本發(fā)明屬昆蟲技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及利用板栗象甲為中間寄主擴(kuò)繁復(fù)壯管氏腫腿蜂的方法及其用途。

背景技術(shù)：

管氏腫腿蜂(Scleroderma guani Xiao et Wu)，屬膜翅目(Hymenoptera)，腫腿蜂總科Bethyloidea)，腫腿蜂科(Bethylidae)，是鉆蛀性害蟲特別是天?？朴紫x和蛹的體外寄生天敵，在防治蛀干害蟲中發(fā)揮重要作用。當(dāng)前管氏腫腿蜂的應(yīng)用研究已成為蛀干害蟲生物防治的熱點(diǎn)之一，在防治松墨天牛、松褐天牛、光肩星天牛、青楊天牛、雙條杉天牛等鉆蛀性害蟲上均已取得成功。

目前，在室內(nèi)利用黃粉甲蛹大規(guī)模人工繁育管氏腫腿蜂技術(shù)已經(jīng)較為成熟，但經(jīng)過多代的人工繁育后，管式腫腿蜂會出現(xiàn)種群退化、寄生能力下降的現(xiàn)象，這時就需要對管式腫腿蜂進(jìn)行復(fù)壯。

至今還沒有利用板栗象甲(Chestnut weevil)為中間寄主擴(kuò)繁復(fù)壯管氏腫腿蜂的方法及其用途的報道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種用板栗象甲為中間寄主擴(kuò)繁復(fù)壯管氏腫腿蜂的方法及其用途。

本發(fā)明方法如下：以板栗象甲(Chestnut weevil)老熟幼蟲為寄主，將寄主和作為種峰的已交尾管氏腫腿蜂雌蜂放入養(yǎng)殖容器內(nèi)，種蜂與寄主的數(shù)量比為1～3:1，優(yōu)選2:1；將養(yǎng)殖容器于25～27℃，相對濕度55～70％條件下養(yǎng)殖1～2天，種蜂在寄主上產(chǎn)卵后經(jīng)幼蟲期、蛹期，直至發(fā)育為成蟲。雄峰羽化時間較早，比雌蜂早1～2天。待雌蜂全部羽化并同雄蜂交尾后進(jìn)行貯存。最好每天檢查是否有發(fā)霉寄主并及時揀出，直至全部羽化出蜂。優(yōu)選地，以健康、有光澤、體形飽滿的板栗象甲老熟幼蟲為寄主。

所述種蜂可以是在其它宿主上繁育了4～5代后退化的管氏腫腿蜂。所述種蜂的來源可以是通過野外采集或購買。所述野外采集可以為野外采集被管氏腫腿蜂寄生的蛀干害蟲蟲體，進(jìn)行培養(yǎng)，直至發(fā)育為成蟲。優(yōu)選地，野外采集為野外剖木收集被管氏腫腿蜂寄生的天牛幼蟲，放置在有人工智能培養(yǎng)箱內(nèi)，條件為26℃，相對濕度60～70％，在黑暗條件下培養(yǎng)，直至管氏腫腿蜂發(fā)育為成蟲。所述購買為從飼養(yǎng)管氏腫腿蜂實(shí)驗室或公司直接購得。

種蜂使用前的保藏為公知技術(shù)，也可以采用以下方法：以交尾雌性管氏腫腿蜂為種蜂，將種蜂保藏在8～12℃的冰箱中，保存時間不超過180天，最好保存30～60天。優(yōu)選體形大、健康活潑的交尾雌性管氏腫腿蜂為種蜂。保存過程中最好每隔15～20天檢查一次種蜂的存活情況，如果種蜂死亡數(shù)量超過10％，可放入濃度為8～12％的蜂蜜水。

本發(fā)明用板栗象甲幼蟲作為替代寄主，其利用率優(yōu)于使用玉米螟老熟幼蟲、黃粉甲蛹作為替代寄主，見以下試驗。

供試蟲源：管氏腫腿蜂是用黃粉甲初化蛹繁育所得；玉米螟、大螟系實(shí)驗室以人工飼料續(xù)代飼養(yǎng)；黃粉甲系花鳥市場購買，并在實(shí)驗室以麥麩飼養(yǎng)。

試驗方法

將玉米螟四齡幼蟲、板栗象甲老熟幼蟲以及黃粉甲初化蛹在2℃條件下冰凍48h，然后各取1頭分別放入指形管(5cm×1cm)中，并接入2頭交尾后的雌蜂，用棉塞封口，放置于26℃、RH 65％的人工智能培養(yǎng)箱內(nèi)(Kenton RG-300)，12h后觀察記錄一次管氏腫腿蜂的上蜂率，每天觀察記錄一次管氏腫腿蜂的寄生率和出蜂率等，直至完全羽化出蜂。分析其產(chǎn)卵前期、不同蟲態(tài)發(fā)育歷期、12h上蜂率、寄生率、產(chǎn)卵量、出蜂率、雌雄性比和單位質(zhì)量利用率等，每處理重復(fù)100次。應(yīng)用SPSS 21.0軟件對以上數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析。

