專利名稱：用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)用器械，具體為一種用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置。
背景技術(shù)：
膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的腫瘤，90%以上患者為移行細(xì)胞癌，其中淺表性膀胱癌占到70、5%。由于膀胱癌病變的多灶性，以及手術(shù)后腫瘤細(xì)胞種植于創(chuàng)面，術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)率高達(dá)50-70%。如今，人們通過建立膀胱癌動(dòng)物模型來研究膀胱癌的病因、病理等生物學(xué)行為，膀胱灌注化療、免疫治療和生物治療的療效，為臨床治療和預(yù)防術(shù)后復(fù)發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。要開展膀胱癌防治研究就必須建立最大程度上接近人類發(fā)病情況的動(dòng)物模型，其中，小鼠原位膀胱癌移植模型就是比較適合的一種，也是應(yīng)用最多的腫瘤模型之一。膀胱原位移植瘤動(dòng)物模型因具有與臨床膀胱腫瘤相似的病理過程而具有更強(qiáng)的實(shí)用性。目前常用的造模方法有以下幾種
1、膀胱壁內(nèi)注射腫瘤細(xì)胞法(周潔，華中科技大學(xué)學(xué)報(bào))。該法的主要缺點(diǎn)是操作復(fù)雜， 腫瘤細(xì)胞懸液易外流造成腹腔轉(zhuǎn)移，與臨床病理過程差異大等。2、先采用化學(xué)腐蝕法損傷膀胱粘膜，然后注入腫瘤細(xì)胞懸液(李憲平等，現(xiàn)代泌尿外科雜志，14)。該方法采用0. 2M0L硝酸銀溶液處理膀胱粘膜后，接種膀胱癌MB49細(xì)胞，建立C57BL/6小鼠原位膀胱腫瘤動(dòng)物模型，總成瘤率達(dá)到96. 7%，但是該方法的缺點(diǎn)是手術(shù)過程復(fù)雜，費(fèi)時(shí)較長(zhǎng)，對(duì)動(dòng)物損傷較大。3、采用蛋白酶消化法損傷膀胱粘膜后，再接種腫瘤細(xì)胞法。該方法的缺點(diǎn)是操作難度大，成瘤率很不穩(wěn)定，難以推廣應(yīng)用。4、采用機(jī)械損傷法造成膀胱粘膜操作后，再接種腫瘤細(xì)胞法(何威，中國(guó)臨床醫(yī)學(xué))。該方法采用切開腹壁，取出膀胱，直視下以針尖劃傷膀胱粘膜，接入膀胱癌TM細(xì)胞， 再注入多聚賴氨酸的方法建立裸鼠膀胱癌動(dòng)物模型，成瘤率達(dá)到100%。該方法的缺點(diǎn)是必須切開動(dòng)物腹壁，取出膀胱后對(duì)膀胱粘膜進(jìn)行劃傷，這樣不僅手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)，而且對(duì)動(dòng)物損傷大，模型難以大量復(fù)制。對(duì)于以上的幾種造膜方法，如今醫(yī)學(xué)上采用第四種方法的居多，因?yàn)樵摲椒ǖ某闪雎蕵O高，可達(dá)到100%。但是該方法必須得切開動(dòng)物腹壁，取出膀胱后對(duì)膀胱粘膜進(jìn)行劃傷，這樣不僅手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)，而且對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜損傷很大，那么是否可以設(shè)計(jì)一種新的機(jī)械造模裝置，保證成瘤率在100%的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)縮短手術(shù)時(shí)間、避免或減少對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜損傷的目的，成為值得人們考慮和研究的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有的膀胱原位移植瘤動(dòng)物模型造模方法存在手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)、操作復(fù)雜、對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜損傷大等缺點(diǎn)，而提供了一種用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置。本發(fā)明造模裝置可以在不切開動(dòng)物腹壁的情況下對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜進(jìn)行造模手術(shù)，這就在一定程度上大大縮短了手術(shù)時(shí)間、減少了對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜的損傷。本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
