本發(fā)明涉及種子質(zhì)量評價
技術(shù)領(lǐng)域：
。更具體地說，本發(fā)明涉及一種山豆根種子質(zhì)量的評價方法。
背景技術(shù)：
：山豆根，又名廣豆根、越南槐，為豆科植物越南槐的干燥根，具有清熱解毒，消腫利咽的功效，用于火毒蘊(yùn)結(jié)，乳蛾喉痹，咽喉腫痛，齒齦腫痛，口舌生瘡等癥。山豆根是一個重要的“桂藥”、“南藥”品種，已成功開發(fā)的中成藥產(chǎn)品有肝炎靈注射液、桂林西瓜霜、鼻咽靈片、清咽抑火丸等。由于山豆根藥材市場需求量大，原料供不應(yīng)求，近年來廣西人工栽培山豆根的面積在不斷擴(kuò)大。山豆根人工種植主要以種子、組培苗繁殖為主，因缺乏相應(yīng)的種子質(zhì)量評價方法，市售種子質(zhì)量低劣，更有偽劣種子坑農(nóng)事件時常發(fā)生，導(dǎo)致藥材減產(chǎn)或絕收。目前，主要通過肉眼去觀察山豆根種子質(zhì)量的好壞，如何根據(jù)山豆根種子的含水率、千粒重、發(fā)芽率、以及凈度等對山豆根種子的質(zhì)量做定量的描述，一直沒有合適的方法。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個目的是解決至少上述問題，并提供至少后面將說明的優(yōu)點。本發(fā)明還有一個目的是提供一種山豆根種子質(zhì)量的評價方法，其利用山豆根種子批種子的含水率、千粒重、發(fā)芽率、純度評價山豆根種子批的種子質(zhì)量，實現(xiàn)了對山豆根種子批的種子質(zhì)量做定量評價，所選評價因子能夠有效反應(yīng)種子質(zhì)量，且操作簡便，結(jié)果可靠，克服了常規(guī)判斷的盲目性和滯后性。為了實現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點，提供了一種山豆根種子質(zhì)量的評價方法，其特征在于，包括下列步驟：步驟一.劃分種子批：同一產(chǎn)地、同一時期收獲的，總重量在1000Kg-20000Kg內(nèi)劃分種子批，在每批種子批抽取總重量不低于1000g的種子作為送驗樣品，其中，同一產(chǎn)地指劃分在同一種子批的種子產(chǎn)自于同一個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，同一時期是指該種子為在同一年份的一個月之內(nèi)收獲的種子，即收獲的時間差不超過一個月；步驟二.選定評價因子：以種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度作為評價因子，其中，種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度的測定所需種子均從送驗樣品中扦取，并分別定義為種子Ⅰ、種子Ⅱ、種子Ⅲ、以及種子Ⅳ，種子Ⅰ、種子Ⅱ、種子Ⅲ、以及種子Ⅳ重量分別不低于送驗樣品總重量的百分之十、百分之十五、百分之六、以及百分之四十；步驟三.確定評價因子權(quán)重：確定評價因子種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度的權(quán)重分別為0.185、0.175、0.425、以及0.215；步驟四.確定評價因子的評價指數(shù)：測得種子Ⅰ的含水率為a，按公式：計算種子批種子含水率的評價指數(shù)，其中，a>0.75時，以A＝0作為種子批種子千粒重的評價指數(shù)；測得種子Ⅱ千粒重為b，當(dāng)b>160g時，以B＝1作為種子批種子千粒重的評價指數(shù)，當(dāng)b≤160g時，按公式：計算種子批種子千粒重的評價指數(shù)；測得種子Ⅲ的發(fā)芽率為C，以C作為種子批種子發(fā)芽率的評價指數(shù)；測得種子Ⅳ的純度為D，以D作為種子批種子純度的評價指數(shù)；步驟五.