一種甜葉菊種質(zhì)組培苗的保存方法
【專利摘要】本發(fā)明公布了一種甜葉菊種質(zhì)組培苗的長期保存方法，其做法是向培養(yǎng)基中添加生長抑制劑甘露醇和增加蔗糖的加入量。利用本方法可顯著延緩甜葉菊種質(zhì)組培苗的生長，延長種質(zhì)的保存時間，同時節(jié)省保存種質(zhì)時繼代所需的勞力和物力。
【專利說明】一種甜葉菊種質(zhì)組培苗的保存方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]一種甜葉菊種質(zhì)組培苗的保存方法，涉及甜葉菊組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，更具體的說是一種利用組織培養(yǎng)技術(shù)延長甜葉菊種質(zhì)保存時間的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]甜葉菊種質(zhì)的組織培養(yǎng)是進行快繁提供生產(chǎn)上用苗和進行室內(nèi)科學研究工作的基礎(chǔ)，由于快繁生產(chǎn)和科學研究都有一定的階段性，其間不可避免地會有一定時間的停滯階段。甜葉菊組培苗生長較快，生根苗一般I個月長滿瓶，增殖苗2個月長滿瓶，這就要對其進行繼代培養(yǎng)，否則就會逐漸死亡，導致種質(zhì)材料丟失。
[0003]中國專利公布號為CN103609448A的發(fā)明專利公開了一種甜葉菊種質(zhì)保存方法，利用此方法能顯著延長種質(zhì)保存時間，節(jié)省繼代培養(yǎng)保存所需人力物力。其不足之處是，夏季室外環(huán)境溫度較高，培養(yǎng)箱長期低溫工作容易造成壓塑機的損壞，箱內(nèi)恒定低溫難以保持；另外，培養(yǎng)箱中10_15°C低溫培養(yǎng)也需增加電力的消耗，這是一些亟待解決的問題。
[0004]本發(fā)明通過提高培養(yǎng)基中蔗糖的含量和添加生長抑制劑甘露醇可以解決上述問題，達到正常組培室溫度條件下長期保存種質(zhì)組培苗的目的。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種在正常組織培養(yǎng)溫度下進行甜葉菊種質(zhì)組培苗保存的方法，以減少甜葉菊種質(zhì)保存繼代次數(shù)和培養(yǎng)保存的成本。
[0006]本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的:
一種甜葉菊種質(zhì)保存方法包括以下技術(shù)環(huán)節(jié):
①培養(yǎng)基配方:MS培養(yǎng)基中加入60g/L蔗糖、20 g/L生長延緩劑甘露醇、5 g/L瓊脂和生長激素 6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L ；
②培養(yǎng)基分裝:按上述配方將配置好的培養(yǎng)基分裝入250ml的組織培養(yǎng)瓶中進行高壓滅菌，每升分裝為24瓶；
③接種:在超凈工作臺上用剪刀將甜葉菊種質(zhì)組培苗剪為±0.5cm長短的莖段，用鑷子將莖段接種到盛有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，每瓶接種4個莖段；
④培養(yǎng)條件:將接種好的組培瓶放入組培室中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25±1°C，光照強度1000-1500 lx，光照時間 12h/d ;
本發(fā)明的有益效果:
本發(fā)明通過向培養(yǎng)基中加入生長抑制劑甘露醇和增加培養(yǎng)基中蔗糖的加入量，有效地延緩甜葉菊種苗在正常組培室溫度下的生長速度，解決長期低溫培養(yǎng)對培養(yǎng)箱壓塑機的損壞及溫度難以控制的難題，同時也減少了種質(zhì)保存繼代的次數(shù)，大大節(jié)省了繼代保存所需的成本。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0007]圖1為蔗糖30g/L、不加生長抑制劑甜葉菊種質(zhì)組培苗生長I個月的示意圖；
圖2為蔗糖60g/L、加生長抑制劑甘露醇甜葉菊種質(zhì)組培苗生長5個月的示意圖。
[0008]【具體實施方式】:
一種甜葉菊種質(zhì)保存方法:
①培養(yǎng)基配方:MS培養(yǎng)基中加入60g/L蔗糖、20 g/L生長延緩劑甘露醇、5 g/L瓊脂和生長激素 6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L ；
②培養(yǎng)基分裝:按上述配方將配置好的培養(yǎng)基分裝入250ml的組織培養(yǎng)瓶中進行高壓滅菌，每升分裝為24瓶；
③接種:在超凈工作臺上用剪刀將甜葉菊種質(zhì)組培苗剪為±0.5cm長短的莖段，用鑷子將莖段接種到盛有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，每瓶接種4個莖段；
④培養(yǎng)條件:將接種好的組培瓶放入組培室中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25 ± I °C，光照強度1000-1500 lx，光照時間 12h/d ;
試驗情況:
試驗于2012年3月27日在安徽科技學院組培室進行。按照上述配方及操作方法接種甜葉菊組培苗的莖段，以不加生長抑制劑甘露醇
、加入30g/L蔗糖的MS培養(yǎng)基為對照；每處理接種12瓶，每瓶接種4株。
[0009]生長調(diào)查:從表I可知，本發(fā)明向培養(yǎng)基中加入甘露醇、提高蔗糖濃度能有效地抑制甜葉菊種質(zhì)組培苗的生長，從接種生長到苗開始死亡和全部死亡的時間都明顯長于對照，延長了甜葉菊種質(zhì)組培苗的保存時間，減少了繼代保存的次數(shù)。
[0010]表I對照和處理組培苗的生長情況
fel麵
mm--τ——一——-τ___________腦_____________―一一
mm mm


寶.備僅)
甘露釀麵麵 Ut 2w6 If? H 細5?HS
【權(quán)利要求】
1.一種甜葉菊種質(zhì)組培苗的保存方法，其特征是，它包括以下技術(shù)環(huán)節(jié): ①培養(yǎng)基配方:MS培養(yǎng)基中加入60g/L蔗糖、20 g/L生長延緩劑甘露醇、5 g/L瓊脂和生長激素 6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L ； ②培養(yǎng)基分裝:按上述配方將配置好的培養(yǎng)基分裝入250ml的組織培養(yǎng)瓶中進行高壓滅菌，每升分裝為24瓶； ③接種:在超凈工作臺上用剪刀將甜葉菊種質(zhì)組培苗剪為±0.5cm長短的莖段，用鑷子將莖段接種到盛有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，每瓶接種4個莖段； ④培養(yǎng)條件:將接種好的組培瓶放入組培室中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度25 ± I °C，光照強度1000-1500 lx，光照時間 12h/d。
【文檔編號】A01H4/00GK104170742SQ201410452480
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年9月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月9日
【發(fā)明者】何克勤, 崔然, 崔廣榮 申請人:何克勤