專利名稱：粘質(zhì)沙雷氏菌在防治白蟻中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物領(lǐng)域，尤其涉及粘質(zhì)沙雷氏菌在防治白蟻中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
白蟻是地球上最古老的社會(huì)性昆蟲，具有生殖力強(qiáng)，存活力高，破壞性大的特點(diǎn)。其分布于除南極洲以后的六大洲，主要分布在以赤道為中心，南北緯度45度之間。在我國(guó)，白蟻的種類已知的有476種，危害房屋建筑的種類有70多種，主要的蟻害種類有19種。白蟻在我國(guó)的分布主要在淮河以南，向北逐漸減少，向南邊逐漸增多，我國(guó)大部分省均有分布的記錄。目前，白蟻的防治以化學(xué)防治為主。由于白蟻為社會(huì)性昆蟲，化學(xué)防治難以達(dá)到根 除白蟻的作用。而且，多種白蟻危害房屋建筑，和人類的生活環(huán)境密切相關(guān)，化學(xué)防治會(huì)對(duì)人類的身體健康帶來不良影響。伴隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人類對(duì)生態(tài)環(huán)境平衡的日益關(guān)注，生物防治技術(shù)的發(fā)展受到越來越多的重視。生物防治技術(shù)相比于化學(xué)防治方法對(duì)環(huán)境和人體健康的危害以及在持續(xù)控制病害方面有長(zhǎng)足的進(jìn)步。害蟲綜合管理(IPM)概念的提出完善與推廣使用生物防治技術(shù)的重要性和可行性已經(jīng)逐漸的被人們接受并應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐中。

發(fā)明內(nèi)容
基于以上背景技術(shù)，本發(fā)明涉及一種白蟻的生物防治方法。為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，擬采用如下技術(shù)方案粘質(zhì)沙雷氏菌在防治白蟻中的應(yīng)用，優(yōu)選地，本發(fā)明的粘質(zhì)沙雷氏菌保藏編號(hào)為CGMCC NO. 6325。本發(fā)明另外一方面還涉及一種防治白蟻的藥劑，其特征在于含有粘質(zhì)沙雷氏菌作為活性成分。此外，本發(fā)明還涉及粘質(zhì)沙雷氏菌的關(guān)鍵生產(chǎn)技術(shù)，其特征在于將粘質(zhì)沙雷氏菌接種在液體培養(yǎng)基中，然后將其置于搖床10°C _40°C，100-600轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速，密閉遮光培養(yǎng)5-60小時(shí)，優(yōu)選置于搖床28°C，200轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速，密閉遮光培養(yǎng)36小時(shí)。按照本發(fā)明，通過試驗(yàn)驗(yàn)證，達(dá)到了以下有益技術(shù)效果(I)達(dá)到了對(duì)白蟻較好的殺滅作用。不僅對(duì)接觸到的白蟻效果較好，而且由于粘質(zhì)沙雷氏菌在白蟻之間可以互相感染，對(duì)蟻穴中的其他白蟻也能達(dá)到較好的防效。(2)本發(fā)明作為生物防治，避免了化學(xué)防治的環(huán)境污染，避免了對(duì)人體健康的影響。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1粘質(zhì)沙雷氏菌生產(chǎn)制備技術(shù)供試材料
粘質(zhì)沙雷氏菌菌種來源采自感染粘質(zhì)沙雷氏菌的白蟻(采自南京林業(yè)大學(xué)校園)，米用下面的培養(yǎng)基培養(yǎng)，每年移菌一次，該菌株被命名為粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratiamarcescens),并于2012年8月15日被保藏在中國(guó)微生物菌株保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCCN0. 6325。白蟻采自南京林業(yè)大學(xué)校園，采回室內(nèi)后25±1°C，黑暗培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)基配方細(xì)菌固體培養(yǎng)基配方牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基牛肉膏3克，蛋白胨5克，氯化鈉5克，瓊脂18克，水1000毫升，pH 至 7. 2-7.4 細(xì)菌液體培養(yǎng)基配方牛肉膏3克，蛋白胨5克，氯化鈉5克，水1000毫升，pH至7. 