專利名稱：生物組織固定劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種保存組織和生物樣品的固定劑組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
組織標(biāo)本離體后用固定劑固定，制成病理切片，進(jìn)行醫(yī)學(xué)病理學(xué)診斷。在醫(yī)院病理科、外科手術(shù)室中最常用的固定劑是福爾馬林，福爾馬林用于病理組織標(biāo)本的固定，以防止組織自溶、結(jié)構(gòu)破壞、細(xì)胞變性。但福爾馬林呈液態(tài)，不方便攜帶及遠(yuǎn)程郵寄，且在不密閉的容器中容易滲漏，組織放于其中還會(huì)出現(xiàn)組織漂浮或貼壁等導(dǎo)致的固定不充分。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種生物組織固定劑及其制備方法，該固定劑配制簡(jiǎn)單，成本低廉，固定效果好，克服液態(tài)固定劑的不足，易于攜帶，不會(huì)滲漏。本發(fā)明的生物組織固定劑，該固定劑按重量百分比計(jì)含有1% 10%的甲醛和 1% 10%的瓊脂。進(jìn)一步，該固定劑按重量百分比計(jì)還含有0.5% 5%的甘油； 進(jìn)一步，該固定劑還含有緩沖液；
進(jìn)一步，所述緩沖液為NaH2PCV Na2HPO4和水配制成的磷酸鹽緩沖液；
進(jìn)一步，該固定劑的組分及其重量百分比為
甲醛1% 10% ；
瓊脂1% 10% ；
甘油0. 5% 5% ；
NaH2PO4 0. 2% 1% ；
Na2HPO4 0. 5% 2% ；
余量為水。本發(fā)明的生物組織固定劑的制備方法為首先取水總量的10% 40%加熱至沸騰， 加入瓊脂不停攪拌，直至完全溶解，然后停止加熱，補(bǔ)充剩余水，加入其余組分，攪拌均勻至完全冷卻。因甲醛能與蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合，使蛋白質(zhì)凝固，因此在醫(yī)藥上可作為檢驗(yàn)時(shí)的組織固定劑、以及防腐劑等；本發(fā)明中，甲醛用于病理組織標(biāo)本的固定，以防止組織自溶、結(jié)構(gòu)破壞、細(xì)胞變性；制備本發(fā)明的生物組織固定劑時(shí)，甲醛可以福爾馬林(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30-40% 的甲醛溶液)的形式加入。瓊脂，學(xué)名瓊膠，英文名agar，又名洋菜、凍粉、燕菜精、洋粉、寒天、大菜絲，是由石花菜或江籬(屬紅藻)經(jīng)加熱至溶化后，加以冷卻凝固而成的海藻精華；用藻類制成的瓊脂是半透明、無(wú)定形的粉末、薄片或顆粒，其具有凝固性，穩(wěn)定性，能與一些物質(zhì)形成絡(luò)合物； 瓊脂可用作增稠劑、凝固劑、懸浮劑、乳化劑、保鮮劑和穩(wěn)定劑，廣泛用于制造粒粒橙及各種飲料、果凍、冰淇淋、糕點(diǎn)、軟糖、罐頭、肉制品、Λ寶粥、銀耳燕窩、羹類食品、涼拌食品等等；瓊脂在化學(xué)工業(yè)、醫(yī)學(xué)科研中可作培養(yǎng)基、藥膏基及其他用途。本發(fā)明中，瓊脂用作凝固劑加入固定劑中，使固定劑呈凝膠狀，方便攜帶及遠(yuǎn)程郵寄，在不密閉的容器中也不會(huì)出現(xiàn)滲漏，組織放于其中不會(huì)出現(xiàn)組織漂浮或貼壁等導(dǎo)致的固定不充分。甘油，化學(xué)名為丙三醇，有甜味，為無(wú)色透明粘性液體，是化工生產(chǎn)的產(chǎn)品，有良好的吸水性；本發(fā)明優(yōu)選的方案為在固定劑中加入甘油，由于甘油有保濕及強(qiáng)大的保水性，因而能夠提供持續(xù)的水分，使得組織不會(huì)干澀，固定更加充分。緩沖系統(tǒng)對(duì)維持生物的正常PH值和正常生理環(huán)境起到重要作用，多數(shù)細(xì)胞僅能在很窄的PH范圍內(nèi)進(jìn)行活動(dòng)，而且需要有緩沖體系來(lái)抵抗在代謝過(guò)程中出現(xiàn)的pH變化。本發(fā)明優(yōu)選的方案為在固定劑中加入緩沖液，以保持PH值在一定范圍內(nèi)的相對(duì)穩(wěn)定，使本發(fā)明的生物組織固定劑更適合做免疫組化檢查。所述緩沖液優(yōu)選為磷酸鹽緩沖液，由于磷酸緩沖液近中性，恰在生理性PH范圍緩沖力最強(qiáng)，且成本相對(duì)較低，成為生命科學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用最廣、最普及的無(wú)機(jī)鹽緩沖液，也是免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室必備的常用緩沖液之一。本發(fā)明的有益效果在于
1、本發(fā)明的生物組織固定劑呈凝膠狀，克服了液態(tài)固定劑的不足，方便攜帶及遠(yuǎn)程郵寄，在不密閉的容器中也不會(huì)出現(xiàn)滲漏，組織放于其中不會(huì)出現(xiàn)組織漂浮或貼壁等導(dǎo)致的固定不充分；
2、本發(fā)明用于穿刺活檢組織的固定，組織結(jié)構(gòu)保存完好，細(xì)胞形態(tài)清晰，固定效果好；
3、加入緩沖液，使固定劑呈中性，固定的組織抗原破壞較少，更有利于后期免疫組化染
色；
4、本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，成本低廉；
