一種利用玉米芯生產(chǎn)蛹蟲草子實(shí)體的栽培方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，一種利用玉米芯生產(chǎn)蛹蟲草子實(shí)體的栽培方法。利用谷物類基質(zhì)培養(yǎng)蛹蟲草子實(shí)體是目前最常用的方法，但利用玉米芯為主要基質(zhì)培植蛹蟲草子實(shí)體還未見報(bào)道。蛹蟲草液體菌種接入添加有營(yíng)養(yǎng)液的玉米芯培養(yǎng)基內(nèi)，將其水分含量調(diào)節(jié)至60-80%，在溫度為18-25℃的環(huán)境中，培養(yǎng)3-4天后，進(jìn)行光照培養(yǎng)，經(jīng)40-50天，子實(shí)體生長(zhǎng)成熟。這種方法在不影響產(chǎn)量的情況下，使生產(chǎn)成本大大下降，培育的蛹蟲草子實(shí)體與目前常用的谷物類基質(zhì)栽培所得的子實(shí)體營(yíng)養(yǎng)成分相當(dāng)，可作為食品或原料使用可應(yīng)用于食品。
【專利說(shuō)明】一種利用玉米芯生產(chǎn)蛹蟲草子實(shí)體的栽培方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種蛹蟲草iCordyceps mi Ii tar is)子實(shí)體的生產(chǎn)方法,具體來(lái)說(shuō)是涉及一種以玉米芯為基質(zhì)栽培蛹蟲草子實(shí)體的生產(chǎn)方法。

【背景技術(shù)】
[0002]傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)與現(xiàn)代科學(xué)研究都表明，冬蟲夏草含有多種對(duì)人體有益的營(yíng)養(yǎng)有效成分，其中如蟲草素、蟲草酸、腺苷等均具有抗菌、抗腫瘤、抗氧化、滋陰壯陽(yáng)、保肝益肺和提高免疫力等功效，因而越來(lái)越受到人們的喜愛(ài)，市場(chǎng)需求不斷擴(kuò)大。蛹蟲草作為冬蟲夏草的替代品也開始深受消費(fèi)者的追捧，其栽培產(chǎn)業(yè)已漸成規(guī)模。蛹蟲草子實(shí)體的栽培生產(chǎn)主要以大米、小麥等谷物類為主要基質(zhì)進(jìn)行，與其它以農(nóng)林下腳料為主要栽培基質(zhì)的食用菌種類有明顯的差別，未能充分發(fā)揮食用菌“化廢為寶”的特點(diǎn)。為進(jìn)一步降低生產(chǎn)成本，節(jié)約糧食資源，有必要開展利用新基質(zhì)的栽培技術(shù)研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于開發(fā)出一種以玉米芯為主要基質(zhì)栽培蛹蟲草子實(shí)體的生產(chǎn)方法，即通過(guò)蛹蟲草母種的制備與保藏、活化、液體菌種的制備、生產(chǎn)種的制備、玉米芯生產(chǎn)培養(yǎng)基制備、接種、培育與采收，從而得到了一種蛹蟲草子實(shí)體，最終實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的。本發(fā)明首次采用玉米芯為主要栽培基質(zhì)，通過(guò)固體培養(yǎng)的方式進(jìn)行蛹蟲草子實(shí)體栽培生產(chǎn)。這種方法不僅節(jié)約資源，充分發(fā)揮食用菌變廢為寶的生物優(yōu)勢(shì)，將農(nóng)林下腳料玉米芯進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，還能生產(chǎn)出營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健價(jià)值高的子實(shí)體，且產(chǎn)量和質(zhì)量均與目前的生產(chǎn)水平相當(dāng)，部分有效成分的含量甚至更高。
[0004]本發(fā)明的蛹蟲草子實(shí)體的生產(chǎn)方法，其特征包括以下的步驟:
[I]蛹蟲草菌株斜面母種的制備:利用獲得的新鮮蛹蟲草子實(shí)體進(jìn)行組織分離，取
0.5cmX0.5cm大小的菌肉接入綜合PDA斜面培養(yǎng)基，20-25°C，避光培養(yǎng)12-20天，菌絲長(zhǎng)滿斜面即得到斜面母種，5 V保存。
[0005][2]母種的活化:將⑴獲得的菌種接入無(wú)菌的綜合PDA斜面培養(yǎng)基中，20_25°C下，暗培養(yǎng)4-7天后，光照5-10天，選取菌絲生長(zhǎng)整齊且基生菌絲發(fā)達(dá)的菌種作為活化母種。
[0006][3]液體菌種的制備:將⑵獲得的活化母種接至無(wú)菌液體培養(yǎng)基中，每100毫升液體培養(yǎng)基接入母種8-12塊(黃豆大小)，20-25°C下，100-120rpm,振蕩培養(yǎng)5_7天，選取菌絲球大小均勻一致的作為一級(jí)菌種，或用同樣的方法擴(kuò)大培養(yǎng)作為二級(jí)菌種或選取菌絲球大小均勻一致直接用于栽培生產(chǎn)。所述的液體培養(yǎng)基組成是PPDA，即每升培養(yǎng)基中含葡萄糖20g，土豆 200g，蛋白胨 2-6g，KH2PO4 l_4g，MgSO4.7H20 l_4g。土豆切粒后煮沸 20 分鐘后，采濾法。將各成分按配方用量稱好并分別用水溶解后，調(diào)節(jié)PH至6.5-7.0,用水定容至I升，按裝量為20-60%的比例裝入耐高溫的容器內(nèi)，于121°C下，15-30分鐘常規(guī)滅菌，冷卻至室溫，備用。