確定山豆根種子質(zhì)量級別：按公式：PI＝0.185A+0.175B+0.425C+0.215D，計算評價指標(biāo)值；當(dāng)PI≥0.95時該種子批種子質(zhì)量為優(yōu)等，當(dāng)0.85≤PI<0.95時該種子批種子質(zhì)量為良等，當(dāng)0.75≤PI<0.85時該種子批種子質(zhì)量為中等，當(dāng)0.65≤PI<0.75時該種子批種子質(zhì)量為中下等，當(dāng)PI<0.65時該種子批種子質(zhì)量為差等。優(yōu)選的是，步驟四中種子Ⅰ含水率的測定方法為：將種子Ⅰ按重量分為多份，每份種子的重量為4-5g，將每份種子稱重后為Wni切成3-5mm的薄片，后置于玻璃稱量瓶內(nèi)，帶瓶蓋稱重為Wnj，取下瓶蓋后置于恒溫干燥箱，調(diào)節(jié)恒溫干燥箱溫度為102-105℃烘8h后，蓋上瓶蓋后取出帶瓶蓋稱重為W’nj，按公式測出每份種子的含水率為其中，Wni為第n份種子未切片前的重量，Wnj為第n份種子干燥前帶瓶和蓋的重量，W’nj為第n份種子干燥后帶瓶和蓋的重量，Hni為第n份種子的含水率，按公式：測得種子Ⅰ的含水率，a即為該種子批種子的含水率。優(yōu)選的是，所述玻璃稱量瓶包括：倒置四棱臺形瓶體；多個盒體，其為頂面敞開設(shè)置，底面為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的長方體狀，多個所述盒體上下間距可拆卸設(shè)置與所述瓶體內(nèi)，且其平行于所述瓶體的底部；其中，所述薄片平鋪于所述盒體底部，瓶蓋可密封蓋設(shè)與所述盒體上，放置烘箱前稱量時瓶蓋蓋設(shè)于所述瓶體，置于烘箱內(nèi)時瓶蓋取出，從烘箱內(nèi)取出稱量時瓶蓋蓋設(shè)于所述瓶體。優(yōu)選的是，步驟四中種子Ⅱ千粒重的測量方法為全重法，步驟如下：將種子Ⅱ通過數(shù)粒儀計數(shù)得種子Ⅱ粒數(shù)，天平得種子Ⅱ重量，則按公式：測得種子Ⅱ千粒重，b即為該種子批種子的千粒重。優(yōu)選的是，步驟四中種子Ⅲ發(fā)芽率的測定方法為：將種子Ⅲ按每份種子粒數(shù)為50-60粒分為多份，通過數(shù)粒儀將每份種子計數(shù)得每份種子的粒數(shù)記為Xni，每份種子滅菌后，將胚根伸出部位朝上均勻排布于培養(yǎng)皿上，放入光照培養(yǎng)箱內(nèi)，控制溫度為25℃，每24h內(nèi)持續(xù)光照時間為8h，光照強(qiáng)度為2000LX，在培養(yǎng)第16天分別統(tǒng)計每份種子正常發(fā)芽個數(shù)記為Yni，并移除去正常發(fā)芽的種子，在第20天分別統(tǒng)計每份剩余種子正常發(fā)芽的個數(shù)記為Zni，按公式：得到每份種子的發(fā)芽率，按公式：計算種子Ⅲ的發(fā)芽率，即為該種子批種子的發(fā)芽率，其中，Yni為第n份種子在培養(yǎng)第16天統(tǒng)計正常發(fā)芽個數(shù)，Zni為第n份種子在培養(yǎng)第20天統(tǒng)計剩余種子正常發(fā)芽的個數(shù)，cni為第n份種子的發(fā)芽率。優(yōu)選的是，步驟四中種子Ⅳ純度的測定方法：通過數(shù)粒儀將種子Ⅳ計數(shù)得種子Ⅳ粒數(shù)為M1，確定種子Ⅳ中純種子的粒數(shù)M2，按公式：測得種子Ⅳ的純度，即為該種子批種子的純度，其中，純種子通過外觀形態(tài)法進(jìn)行測定：有種臍、長7.25mm-11.40mm、寬5.01mm-9.04mm、且顏色與標(biāo)準(zhǔn)色色差CA值小于或等于1.5的種子，純種子的標(biāo)準(zhǔn)色為黑色。