一種丁公藤植株再生的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種丁公藤植株再生的快速繁殖方法,包括葉片的消毒、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根培養(yǎng)。采用本發(fā)明方法組培生根率高,再生率好,遺傳穩(wěn)定性好,可以短期內(nèi)獲得大量的丁公藤幼苗。
【專利說明】一種丁公藤植株再生的快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及丁公藤組織培養(yǎng)的快繁方法,屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002] 丁公藤,旋花科,木質(zhì)藤本,嫩枝稍被毛。枝繁葉茂,葉色翠綠。葉卵形至長圓形, 側(cè)脈每邊5 - 8條,腹面微突起。夏秋季開花,花黃白色,花冠5深裂。漿果近球形,無毛。 分布于中國廣東、海南、廣西、云南;越南北部。產(chǎn)于山谷濕潤密林中,路旁灌叢可見。含丁 公藤甲素、東莨菪內(nèi)酯。祛風(fēng)勝濕,舒筋活絡(luò),消腫,止痛。用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān) 節(jié)炎、坐骨神經(jīng)痛、半身不遂、跌打腫痛,目前其利用主要是野外采集,尚無人栽培。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種丁公藤的快速繁殖方法,由該方法所制備 的丁公藤組培生根率高,再生率好,遺傳穩(wěn)定性好,可以短期內(nèi)獲得大量的丁公藤幼苗。本 發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實現(xiàn)的: 取丁公藤幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡7min,流水沖洗23min,超凈工作臺上1%高錳酸 鉀處理15min,無菌水沖洗6遍,消毒處理過的丁公藤葉片接入培養(yǎng)基為MS+6-BA2. Omg/ L+IBAO. 15mg/l誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行愈傷組織誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂7. Og/L,PH5. 82, 暗光照,溫度25 ± 1 °C,誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入分化培養(yǎng)基MS+6-BA0. 8-1. Omg/ L+IBAO. 1-0. 2mg/L,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 L Og/L,PH5. 82,光照 18001x,溫度 25 ± 1 °C,長約 3cm左右的瓶苗取出,洗去培養(yǎng)基,基部在GGR70ppm的溶液中浸泡0. 5h,形態(tài)學(xué)下端插入黃 心土 :森林腐殖土 :蛭石=2 :2 :1的基質(zhì)中,自動噴霧裝置,每十五分鐘噴霧10s,一周噴灑 一次營養(yǎng)液(氯化興50mg/L,硫酸鎂70mg/L,硫酸亞鐵10mg/L,硫酸鋅20mg/L,氯化錯20mg/ L),共噴4次,溫度25°C,光照強度50001x。
[0004] 采用本發(fā)明制備的丁公藤生根率高,周期短,產(chǎn)量大,污染小,利于大規(guī)模種植。
[0005] 下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述,但本發(fā)明要求保護的范圍并不 局限于下列實施方式。
【具體實施方式】 [0006] 實施例1 取丁公藤幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡7min,流水沖洗23min,超凈工作臺上1%高錳酸 鉀處理15min,無菌水沖洗6遍,消毒處理過的丁公藤葉片接入培養(yǎng)基為MS+6-BA2. Omg/ L+IBAO. 15mg/l誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行愈傷組織誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂7. 0g/L,PH5. 82,暗 光照,溫度25土1°C,誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入分化培養(yǎng)基MS+6-BA0. 8mg/L+IBA0. lmg/L, 附加蔗糖30g/L,瓊脂7. 0g/L,PH5. 82,光照18001x,溫度25 ± 1 °C,長約3cm左右的瓶苗取 出,洗去培養(yǎng)基,基部在GGR70ppm的溶液中浸泡0. 5h,形態(tài)學(xué)下端插入黃心土:森林腐殖 土 :蛭石=2 :2 :1的基質(zhì)中,自動噴霧裝置,每十五分鐘噴霧10s,一周噴灑一次營養(yǎng)液(氯 化隹丐50mg/L,硫酸鎂70mg/L,硫酸亞鐵10mg/L,硫酸鋅20mg/L,氯化錯20mg/L),共噴4次, 溫度25°C,光照強度50001x,生根率96%。
