專利名稱：一種三疣梭子蟹家系選育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水產(chǎn)育種領(lǐng)域，具體地涉及一種三疣梭子蟹家系選育方法。
背景技術(shù)：
三撫梭子蟹(Portunus trituberculatus)是一種重要的海洋經(jīng)濟(jì)動(dòng)物，目前養(yǎng)殖面積50萬(wàn)畝，產(chǎn)量達(dá)10萬(wàn)噸，已成為我國(guó)海洋養(yǎng)殖主導(dǎo)種類之一。目前，三疣梭子蟹養(yǎng)殖業(yè)主要還是依靠捕撈野生蟹來(lái)滿足生產(chǎn)育苗的需要，這種狀態(tài)限制了其發(fā)展。一方面，這些捕撈的野生三疣 梭子蟹可能攜帶感染性病毒，導(dǎo)致養(yǎng)殖成活率極低(5 10%)，給產(chǎn)業(yè)和區(qū)域經(jīng)濟(jì)的發(fā)展造成重大損失；另一方面，生長(zhǎng)速度是重要的經(jīng)濟(jì)性狀，大規(guī)格三疣梭子蟹的經(jīng)濟(jì)價(jià)值明顯要高。因此培育生長(zhǎng)速度快、成活率高的優(yōu)良品種是實(shí)現(xiàn)三疣梭子蟹產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)性發(fā)展的重要保障。傳統(tǒng)群體選育無(wú)法兼顧生長(zhǎng)速度和成活率兩個(gè)性狀，由于梭子蟹沒有合適的個(gè)體標(biāo)記，也無(wú)法通過評(píng)估個(gè)體育種值進(jìn)行選育。根據(jù)物種特性及目前研究進(jìn)展，采用家系的選育方式效果更佳，但由于個(gè)體標(biāo)記沒有解決，家系不能混養(yǎng)，必須在不同的網(wǎng)格或池塘中單獨(dú)養(yǎng)殖，在養(yǎng)殖過程中，密度是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化值，而養(yǎng)殖密度對(duì)生長(zhǎng)速度影響較大，因此以生長(zhǎng)速度為單一選育指標(biāo)，結(jié)果不科學(xué)；如果以成活率為單一選育指標(biāo)，結(jié)果可能導(dǎo)致選育的成品蟹規(guī)格小，經(jīng)濟(jì)價(jià)值低。因此以單一性狀為選育指標(biāo)進(jìn)行家系選育，結(jié)果可能會(huì)導(dǎo)致較差的選育效果或較低的經(jīng)濟(jì)效益。目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)三疣梭子蟹生長(zhǎng)速度、成活率復(fù)合性狀選育的相關(guān)報(bào)道。另外我國(guó)北方梭子蟹養(yǎng)殖至120日齡時(shí)，雌蟹完成生殖蛻殼與交尾，而180日齡時(shí)收獲上市，由于交尾與收獲時(shí)間的不同步，給家系的構(gòu)建與生長(zhǎng)性狀的精確評(píng)估帶來(lái)很大困難。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種三疣梭子蟹家系選育方法，本選育方法，以生長(zhǎng)速度、成活率2個(gè)經(jīng)濟(jì)性狀為指標(biāo)，結(jié)合商品蟹規(guī)格與市場(chǎng)價(jià)格的經(jīng)驗(yàn)值，分別加權(quán)65%,35%； 120日齡時(shí)進(jìn)行家系經(jīng)濟(jì)性狀評(píng)估，根據(jù)結(jié)果進(jìn)行初步選育，并完成室內(nèi)人工定向交尾，收獲時(shí)再次評(píng)估家系經(jīng)濟(jì)性狀，對(duì)選育結(jié)果進(jìn)行修正，選育效果得到顯著提高，大幅度提聞養(yǎng)殖效益。