一種用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置，包括前端固設(shè)有針芯的針座和帶有空腔的套管座，在套管座前端固設(shè)有與空腔相通的軟套管，針座前端套插在套管座的空腔內(nèi)并由設(shè)于針座上的定位擋圈定位，此時(shí)針座上的針芯正好也套插于套管座的軟套管中、且針芯的針尖露出軟套管端部的長(zhǎng)度為0. 5^1. 0mm，所述的針芯在距針尖1. 5^2. Ocm處設(shè)有5° 7°的折角，所述的定位擋圈上開設(shè)有標(biāo)記槽。規(guī)定針芯的針尖端為該裝置的前端。進(jìn)一步的，針芯在距針尖1.5 2.0cm處折有5° 7°的偏角，根據(jù)幾何學(xué)公式 Sing A = a / c，其中a為短直角邊、c為斜邊、A為短直角邊所對(duì)的銳角，則可以計(jì)算出 a= Sing AXc，即損傷圓形的半徑。例如設(shè)定c=l. 5cm，由上述公式可以得出當(dāng)A =5°時(shí)， Sing A =0.0871，則 a =0. 0871X15 = 1.308 mm;當(dāng) A =7° 時(shí)，Sing A =0.1218，則 a = 0. 1218X15 =1.83mm。所以當(dāng)針芯轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，可以形成一個(gè)半徑為1. 308mnTl. 83mm的圓形轉(zhuǎn)動(dòng)，這個(gè)轉(zhuǎn)動(dòng)可以造成動(dòng)物膀胱粘膜穩(wěn)定的、程度均一的損傷，再有當(dāng)針座與套管座定位后針尖露出軟套管的長(zhǎng)度為0. 5^1. 0mm，所以也不會(huì)造成膀胱穿孔，這些都是膀胱腫瘤移植的重要條件。上述的針芯在距針尖1.5 2. Ocm處折有5° 7°的偏角以及當(dāng)針座與套管座定位后針尖露出軟套管的長(zhǎng)度為0. 5^1. Omm都是經(jīng)過大量的臨床試驗(yàn)而得出的，在這種尺寸規(guī)格下建立的動(dòng)物模型的成瘤率都能達(dá)到100%。本發(fā)明裝置的具體使用方法
具體使用該造膜裝置時(shí)，先選取好實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物后將其常規(guī)麻醉，取仰臥位，并將其下腹部常規(guī)消毒，接著取該裝置的套管座，將套管座前端的軟套管經(jīng)動(dòng)物的尿道緩緩插入到膀胱腔內(nèi)，抽出尿液；再取針座，將針座前端帶折角的針芯緩緩的插入套管座前端的軟套管內(nèi)，直至套管座的空腔與針座的前端重合并由定位擋圈定位；當(dāng)針座與套管座定位好以后， 針芯就露出軟套管外0. 5 1. 0mm，此時(shí)以左手固定套管座，使軟套管頭部抵在動(dòng)物膀胱壁上，那么針芯就插入到了動(dòng)物膀胱壁、且深度為0. 5^1. 0mm，右手按順(逆)時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)針座，針座帶動(dòng)針芯轉(zhuǎn)動(dòng)數(shù)圈(所轉(zhuǎn)動(dòng)的圈數(shù)由具體的手術(shù)方案來確定)，并通過針座的定位擋圈上的標(biāo)記槽來記錄轉(zhuǎn)動(dòng)的具體圈數(shù)，轉(zhuǎn)動(dòng)圓形造成動(dòng)物膀胱粘膜穩(wěn)定的、程度均一的損傷后，慢慢取出針座，通過套管座上的軟套管將腫瘤細(xì)胞接入動(dòng)物體內(nèi)，最后將套管座慢慢拔出，待動(dòng)物自然蘇醒即可。上述過程中動(dòng)物的選取、動(dòng)物的麻醉消毒、腫瘤細(xì)胞的接入等都是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知并容易實(shí)現(xiàn)的。所述的軟套管外徑為0. 6^1. 2mm、內(nèi)徑為0. 3^0. 6mm、長(zhǎng)度為2、cm ；所述的針芯直徑為0. 3^0. 6mm,長(zhǎng)度為3 5cm。所述的軟套管頭部鈍圓，針芯的針尖部為鋒利的銳角。軟套管頭部鈍圓可