而且其外形為橢圓形、卵形或長圓形，且種子結(jié)構(gòu)完整，表面無殘缺不全或受到嚴(yán)重?fù)p傷，無畸形或縮縊，解剖刀剖開后子葉乳白色，無染病、霉變或腐爛產(chǎn)生的變色、壞死現(xiàn)象。本發(fā)明至少包括以下有益效果：1、本發(fā)明的山豆根種子質(zhì)量的評價方法利用山豆根種子批種子的含水率、千粒重、發(fā)芽率、純度評價山豆根種子批的種子質(zhì)量，實現(xiàn)了對山豆根種子批的種子質(zhì)量做定量評價，所選評價因子能夠有效反應(yīng)種子質(zhì)量，且操作簡便，結(jié)果可靠，克服了常規(guī)判斷的盲目性和滯后性。2、本發(fā)明的山豆根種子質(zhì)量的評價方法中種子的水分是保持種子生命活力的重要物質(zhì)，只有在水的作用下種子的代謝才能順利完成，但水分含量過高會使種子的呼吸作用過于旺盛，并使微生物大量繁殖，最終使種子儲藏壽命大大縮短，水分含量過低則會使種子失水死亡，種子的千粒重能夠有效反應(yīng)種子的大小和飽滿程度，種子的純度能夠有效的反應(yīng)有效山豆根種子所占比例。本發(fā)明的其它優(yōu)點、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本發(fā)明的研究和實踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。附圖說明圖1為本發(fā)明的不同培養(yǎng)溫度的山豆根種子萌發(fā)率；圖2為本發(fā)明的不同培養(yǎng)溫度下光照和黑暗培養(yǎng)的山豆根種子萌發(fā)率。具體實施方式本發(fā)明公開了一種山豆根種子質(zhì)量的評價方法，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法進(jìn)行改動或適當(dāng)變更與組合來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。下面結(jié)合實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明：實施例1步驟一.劃分種子批：2015年10月份在南寧馬山縣收獲的山豆根種子，待檢測種子質(zhì)量的種子批的重量為10000Kg，抽取該種子批中的1000g種子作為送驗樣品，送驗樣品4℃，干燥環(huán)境下保存；步驟二.選定評價因子：以種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度作為評價因子，其中，種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度的測定所需種子均從送驗樣品中扦取，并分別定義為種子Ⅰ、種子Ⅱ、種子Ⅲ、以及種子Ⅳ，種子Ⅰ抽取送驗樣品總重量的百分之十為100g、種子Ⅱ抽取送驗樣品總重量的百分之十五為150g、種子Ⅲ抽取送驗樣品總重量的百分之六為60g、以及種子Ⅳ抽取送驗樣品總重量的百分之四十為400g；步驟三.確定評價因子權(quán)重：確定評價因子種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度的權(quán)重分別為0.185、0.175、0.425、以及0.215；步驟四.