本發(fā)明是按照以下操作技術(shù)方案完成的:一種三疣梭子蟹家系選育方法，包括以下步驟:(I)收集我國(guó)不同地理群體的三疣梭子蟹構(gòu)建基礎(chǔ)群體，并進(jìn)行遺傳多樣性綜合評(píng)估；(2)不同群體中分別挑選親蟹，按完全雙列雜交模式建立家系，標(biāo)準(zhǔn)化育苗和養(yǎng)殖，計(jì)算雜交優(yōu)勢(shì)率；(3)利用具有明顯雜交優(yōu)勢(shì)的交配組合，通過室內(nèi)人工定向交尾，構(gòu)建家系，標(biāo)準(zhǔn)化育苗與養(yǎng)殖，每個(gè)家系設(shè)置親本組和備份組，各組養(yǎng)殖面積、放養(yǎng)密度完全相同，養(yǎng)殖環(huán)境一致；親本組作為構(gòu)建家系的材料，120日齡時(shí)進(jìn)行體重測(cè)量、成活率統(tǒng)計(jì)，計(jì)算家系選育綜合提聞值R=65%X (B家系體重-B野生對(duì)照體重)/B野生對(duì)照體重+35% (S家系成醇-S野生對(duì)照成醇)/S野生
&對(duì)R大于零的家系挑選優(yōu)良個(gè)體，進(jìn)行室內(nèi)人工定向交尾，交尾成功雌蟹，進(jìn)行物 標(biāo)記，室內(nèi)繼續(xù)養(yǎng)殖；備份組室外養(yǎng)殖至180日齡時(shí)收獲，測(cè)量體重，統(tǒng)計(jì)成活率，重新計(jì)算各家系R，然后備份組所有個(gè)體上市，對(duì)120日齡留種結(jié)果進(jìn)行修正，選擇兩次R均大于零的家系留種；將留種家系室內(nèi)養(yǎng)殖的親本組已交尾雌蟹進(jìn)行越冬；(4)次年春天每個(gè)家系選擇抱卵良好的親蟹，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化育苗與養(yǎng)殖，采用(3)的選育方法繼續(xù)篩選家系；(5)對(duì)篩選出的家系進(jìn)行小規(guī)模示范養(yǎng)殖，確定和評(píng)價(jià)選育家系的養(yǎng)殖效益。進(jìn)一步，所述的步驟(2)具體為從備選親蟹中挑選親蟹，采用人工定向交尾技術(shù)按完全雙列雜交模式建立家系交配組合，每種交配組合2組，雌雄比例為3:1，對(duì)建立的家系進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化育苗與養(yǎng)殖，各家系苗種培育密度、養(yǎng)殖密度相同，120日齡時(shí)隨機(jī)測(cè)量各家系50個(gè)個(gè)體生長(zhǎng)性狀，采用SPSS計(jì)算雜交優(yōu)勢(shì)率。進(jìn)一步，所述的步驟(3)中對(duì)R大于零的家系挑選優(yōu)良個(gè)體，進(jìn)行室內(nèi)人工定向交尾，其交尾方式為家系內(nèi)自交，每個(gè)家系建立自交組合5-10個(gè)。進(jìn)一步，所述的步驟(4)中每個(gè)篩選家系的越冬親蟹為雌蟹50-100只。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果:1、本發(fā)明以生長(zhǎng)速度、成活率2個(gè)指標(biāo)，進(jìn)行三疣梭子蟹家系選育，綜合評(píng)價(jià)家系經(jīng)濟(jì)性狀，選育結(jié)果既提高收獲時(shí)梭子蟹規(guī)格，又提高養(yǎng)殖成活率，從而大幅度提高養(yǎng)殖效益，同時(shí)避免單一'丨生狀選育造成的偏差。2、本發(fā)明在三疣梭子蟹選育過程中，每個(gè)家系設(shè)置親本組和備份組，三疣梭子蟹養(yǎng)殖至120日齡時(shí)性成熟，評(píng)估此時(shí)家系生長(zhǎng)性狀，R大于零的家系親本組進(jìn)行室內(nèi)人工定向交尾；180日齡(收獲)時(shí)重新評(píng)估家系備份組生長(zhǎng)性狀，對(duì)選育結(jié)果進(jìn)行修正，然后選擇兩次R均大于零的家系室內(nèi)交尾雌蟹留種。該方法即避免收獲時(shí)，個(gè)體完成交尾，不能選擇優(yōu)良雄蟹與雌蟹交尾，同時(shí)又避免120日齡時(shí)家系生長(zhǎng)性狀評(píng)估誤差。另外可以為擬穴青蟹、中華絨螯蟹等個(gè)體標(biāo)記未解決的甲殼類新品種培育提供一種新思路。3、通過小規(guī)模示范養(yǎng)殖結(jié)果表明，篩選出的三疣梭子蟹家系具明顯的高產(chǎn)出效果，具有良好的推廣和應(yīng)用價(jià)值，經(jīng)小規(guī)模的示范測(cè)試和比較試驗(yàn)，可以獲得高產(chǎn)，平均畝產(chǎn)量在80kg以上，上市時(shí)梭子蟹規(guī)格提高15-18%，養(yǎng)殖成活率提高20-22%。
