本發(fā)明屬于種植技術(shù),尤其涉及紅心獼猴桃的育苗方法。
背景技術(shù):
:紅心獼猴桃,是一種可食用與藥用為一體的水果,每百克鮮果肉含維生素c100~420毫克,比柑橘高5~10倍,比檸檬高11~13倍,比蘋果高20~80倍。紅心獼猴桃果肉細(xì)嫩、香氣濃郁、口感香甜清爽、酸度極低,營養(yǎng)豐富,看之飽眼福、食之飽口福。富含超高的維生素c及p、k、ca、mg、fe、cu等多種礦物質(zhì)和18種氨基酸,微量元素的含鈣量為果中之首,被譽(yù)為“人間仙果”、被稱為“果中之王”、“維c之王”,特別由于含鈣量較高,可直接被人體吸收,是中老年人良好的補(bǔ)鈣劑,營養(yǎng)價(jià)值豐富。紅心獼猴桃是新品種,屬中華獼猴桃中的紅肉獼猴桃變種,是特早熟紅心品種,其子代遺傳性狀穩(wěn)定,抗逆性強(qiáng),果實(shí)較大,風(fēng)味濃甜可口,較耐貯藏。紅心獼猴桃的莖枝上容易產(chǎn)生不定根,跟上容易產(chǎn)生不定芽,適于獼猴桃繁殖的方式有很多種,如扦插繁殖、壓條繁殖、嫁接繁殖和種子繁殖等。上述繁殖方法具有繁殖周期長、易感染真菌性病害、良種化程度降低,而劣質(zhì)種苗的使用又導(dǎo)致獼猴桃的果實(shí)質(zhì)量及營養(yǎng)價(jià)值降低,同時(shí)口感下降,這在一定程度上約束了獼猴桃的大力發(fā)展和推廣應(yīng)用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的是提供一種紅心獼猴桃育苗方法,以解決上述技術(shù)問題。提供的方法包括以下步驟:1)外植體選取和滅菌取紅心獼猴桃木質(zhì)化莖段的外植體,經(jīng)過水洗,然后用70%的酒精消毒20~50s,在用2%的次氯酸鈉溶液滅菌10~15min,然后用水清洗,備用;2)誘導(dǎo)生根將滅菌后的外植體切成含單芽切段,然后放置在海綿上,并蓋上一層海綿,每天對海綿噴灑一次誘導(dǎo)生根溶液,至下層海綿滴出溶液時(shí)停止噴灑,培養(yǎng)溫度為18~22℃,培養(yǎng)10~15天;3)誘導(dǎo)生芽用誘導(dǎo)生芽溶液替換誘導(dǎo)生根溶液,每天對海綿噴灑一次,至下層海綿滴出溶液時(shí)停止噴灑;前10~15天每天取下上層海綿,光照培養(yǎng),培養(yǎng)溫度23~25℃,光強(qiáng)2000~3500lux,光照培養(yǎng)3~5h;其余時(shí)間為蓋上海綿黑暗培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為18~22℃;然后取下上層海綿,每天光照10~12h,光強(qiáng)2000~3500lux,然后黑暗培養(yǎng),光照和黑暗培養(yǎng)溫度相同為,20~23℃,培養(yǎng)20~30天,得到組培苗;4)組培苗移植將組培苗移栽至基質(zhì)中,并置于大棚溫室中,澆水、保濕至組培苗成苗、出圃。進(jìn)一步的,所述的誘導(dǎo)生根溶液為ms+6-ba2~5mg/l+iaa0.5~1mg/l+lzt0.5~1mg/l+lac100~300mg/l+左旋龍腦5~10mg/lmg/l。進(jìn)一步的,所述的誘導(dǎo)生根溶液為ms+6-ba3mg/l+iaa0.7mg/l+lzt0.7mg/l+lac200mg/l+左旋龍腦7mg/lmg/l。進(jìn)一步的,所述的誘導(dǎo)生芽溶液為ms+6-ba2~5mg/l+iaa1~1.5mg/l+tdz0.5~1mg/l+lac50~100mg/l。進(jìn)一步的,所述的誘導(dǎo)生芽溶液為ms+6-ba3mg/l+iaa1.2mg/l+tdz0.7mg/l+lac80mg/l。進(jìn)一步的,所述步驟3)光照培養(yǎng)的光強(qiáng)控制為前一半時(shí)間光強(qiáng)由2000lux線性變化為3500lux,后一半時(shí)間光強(qiáng)由3500lux線性變化為2000lux。本發(fā)明的中ms的成分含量為常規(guī)含量。上述ms培養(yǎng)基是murashige和skoog于1962年為煙草細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)的,其特點(diǎn)是無機(jī)鹽和離子濃度較高,是較穩(wěn)定的離子平衡溶液,它的硝酸鹽含量高,其養(yǎng)分的數(shù)量和比例合適,能滿足植物細(xì)胞的營養(yǎng)和生理需要,因而適用范圍比較廣,多數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)基的基本培養(yǎng)基。