2-7. 4。固體培養(yǎng)基接菌在無菌操作臺(tái)中接種。接種完成后，將試管豎直放入28°C的溫箱中培養(yǎng)48h，放入冰箱4°C保存；平板培養(yǎng)基倒置放入28 °C溫箱中培養(yǎng)。液體培養(yǎng)基接菌在無菌操作臺(tái)中用接種環(huán)取粘質(zhì)沙雷氏菌接種在液體培養(yǎng)基中，然后將其置于搖床28°C，200轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速，密閉遮光培養(yǎng)36h。實(shí)施例2 :粘質(zhì)沙雷氏菌防治白蟻效果測(cè)定液體培養(yǎng)基稀釋:將液體培養(yǎng)基原液分別稀釋為2-^212^2-4和2_5稀釋度的溶液。測(cè)OD 倌:在分光光度計(jì)600nm波長(zhǎng)下測(cè)得各濃度溶液的OD值。測(cè)溶液濃度將各濃度的溶液分別稀釋為10_7、10_8和10_9稀釋度的溶液。用無菌吸管按無菌操作分別吸取各稀釋液O.1mL加入到培養(yǎng)皿中，用無菌玻璃刮棒將菌液涂抹均勻，平放于桌上20-30分鐘，使菌液滲入培養(yǎng)基表層內(nèi)，然后倒置于28°C溫箱培養(yǎng)24h，重復(fù)3次。計(jì)數(shù)每毫升含菌數(shù)=每稀釋度平均菌落數(shù)X IOX稀釋倍數(shù)逾定每培養(yǎng)皿放10頭白蟻，用O. 04 μ L微量點(diǎn)滴儀分別將各濃度菌液滴定到白蟻前胸背板上，重復(fù)3次，以清水為對(duì)照。具體用藥方法不限如此，也可以采用噴霧的方式。觀察:記錄白蟻的死亡數(shù)量。當(dāng)對(duì)照死亡率為20%時(shí)結(jié)束觀察。數(shù)據(jù)處理利用SPSS13. O統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，求出菌液對(duì)白蟻的LD5tl和95%置信限。結(jié)果與分析OD倌與粘質(zhì)沙雷氏菌數(shù)量的關(guān)系從表I可以看出，在一定的范圍內(nèi)，隨著粘質(zhì)沙雷氏菌數(shù)量的增加，其OD6tltl也增力口。0D_值與粘質(zhì)沙雷氏菌數(shù)量呈線性相關(guān)，方程為
y = 3. 8771x-0. 3732 (R2 = O. 993)。因此，可以根據(jù)此方程，利用菌液OD6tltl值求得菌液的菌數(shù)量。表1:0D600值與粘質(zhì)沙雷氏菌數(shù)量的關(guān)系
權(quán)利要求
1.粘質(zhì)沙雷氏囷在防治白蟻中的應(yīng)用，優(yōu)選地，粘質(zhì)沙雷氏囷保減編號(hào)為CGMCCNO. 6325。
2.一種防治白蟻的藥劑，其特征在于含有粘質(zhì)沙雷氏菌作為活性成分，優(yōu)選地，粘質(zhì)沙雷氏菌保藏編號(hào)為CGMCC NO. 6325。
3.權(quán)利要求1所述的粘質(zhì)沙雷氏菌的培養(yǎng)方法，其特征在于將粘質(zhì)沙雷氏菌接種在液體培養(yǎng)基中，然后將其置于搖床10°C -40°C, 100-600轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速，密閉遮光培養(yǎng)5_60小時(shí)，優(yōu)選置于搖床28°C，200轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速，密閉遮光培養(yǎng)36小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的培養(yǎng)方法，其特征在于所述的液體培養(yǎng)基包括牛肉膏2-4重量份克，蛋白胨4-6重量份，氯化鈉4-6重量份，水1000重量份，液體培養(yǎng)基的pH介于·7.2-7. 4 之間。
全文摘要
本發(fā)明公開了粘質(zhì)沙雷氏菌在防治白蟻中的應(yīng)用及關(guān)鍵制備技術(shù)，粘質(zhì)沙雷氏菌保藏編號(hào)為CGMCC NO.6325。本發(fā)明公開的粘質(zhì)沙雷氏菌，對(duì)白蟻具有較好的殺滅作用，又不污染環(huán)境，具有綠色高效的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)A01N63/00GK102986736SQ201210398930
公開日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2012年10月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月19日
發(fā)明者湯方, 李生臣 申請(qǐng)人:湯方, 李生臣