具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例詳細(xì)敘述本發(fā)明的技術(shù)方法:一種三疣梭子蟹家系選育方法，包括以下步驟:1、收集我國(guó)沿海三疣梭子蟹不同地理群體并進(jìn)行遺傳多樣性綜合評(píng)估；2、從不同群體中分別挑選親蟹，按完全雙列雜交模式建立家系，標(biāo)準(zhǔn)化育苗和養(yǎng)殖，計(jì)算雜交優(yōu)勢(shì)；3、利用具有雜交優(yōu)勢(shì)的組合，通過室內(nèi)交尾建立家系，標(biāo)準(zhǔn)化育苗和養(yǎng)殖，分別測(cè)量各家系120日齡、180日齡(收獲)時(shí)體重，統(tǒng)計(jì)成活率，計(jì)算綜合選育提高值R，對(duì)兩次R均大于零的家系進(jìn)行留種；4、次年春天對(duì)留種家系進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化育苗及養(yǎng)殖，采用3方法再次篩選家系；5、對(duì)篩選出的家系進(jìn)行小規(guī)模示范養(yǎng)殖，確定和評(píng)估其 收益。一種三疣梭子蟹家系選育方法，具體包括以下步驟:
(I)收集了萊州灣、鴨綠江口、海州灣、舟山4個(gè)三疣梭子蟹野生群體組建基礎(chǔ)群，每個(gè)群體的雌、雄蟹數(shù)量均在80只以上。對(duì)4個(gè)群體的14項(xiàng)形態(tài)學(xué)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)量，綜合運(yùn)用生物學(xué)性狀、免疫酶學(xué)指標(biāo)、同工酶電泳、AFLP分析等手段對(duì)4個(gè)不同地理群體進(jìn)行群體間遺傳分化研究，發(fā)現(xiàn)三疣梭子蟹遺傳多樣性較高，種質(zhì)資源維護(hù)處于較好狀態(tài)；選擇體重> 250g的個(gè)體構(gòu)建基礎(chǔ)群體，備選親蟹符合以下特征:健康、活力強(qiáng)、體表光潔、附肢齊全、無(wú)機(jī)械損傷的個(gè)體；(2)從備選親蟹中挑選優(yōu)良個(gè)體，采用人工定向交尾技術(shù)按完全雙列雜交模式建立家系交配組合，每種交配組合1-2組，雌雄比例為3:1，對(duì)建立的家系進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化育苗和養(yǎng)殖，120日齡時(shí)，測(cè)量體重，采用SPSS軟件，計(jì)算雜交優(yōu)勢(shì)率。(3)以具有雜交優(yōu)勢(shì)的組合(舟山古X萊州灣早、萊州灣古X舟山早、海州灣古X萊州灣早、萊州灣 X海州灣早)，采用室內(nèi)人工定向交尾技術(shù)建立家系，經(jīng)過越冬，次年春天建立30個(gè)全同胞家系，同步建立野生對(duì)照，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化苗種培育和養(yǎng)殖，苗種培育布池密度為3萬(wàn)尾/立方水體，養(yǎng)殖密度控制在3500尾/畝，每個(gè)家系通過圍格養(yǎng)殖4份，親本組、備份組各兩份，每份I畝水面，養(yǎng)殖環(huán)境一致。家系的篩選共分二次進(jìn)行:(a)養(yǎng)殖至120日齡時(shí)，每個(gè)家系收獲2份親本組，隨機(jī)測(cè)量50只個(gè)體體重，統(tǒng)計(jì)
