專利名稱：圓斑星鰈雌魚與條斑星鰈雄魚雜交育種育苗方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖海水魚類苗種繁育，具體的說是一種選用圓斑星鰈雌魚X 條斑星鰈雄魚人工雜交培育養(yǎng)殖新品種和繁育苗種的方法。
背景技術(shù)：
圓斑星鰈(Verasper variegates Τ. &S.)主要分布于我國黃海、渤海、東海以及 日本，朝鮮等海域，產(chǎn)量不多，為一種冷溫型大型底棲魚類，多生活在近岸水域或海灣內(nèi)，不 做遠(yuǎn)距離洄游，是漁業(yè)資源增殖和人工養(yǎng)殖的優(yōu)良品種。條斑星鰈(Verasper moseri)為 冷水性底棲大型鰈類，主要分布于日本茨城縣以北的太平洋沿岸和若狹灣以北的日本海沿 岸，我國黃海和渤海以前也有分布，現(xiàn)在已多年未見漁獲。星鰈外觀漂亮、形體較大，肉質(zhì)細(xì) 嫩鮮美，鰭邊膠質(zhì)厚而有彈性，富含多種維生素、微量元素，營養(yǎng)豐富，易于烹飪，深受消費(fèi) 者喜愛，市場開發(fā)潛力巨大。目前，我國星鰈的自然資源極其稀少，已形不成漁獲，因此，星 鰈人工繁育和養(yǎng)殖技術(shù)研究已引起廣大漁業(yè)工作者的普遍重視。在國家“863”計(jì)劃項(xiàng)目資 助下，黃海水產(chǎn)研究所已先后于2007年至2010年在山東省萊州明波水產(chǎn)有限公司、山東 省海陽市黃海水產(chǎn)有限公司和青島市忠海水產(chǎn)有限公司實(shí)驗(yàn)完成了圓斑星鰈及條斑星鰈 人工繁育技術(shù)的突破，規(guī)模化繁育苗種達(dá)到百萬尾量級。在海水鲆鰈魚類雜交方面，目前國 內(nèi)僅報(bào)道了褐牙鲆(早)X石鰈( )雜交、大菱鲆(早)X褐牙鲆( )雜交、褐牙鲆 (早)X犬齒牙鲆( )雜交、圓斑星鰈(早)X石鰈($ )雜交、漠斑牙鲆(早)X白點(diǎn) 牙鲆( )雜交等少數(shù)幾種鲆鰈類的雜交。有關(guān)圓斑星鰈雌魚X條斑星鰈雄魚雜交尚未 見有報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明擬解決的技術(shù)問題是通過調(diào)控養(yǎng)殖環(huán)境水溫和光照，模擬親魚性腺在自 然環(huán)境中的發(fā)育規(guī)律，人為刺激控制魚類中樞神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)，促進(jìn)圓斑星鰈雌魚 和條斑星鰈雄魚性腺同步發(fā)育；通過人工雜交育種的方法，使圓斑星鰈雌魚X條斑星鰈雄 魚雜交，培育新的優(yōu)質(zhì)苗種；同時(shí)探索出新苗種繁育的技術(shù)工藝。本發(fā)明按以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)主要內(nèi)容包括，一、親本選擇；二、親魚培育和生殖 調(diào)控；三、人工受精和孵化；四、仔稚魚和幼魚的培育。一、親本的選擇母本選用圓斑星鰈雌魚，父本選用條斑星鰈雄魚。二、親魚培育和生殖調(diào)控包括親魚的優(yōu)選；親魚的飼料、飼喂及營養(yǎng)強(qiáng)化；水溫 和光照綜合生殖調(diào)控；培育條件及日常管理。1、親魚優(yōu)選選擇形態(tài)、體色正常、個(gè)體大、健康無傷3齡以上的圓斑星鰈雌魚親魚，全長 達(dá)400-550mm，體重1300-3000g ；條斑星鰈雄魚達(dá)2齡以上，全長四0-450讓，體重達(dá) 600-1500g。2、親魚的飼料、飼喂及營養(yǎng)強(qiáng)化培育
親魚的飼料餌料以小黃花魚、小蝦、牡蠣肉等為主。親魚的飼喂日投喂2次，日投喂量為魚體體重的1-3%。營養(yǎng)強(qiáng)化培育自控溫控光開始，在每公斤餌料中添加1_3%。維生素C、0. 2-0. 5%o 維生素E、l%。復(fù)合維生素，1.5% DHAU.5%的卵磷脂。3、水溫和光照綜合生殖調(diào)控水溫調(diào)控產(chǎn)卵期到來前3個(gè)月，一般在11月中上旬，自然水溫下降到16-17°C左 右時(shí)，將優(yōu)選的親魚分批放入30m3親魚培育池內(nèi)，雌雄數(shù)量比例為早 1 1.5; 飼養(yǎng)密度3kg/m3。