其成分及濃度如下表:大量元素使用濃度(mg/l)硝酸鉀 kno31900硝酸銨 nh4no31650磷酸二氫鉀 kh2po4170硫酸鎂 mgso4·7h2o370氯化鈣 cacl2·2h2o440微量元素碘化鉀 ki0.83硼酸 h3bo36.2硫酸錳 mnso4·4h2o22.3硫酸鋅 znso4·7h2o8.6鉬酸鈉 na2moo4·2h2o0.25硫酸銅 cuso4·5h2o0.025氯化鈷 cocl2·6h2o0.025鐵鹽 乙二胺四乙酸二鈉 na2.edta37.25硫酸亞鐵 feso4·7h2o27.85有機(jī)成分肌醇100甘氨酸2鹽酸硫胺素 vb10.1鹽酸吡哆醇 vb60.5煙酸 vb5或vpp0.5蔗糖 sucrose30g/l瓊脂 agar7g/l所述6-ba為6-benzylaminopurine,6-芐氨基腺嘌呤;所述iaa為indol-yl-3-aceticacid,吲哚-3-乙酸;所述zt為zeatin,玉米素;所述ac為activecarbon,活性炭;所述tdz為thidiazuron,噻重氮苯基脲。本發(fā)明的技術(shù)效果在于:本發(fā)明設(shè)計(jì)的誘導(dǎo)生根溶液和誘導(dǎo)生芽溶液針對性強(qiáng)、適用性好,使用海綿作為溶液的附著物,使得外植體能正常有氧呼吸,有效避免了傳統(tǒng)培養(yǎng)基因氧氣供應(yīng)不足而造成外植體壞死現(xiàn)象的發(fā)生,并且將誘導(dǎo)生根培養(yǎng)設(shè)計(jì)在誘導(dǎo)生芽培養(yǎng)的前面,有效避免了傳統(tǒng)誘導(dǎo)生芽在先而導(dǎo)致的新生芽因營養(yǎng)不足而壞死的現(xiàn)象發(fā)生,并且在生芽階段對光強(qiáng)獨(dú)特的線性變化設(shè)計(jì),使得外植體更快生芽形成組培苗,經(jīng)過試驗(yàn)證明,使用本發(fā)明育苗方法進(jìn)行育苗,其紅心獼猴桃外植體的生根率達(dá)到95%以上,生芽率96%以上,移栽成活率達(dá)到95%以上。具體實(shí)施方式下面進(jìn)一步描述本發(fā)明的技術(shù)方案,但要求保護(hù)的范圍并不局限于所述。實(shí)施例1本實(shí)施例提供了一種紅心獼猴桃育苗方法,包括以下步驟:1、培養(yǎng)溶液準(zhǔn)備:誘導(dǎo)生根溶液:ms+6-ba5mg/l+iaa0.5mg/l+lzt1mg/l+lac100mg/l+左旋龍腦5~10mg/lmg/l。誘導(dǎo)生芽溶液:ms+6-ba5mg/l+iaa1mg/l+tdz1mg/l+lac50mg/l。本發(fā)明的中ms的成分含量為常規(guī)含量。2、育苗1)外植體選取和滅菌,取紅心獼猴桃木質(zhì)化莖段的外植體,經(jīng)過水洗,然后用70%的酒精消毒20~50s,在用2%的次氯酸鈉溶液滅菌10~15min,然后用水清洗,備用;2)誘導(dǎo)生根,將滅菌后的外植體切成含單芽切段,然后放置在海綿上,并蓋上一層海綿,每天對海綿噴灑一次誘導(dǎo)生根溶液,至下層海綿滴出溶液時(shí)停止噴灑,培養(yǎng)溫度為18℃~22℃,培養(yǎng)10~15天;3)誘導(dǎo)生芽,用誘導(dǎo)生芽溶液替換誘導(dǎo)生根溶液,每天對海綿噴灑一次,至下層海綿滴出溶液時(shí)停止噴灑;前10~15天每天取下上層海綿,光照培養(yǎng),培養(yǎng)溫度23℃~25℃,光強(qiáng)2000~3500lux,光照培養(yǎng)3~5h;其余時(shí)間為蓋上海綿黑暗培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為18℃~22℃;然后取下上層海綿,每天光照10~12h,光強(qiáng)2000~3500lux,然后黑暗培養(yǎng),光照和黑暗培養(yǎng)溫度相同為,20℃~23℃,培養(yǎng)20~30天,得到組培苗;光照培養(yǎng)的光強(qiáng)控制為前一半時(shí)間光強(qiáng)由2000lux線性變化為3500lux,后一半時(shí)間光強(qiáng)由3500lux線性變化為2000lux。4)組培苗移植,將組培苗移栽至基質(zhì)中,并置于大棚溫室中,澆水、保濕至組培苗成苗、出圃。經(jīng)過試驗(yàn)證明,使用本實(shí)施例育苗方法進(jìn)行育苗,其紅心獼猴桃外植體的生根率達(dá)到96.5%,生芽率96.5%,移栽成活率達(dá)到96.3%。