結(jié)果與分析

表1不同寄主對管氏腫腿蜂發(fā)育歷期的影響(單位：天)

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示在0.05％水平上差異顯著，下同。

由表1可以看出，不同寄主對管氏腫腿蜂的產(chǎn)卵前期、卵期、幼蟲期和蛹期均有顯著影響。管氏腫腿蜂在板栗象甲上的產(chǎn)卵前期要長于玉米螟，與黃粉甲無顯著差異；在不同寄主上的卵期均差異顯著，以玉米螟最長，板栗象甲最短；在板栗象甲上的幼蟲期和蛹期均顯著高于黃粉甲和玉米螟?？傮w來說，管氏腫腿蜂在板栗象甲上完成一個世代的時間要長于黃粉甲和玉米螟。

表2不同寄主對管氏腫腿蜂寄生和存活的影響(單位：％)

從表2可以看出，不同寄主對管氏腫腿蜂的上蜂率、寄生率和出蜂率均有顯著影響。管氏腫腿蜂對板栗象甲的寄生率和出蜂率均顯著高于黃粉甲，稍低于玉米螟。12h上蜂率與寄生率和出蜂率沒有必然關(guān)系。

表3不同寄主對管氏腫腿蜂繁殖的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

由表3可以發(fā)現(xiàn)，各寄主之間產(chǎn)卵量、出蜂量和單位質(zhì)量出蜂量均存在一定差異，而雌雄比無顯著差異。管氏腫腿蜂在板栗象甲上的產(chǎn)卵量、單位質(zhì)量出蜂率明顯高于黃粉甲。

表4第五代繁殖不同寄主對管氏腫腿蜂體型的影響

注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

由表4可以發(fā)現(xiàn)，管氏腫腿蜂子代在板栗象甲上的出蜂質(zhì)量要高于玉米螟，及黃粉甲，即板栗象甲對管氏腫腿蜂的發(fā)育更加有優(yōu)勢。

本發(fā)明方法的用途是：將按本發(fā)明方法所得到的管氏腫腿蜂成蟲在蛀干害蟲內(nèi)進(jìn)行寄生繁殖并殺滅蛀干害蟲。優(yōu)選地，所述蛀干害蟲為咖啡滅字脊虎天牛。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：

1.直接使用板栗象甲幼蟲作為替代寄主進(jìn)行擴(kuò)繁管氏腫腿蜂，無需使用誘導(dǎo)寄主進(jìn)行誘導(dǎo)，大大降低了管氏腫腿蜂的繁殖周期，步驟簡化，降低繁殖成本。

2.使用的器具非常簡單，僅使用指形管、毛筆、棉花等，成本低，具有廣闊的產(chǎn)業(yè)化前景。

3.用板栗象甲幼蟲作為替代寄主，其利用率優(yōu)于使用玉米螟老熟幼蟲、黃粉甲蛹作為替代寄主。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步描述，需要說明的是，下述實(shí)施例不能作為對本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，任何自本發(fā)明基礎(chǔ)上作出的改進(jìn)都在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例1：

1.儀器設(shè)備：人工智能培養(yǎng)箱。

2.主要用具及消耗品：指形管、棉花、毛筆、托盤、鑷子、毛巾、酒精。

3.人工繁蜂寄主

寄主種類：板栗象甲

寄主收集：收集板栗象甲老熟幼蟲為替代寄主。

寄主貯存：10℃貯存1個月。

1種蜂

1.1種蜂獲得：

(1)野外剖木收集被管氏腫腿蜂寄生的天牛蟲體，放置于人工智能培養(yǎng)箱內(nèi)(26℃，RH 65％，D:L＝24)，直至天牛蟲體上的管氏腫腿蜂全部發(fā)育為成蟲。

(2)從繁育管氏腫腿蜂的實(shí)驗室或公司購買個體強(qiáng)健的種蜂。

種蜂選擇：選擇個體大、健壯、活潑、交尾后的無翅雌蜂。

種蜂擴(kuò)繁：每個指形管內(nèi)按1:2的比例分別接入1頭板栗象甲老熟幼蟲和2頭已交尾的管氏腫腿蜂雌蜂，用棉塞封口，放置于人工智能培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行繁育。擴(kuò)繁條件為26℃，RH 60～70％，D:L＝24。

