn)pda培養(yǎng)皿中，每個(gè)培養(yǎng)皿中放置3個(gè)根段；

7、將培養(yǎng)皿倒置于培養(yǎng)箱中恒溫25°避光培養(yǎng)，待培養(yǎng)皿中長(zhǎng)出菌落后再用無(wú)菌接種環(huán)挑取無(wú)污染的菌落繼續(xù)在pda培養(yǎng)基進(jìn)行純化培養(yǎng)，直至得到單一菌株；

8、將菌株接種到藍(lán)莓無(wú)菌苗上，15天后檢測(cè)菌根的形成情況，對(duì)于能形成菌根結(jié)構(gòu)的菌種，可以判定其為菌根真菌；

9、s2.研制與藍(lán)莓菌根真菌匹配的繁衍基質(zhì)；

10、采用不同配比的腐殖土、泥炭土和有機(jī)肥進(jìn)行接菌試驗(yàn)，篩選適合的接菌基質(zhì)和菌根真菌接種量，研制與之匹配的藍(lán)莓菌根真菌基質(zhì)。

11、進(jìn)一步，s1-2中，生理生化指標(biāo)包括：可溶性糖和可溶性蛋白的含量、超氧物歧化酶活力、過(guò)氧化物酶活性、丙二醛含量和葉綠素含量。

12、進(jìn)一步，一種利于藍(lán)莓栽培的菌根化栽培方法，包括以下步驟：

13、s1.園地選擇和準(zhǔn)備；

14、選擇坡耕地，土層深厚、疏松、水源充足和灌溉便利的地方；定植前進(jìn)行園地清理及翻挖，沿等高線修筑帶寬2.5m～3.0m的梯帶，帶面土地翻挖深度40cm，且整理平整；加入上述菌根真菌基質(zhì)，同時(shí)結(jié)合壓綠肥，使有機(jī)質(zhì)含量達(dá)到10％以上；用草炭土、泥炭土和酸性有機(jī)質(zhì)將ph調(diào)節(jié)至4.2-5.5,深翻土壤和平整土地后，按行寬2.5m起壟建廂，廂面寬1.0m～1.5m、壟高30cm～40cm，在壟面上挖定植穴；s2.栽植及菌根化；

15、選擇適應(yīng)當(dāng)?shù)貧夂?、土壤條件和經(jīng)營(yíng)定位明確的品種，在藍(lán)莓停止生長(zhǎng)時(shí)至萌芽前的雨后晴天或陰天中的一種進(jìn)行植苗；在水源充足處全年容器苗種植；栽植要求為：根舒、苗正和覆土壓實(shí)；將苗木放置于定植穴中央、覆蓋有機(jī)質(zhì)和細(xì)軟泥土，向上提動(dòng)幼苗，使其根系舒展，再覆土8cm～10cm壓實(shí)，讓其根系與土壤緊密接觸，最后覆蓋8cm～10㎝松軟細(xì)土，澆透定根水；用作物秸稈、鋸木屑或碎松樹皮中的一種有機(jī)物覆蓋種植行地面，覆蓋厚度10㎝以上；植苗時(shí)，用菌根菌劑蘸根后定植，定植后采用穴施或溝施中的一種藍(lán)莓固體菌根真菌繁衍基質(zhì)進(jìn)行二次接種；

16、s3.施肥；

17、根據(jù)藍(lán)莓生長(zhǎng)情況于種植行上撒施酸性有機(jī)肥或緩釋復(fù)合肥中的一種；撒施于離基部主莖20cm以外的種植行樹冠下根幅范圍，然后取行間泥土覆蓋厚度3cm～5cm。

18、進(jìn)一步，s1中，定植穴長(zhǎng)50cm×寬50cm×深30cm，高叢藍(lán)莓株距0.7m～1m，行距2.5m～3.0m；兔眼藍(lán)莓株距1.0m～1.5m，行距2.5m～3.0m。

19、進(jìn)一步，s2中，苗高大于40cm，地徑大于1cm。

20、進(jìn)一步，s3中，幼樹施肥：1～2年生幼樹每年施基肥一次，于9月份至翌年2月份萌芽前施入腐熟農(nóng)家肥或有機(jī)肥中的一種，每株施入3kg～5kg；結(jié)果樹施肥：3年生以上結(jié)果樹每年施基肥一次，于9月中旬至翌年2月份萌芽前每株5kg～10kg腐熟農(nóng)家肥或有機(jī)肥與30g～50ɡ硫酸鉀復(fù)合肥混合后施入中的一種。

21、進(jìn)一步，s3中，施肥量根據(jù)土壤肥力、樹體長(zhǎng)勢(shì)、田間管理水平和氣候特點(diǎn)因素來(lái)確定。

22、進(jìn)一步，s1-1中，不同地區(qū)、不同種類的藍(lán)莓根系包括貴州省麻江地區(qū)、凱里地區(qū)、赫章地區(qū)和花溪地區(qū)的燦爛、粉藍(lán)和萊克西藍(lán)莓根系。采用上述方案后實(shí)現(xiàn)了以下原理以及有益效果：

