專利名稱：一種細(xì)腳擬青霉的液體栽培方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種細(xì)腳擬青霉的栽培方法，更具體涉及一種細(xì)腳擬青霉的液體栽培方法。
背景技術(shù)：
細(xì)腳擬青霉tenuipes(Peck) Samson)是高雄山蟲草(Cbr辦ce/751takaomontana Yakushijiet Kumazaw)的無性型，以天然冬蟲夏草作對照分析表明，細(xì)腳擬青霉的主要化學(xué)組分如留醇類、糖醇類、生物堿、有機(jī)酸類和微量元素與前者十分相似，所含氨基酸種類亦相同，但多種氨基酸含量卻高于冬蟲夏草。在日本和韓國該菌已被成功作為冬蟲夏草替代品進(jìn)行了開發(fā)利用。藥理作用方面的研究表明細(xì)腳擬青霉具有抗腫瘤、抗菌、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)功能。據(jù)已報道的相關(guān)文獻(xiàn)，細(xì)腳擬青霉一般采用固體栽培的方式進(jìn) 行，液體栽培的方式還未報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種細(xì)腳擬青霉的液體栽培方法，該方法相較于固體栽培，具有操作簡單，菌種的流動性好，接種后容易分散等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下
將斜面菌種活化后，取菌塊接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，于25-28 °C搖瓶培養(yǎng)7-10d，制備液體菌種；取液體菌種，以5 - 20%的接種量，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為20-25 °C，培養(yǎng)30-40 d ;所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基的組成為馬鈴薯5 - 30%，葡萄糖0. 5 - 5%，蛋白胨0. I - 2%，余量為水。本發(fā)明采用液體栽培，相較于固體栽培，其操作簡單，菌種的流動性好，接種后容易分散，不易污染及生長速度快等優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I
細(xì)腳擬青霉的液體栽培步驟如下
I)配制液體培養(yǎng)基。所述的液體培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基(200 g馬鈴薯去皮，切成小塊，加水煮沸20 min,八層紗布過濾，收集馬鈴薯濾液,加入葡萄糖20 g,蛋白胨10 g，用水定容至I L)，121°C，高壓蒸汽滅菌30 min。2)液體菌種制備。將細(xì)腳擬青霉斜面菌種活化，將活化的斜面菌種挑出按0. 5 I. Ocm2菌塊接種到裝有150 ml的所述液體培養(yǎng)基的三角瓶中，于28 °C, 230 rmp/min的搖床中培養(yǎng)7d，制備液體菌種。3)細(xì)腳擬青霉的液體靜置栽培。將液體菌種以10%接種量，接種到裝有4 L馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，于25°C培養(yǎng)35d。4)采收。經(jīng)過35天培養(yǎng)，細(xì)腳擬青霉子實(shí)體可以采收，子實(shí)體干重的收率為2. 50gA子實(shí)體的長度可達(dá)到52mm左右(圖I)。待細(xì)腳擬青霉生長成熟后，不僅可采收子實(shí)體，而且其發(fā)酵液中含有大量具有生理活性的物質(zhì)，如含有具有降膽固醇作用的葵內(nèi)酯結(jié)構(gòu)類似物等活性化合物。發(fā)酵液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀真空濃縮，而后用乙酸乙酯萃取，真空濃縮成膏狀，再應(yīng)用反相硅膠、凝膠和正相硅膠等層析技術(shù)可分離提取葵內(nèi)酯等各類活性化合物。因此采用液體栽培細(xì)腳擬青霉具有良好的經(jīng)濟(jì)效益。實(shí)施例2
細(xì)腳擬青霉的液體栽培步驟如下
將斜面菌種活化后，取菌塊接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，于25°C搖瓶培養(yǎng)10d，制備液體菌種；取液體菌種，以5%的接種量，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為23 °C，培養(yǎng)30d ;所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基的組成為馬鈴薯5%，葡萄糖5%，蛋白胨2%，余量為水。實(shí)施例3
細(xì)腳擬青霉的液體栽培步驟如下
將斜面菌種活化后，取菌塊接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，于22°C搖瓶培 養(yǎng)8d，制備液體菌種；取液體菌種，以20%的接種量，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為20°C，培養(yǎng)40d ;所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基的組成為馬鈴薯30%，葡萄糖0. 5%，蛋白胨0. 1%，余量為水。
權(quán)利要求
1.一種細(xì)腳擬青霉的液體栽培方法，其特征在于將斜面菌種活化后，取菌塊接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，于25-28 °〇搖瓶培養(yǎng)7-10d，制備液體菌種；取液體菌種，以5 — 20%的接種量，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為20-25°C，培養(yǎng)30-40 d ;所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基的組成為馬鈴薯5 - 30%，葡萄糖0.5 - 5%，蛋白胨0. I - 2%，余量為水。
全文摘要
本發(fā)明具體涉及一種細(xì)腳擬青霉的液體栽培方法。該方法通過將液體菌種，接種到馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為20-25℃，培養(yǎng)30-40d；所述馬鈴薯葡萄糖蛋白胨液體培養(yǎng)基的組成為馬鈴薯5－30%，葡萄糖0.5－5%，蛋白胨0.1－2%，余量為水。本發(fā)明采用液體栽培，相較于固體栽培，其操作簡單，菌種的流動性好，接種后容易分散，不易污染及生長速度快等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號A01G1/04GK102657030SQ201210162110
公開日2012年9月12日 申請日期2012年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月24日
發(fā)明者鄭永標(biāo), 黃建忠 申請人:福建師范大學(xué)