確定評價因子的評價指數(shù)：將100g種子Ⅰ按重量分為24份，將24份種子按照表1進(jìn)行編號，并分別稱量每份種子重量為Wni，具體如表1所示，將每份種子中的每個種子均切成厚度范圍再3-5mm的薄片，并平鋪于玻璃稱量瓶，帶瓶和瓶蓋一起稱重為Wnj，將玻璃稱量瓶不帶瓶蓋置于恒溫干燥箱，調(diào)節(jié)恒溫干燥箱溫度為102℃烘8h后，取出帶瓶蓋稱量重量為W’nj，具體如表1所示，按公式測出每份種子的含水率為具體如表1所示，且測量結(jié)果顯示編號為13的該份種子的含水率最高為0.372，編號為18的該份種子的含水率最低為0.345，兩者相差0.027，在誤差的允許范圍內(nèi)，其中，Wni為第n份種子未切片前的重量，W’ni為第n份種子干燥后的重量，Hni為第n份種子的含水率，按公式：測得種子Ⅰ的含水率為35.5％，35.5％即為該種子批種子的含水率。表1山豆根種子含水率測定測得種子Ⅰ的含水率為35.5％，按公式：計算種子批種子含水率的評價指數(shù)為0.99；其中，倒置四棱臺形瓶體；多個盒體，其為頂面敞開設(shè)置，底面為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的長方體狀，多個所述盒體上下間距可拆卸設(shè)置與所述瓶體內(nèi)，且其平行于所述瓶體的底部；其中，所述薄片平鋪于所述盒體底部，瓶蓋可密封蓋設(shè)與所述盒體上；使用過程中，將所述薄片平鋪于所述盒體2底部，采用倒置四棱臺形瓶體1放置盒體2，方便盒體2的放置和取出，而且相鄰盒體2內(nèi)薄片水分的去除互不影響，且其底面設(shè)為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)能夠有效的增加水分去除的速度，增大薄片的受熱面積，放置烘箱前稱量時瓶蓋蓋設(shè)于所述瓶體，置于烘箱內(nèi)時瓶蓋取出，從烘箱內(nèi)取出稱量時瓶蓋蓋設(shè)于所述瓶體，通過蓋體密封蓋設(shè)于所述瓶體上，能夠有效的避免當(dāng)從烘箱中取出時空氣中的水分影響測量的效果，導(dǎo)致的測量錯誤。將150g種子Ⅱ通過數(shù)粒儀計數(shù)得種子Ⅱ粒數(shù)為1062粒，則按公式：測得種子Ⅱ千粒重為141.2g，141.2g即為該種子批種子的千粒重，當(dāng)141.2g<180g時，按公式：0.88即為種子批種子千粒重的評價指數(shù)；通過數(shù)粒儀將60g種子Ⅲ計數(shù)得種子Ⅲ粒數(shù)記為424粒，并按每份種子粒數(shù)為53粒等分為8份，每份種子滅菌后，將胚根伸出部位朝上均勻排布于培養(yǎng)皿上，放入光照培養(yǎng)箱內(nèi)，控制溫度為25℃，每24h內(nèi)持續(xù)光照時間為8h，光照強(qiáng)度為2000LX，在培養(yǎng)第16天分別統(tǒng)計種子每份正常發(fā)芽個數(shù)記為Yni，具體如表2所示，并移除去正常發(fā)芽的種子，在第20天分別統(tǒng)計每份剩余種子正常發(fā)芽的個數(shù)記為Zni，具體如表2所示，按公式：得到每份種子的發(fā)芽率，按公式：計算種子Ⅲ的發(fā)芽率，即為該種子批種子的發(fā)芽率，其中，Yni為第n份種子在培養(yǎng)第16天統(tǒng)計正常發(fā)芽個數(shù)，Zni為第n份種子在培養(yǎng)第20天統(tǒng)計剩余種子正常發(fā)芽的個數(shù)，cni為第n份種子的發(fā)芽率,測得種子Ⅲ的發(fā)芽率為C，以C作為種子批種子發(fā)芽率的評價指數(shù)；表2山豆根種子發(fā)芽率測定根據(jù)上表得出的相關(guān)數(shù)據(jù)可以得出，種子Ⅲ的發(fā)芽率為0.83，以0.83作為種子批種子發(fā)芽率的評價指數(shù)；通過數(shù)粒儀將400g種子Ⅳ計數(shù)得種子Ⅳ粒數(shù)為M1＝2834粒，確定種子Ⅳ中純種子的粒數(shù)M2＝2441粒，按公式