23、(1)將貴州土著杜鵑菌根真菌分離培養(yǎng)并應(yīng)用到坡耕地的藍(lán)莓栽培中，研制菌根真菌繁衍基質(zhì)，研究菌根真菌在栽培藍(lán)莓高效利用技術(shù)，為退化生態(tài)系統(tǒng)的植被恢復(fù)和土壤改良提供了新的思路。

24、(2)采用高通量測(cè)序和微生物純培養(yǎng)的技術(shù)手段篩選出適于藍(lán)莓共生的菌根真菌，建立高效菌根-藍(lán)莓共生體，保證藍(lán)莓成活率、提高生產(chǎn)量、發(fā)展生態(tài)藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)和恢復(fù)坡耕地退化生態(tài)系統(tǒng)。

25、(3)通過(guò)采集貴州野生杜鵑花科菌根真菌進(jìn)行分離培養(yǎng)，篩選出適于藍(lán)莓共生的菌根真菌，研制與之匹配的繁衍基質(zhì)；為貴州坡耕地退化生態(tài)系統(tǒng)恢復(fù)及經(jīng)濟(jì)植物高效栽培提供技術(shù)支撐。

技術(shù)特征：

1.一種利于藍(lán)莓栽培的菌根真菌基質(zhì)，其特征在于：其制備方法包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利于藍(lán)莓栽培的菌根真菌基質(zhì)，其特征在于：s1-2中，生理生化指標(biāo)包括：可溶性糖和可溶性蛋白的含量、超氧物歧化酶活力、過(guò)氧化物酶活性、丙二醛含量和葉綠素含量。

3.一種利于藍(lán)莓栽培的菌根化栽培方法，其特征在于：包括以下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的利于藍(lán)莓栽培的菌根化栽培方法，其特征在于：s1中，定植穴長(zhǎng)50cm×寬50cm×深30cm，高叢藍(lán)莓株距0.7m～1m，行距2.5m～3.0m；兔眼藍(lán)莓株距1.0m～1.5m，行距2.5m～3.0m。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的利于藍(lán)莓栽培的菌根化栽培方法，其特征在于：s2中，s2中，苗高大于40cm，地徑大于1cm。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的利于藍(lán)莓栽培的菌根化栽培方法，其特征在于：s3中，幼樹施肥：1～2年生幼樹每年施基肥一次，于9月份至翌年2月份萌芽前施入腐熟農(nóng)家肥或有機(jī)肥中的一種，每株施入3kg～5kg；結(jié)果樹施肥：3年生以上結(jié)果樹每年施基肥一次，于9月中旬至翌年2月份萌芽前每株5kg～10kg腐熟農(nóng)家肥或有機(jī)肥與30g～50ɡ硫酸鉀復(fù)合肥混合后施入中的一種。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的利于藍(lán)莓栽培的菌根化栽培方法，其特征在于：s3中，施肥量根據(jù)土壤肥力、樹體長(zhǎng)勢(shì)、田間管理水平和氣候特點(diǎn)因素來(lái)確定。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的利于藍(lán)莓栽培的菌根化栽培方法，其特征在于：s1-1中，不同地區(qū)、不同種類的藍(lán)莓植物根系包括貴州省麻江地區(qū)、凱里地區(qū)、赫章地區(qū)和花溪地區(qū)的燦爛、粉藍(lán)和萊克西藍(lán)莓根系。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了農(nóng)作物栽培技術(shù)領(lǐng)域的一種利于藍(lán)莓栽培的菌根真菌基質(zhì)及菌根化栽培方法，包括以下步驟：S1.貴州野生杜鵑花科與藍(lán)莓菌根真菌采集和分離培養(yǎng)；S1?1.采集不同地區(qū)、不同種類的杜鵑花科植物根系和根周圍土壤；S1?2.采用純培養(yǎng)和高通量測(cè)序技術(shù)，分離培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)野生杜鵑菌根真菌，以藍(lán)莓為材料進(jìn)行回接試驗(yàn)，測(cè)定菌根真菌和接種苗的生理生化指標(biāo)，篩選適合藍(lán)莓共生的優(yōu)良菌根真菌；S2.研制與藍(lán)莓菌根真菌匹配的繁衍基質(zhì)；采用不同配比的腐殖土、泥炭土和有機(jī)肥進(jìn)行接菌試驗(yàn)，篩選適合的接菌基質(zhì)和最優(yōu)菌根真菌接種量；利用貴州野生杜鵑菌根真菌，建立高效菌根?藍(lán)莓共生體，保證藍(lán)莓成活率、提高生產(chǎn)量、發(fā)展生態(tài)藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)和恢復(fù)坡耕地退化生態(tài)系統(tǒng)。

技術(shù)研發(fā)人員：段如雁,安常蓉,李蕓,文光琴,聶飛
受保護(hù)的技術(shù)使用者：貴州省生物研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9