實(shí)施例2本實(shí)施例提供了一種紅心獼猴桃育苗方法,包括以下步驟:1、培養(yǎng)溶液準(zhǔn)備:誘導(dǎo)生根溶液:ms+6-ba2mg/l+iaa1mg/l+lzt0.5mg/l+lac300mg/l+左旋龍腦5~10mg/lmg/l。誘導(dǎo)生芽溶液:ms+6-ba2mg/l+iaa1.5mg/l+tdz0.5mg/l+lac100mg/l。本發(fā)明的中ms的成分含量為常規(guī)含量。2、育苗1)外植體選取和滅菌,取紅心獼猴桃木質(zhì)化莖段的外植體,經(jīng)過水洗,然后用70%的酒精消毒20~50s,在用2%的次氯酸鈉溶液滅菌10~15min,然后用水清洗,備用;2)誘導(dǎo)生根,將滅菌后的外植體切成含單芽切段,然后放置在海綿上,并蓋上一層海綿,每天對海綿噴灑一次誘導(dǎo)生根溶液,至下層海綿滴出溶液時(shí)停止噴灑,培養(yǎng)溫度為18℃~22℃,培養(yǎng)10~15天;3)誘導(dǎo)生芽,用誘導(dǎo)生芽溶液替換誘導(dǎo)生根溶液,每天對海綿噴灑一次,至下層海綿滴出溶液時(shí)停止噴灑;前10~15天每天取下上層海綿,光照培養(yǎng),培養(yǎng)溫度23℃~25℃,光強(qiáng)2000~3500lux,光照培養(yǎng)3~5h;其余時(shí)間為蓋上海綿黑暗培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為18℃~22℃;然后取下上層海綿,每天光照10~12h,光強(qiáng)2000~3500lux,然后黑暗培養(yǎng),光照和黑暗培養(yǎng)溫度相同為,20℃~23℃,培養(yǎng)20~30天,得到組培苗;光照培養(yǎng)的光強(qiáng)控制為前一半時(shí)間光強(qiáng)由2000lux線性變化為3500lux,后一半時(shí)間光強(qiáng)由3500lux線性變化為2000lux。4)組培苗移植,將組培苗移栽至基質(zhì)中,并置于大棚溫室中,澆水、保濕至組培苗成苗、出圃。經(jīng)過試驗(yàn)證明,使用本實(shí)施例育苗方法進(jìn)行育苗,其紅心獼猴桃外植體的生根率達(dá)到96.3%,生芽率96.7%,移栽成活率達(dá)到96.6%。實(shí)施例3本實(shí)施例提供了一種紅心獼猴桃育苗方法,包括以下步驟:1、培養(yǎng)溶液準(zhǔn)備:誘導(dǎo)生根溶液:ms+6-ba3mg/l+iaa0.7mg/l+lzt0.7mg/l+lac200mg/l+左旋龍腦7mg/lmg/l。誘導(dǎo)生芽溶液:ms+6-ba3mg/l+iaa1.2mg/l+tdz0.7mg/l+lac80mg/l。本發(fā)明的中ms的成分含量為常規(guī)含量。2、育苗1)外植體選取和滅菌,取紅心獼猴桃木質(zhì)化莖段的外植體,經(jīng)過水洗,然后用70%的酒精消毒20~50s,在用2%的次氯酸鈉溶液滅菌10~15min,然后用水清洗,備用;2)誘導(dǎo)生根,將滅菌后的外植體切成含單芽切段,然后放置在海綿上,并蓋上一層海綿,每天對海綿噴灑一次誘導(dǎo)生根溶液,至下層海綿滴出溶液時(shí)停止噴灑,培養(yǎng)溫度為18℃~22℃,培養(yǎng)10~15天;3)誘導(dǎo)生芽,用誘導(dǎo)生芽溶液替換誘導(dǎo)生根溶液,每天對海綿噴灑一次,至下層海綿滴出溶液時(shí)停止噴灑;前10~15天每天取下上層海綿,光照培養(yǎng),培養(yǎng)溫度23℃~25℃,光強(qiáng)2000~3500lux,光照培養(yǎng)3~5h;其余時(shí)間為蓋上海綿黑暗培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為18℃~22℃;然后取下上層海綿,每天光照10~12h,光強(qiáng)2000~3500lux,然后黑暗培養(yǎng),光照和黑暗培養(yǎng)溫度相同為,20℃~23℃,培養(yǎng)20~30天,得到組培苗;光照培養(yǎng)的光強(qiáng)控制為前一半時(shí)間光強(qiáng)由2000lux線性變化為3500lux,后一半時(shí)間光強(qiáng)由3500lux線性變化為2000lux。4)組培苗移植,將組培苗移栽至基質(zhì)中,并置于大棚溫室中,澆水、保濕至組培苗成苗、出圃。經(jīng)過試驗(yàn)證明,使用本實(shí)施例育苗方法進(jìn)行育苗,其紅心獼猴桃外植體的生根率達(dá)到96.7%,生芽率96.8%,移栽成活率達(dá)到96.9%。當(dāng)前第1頁12