[0007][4]生產(chǎn)種的制備:將一級(jí)菌種按2-109UV/V)的接種量接入液體培養(yǎng)基PPDA中，按步驟[3]進(jìn)行培養(yǎng)，選取菌絲球大小均勻一致的作為生產(chǎn)種，用于栽培生產(chǎn)。
[0008][5]接種:在無(wú)菌室或超凈工作臺(tái)內(nèi)，按1:10-30 (V/V)的比例用無(wú)菌水將生產(chǎn)菌種稀釋，再接入無(wú)菌的生產(chǎn)培養(yǎng)基中，接種量為1-1OmL,接入玉米芯生產(chǎn)培養(yǎng)基中。
[0009][6]玉米芯生產(chǎn)培養(yǎng)基制備:所述的生產(chǎn)培養(yǎng)基是由玉米芯和營(yíng)養(yǎng)液組成，每升營(yíng)養(yǎng)液由碳源10-30 g，氮源8-15 g，大量元素1-5 g，以及余量的水組成，pH6.0-7.5，所述的碳源是白糖、葡萄糖或不添加碳源，所述的氮源是蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、甘氨酸或硝酸銨，大量元素是磷酸二氫鉀、硫酸鎂(以上所用碳源、氮源和磷元素可為食品級(jí)或生化試劑級(jí)；玉米芯需粉碎至4目以上)，玉米芯和營(yíng)養(yǎng)液混合后，使培養(yǎng)基水分含量為60-80%左右，裝瓶，將料面壓平，生產(chǎn)培養(yǎng)基厚度為2-5cm，密度為:0.3-0.6g/cm3,封口，121 ° C滅菌40 min,冷卻至室溫備用。
[0010]培育與采收:在18-25°C，空氣相對(duì)濕度50-65%下，先進(jìn)行暗培養(yǎng)3-4天，待菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)基后，進(jìn)行光照培養(yǎng)，光強(qiáng)400-10001ux，10-12h/d,空氣相對(duì)濕度80_90%，18-23°C，經(jīng)7-14天即可長(zhǎng)出子實(shí)體原基，再培養(yǎng)40-50天，待部分子實(shí)體頂部變成圓形，或出現(xiàn)淺黃色孢子時(shí)，即可進(jìn)行采收。新鮮的子實(shí)體在60°C下烘3-4小時(shí)，即可獲得干品(水分含量≤13%),便于保存和再利用。
[0011]本發(fā)明利用玉米芯為主要原料進(jìn)行蛹蟲草子實(shí)體栽培，并未對(duì)生產(chǎn)周期和生產(chǎn)條件產(chǎn)生明顯的影響。本發(fā)明的蛹蟲草子實(shí)體含有多種有效成分和營(yíng)養(yǎng)成分，且與目前常用的大米等主要基質(zhì)栽培所得的子實(shí)體營(yíng)養(yǎng)成分相當(dāng)，部分成分含量更高，可作為食品或原料使用。各營(yíng)養(yǎng)成分含量見表1所示。
[0012]表1蛹蟲草子實(shí)體的主要營(yíng)養(yǎng)活性成分及最低含量表

【權(quán)利要求】
1.一種蛹蟲草子實(shí)體的固體栽培方法。
2.權(quán)利要求1所述的蛹蟲草子實(shí)體的栽培方法，以玉米芯為主要基質(zhì)。
3.權(quán)利要求2所述玉米芯生產(chǎn)培養(yǎng)基需要由玉米芯和營(yíng)養(yǎng)液組成，每升營(yíng)養(yǎng)液由碳源10-30 g,氮源8-15 g,大量元素1-5 g,以及余量的水組成，pH6.0-7.5,所述的碳源是白糖、葡萄糖或不添加碳源，所述的氮源是蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、甘氨酸或硝酸銨，大量元素是磷酸二氫鉀、硫酸鎂(以上所用碳源、氮源和磷元素可為食品級(jí)或生化試劑級(jí)；玉米芯需粉碎至5目以上)。
4.權(quán)利要求3所述玉米芯生產(chǎn)培養(yǎng)基水分含量為60-80%左右，而以70-80%為最佳，以保證蛹蟲草子實(shí)體生長(zhǎng)全過(guò)程所需的水分要求。
5.權(quán)利要求4所述玉米芯生產(chǎn)培養(yǎng)基厚度需控制在2-5cm，同時(shí)需壓實(shí)使其密度達(dá)到0.3-0.6g/cm3，在保證滿足生長(zhǎng)要求的條件下，達(dá)到縮短滅菌時(shí)間(121 °C滅菌20 min)，實(shí)現(xiàn)節(jié)約能源的目的。
6.權(quán)利要求5所述玉米芯生產(chǎn)培養(yǎng)基在接入液體菌種時(shí)避免加入過(guò)多的水分，影響培養(yǎng)基的透氣性，且能降低接種難度和加快接種的速度，僅接入1-1OmL經(jīng)稀釋的液體菌種即能達(dá)到快速發(fā)菌的要 求。
【文檔編號(hào)】C05G3/00GK104177182SQ201410406541
【公開日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2014年8月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月19日
【發(fā)明者】林群英, 孫曉明, 張衛(wèi)明, 吳亮亮 申請(qǐng)人:中華全國(guó)供銷合作總社南京野生植物綜合利用研究所