一種深紫色馬蹄蓮組培快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種深紫色馬蹄蓮組培快速繁殖方法，采集健康、飽滿的深紫色彩色馬蹄蓮主芽或側(cè)芽為外植體，在次氯酸鈉溶液中消毒5-10min，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA0.5～1.5mg/L+NAA0.1～0.3mg/L上誘導(dǎo)不定芽的生長；將誘導(dǎo)出的不定芽在MS+6-BA2.0～3.0mg/L+NAA0.2～0.3mg/L培養(yǎng)基上進行繼代擴繁；將高度在2cm以上的小芽轉(zhuǎn)入MS+6-BA0.5～1.0mg/L+NAA0.3～0.5mg/L培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)及壯苗；光照強度2000lux，溫度25℃；最后將煉苗后的植株在溫度25℃、濕度>85%的溫室進行移栽，種苗成活率達到95%以上。
【專利說明】一種深紫色馬蹄蓮組培快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)方法領(lǐng)域，特別是涉及一種深紫色馬蹄蓮組培快速繁殖方法。

【背景技術(shù)】
[0002]馬蹄蓮原產(chǎn)于南非又稱海芋、水芋、觀音蓮，天南星科馬蹄蓮屬，為球根花卉，肉質(zhì)塊莖肥大，節(jié)處生根，根系發(fā)達粗壯，其花型為肉穗花序，包于黃、紅、粉等不同色彩的佛焰苞內(nèi)，形成不同品種系。彩色馬蹄蓮既可觀葉也可觀花，具有較高的觀賞價值。馬蹄蓮的繁殖通常兩種方法，傳統(tǒng)的方法是采用塊莖分生法進行，該方法繁殖慢、成活率低、生產(chǎn)周期長，易變異，繁殖系數(shù)??；另一種方法是組培快繁技術(shù)，但由于不同的品種在誘導(dǎo)、繼代擴繁、生根階段都要求不同的培養(yǎng)基，因此每個花色品種都需要適合自身快繁需要的專用培養(yǎng)基。
[0003]2000.12.6公開的專利號為99107899.3的中國發(fā)明專利公開了一種彩色馬蹄蓮微型種球大規(guī)?？旆狈椒ǎ摲椒ㄊ紫葘Σ噬R蹄蓮進行試管苗快繁，然后進行種球誘導(dǎo)，所得的種球便于貯藏和運輸，利于推廣種植。該方法通過誘導(dǎo)種球的形成實現(xiàn)馬蹄蓮的快繁，但在實際操作過程中，若要獲得馬蹄蓮植株還需要對種球進行栽種培育，從而無法保證種球的成活率。
[0004]2011.6.15公開的專利號為201010537621.5的中國發(fā)明專利公開了一種彩色馬蹄蓮瓶內(nèi)結(jié)莖的快速繁殖方法，該方法將馬蹄蓮消毒的芽眼接種于每升添加0.5~2.0mg6-BA, 0.1mg NAA, 2.0mg KT, 30g蔗糖和6g瓊脂的MS培養(yǎng)基上進行不定芽誘導(dǎo)和繼代增殖；然后轉(zhuǎn)接到每升添加30g蔗糖，6g瓊脂的改良MS培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；待小苗長到4~6cm時，轉(zhuǎn)接到每升附加0.1~0.6mg6_BA, 0.1mg NAA, 60~120g鹿糖，0.1~0.2mg水楊酸和6g瓊脂的MS培養(yǎng)基上進行塊莖誘導(dǎo)。該方法未涉及組培苗生根的誘導(dǎo)，若要獲得馬蹄蓮植株還需要對塊莖進行栽種，增加了馬蹄蓮快速繁殖的步驟。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種深紫色馬蹄蓮組培快速繁殖方法，在高繁殖系數(shù)和成活率前提下，實現(xiàn)該品種馬蹄蓮工廠化快速生產(chǎn)。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
[0007]深紫色馬蹄蓮組培快速繁殖方法，采集健康、飽滿的深紫色彩色馬蹄蓮主芽或側(cè)芽為外植體，在次氯酸鈉溶液中消毒，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA0.5~1.5mg/L+NAA0.1~0.3mg/L上誘導(dǎo)不定芽的產(chǎn)生，將誘導(dǎo)出的不定芽在繼代培養(yǎng)基MS+6-BA2.0~3.0mg/L+NAA0.2~0.3mg/L上進行繼代擴繁，將高度在2cm以上的小芽轉(zhuǎn)入生根壯苗培養(yǎng)基MS+6-BA0.5~1.0mg/L+NAA0.3~0.5mg/L進行生根培養(yǎng)及壯苗；組培過程光照強度2000lux，溫度25°C ;最后將經(jīng)過煉苗的植株移至溫室進行移栽。
[0008]進一步的，所述的次氯酸鈉溶液濃度為4%，消毒時間為5-10min。
[0009]進一步的，所述的外植體大小為0.5cmX0.5cmX0.5cm。
[0010]進一步的，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的成分為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.lmg/L,所述的繼代培養(yǎng)基成分為MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L,所述的生根壯苗培養(yǎng)基成分為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L。
[0011]進一步的，所述的馴化煉苗環(huán)境條件為室溫25°C、濕度>85%。
[0012]進一步的，外殖體誘導(dǎo)培養(yǎng)時間為30d，繼代擴繁時間為30d，生根培養(yǎng)及壯苗時間為40d。