：計算測得種子Ⅳ的純度為0.86，即為該種子批種子的純度D＝0.86，以D＝0.86作為種子批種子純度的評價指數(shù)，其中，純種子通過外觀形態(tài)法進(jìn)行測定：有種臍、長7.25mm-11.40mm、寬5.01mm-9.04mm、且顏色與標(biāo)準(zhǔn)色色差CA值小于或等于1.5的種子，標(biāo)準(zhǔn)色為黑色，且檢測的純種子均需符合結(jié)構(gòu)完整，表面無殘缺不全或受到嚴(yán)重?fù)p傷，無畸形或縮縊，解剖刀剖開后子葉乳白色，無染病、霉變或腐爛產(chǎn)生的變色、壞死現(xiàn)象的要求。步驟五.確定山豆根種子質(zhì)量級別：按公式：PI＝0.185A+0.175B+0.425C+0.215D，計算評價指標(biāo)值，具體如表3所示；表3山豆根種子評價指標(biāo)值計算當(dāng)PI≥0.95時該種子批種子質(zhì)量為優(yōu)等，當(dāng)0.85≤PI<0.95時該種子批種子質(zhì)量為良等，當(dāng)0.75≤PI<0.85時該種子批種子質(zhì)量為中等，當(dāng)0.65≤PI<0.75時該種子批種子質(zhì)量為中下等，當(dāng)PI<0.65時該種子批種子質(zhì)量為差等；因0.85≤0.87<0.95，所以2015年10月份在南寧馬山縣收獲的山豆根種子，待檢測重量為10000Kg的種子批的種子質(zhì)量為良等種子。實施例2步驟一.劃分種子批：2014年09月份在百色那坡縣龍合鄉(xiāng)收獲的山豆根種子，待檢測種子質(zhì)量的種子批的重量為15000Kg，抽取該種子批中的1500g種子作為送驗樣品，送驗樣品4℃，干燥環(huán)境下保存；步驟二.選定評價因子：以種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度作為評價因子，其中，種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度的測定所需種子均從送驗樣品中扦取，并分別定義為種子Ⅰ、種子Ⅱ、種子Ⅲ、以及種子Ⅳ，種子Ⅰ抽取送驗樣品總重量的百分之十為150g、種子Ⅱ抽取送驗樣品總重量的百分之十五為225g、種子Ⅲ抽取送驗樣品總重量的百分之六為90g、以及種子Ⅳ抽取送驗樣品總重量的百分之四十為600g；步驟三.確定評價因子權(quán)重：確定評價因子種子含水率、種子千粒重、種子發(fā)芽率、以及種子純度的權(quán)重分別為0.185、0.175、0.425、以及0.215；步驟四.確定評價因子的評價指數(shù)：將150g種子Ⅰ按重量分為30份，將30份種子按照表1進(jìn)行編號，并分別稱量每份種子重量為Wni，具體如表4所示，將每份種子中的每個種子均切成厚度范圍再3-5mm的薄片，并平鋪于玻璃稱量瓶，帶瓶和瓶蓋一起稱重為Wnj，將玻璃稱量瓶不帶瓶蓋置于恒溫干燥箱，調(diào)節(jié)恒溫干燥箱溫度為102℃烘8h后，取出帶瓶蓋稱量重量為W’nj，具體如表4所示，按公式測出每份種子的含水率為具體如表4所示，且測量結(jié)果顯示編號為10的該份種子的含水率最高為0.303，編號為18的該份種子的含水率最低為0.283，兩者相差0.02，在誤差的允許范圍內(nèi)，其中，Wni為第n份種子未切片前的重量，W’ni為第n份種子干燥后的重量，Hni為第n份種子的含水率，按公式：測得種子Ⅰ的含水率為29.1％，29.1％即為該種子批種子的含水率。