一種灌木柳花粉保存方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種灌木柳花粉保存的條件，包括以下步驟：（1）干燥；（2）低溫保存。本發(fā)明所述的灌木柳花粉保存方法能有效阻止花粉衰老，降低花粉呼吸強(qiáng)度和酶活性，保證花粉生活力，克服灌木柳花粉因雌雄異株花期不遇而造成的雜交困難，灌木柳花粉在低溫中保存至180d時(shí)，生活力仍可高達(dá)49%。本發(fā)明所述的灌木柳花粉保存方法簡(jiǎn)單易操作，成本低，能有效保證灌木柳花粉進(jìn)行雜交的生活力，在灌木柳繁殖生產(chǎn)上具有重要的實(shí)踐與推廣意義。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種灌木柳花粉保存方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物花粉保存方法，具體是涉及一種灌木花粉低溫保存的方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002] 柳屬（SalixL.)是楊柳科最大的屬，約550種，我國(guó)柳屬植物255種，約占全世界 總數(shù)的46%，是全世界柳屬植物最多、最豐富的地區(qū)，在全國(guó)各省、區(qū)廣泛分布。而柳屬絕大 部分為灌木柳，許多種類(lèi)與人們生產(chǎn)生活戚戚相關(guān)。隨著全球經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們對(duì)灌木柳作 用的逐步認(rèn)識(shí)，特別是2008年多哈會(huì)議后，熱愛(ài)自然、崇尚環(huán)保，倡導(dǎo)低碳經(jīng)濟(jì)已成為全世 界各國(guó)政府和人民的共識(shí)，對(duì)灌木柳的開(kāi)發(fā)利用尤為迫切和重要。
[0003] 花粉作為灌木柳種質(zhì)的形式之一，包含了柳樹(shù)的所有基因類(lèi)型，具有豐富的遺傳 多樣性，是柳樹(shù)種質(zhì)保存以及雜交育種的重要材料。但柳樹(shù)雌雄異株，花期不遇，且柳樹(shù)花 粉自然條件下壽命短，這給柳樹(shù)種質(zhì)研究及其雜交育種工作帶來(lái)極大的不便，同時(shí)也不利 于柳樹(shù)的遺傳改良研究。因此，有必要對(duì)柳樹(shù)花粉保存開(kāi)展相關(guān)研究。雖然柳樹(shù)花粉采集 和貯藏在歐洲柳樹(shù)繁殖中已有應(yīng)用，但對(duì)其提取和貯藏得方法沒(méi)有具體描述。花粉保存研 究的目的在于在不破壞種質(zhì)資源的前提下保持花粉生活力，延長(zhǎng)其受精能力，并以此來(lái)克 服雜交育種中的時(shí)間和空間的限制，提高育種效率，為地區(qū)間乃至國(guó)際間的種質(zhì)交換提供 方便；同時(shí)可以避免病蟲(chóng)害的傳播。例如柳樹(shù)雌雄異株，且雌雄開(kāi)花時(shí)間不相同，自然育種 造成花期不遇，為了克服這一難題，其花粉的保存便具有現(xiàn)實(shí)的必要性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于確定灌木柳花粉最佳干燥方法、干燥時(shí)間和低溫保存溫度。
[0005] 本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：
[0006] 步驟（1)將灌木柳花粉采用自然風(fēng)干、燈光干燥、干燥劑干燥三種方式中的任意 一種或任意兩種或三種方式干燥。
[0007] 步驟⑵灌木柳花粉經(jīng)步驟⑴處理后，置于-70?4攝氏度中保存。
[0008] 進(jìn)一步，步驟（1)收集灌木柳新鮮花粉，自然風(fēng)干為室內(nèi)自然晾干，燈光干燥具體 操作為將花粉置于30W白熾燈下5?8cm處照射，干燥劑干燥是將500g變色硅膠放于干燥 器中，離變色硅膠2cm處放一隔板，再將花粉置于隔板上。
[0009] 步驟⑴所述自然風(fēng)干2?24h，燈光干燥0. 5?6h，干燥劑干燥1?16h;
[0010] 步驟（2)中，所述將經(jīng)干燥處理的灌木柳花粉混勻，均勻分裝在5mL離心管中，先 于4攝氏度冷藏Ih后，再轉(zhuǎn)入-25攝氏度冷凍2h后，置于-70攝氏度中保存。