成活率，計(jì)算綜合選育提聞值R，R=65%X (B家系體重-13野生對(duì)照體重)/13野生對(duì)照體重+35% (S家系成活率-S野生對(duì)照成活率)/S野生對(duì)照成活率，R > O的家系共18個(gè),采用室內(nèi)人工定向交尾技術(shù),進(jìn)行家系自交，親蟹特征同步驟(I )，每個(gè)家系建立5-10組，每組雌雄比例為3:1。(b)養(yǎng)殖至180日齡時(shí)，每個(gè)家系收獲2份備份組，隨機(jī)測(cè)量50只個(gè)體體重，統(tǒng)計(jì)成活率，計(jì)算綜合選育提高值R。R> O的家系共22個(gè)，對(duì)120日齡留種結(jié)果進(jìn)行修正，選擇兩次R均大于零的家系留種，共計(jì)15個(gè)，然后備份組所有個(gè)體上市。對(duì)留種家系室內(nèi)已交尾的親本組235只雌蟹進(jìn)行越冬。(4)次年春天，每個(gè)家系挑選抱卵良好的親蟹2-3只，單獨(dú)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化育苗，共建立35個(gè)全同胞家系，同步建立野生對(duì)照，養(yǎng)殖及選育同步驟(3 )。最終篩選出性狀優(yōu)良家系25個(gè)進(jìn)行留種。留種家系按照步驟(3)中的方式進(jìn)行親蟹交尾、越冬，每個(gè)家系越冬親蟹為雌蟹50-100只。對(duì)越冬成功的親蟹單獨(dú)進(jìn)行苗種培育，分別在中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院下營(yíng)增殖實(shí)驗(yàn)站、青島市寶榮水產(chǎn)科技發(fā)展有限公司、即墨祥瑞水產(chǎn)有限公司、日照開航水產(chǎn)有限公司四個(gè)地區(qū)進(jìn)行小規(guī)模養(yǎng)殖示范，采用普通商品苗種作為對(duì)照組。其中中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院下營(yíng)增殖實(shí)驗(yàn)站示范面積200畝，平均畝產(chǎn)82kg，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值131.2萬(wàn)元，與對(duì)照組相比經(jīng)濟(jì)效益提高32% ;青島市寶榮水產(chǎn)科技發(fā)展有限公司示范養(yǎng)殖面積120畝，收獲時(shí)平均畝產(chǎn)79kg,實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值76.80萬(wàn)元，與對(duì)照組相比經(jīng)濟(jì)效益提高25% ;即墨祥瑞水產(chǎn)有限公司示范養(yǎng)殖面積180畝，收獲時(shí)平均畝產(chǎn)84kg，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值120.96萬(wàn)元，與對(duì)照組相比經(jīng)濟(jì)效益提高28% ;日照開航水產(chǎn)有限公司示范養(yǎng)殖面積280畝，收獲時(shí)平均畝產(chǎn)86kg，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值192.64萬(wàn)元，與對(duì)照組相比經(jīng)濟(jì)效益提高36%。
權(quán)利要求
1.一種三疣梭子蟹家系選育方法，其特征在于包括以下步驟 (1)收集我國(guó)不同地理群體的三疣梭子蟹構(gòu)建基礎(chǔ)群體，并進(jìn)行遺傳多樣性綜合評(píng)估； (2)不同群體中分別挑選親蟹，按完全雙列雜交模式建立家系，標(biāo)準(zhǔn)化育苗和養(yǎng)殖，計(jì)算雜交優(yōu)勢(shì)率； (3)利用具有明顯雜交優(yōu)勢(shì)的交配組合，通過室內(nèi)人工定向交尾，構(gòu)建家系，標(biāo)準(zhǔn)化育苗與養(yǎng)殖，每個(gè)家系設(shè)置親本組和備份組，各組養(yǎng)殖面積、放養(yǎng)密度完全相同，養(yǎng)殖環(huán)境一致；親本組作為構(gòu)建家系的材料，120日齡時(shí)進(jìn)行體重測(cè)量、成活率統(tǒng)計(jì)，計(jì)算家系選育綜合提聞值R=65% X (B家系體重-B野生對(duì)照體重)/B野生對(duì)照體重+35% (S家系成活率-S野生對(duì)照成活率)/S野生對(duì)照成 ，對(duì)R大于零的家系挑選優(yōu)良個(gè)體，進(jìn)行室內(nèi)人工定向交尾，交尾成功雌蟹，進(jìn)行物理標(biāo)記，室內(nèi)繼續(xù)養(yǎng)殖；備份組室外養(yǎng)殖至180日齡時(shí)收獲，測(cè)量體重，統(tǒng)計(jì)成活率，重新計(jì)算各家系R，然后備份組所有個(gè)體上市，對(duì)120日齡留種結(jié)果進(jìn)行修正，選擇兩次R均大于零的家系留種；將留種家系室內(nèi)養(yǎng)殖的親本組已交尾雌蟹進(jìn)行越冬； (4)次年春天每個(gè)家系選擇抱卵良好的親蟹，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化育苗與養(yǎng)殖，采用(3)的選育方法繼續(xù)篩選家系； (5)對(duì)篩選出的家系進(jìn)行小規(guī)模示范養(yǎng)殖，確定和評(píng)價(jià)選育家系的養(yǎng)殖效益。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種三疣梭子蟹家系選育方法，其特征在于所述的步驟(2)具體為從備選親蟹中挑選親蟹，采用人工定向交尾技術(shù)按完全雙列雜交模式建立家系交配組合，每種交配組合2組，雌雄比例為3:1，對(duì)建立的家系進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化育苗與養(yǎng)殖，各家系苗種培育密度、養(yǎng)殖密度相同，120日齡時(shí)隨機(jī)測(cè)量各家系50個(gè)個(gè)體生長(zhǎng)性狀，采用SPSS計(jì)算雜交優(yōu)勢(shì)率。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種三疣梭子蟹家系選育方法，其特征在于所述的步驟(3)中對(duì)R大于零的家系挑選優(yōu)良個(gè)體，進(jìn)行室內(nèi)人工定向交尾，其交尾方式為家系內(nèi)自交，每個(gè)家系建立自交組合5-10個(gè)。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種三疣梭子蟹家系選育方法，其特征在于所述的步驟(4)中每個(gè)篩選家系的越冬親蟹為雌蟹50-100只。
全文摘要
一種三疣梭子蟹家系選育方法，包括以下步驟收集我國(guó)不同地理群體的三疣梭子蟹構(gòu)建基礎(chǔ)群體，并進(jìn)行遺傳多樣性綜合評(píng)估；不同群體中分別挑選親蟹，按完全雙列雜交模式建立家系，標(biāo)準(zhǔn)化育苗和養(yǎng)殖，計(jì)算雜交優(yōu)勢(shì)率；利用具有明顯雜交優(yōu)勢(shì)的交配組合，通過室內(nèi)人工定向交尾，構(gòu)建家系，標(biāo)準(zhǔn)化育苗與養(yǎng)殖，通過兩次篩選留種家系；將留種家系室內(nèi)養(yǎng)殖的親本組已交尾雌蟹進(jìn)行越冬；次年春天每個(gè)家系選擇抱卵良好的親蟹，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化育苗與養(yǎng)殖，利用上述選育方法繼續(xù)篩選家系；本發(fā)明以生長(zhǎng)速度、成活率2個(gè)指標(biāo)，進(jìn)行三疣梭子蟹家系選育，綜合評(píng)價(jià)家系經(jīng)濟(jì)性狀，選育結(jié)果既提高收獲時(shí)梭子蟹規(guī)格，又提高養(yǎng)殖成活率，從而大幅度提高養(yǎng)殖效益，同時(shí)避免單一性狀選育造成的偏差。
文檔編號(hào)A01K61/00GK103250666SQ201310175320
公開日2013年8月21日 申請(qǐng)日期2013年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月14日
發(fā)明者高保全, 劉萍, 李健, 陳萍 申請(qǐng)人:中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所