表4山豆根種子含水率測定測得種子Ⅰ的含水率為a＝29.1％，按公式：故以0.83作為種子批種子含水率的評價指數(shù)；將225g種子Ⅱ通過數(shù)粒儀計數(shù)得種子Ⅱ粒數(shù)為1803粒，則按公式：測得種子Ⅱ千粒重為124.8g，124.8g即為該種子批種子的千粒重，當(dāng)124.8g<180g時，按公式：0.78即為種子批種子千粒重的評價指數(shù)；通過數(shù)粒儀將90g種子Ⅲ計數(shù)得種子Ⅲ粒數(shù)記為721粒，將種子Ⅲ分為13份，其中第1-11份按每份種子粒數(shù)為55粒分配，第12，13份按每份種子粒數(shù)為58粒分配，每份種子滅菌后，將胚根伸出部位朝上均勻排布于培養(yǎng)皿上，放入光照培養(yǎng)箱內(nèi)，控制溫度為25℃，每24h內(nèi)持續(xù)光照時間為8h，光照強(qiáng)度為2000LX，在培養(yǎng)第16天分別統(tǒng)計種子每份正常發(fā)芽個數(shù)記為Yni，具體如表5所示，并移除去正常發(fā)芽的種子，在第20天分別統(tǒng)計每份剩余種子正常發(fā)芽的個數(shù)記為Zni，具體如表5所示，按公式：得到每份種子的發(fā)芽率，按公式：計算種子Ⅲ的發(fā)芽率，即為該種子批種子的發(fā)芽率，其中，Yni為第n份種子在培養(yǎng)第16天統(tǒng)計正常發(fā)芽個數(shù)，Zni為第n份種子在培養(yǎng)第20天統(tǒng)計剩余種子正常發(fā)芽的個數(shù)，cni為第n份種子的發(fā)芽率,測得種子Ⅲ的發(fā)芽率為C，以C作為種子批種子發(fā)芽率的評價指數(shù)；表5山豆根種子發(fā)芽率測定編號YniZnicni編號YniZnicni129110.73829110.73229100.7193290.75329110.731029110.71428110.711130100.73529100.711231100.71628110.711331110.72730110.75////根據(jù)上表得出的相關(guān)數(shù)據(jù)可以得出，種子Ⅲ的發(fā)芽率為0.72，以0.72作為種子批種子發(fā)芽率的評價指數(shù)；通過數(shù)粒儀將600g種子Ⅳ計數(shù)得種子Ⅳ粒數(shù)為M1＝4812粒，確定種子Ⅳ中純種子的粒數(shù)M2＝3657粒，按公式：計算測得種子Ⅳ的純度為0.76，即為該種子批種子的純度D＝0.76，以D＝0.76作為種子批種子純度的評價指數(shù)，其中，純種子定義為：有種臍、長7.25mm-11.40mm、寬5.01mm-9.04mm、且顏色與標(biāo)準(zhǔn)色色差CA值小于或等于1.5的種子；步驟五.確定山豆根種子質(zhì)量級別：按公式：PI＝0.185A+0.175B+0.425C+0.215D，計算評價指標(biāo)值，具體如表6所示；表6山豆根種子評價指標(biāo)值計算當(dāng)PI≥0.95時該種子批種子質(zhì)量為優(yōu)等，當(dāng)0.85≤PI<0.95時該種子批種子質(zhì)量為良等，當(dāng)0.75≤PI<0.85時該種子批種子質(zhì)量為中等，當(dāng)0.65≤PI<0.75時該種子批種子質(zhì)量為中下等，當(dāng)PI<0.65時該種子批種子質(zhì)量為差等；因0.75≤0.76<0.85，2014年09月份在百色那坡縣龍合鄉(xiāng)收獲的待檢測的重量為15000Kg山豆根種子批的種子質(zhì)量為中等種子。<山豆根種子的種子批確定實驗>根據(jù)ISTA、GB/T3543.2的相關(guān)要求，按同一產(chǎn)地、同一時期收獲、重量不高于20000kg之內(nèi)劃分種子批，送驗樣品的最小重量定為1000g，根據(jù)GB/T3543.2，將水分測定試樣、種子千粒重、、種子發(fā)芽率、以及品種純度測定試樣分別不低于送驗樣品總重量的百分之十、百分之十五、百分之六、以及百分之四十。