[0007] 實施例2 取丁公藤幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡7min,流水沖洗23min,超凈工作臺上1%高錳酸 鉀處理15min,無菌水沖洗6遍,消毒處理過的丁公藤葉片接入培養(yǎng)基為MS+6-BA2. Omg/ L+IBAO. 15mg/l誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行愈傷組織誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂7. 0g/L,PH5. 82,暗 光照,溫度25土1°C,誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入分化培養(yǎng)基MS+6-BA0. 9mg/L+IBA0. 2mg/L, 附加蔗糖30g/L,瓊脂7. Og/L,PH5. 82,光照18001x,溫度25 ± 1 °C,長約3cm左右的瓶苗取 出,洗去培養(yǎng)基,基部在GGR70ppm的溶液中浸泡0. 5h,形態(tài)學(xué)下端插入黃心土:森林腐殖 土 :蛭石=2 :2 :1的基質(zhì)中,自動噴霧裝置,每十五分鐘噴霧10s,一周噴灑一次營養(yǎng)液(氯 化隹丐50mg/L,硫酸鎂70mg/L,硫酸亞鐵10mg/L,硫酸鋅20mg/L,氯化錯20mg/L),共噴4次, 溫度25°C,光照強度50001x,生根率94%。
[0008] 實施例3 取丁公藤幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡7min,流水沖洗23min,超凈工作臺上1%高錳酸 鉀處理15min,無菌水沖洗6遍,消毒處理過的丁公藤葉片接入培養(yǎng)基為MS+6-BA2. Omg/ L+IBAO. 15mg/l誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行愈傷組織誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂7. 0g/L,PH5. 82,暗 光照,溫度25土1°C,誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入分化培養(yǎng)基MS+6-BA1. 0mg/L+IBA0. 2mg/L, 附加蔗糖30g/L,瓊脂7. 0g/L,PH5. 82,光照18001x,溫度25 ± 1 °C,長約3cm左右的瓶苗取 出,洗去培養(yǎng)基,基部在GGR70ppm的溶液中浸泡0. 5h,形態(tài)學(xué)下端插入黃心土:森林腐殖 土 :蛭石=2 :2 :1的基質(zhì)中,自動噴霧裝置,每十五分鐘噴霧10s,一周噴灑一次營養(yǎng)液(氯 化隹丐50mg/L,硫酸鎂70mg/L,硫酸亞鐵10mg/L,硫酸鋅20mg/L,氯化錯20mg/L),共噴4次, 溫度25°C,光照強度50001x,生根率92%。
【權(quán)利要求】
1. 一種丁公藤植株再生的快速繁殖方法,包括葉片的消毒、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組 織的分化、生根培養(yǎng),其主要步驟如下: (1) 取丁公藤幼嫩葉片,對其進行消毒處理; (2) 將步驟(1)消毒處理過的丁公藤葉片接入培養(yǎng)基為MS+6-BA2. Omg/L+IBAO. 15mg/ 1誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進行愈傷組織誘導(dǎo),附加蔗糖30g/L,瓊脂7. Og/L,PH5. 82,暗光照,溫度 25±1°C ; (3) 取步驟(2)誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入分化培養(yǎng)基MS+6-BA0. 8-1. Omg/ L+IBA0. 1-0. 2mg/L,附加蔗糖 30g/L,瓊脂 7. Og/L,PH5. 82,光照 18001x,溫度 25±1°C ; (4) 取步驟(3)分化培養(yǎng)出來的芽苗進行室外生根誘導(dǎo)。
2. 按照權(quán)利要求1所述的一種丁公藤植株再生的快速繁殖方法,其特征在于:步驟 (1)中所述丁公藤無菌葉片的獲得為,取丁公藤幼嫩葉片,在漂白粉中浸泡7min,流水沖洗 23min,超凈工作臺上1%高猛酸鉀處理15min,無菌水沖洗6遍。
3. 按照權(quán)利要求1所述的一種丁公藤植株再生的快速繁殖方法,其特征在于:步驟 (4) 丁公藤室外生根的條件為長約3cm左右的瓶苗取出,洗去培養(yǎng)基,基部在GGR70ppm的 溶液中浸泡〇. 5h,形態(tài)學(xué)下端插入黃心土 :森林腐殖土 :蛭石=2 :2 :1的基質(zhì)中,自動噴霧 裝置,每十五分鐘噴霧10s,一周噴灑一次營養(yǎng)液(氯化興50mg/L,硫酸鎂70mg/L,硫酸亞鐵 10mg/L,硫酸鋅20mg/L,氯化鋁20mg/L),共噴4次,溫度25°C,光照強度50001x。
【文檔編號】A01H4/00GK104186344SQ201410463222
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司