5、本發(fā)明的固定劑有效期長(zhǎng)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，有效期長(zhǎng)達(dá)一年以上。
具體實(shí)施例方式以下將對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。實(shí)施例1
首先取水10 g加熱至沸騰，加入Ig瓊脂不停攪拌，直至完全溶解，然后停止加熱，補(bǔ)充 83. 8 g水，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%的甲醛溶液2. 5g、NaH2P04 0. 2g、Na2HP04 2g及甘油0. 5g，攪拌均勻至完全冷卻，制得本實(shí)施例的生物組織固定劑。實(shí)施例2
首先取水20g加熱至沸騰，加入3g瓊脂不停攪拌，直至完全溶解，然后停止加熱，補(bǔ)充 51g水，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為35%的甲醛溶液20g、NaH2P04 0. 5g,Na2HPO4 1. 5g及甘油4g，攪拌均勻至完全冷卻，制得本實(shí)施例的生物組織固定劑。實(shí)施例3
首先取水26g加熱至沸騰，加入5g瓊脂不停攪拌，直至完全溶解，然后停止加熱，補(bǔ)充 54. 5g水，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為35%的甲醛溶液10g、NaH2P04 0. 5g、Na2HP04 Ig及甘油3g，攪拌均勻至完全冷卻，制得本實(shí)施例的生物組織固定劑。實(shí)施例4
首先取水30g加熱至沸騰，加入8g瓊脂不停攪拌，直至完全溶解，然后停止加熱，補(bǔ)充39g水，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%的甲醛溶液20g、NaH2P04 0. 3g,Na2HPO4 0. 7g及甘油2g，攪拌均勻至完全冷卻，制得本實(shí)施例的生物組織固定劑。實(shí)施例5
首先取水30g加熱至沸騰，加入IOg瓊脂不停攪拌，直至完全溶解，然后停止加熱，補(bǔ)充 28. 5 g水，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40%的甲醛溶液25g、NaH2PO4 lg、Na2HPO4 0. 5g及甘油5g，攪拌均勻至完全冷卻，制得本實(shí)施例的生物組織固定劑。最后說(shuō)明的是，以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過(guò)參照本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以在形式上和細(xì)節(jié)上對(duì)其作出各種各樣的改變，而不偏離所附權(quán)利要求書所限定的本發(fā)明的精神和范圍。
權(quán)利要求
1.一種生物組織固定劑，其特征在于該固定劑按重量百分比計(jì)含有1% 10%的甲醛和1% 10%的瓊脂。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物組織固定劑，其特征在于該固定劑按重量百分比計(jì)還含有0. 5% 5%的甘油。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物組織固定劑，其特征在于該固定劑還含有緩沖液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物組織固定劑，其特征在于所述緩沖液為NaH2P04、 Na2HPO4和水配制成的磷酸鹽緩沖液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的生物組織固定劑，其特征在于該固定劑的組分及其重量百NaH2PO4 0. 2% 1% ； Na2HPO4 0. 5% 2% ；余量為水。
6.權(quán)利要求1至5任意一項(xiàng)所述的生物組織固定劑的制備方法，其特征在于首先取水總量的10% 40%加熱至沸騰，加入瓊脂不停攪拌，直至完全溶解，然后停止加熱，補(bǔ)充剩余水，加入其余組分，攪拌均勻至完全冷卻。分比為甲醛瓊脂甘油1% 10% ； 1% 10% ； 0. 5% 5% ；
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種生物組織固定劑及其制備方法，其組分及其重量百分比為甲醛1%～10%，瓊脂1%～10%，甘油0.5%～5%，NaH2PO40.2%～1%，Na2HPO40.5%～2%，余量為水；本發(fā)明的生物組織固定劑呈凝膠狀，克服了液態(tài)固定劑的不足，方便攜帶及遠(yuǎn)程郵寄，在不密閉的容器中也不會(huì)出現(xiàn)滲漏，組織放于其中不會(huì)出現(xiàn)組織漂浮或貼壁等導(dǎo)致的固定不充分，用于穿刺活檢組織的固定，組織結(jié)構(gòu)保存完好,細(xì)胞形態(tài)清晰，固定效果好；本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，成本低廉，有效期長(zhǎng)達(dá)一年以上。
文檔編號(hào)A01N1/02GK102246742SQ20111013651
公開(kāi)日2011年11月23日 申請(qǐng)日期2011年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月25日
發(fā)明者何婭妮, 詹俊 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)第三附屬醫(yī)院