[0011] 本發(fā)明的有益效果是：
[0012] 1、采用本發(fā)明所述的灌木柳花粉保存方法能有效阻止花粉衰老，降低花粉呼吸強(qiáng) 度和酶活性，保證花粉生活力，克服灌木柳花粉因雌雄異株花期不遇而造成的雜交困難，灌 木柳花粉在低溫中保存至180d時(shí)，生活力仍可高達(dá)49%。
[0013] 2、采用本發(fā)明所述的灌木柳花粉保存方法與超低溫保存相比，操作簡(jiǎn)單，成本低， 且低溫保存也能降低超低溫產(chǎn)生的遺傳變異。
[0014] 3、采用本發(fā)明所述的灌木柳花粉保存方法，干燥方法為快速干燥法，而干燥時(shí)間 短，也保證了花粉不至于完全失活，有利于保存。且干燥投入成本也較低。綜上所述：本發(fā) 明所述的灌木柳花粉保存方法簡(jiǎn)單易操作，成本低，能有效保證灌木柳花粉進(jìn)行雜交的生 活力，在灌木柳繁殖生產(chǎn)上具有重要的實(shí)踐與推廣意義。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0015]圖1為保存溫度與灌木柳花粉生活力；
[0016] 圖2為預(yù)凍處理對(duì)灌木柳花粉保存的影響。

【具體實(shí)施方式】
[0017] 下面結(jié)合附圖和具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。
[0018] 實(shí)施例：灌木柳花粉低溫保存方法，包括如下步驟：
[0019] (1)選擇干燥方式及干燥時(shí)間：收集新鮮灌木柳花粉，混勻，分成若干份，分別用 三種干燥方式干燥。
[0020] 表1柳樹(shù)花粉的干燥方法及干燥時(shí)間
[0021]

【權(quán)利要求】
1. 一種灌木柳花粉低溫保存方法，其特征在于，包括如下步驟： (1) 將灌木柳花粉分別采用自然風(fēng)干、燈光干燥、干燥劑干燥三種方式干燥； (2) 灌木柳花粉經(jīng)步驟（1)處理后，置于-70?4攝氏度中保存。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述灌木柳花粉低溫保存方法，其特征在于：所述步驟（1)篩選出最 佳干燥方式。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述灌木柳花粉低溫保存方法，其特征在于：所述燈光干燥采 用30w的白熾燈，花粉置于燈下5?8cm處。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述灌木柳花粉低溫保存方法，其特征在于：所述的燈光干燥的時(shí) 間為0. 5?6h。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述灌木柳花粉低溫保存方法，其特征在于：所述干燥劑干燥的方 法為：使用變色硅膠作為干燥劑，將花粉置于干燥器中干燥。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述灌木柳花粉低溫保存方法，其特征在于：所述的干燥劑干燥的 時(shí)間為1?16h。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述灌木柳花粉低溫保存方法，其特征在于：步驟（1)所述的自然風(fēng) 干干燥時(shí)間為2?24h。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述灌木柳花粉低溫保存方法，其特征在于：步驟（2)中，先將經(jīng)步 驟（1)干燥處理的灌木柳花粉先于4攝氏度冷藏lh后，再轉(zhuǎn)入-25攝氏度冷凍2h后，置 于-70攝氏度中保存。
【文檔編號(hào)】A01N3/00GK104351170SQ201410491983
【公開(kāi)日】2015年2月18日 申請(qǐng)日期:2014年9月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月23日
【發(fā)明者】何旭東, 姚伶, 李霞, 何開(kāi)躍, 王保松, 施士爭(zhēng) 申請(qǐng)人:江蘇省林業(yè)科學(xué)研究院