將山豆根種子分別進(jìn)行常溫貯藏和4℃貯藏試驗，發(fā)現(xiàn)常溫貯藏的山豆根種子生活力下降較快，9個月后其發(fā)芽率下降為15％，4℃貯藏的山豆根種子生活力下降的較為緩慢，儲藏6個月后的發(fā)芽率與初始發(fā)芽率在統(tǒng)計學(xué)上無明顯差異，但在9個月后的發(fā)芽率與初始發(fā)芽率在統(tǒng)計學(xué)上差異亦較顯著，因此定樣品保存條件為在4℃、干燥條件下，保存期為6個月。<山豆根種子含水率測定方法確定實驗>實驗1：參照ISTA和GB/T3543的相關(guān)要求，通過不同烘箱溫度及烘干時間的對比研究(高恒溫131±1℃，烘3h，20min取樣1次；低恒溫103±1℃，烘10h，每0.5h取樣一次)，結(jié)合種子失水規(guī)律，得出山豆根種子水分測定的烘箱法為102-104℃，烘8h。<山豆根種子千粒重測定方法確定實驗>按GB/T3543對山豆根種子進(jìn)行全量法、千粒法、百粒法的對比分析，確定適宜的山豆根種子重量測定方法。試驗結(jié)果如下表7所示：表7山豆根種子重量測定結(jié)果(注：小寫字母為0.05顯著水平，大寫字母為0.01顯著水平。)由表7可知，百粒法、千粒法、全量法所得的結(jié)果在5％和1％的顯著水平上沒有差異，說明對于山豆根種子的重量測定，百粒法、千粒法和全量法均適用，因全量法操作較為簡便能夠有效的節(jié)省人力物力，故本發(fā)明選定使用全量法測定山豆根種子的千粒重。<山豆根種子發(fā)芽率測定方法確定實驗>通過單一變量法設(shè)定對比實驗確定山豆根種子發(fā)芽率測定時培育山豆根種子的溫度、光照時間、光照強(qiáng)度、以及統(tǒng)計時間。實驗1：發(fā)芽溫度的確定在相同其它培養(yǎng)條件下，設(shè)10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃6個恒溫培養(yǎng)箱，按照每份400粒種子，分別置于6個培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，不同溫度下種子的發(fā)芽結(jié)果如下表8所示；表8不同溫度山豆根種子發(fā)芽結(jié)果發(fā)芽溫度(℃)露白時間(d)統(tǒng)計發(fā)芽率時間(d)發(fā)芽率(％)1033418cC15163886aA2052176aA2562082aA3071975aA3572054bB(注：小寫字母為0.05顯著水平，大寫字母為0.01顯著水平。)由表8和圖2可以看出，對各溫度的最終萌發(fā)率進(jìn)行方差分析，在15℃、20℃、25℃、和30℃的4個溫度條件下的最終萌發(fā)率無顯著差異(P﹥0.05)，35℃和10℃溫度條件下的最終萌發(fā)率差異顯著(P﹤0.05)。試驗中觀察到萌發(fā)溫度越高，種子霉?fàn)€數(shù)量也越多，萌發(fā)溫度為10℃時，種子霉?fàn)€率幾乎為0。15℃恒溫條件下最終萌發(fā)率最高，但是其所需萌發(fā)時間較長，幾乎是25℃所需萌發(fā)時間的1倍，故根據(jù)上述測定結(jié)果選定25℃為山豆根種子發(fā)芽的最佳培養(yǎng)溫度。實驗2：發(fā)芽床的確定在相同其它培養(yǎng)條件下，25℃恒溫培養(yǎng)，設(shè)定紙上(TP)、紙間(BP)、砂上(TS)、砂中(S)4個發(fā)芽床處理，不同發(fā)芽床試驗結(jié)果見表9；表9不同發(fā)芽床山豆根種子發(fā)芽結(jié)果發(fā)芽床紙上(TP)紙間(BP)砂上(TS)砂中(S)發(fā)芽率(％)85aA79bB77bB0cC(注：小寫字母為0.05顯著水平，大寫字母為0.01顯著水平。)