專利名稱：一種心肌臟器保存液制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)療器械領(lǐng)域，具體涉及一種心肌臟器保存液HTK液及其制備工藝。
背景技術(shù)：
HTK液由Bretschneider于1975年研制，是目前應(yīng)用最廣泛的器官保存液，可用作心臟、腎臟、肝臟、胰腺等臟器的保存，臨床上大大提高了器官移植的成功率。一種成功的器官保存液應(yīng)滿足以下要求:減少低溫保存導(dǎo)致的細(xì)胞水腫；防止細(xì)胞的酸化作用；防止細(xì)胞灌洗保存過(guò)程的細(xì)胞間隙膨脹；防止氧自由基的損傷，尤其在再灌洗過(guò)程中；提供再生高能磷酸化合物底物；保持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定。HTK液具有以下特點(diǎn)(I)含鉀量低,故HTK液易于進(jìn)入受體循環(huán)系統(tǒng).且可反復(fù)或持續(xù)性原位灌洗無(wú)任何副作用及危險(xiǎn)性；(2)含組氨酸/組氨酸-鹽酸緩沖系統(tǒng).有較強(qiáng)的緩沖能力.且組氨酸為有效的非滲透性因子，故可防止內(nèi)皮細(xì)胞腫脹；(3)含色氨酸，作為膜穩(wěn)定劑.可防止組氨酸進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)；(4)含甘露醇，作為羥自由基的清除劑，可防止氧自由基的損傷，同時(shí)兼有滲透支持的作用；(5)含酮戊二酸及色氨酸作為高能磷酸化合物的底物；(6) HTK液粘度低.常溫下粘度指數(shù)為0.8，5°C時(shí)粘度指數(shù)為3.0，故更易于擴(kuò)散至組織間隙，也易于在短時(shí)間內(nèi)使器官降溫。目前我國(guó)市場(chǎng)上的器官保護(hù)液多為進(jìn)口產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)對(duì)此項(xiàng)研究日漸增多，但至今仍無(wú)一國(guó)產(chǎn)器官保存液經(jīng)國(guó)家批準(zhǔn)可 在醫(yī)療市場(chǎng)流通，且進(jìn)口產(chǎn)品需低溫保存，運(yùn)輸成本高，使用不便，其中主要成分之一的2-酮戊二酸氫鉀在儲(chǔ)存溫度達(dá)到20°C以上I小時(shí)就降解并導(dǎo)致產(chǎn)品失去器官保護(hù)作用。因此，制備一種穩(wěn)定性好、成本低、效果好的多器官保護(hù)液顯得尤為重要。我們?cè)谘芯窟^(guò)程中發(fā)現(xiàn)，2-酮戊二酸氫鉀與其他成分同時(shí)溶解配液后，所得產(chǎn)品穩(wěn)定性較差，本發(fā)明在進(jìn)口產(chǎn)品配方基礎(chǔ)上對(duì)制備工藝進(jìn)行了改進(jìn)，使有效成分2-酮戊二酸氫鉀更加穩(wěn)定，產(chǎn)品在40°C下放置20天仍可保證含量穩(wěn)定，避免了全程冷鏈運(yùn)輸，提高了產(chǎn)品穩(wěn)定性和安全性，降低了成本，提高了產(chǎn)品收益，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明在進(jìn)口產(chǎn)品配方基礎(chǔ)上，對(duì)工藝進(jìn)行優(yōu)化，調(diào)整了 2-酮戊二酸氫鉀的配液順序，并加入充氮工藝步驟，以及對(duì)滅菌參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，主要成分2-酮戊二酸氫鉀含量穩(wěn)定在95%以上，其他物質(zhì)含量穩(wěn)定。工藝簡(jiǎn)單，易于操作，從而保證了生產(chǎn)工藝的可重復(fù)性聞，易于控制。本發(fā)明中,HTK液組分包括:氯化鈉15mmoI,氯化鉀9 mmol,六水氯化鎂4 mmol, —水一鹽酸組氨酸18 mmol,組氨酸180 mmol,色氨酸2 mmol, 二水氯化韓0.015 mmol,甘露醇30 mmol ,2-酮戍二酸氫鉀I mmol以及注射用水1000ml。2-酮戊二酸氫鉀與其他組分混合溶解會(huì)導(dǎo)致含量降低，分析其可能與其它成分在部分原輔料溶解后形成的某一特定環(huán)境下發(fā)生反應(yīng)，因此，本發(fā)明著重考察了 2-酮戊二酸氫鉀的加入順序，有如下3種方案:
(1)將2-酮戊二酸氫鉀最先加入注射用水中溶解后，加入其它成分溶解混勻，即:2_酮戊二酸氫鉀，氯化鈉，氯化鉀，六水氯化鎂，一水一鹽酸組氨酸，組氨酸，色氨酸，二水氯化鈣，甘露醇；
(2)將所有離子物質(zhì)加入注射用水中溶解后再加入2-酮戊二酸氫鉀溶解，待溶解后加入其它剩余物料溶解混勻，即:氯化鈉，氯化鉀，六水氯化鎂，二水氯化鈣，2-酮戊二酸氫鉀，一水一鹽酸組氨酸，組氨酸，色氨酸，甘露醇；
(3 )將除2-酮戊二酸氫鉀外其它成分均加入注射用水溶解后，再加入2-酮戊二酸氫鉀溶解混勻，:氯化鈉，氯化鉀，六水氯化鎂，二水氯化鈣，一水一鹽酸組氨酸，組氨酸，色氨酸，甘露醇，2-酮戊二酸氫鉀。測(cè)試結(jié)果:三種方案2-酮戊二酸中間體含量分別為:86.33%，83.43%，96.61%。由此可知，2-酮戊二酸氫鉀在其它原輔料均溶解完全后，再加入溶解，中間體含量不再降低，因此HTK溶液配液順序確定為，將除2-酮戊二酸氫鉀外其它成分均溶解于75%體積注射用水中，再加入2-酮戊二酸氫鉀溶解，混勻。在工藝過(guò)程中，保護(hù)樣品避免被氧化是保證樣品有效含量的重要技術(shù)，本發(fā)明采用充氮技術(shù)條件下進(jìn)行配液、121°C滅菌20min，以組氨酸、色氨酸、2-酮戊二酸氫鉀在高溫60°C放置10天條件下的穩(wěn)定性為考察指標(biāo)，結(jié)果表明，HTK溶液在充氮保護(hù)條件下，在高溫60°C放置過(guò)程中，2-酮戊二酸氫鉀穩(wěn)定性可得到顯著提高，因此HTK溶液制備工藝中選擇進(jìn)行充氮保護(hù)。表I充氮條件下樣品組分穩(wěn)定性
權(quán)利要求
1.一種心肌臟器保護(hù)液，組分包括氯化鈉15mmol,氯化鉀9 mmol,六水氯化鎂4 mmol,一水一鹽酸組氨酸18 mmol,組氨酸180 mmol,色氨酸2 mmol, 二水氯化|丐0.015 mmol,甘露醇30 mmol，2-酮戊二酸氫鉀I mmol以及注射用水，其制備過(guò)程包括:(I)配液:在充氮條件下稱量處方量各組分，依次加入鹽酸組氨酸、組氨酸、甘露醇、氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂攪拌使溶解；將藥液溫度冷至50 60°C，依次加入氯化鈣、色氨酸、2-酮戊二酸氫鉀，攪拌使溶解；(2)吸附過(guò)濾:加入0.05% (w/v)用量活性炭，50°C吸附15min后，脫炭；過(guò)0.22iim濾膜；(3)封裝滅菌:充氮、灌封；115°C濕熱滅菌30分鐘后，迅速冷卻；樣品于2 15°C條件下保存。
2.權(quán)利要求1所述的心肌臟器保護(hù)液制備方法，其特征在于:配液過(guò)程中2-酮戊二酸氫鉀在所有組分溶解后，加入并進(jìn)行溶解。
3.權(quán)利要求1所述的心肌臟器保護(hù)液制備方法，其特征在于:充氮?dú)夂蠊喾狻?br> 4.權(quán)利要求1所述的心肌臟器保護(hù)液在器官移植過(guò)程中用于保存心臟、腎臟、肝臟和胰腺器官。 ·
全文摘要
本發(fā)明提供一種心肌臟器保存液HTK液的制備工藝，在市售標(biāo)準(zhǔn)配方基礎(chǔ)上，調(diào)整配液原料添加順序，加入充氮步驟，以及對(duì)滅菌參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，工藝簡(jiǎn)單，操作方便，2-酮戊二酸氫鉀含量穩(wěn)定在95%以上，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A01N1/02GK103238586SQ20131010388
公開日2013年8月14日 申請(qǐng)日期2013年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月28日
發(fā)明者關(guān)屹, 閆冬, 高曉峰 申請(qǐng)人:遼寧億靈科創(chuàng)生物醫(yī)藥科技有限公司, 關(guān)屹