以避免其對(duì)動(dòng)物膀胱壁造成意外損傷，針芯針尖為鋒利的銳角可以比較容易的對(duì)動(dòng)物膀胱壁造成穩(wěn)定的、程度均一的損傷。本發(fā)明的造模裝置設(shè)計(jì)巧妙、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，在具體的造模過程中，操作容易方便，大大縮短了造模手術(shù)時(shí)間，對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜的損傷是穩(wěn)定的、程度均一的，而且成瘤率都為
100% O


圖1為本發(fā)明裝置的結(jié)構(gòu)示意圖。圖2為本發(fā)明裝置中的針座結(jié)構(gòu)示意圖。圖3為本發(fā)明裝置中的套管座結(jié)構(gòu)示意圖。圖4為圖2中的A-A拋面圖。圖中1-針芯、2-針座、3-空腔、4-套管座、5-軟套管、6-定位擋圈、7-標(biāo)記槽。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的描述
一種用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置，包括前端固設(shè)有針芯1的針座 2和帶有空腔3的套管座4，在套管座4前端固設(shè)有與空腔3相通的軟套管5，針座2前端套插在套管座4的空腔3內(nèi)并由設(shè)于針座2上的定位擋圈6定位，此時(shí)針座2上的針芯1正好也套插于套管座4的軟套管5中、且針芯1的針尖露出軟套管5端部的長(zhǎng)度為0. 5^1. Omm, 所述的針芯1在距針尖1.5 2.0cm處設(shè)有5° 7°的折角，所述的定位擋圈6上開設(shè)有標(biāo)記槽7。所述套管座4前端的軟套管5由質(zhì)地較軟的材料制成，可以選擇用橡膠或塑料，且軟套管5的頭部鈍圓、表面光滑，這樣的話，當(dāng)軟套管5經(jīng)尿道插入動(dòng)物的膀胱腔時(shí)，可以有效避免軟套管5對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜的損傷，而且當(dāng)針芯1在軟套管5中轉(zhuǎn)動(dòng)的時(shí)候，軟套管5 可以隨針芯1在一定的范圍內(nèi)擺動(dòng)。所述的針芯1可由不銹鋼制成。以下是使用本發(fā)明造膜裝置建立膀胱癌原位移植瘤小鼠模型的具體實(shí)施例。實(shí)施例1
T739小鼠，70只，雌性，體重20-24克，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組60只，對(duì)照組10只，購(gòu)自北京華阜康實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK (jing) 2009-0004 ； 小鼠膀胱癌BTT細(xì)胞由山西醫(yī)科大學(xué)泌尿外科楊曉峰教授惠贈(zèng)。小鼠按60mg/kg腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉，取仰臥位，下腹部常規(guī)消毒，將無菌套管座4的軟套管5外涂液體石蠟，經(jīng)尿道緩緩插入膀胱腔內(nèi)，抽出尿液。將帶有5-7°偏角的針芯1緩緩插入套管座4的軟套管5內(nèi)，以左手固定套管座4，使軟套管5頭部抵在動(dòng)物膀胱壁上，右手按順時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)針芯1，轉(zhuǎn)3-5圈(108(T1800° )后拔出針芯1，立即通過套管座4上的軟套管5注入0. Iml含有IO6個(gè)BTT細(xì)胞的細(xì)胞懸液，最后慢慢拔出套管座 4，待小鼠自然蘇醒即可。成瘤率觀察小鼠接種后常規(guī)飼養(yǎng)觀察40天，觀察期間如果小鼠死亡，解剖小鼠觀察膀胱腫瘤生成情況，并將膀胱以10%甲醛固定，切片進(jìn)行病理檢查。成瘤率按公式成瘤小鼠數(shù)/接種小鼠數(shù)X 100%計(jì)算。以膀胱內(nèi)檢查出腫瘤細(xì)胞或膀胱內(nèi)長(zhǎng)出肉眼可見的腫瘤為判斷成瘤的標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)稱量膀胱濕重，與對(duì)照組進(jìn)行比較。對(duì)照組小鼠不做膀胱損傷，只接種腫瘤細(xì)胞。結(jié)果60只損傷后接種的小鼠膀胱中均發(fā)現(xiàn)有腫瘤生成，成瘤率為100%。對(duì)照組小鼠膀胱中未見腫瘤生成。實(shí)施例2Bslb/c-nu-nu小鼠70只，雌性，體重20-22克，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào):SCXK (jing) 2006-0009 ；