由表9可以看出，在紙上作為發(fā)芽床時其具有較高的發(fā)芽率且觀察更為便利，故本發(fā)明選定紙作為發(fā)芽床測定山豆根種子的發(fā)芽率。實驗3：發(fā)芽光照時間測試由圖2可以看出，在相同其它培養(yǎng)條件下，以紙作為發(fā)芽床，分為光照、黑暗兩種條件，設(shè)10℃、15℃、20℃、25℃、30℃和35℃6個恒溫培養(yǎng)培養(yǎng)箱。試驗結(jié)果表明，在相同萌發(fā)溫度下，山豆根種子在光照和黑暗培養(yǎng)下的萌發(fā)率無明顯差異(P﹥0.05)，其中，15-25℃下暗培養(yǎng)的萌發(fā)率略高于光培養(yǎng)的，30℃、35℃和10℃的光培養(yǎng)的萌發(fā)率略高于暗培養(yǎng)的，本實驗選定每24h內(nèi)持續(xù)光照時間為8h，光照強(qiáng)度為2000LX為培養(yǎng)條件。實驗4：試驗持續(xù)時間及幼苗鑒定測試觀察實驗1-3的結(jié)果表明，山豆根種子的發(fā)芽規(guī)律為：在固定光照條件下正常發(fā)芽的山豆根種子，首先為胚根(初生根)突破種皮(露白)，然后下胚軸伸長。下胚軸長到約1-2mm時，子葉脫出種皮或部分脫出種皮，下胚軸漸變綠色，子葉漸變綠色或黃綠色。下胚軸進(jìn)一步伸長，子葉打開，幼苗直立。胚根進(jìn)一步伸長，有的幼苗有次生根長出。以紙作為發(fā)芽床，每24h內(nèi)持續(xù)光照時間為8h，光照強(qiáng)度為2000LX，在25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時，山豆根種子露白的高峰期在5-10d，成苗高峰期在8-16d，但一直到20d才穩(wěn)定的連續(xù)3天沒有萌發(fā)，因此定其初次計數(shù)時間為16d，末次計數(shù)時間(試驗持續(xù)時間)為20d，其中，觀察發(fā)現(xiàn)子葉正常脫出種皮、胚根發(fā)育不停滯的幼苗99％都能發(fā)育成正常幼苗。通過觀察發(fā)現(xiàn)幼苗分為如下幾種：a.完整幼苗：根系發(fā)育良好，有明顯的初生根和次生根，初生根白色，長而細(xì)。子葉兩片，子葉出土型發(fā)芽，同時具有伸長的上胚軸和下胚軸，綠色。初生葉兩片，單葉，對生，通常綠色或黃綠色。b.帶有輕微缺陷的幼苗：初生根局部損傷，或生長稍遲緩。子葉局部損傷，但子葉組織總面積的一半或一半以上仍保持著正常的功能(采用50％規(guī)則)。c.次生感染的幼苗：幼苗已發(fā)育，但嚴(yán)重腐爛，經(jīng)觀察、檢驗不是由于種子本身感染引起，而是由真菌或細(xì)菌侵害引起的，并能確定所有主要構(gòu)造仍保留著。d.受損傷的幼苗：幼苗的構(gòu)造殘缺不全或受到嚴(yán)重?fù)p傷，不能均衡正常發(fā)育者。如幼苗沒有初生根，胚軸、子葉、初生葉及芽缺失、破裂、縮縊、腐爛；e.畸形或不勻稱的幼苗：幼苗主要構(gòu)造畸形，發(fā)育不平衡或生長瘦弱。如初生根短粗、腫脹、纖細(xì)，子葉及初生葉腫脹卷曲、畸形、變色、壞死，胚軸深度開裂、嚴(yán)重扭曲或彎曲、纖細(xì)，子葉出現(xiàn)后幼苗沒有進(jìn)一步的發(fā)育；f.腐爛幼苗：幼苗的的主要構(gòu)造染病或腐爛嚴(yán)重，以至阻礙幼苗的正常發(fā)育。其中，上述a、b、c所指代的幼苗為正常發(fā)芽幼苗，d、e、f所指代的幼苗為不正常發(fā)芽的幼苗。盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的圖例。當(dāng)前第1頁1 2 3