種蜂貯存：10℃冰箱貯存成蟲1～3個月。

1.2種蜂復(fù)壯

(1)室內(nèi)復(fù)壯：每支指形管內(nèi)接入1頭板栗象甲老熟幼蟲(人工野外采集)和3～6頭不同產(chǎn)地已交尾的管氏腫腿蜂雌蜂，用棉塞封口，放置于人工智能培養(yǎng)箱內(nèi)，條件為26℃，RH 60～70％，D:L＝24。

(2)野外復(fù)壯：田間選取天牛危害后的樹木，進(jìn)行放蜂，1～2個月后，剖開受害樹干，收集被管氏腫腿蜂寄生的天牛，帶回室內(nèi)繼續(xù)培育，帶其上管氏腫腿蜂發(fā)育為成蟲，即為野外復(fù)壯的蜂種。

5.擴(kuò)繁

用品準(zhǔn)備：指形管、棉花、毛筆、托盤、鑷子、毛巾、酒精。

挑選寄主和種蜂：選擇健康的、體形飽滿的板栗象甲老熟幼蟲，然后在2℃冰箱內(nèi)冰凍48h；種蜂為體形大、健壯、活潑、交尾后的無翅雌蜂。

5.1接蜂：

將寄主和寄生蜂按1:1的比例分別接入指形管，用棉塞封口，放入鋪有毛巾的托盤內(nèi)。

5.2培養(yǎng)：

將托盤放入26℃，RH 65％的人工智能培養(yǎng)箱內(nèi)。每天檢查是否有發(fā)霉寄主，并及時揀出，直至管氏腫腿蜂全部羽化出蜂。

5.3出蜂：

管氏腫腿蜂在寄主上經(jīng)產(chǎn)卵前期、幼蟲期、蛹期，最終發(fā)育為成蟲。雄峰羽化時間較早，比雌蜂早1-2天。待雌蜂全部羽化并同雄蜂交尾后進(jìn)行貯存。

6貯存運(yùn)輸

管氏腫腿蜂雌蜂成蟲可在10℃條件下貯存1～6個月。成蟲期適于短距離和冷藏運(yùn)輸，蛹末期適于長距離常溫運(yùn)輸。

實(shí)施例2：

將用黃粉甲繁育了5代后退化的管氏腫腿蜂，選取雌雄比例為2：1比例，放置在培養(yǎng)管內(nèi)，自然交配1天后將1只雌蜂放置到有1頭板栗象甲老熟幼蟲的養(yǎng)殖盒內(nèi)，在溫度27℃、濕度70％的環(huán)境下養(yǎng)殖2天，顯微鏡下可見板栗象甲幼蟲產(chǎn)卵29粒，常規(guī)養(yǎng)殖環(huán)境下養(yǎng)殖26天，收集到蜂繭27粒，繭羽化后經(jīng)統(tǒng)計蜂平均體長為3.5376±0.3079mm，體重0.8201±0.1385克，兩項指標(biāo)均顯著高于上一代。

實(shí)施例3：

將用黃粉甲繁育了4代后退化的管氏腫腿蜂，選取雌雄比例為3：1比例，放置在培養(yǎng)管內(nèi)，自然交配1天后將3只雌蜂放置到有1頭板栗象甲老熟幼蟲的養(yǎng)殖盒內(nèi)，在溫度25℃、濕度55％的環(huán)境下養(yǎng)殖1天，顯微鏡下可見板栗象甲幼蟲生產(chǎn)卵41粒，常規(guī)養(yǎng)殖環(huán)境下養(yǎng)殖26天，收集到蜂繭41粒，繭羽化后經(jīng)統(tǒng)計蜂平均體長為3.7012±0.2331mm，體重0.8137±0.0781克，兩項指標(biāo)均顯著高于上一代。

實(shí)施例4：

將用黃粉甲繁育了5代后退化的管氏腫腿蜂，選取雌雄比例為3：1比例，放置在培養(yǎng)管內(nèi)，自然交配1天后將2只雌蜂放置到有1頭板栗象甲老熟幼蟲的養(yǎng)殖盒內(nèi)，在溫度25℃、濕度70％的環(huán)境下養(yǎng)殖1天，顯微鏡下可見板栗象甲幼蟲生產(chǎn)卵31粒，常規(guī)養(yǎng)殖環(huán)境下養(yǎng)殖26天，收集到蜂繭36粒，繭羽化后經(jīng)統(tǒng)計蜂平均體長為3.6261±0.1809mm，體重0.7967±0.0904克，兩項指標(biāo)均顯著高于上一代。