細(xì)胞株人膀胱癌TM細(xì)胞株，購(gòu)自中科院上海生物科技有限公司。小鼠按60mg/kg腹腔注射戊巴比妥鈉麻醉，取仰臥位，下腹部常規(guī)消毒，將無菌套管座4的軟套管5外涂液體石蠟，經(jīng)尿道緩緩插入膀胱腔內(nèi)，抽出尿液。將帶有5-7°偏角的針芯1緩緩插入套管座4的軟套管5內(nèi)，以左手固定套管座4，使軟套管5頭部抵在動(dòng)物膀胱壁上，右手按順時(shí)針方向轉(zhuǎn)動(dòng)針芯1，轉(zhuǎn)3-5圈(108(T1800° )后拔出針芯1，立即通過套管座4上的軟套管5注入0. Iml含有IO6個(gè)TM細(xì)胞的細(xì)胞懸液，最后慢慢拔出套管座 4，待小鼠自然蘇醒即可。成瘤率觀察小鼠接種后常規(guī)飼養(yǎng)觀察60天，觀察期間如果小鼠死亡，解剖小鼠觀察膀胱腫瘤生成情況，并將膀胱以10%甲醛固定，切片進(jìn)行病理檢查。成瘤率按公式成瘤小鼠數(shù)/接種小鼠數(shù)X 100%計(jì)算。以膀胱內(nèi)檢查出腫瘤細(xì)胞或膀胱內(nèi)長(zhǎng)出肉眼可見的腫瘤為判斷成瘤的標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)稱量膀胱濕重，與對(duì)照組進(jìn)行比較。對(duì)照組小鼠不做膀胱損傷，只接種腫瘤細(xì)胞。結(jié)果60只損傷后接種的小鼠膀胱中均發(fā)現(xiàn)有腫瘤生成，成瘤率為100%。對(duì)照組小鼠膀胱中未見腫瘤生成。表1膀胱粘膜損傷與不損傷小鼠成瘤率比較
權(quán)利要求
1.一種用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置，其特征在于包括前端固設(shè)有針芯(1)的針座(2)和帶有空腔(3)的套管座(4)，在套管座(4)前端固設(shè)有與空腔(3)相通的軟套管(5)，針座(2)前端套插在套管座(4)的空腔(3)內(nèi)并由設(shè)于針座(2)上的定位擋圈(6)定位，此時(shí)針座(2)上的針芯(1)正好也套插于套管座(4)的軟套管(5)中、且針芯 (1)的針尖露出軟套管(5)端部的長(zhǎng)度為0. 5^1. 0mm，所述的針芯(1)在距針尖1. 5^2. Ocm 處設(shè)有5° 7°的折角，所述的定位擋圈(6)上開設(shè)有標(biāo)記槽(7)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置，其特征在于所述的軟套管(5)外徑為0. 6 1. 2_、內(nèi)徑為0. 3 0. 6mm、長(zhǎng)度為2 4cm ；所述的針芯(1) 直徑為0. 3^0. 6mm,長(zhǎng)度為3 5cm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置，其特征在于所述的軟套管(5)頭部鈍圓，針芯(1)的針尖部為鋒利的銳角。
全文摘要
本發(fā)明為一種用于建立膀胱癌原位移植瘤動(dòng)物模型的造模裝置，解決了現(xiàn)有造模方法手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)、操作復(fù)雜、對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜損傷大等缺點(diǎn)。該裝置包括前端固設(shè)有針芯的針座和帶有空腔的套管座，在套管座前端固設(shè)有與空腔相通的軟套管，針座前端套插在套管座的空腔內(nèi)并由設(shè)于針座上的定位擋圈定位，此時(shí)針座上的針芯正好也套插于套管座的軟套管中、且針芯針尖露出軟套管端部的長(zhǎng)度為0.5~1.0mm，所述的針芯在距針尖1.5~2.0cm處設(shè)有5°~7°的折角，所述的定位擋圈上開設(shè)有標(biāo)記槽。該裝置設(shè)計(jì)巧妙、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作容易，大大縮短了手術(shù)時(shí)間，且對(duì)動(dòng)物膀胱粘膜的損傷小，成瘤率可達(dá)100%。
文檔編號(hào)A61D1/00GK102335048SQ20111020067
公開日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2011年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月18日
發(fā)明者任連生, 張蕻, 楊喜花, 王靖, 趙莉莉 申請(qǐng)人:山西省腫瘤醫(yī)院