[0013]上述技術(shù)方案中的MS培養(yǎng)基均含:蔗糖30g/L，瓊脂6.3g/L，pH5.8。
[0014]本技術(shù)方案與【背景技術(shù)】相比，它具有如下優(yōu)點:
[0015]1、建立了深紫色彩色馬蹄蓮品種高效組培快繁體系，可以進行工廠化生產(chǎn)，
[0016]2、提高了馬蹄蓮?fù)庵丑w培育的成活率，將生根和壯苗合并培養(yǎng)，培養(yǎng)周期由原來的60天左右縮短為40天左右，節(jié)約了成本，提高了經(jīng)濟效益。

【具體實施方式】
[0017]以下結(jié)合具體實施例進一步詳細描述本發(fā)明的技術(shù)方案，但本發(fā)明的內(nèi)容并不限于此。
[0018]實施例1
[0019]步驟1:采集健康、飽滿的紫色彩色馬蹄蓮主芽或側(cè)芽為外植體，外植體大小為
0.5cmX0.5cmX0.5cm,在4%次氯酸鈉溶液中滅菌1min,用無菌水反復(fù)沖洗7次；
[0020]步驟2:將滅菌后的外殖體接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.lmg/L上誘導(dǎo)主芽或側(cè)芽，誘導(dǎo)成功率100% ；
[0021]步驟3:外殖體誘導(dǎo)培養(yǎng)30天后，將誘導(dǎo)出的主芽或側(cè)芽接種在繼代培養(yǎng)基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L上進行不定芽誘導(dǎo)，誘導(dǎo)率100%，每塊主芽或側(cè)芽可擴繁成3~4團不定芽，不定芽可在同種培養(yǎng)基上連續(xù)繼代；
[0022]步驟4:繼代擴繁30天后，將高度在2cm以上的小芽轉(zhuǎn)入生根壯苗培養(yǎng)基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L 中進行培養(yǎng)；
[0023]步驟5:生根培養(yǎng)及壯苗40天后，植株高5~8cm，生根率100%，平均生根3.6條，平均根長3.9cm，煉苗后將植株移至溫度25°C、濕度>85%的溫室進行移栽，種苗成活率>95%。
[0024]步驟I 一 4中所述的MS培養(yǎng)基均含:蔗糖30g/L，瓊脂6.3g/L，pH5.8 ;培養(yǎng)條件為:溫度25。。，光照20001ux。
[0025]上述僅為本發(fā)明的一個具體實施例，但本發(fā)明的設(shè)計構(gòu)思并不局限于此，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，對發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，但不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍中。
【權(quán)利要求】
1.一種深紫色馬蹄蓮組培快速繁殖方法，采集健康、飽滿的深紫色彩色馬蹄蓮主芽或側(cè)芽為外植體，在次氯酸鈉溶液中消毒，在誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA0.5~1.5mg/L+NAA0.1~0.3mg/L上誘導(dǎo)不定芽的產(chǎn)生，將誘導(dǎo)出的不定芽在繼代培養(yǎng)基MS+6-BA2.0~3.0mg/L+NAA0.2~0.3mg/L上進行繼代擴繁，將高度在2cm以上的小芽轉(zhuǎn)入生根壯苗培養(yǎng)基MS+6-BA0.5~1.0mg/L+NAA0.3~0.5mg/L進行生根培養(yǎng)及壯苗，光照強度20001ux，溫度250C ;最后將煉苗后的植株移至溫室進行移栽；所述的MS培養(yǎng)基均含:蔗糖30g/L，瓊脂6.3g/L, pH5.8。
2.如權(quán)利要求1所述的深紫色馬蹄蓮快速繁殖方法，其特征在于:所述的次氯酸鈉溶液濃度為4%,消毒時間為5-10min。
3.如權(quán)利要求1所述的深紫色馬蹄蓮快速繁殖方法，其特征在于:所述的外植體大小為 0.5cmX0.5cmX0.5cm。
4.如權(quán)利要求1所述的深紫色馬蹄蓮快速繁殖方法，其特征在于:所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的成分為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.lmg/L,所述的繼代培養(yǎng)基成分為MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L，所述的生根壯苗培養(yǎng)基成分為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L。
5.如權(quán)利要求1所述的深紫色馬蹄蓮快速繁殖方法，其特征在于:所述的溫室環(huán)境條件為室溫25°C、濕度>85%。
6.如權(quán)利要求1所述的深紫色馬蹄蓮快速繁殖方法，其特征在于:外殖體誘導(dǎo)培養(yǎng)時間為30d。
7.如權(quán)利要求1所述的深紫色馬蹄蓮快速繁殖方法，其特征在于:繼代擴繁時間為30d。
8.如權(quán)利要求1所述的深紫色馬蹄蓮快速繁殖方法，其特征在于:生根培養(yǎng)及壯苗時間為40d。
【文檔編號】A01H4/00GK104041407SQ201310345164
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2013年8月8日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月8日
【發(fā)明者】謝松林, 邢東方 申請人:歐中（福建）植物技術(shù)有限公司