當(dāng)自然水溫16°C時(shí)，此時(shí)開始控溫，控溫方法初始水溫16°C，每5d水溫 緩慢降低1°C，降至6°C時(shí)，此后維持6°C水溫IOd ；然后水溫從6°C開始回升，每5d水溫緩 慢升高1°C，直至升高至9-10°C時(shí)，此后水溫維持不變，定期觀察親魚性腺發(fā)育情況；水溫 靠地下井水和自然海水混合調(diào)節(jié)控制，或用鍋爐加溫調(diào)配水溫。光照調(diào)控自親魚放入培育池始，親魚培育池用黑色遮光簾(留有窗口，人工控光 前透射自然光用)遮光?？毓夥椒ㄋ疁?6°C時(shí)開始控光，使用普通白熾燈提供照明，調(diào)節(jié) 水面光照強(qiáng)度150-2801UX，光照節(jié)律時(shí)間變化從他延長至16h。初始光照時(shí)間為他；當(dāng)水 溫降至6°C時(shí)，開始延長光照時(shí)間，每5d增加光照時(shí)間lh(12min. /d)，直至光照時(shí)間達(dá)到 16h，此后光照時(shí)間維持不變。定時(shí)器精確控制每天的光照時(shí)間。4、培育條件和日常管理親魚培育期間，連續(xù)充氣、流水培育，換水率500%，定時(shí)清池?fù)Q水；水質(zhì)條件 DO 彡 6. Omg/L, pH 7. 6-8. 5，鹽度 29-33。日常管理投喂過程中及時(shí)清除殘餌、排污。每日觀察親魚情況；做好記錄。三、人工受精和孵化包括1、擠卵、采精；2、人工受精；3、洗卵；4、受精卵孵化。經(jīng)過80d控溫、控光和營養(yǎng)強(qiáng)化培育綜合生殖調(diào)控后，圓斑星鰈雌魚親魚性腺發(fā) 育至四期至五期，外觀可觀察到雌魚腹部膨脹飽滿。同時(shí)，條斑星鰈雄魚性腺也基本發(fā)育成 熟。每天定時(shí)檢查親魚，人工擠壓圓斑星鰈親魚雌魚腹部，一般能夠獲得成熟的卵子，此時(shí) 便可從條斑星鰈雄魚體內(nèi)采集精液，進(jìn)行人工干法受精，人工受精后可獲得優(yōu)質(zhì)受精卵。1、擠卵、采精先撈出圓斑星鰈親魚雌魚，用于輕輕擠壓腹部，擠卵流入洗臉盆或 大燒杯，等待受精；撈出條斑星鰈雄魚邊擠壓邊用吸管采集精液滴入另一空燒杯；整個(gè)擠 卵過程要求在15min.內(nèi)完成、采精過程要求在IOmin內(nèi)完成。2、人工受精采用干法受精。向盛精液中的燒杯中加50ml海水，攪動(dòng)激活精子， 把被激活精于迅速倒入盛卵容器，快速攪動(dòng)5min.，然后，向盛卵容器加入2000ml水溫為 (10士0. 的清新海水，用玻璃棒攪動(dòng)lmin.，整個(gè)受精過程要求在IOmin.內(nèi)完成。3、洗卵受精完成15min.后，把受精卵倒入篩絹縫制專用洗卵的手抄網(wǎng)，用清新 海水(10士0. 50C )洗卵5遍，把洗好的受精卵倒入預(yù)盛有500ml鹽度35海水的2000ml量 筒中，然后加鹽度35的海水至2000ml刻度，利用沉降法通過量筒分離受精卵與未受精卵， 浮卵基本為受精卵，估算受精率。4、受精卵孵化圓斑星鰈雌魚X條斑星鰈雄魚受精卵在鹽度31-33海水中為懸浮 性或半沉性、無油球卵，透明、圓球形、卵黃均勻分布，卵徑(1. 75 士 0. 08) mm (η = 30)，350粒 /ml。孵化網(wǎng)箱為上部圓柱形，下部漏手形，底部充氣，布卵密變?yōu)?5萬粒/m3水體；在水溫 (10 士0. 5) °C，鹽度 31-32，DO ≥ 6mg/L，pH7. 6-8. 5，光照 300_5001ux 條件下孵化，受精卵經(jīng)160h脫膜孵出。估算孵化率孵化率(％) = [ (N-n) /N] X 100%η-孵化完畢后剩余的沉卵毫升數(shù)；N-孵化時(shí)放入的卵總毫升數(shù)。修正孵化率孵化期間，每天取100粒卵鏡檢，通過觀察胚胎發(fā)育比例情況，結(jié)合 (N-n)/N修正孵化率。四、仔稚魚和幼魚的培育初孵仔魚布池密度為1萬尾/m3，前3d靜水培育，培育池初始水深500-600mm，從 第4d開始每天加水100mm，至800-900mm，第6日齡時(shí)開始換水，換水率由20%逐漸增加到 100%；1-19日齡微充氣；第20日齡時(shí)改為長流水，并加裝環(huán)流板，在也中形成環(huán)流，充氣量 增大。仔魚孵化后第7天開始投喂L型褶皺臂尾輪蟲(Brachionus plicatilis)，上下午各 一次，投喂密度IOind./ml，同時(shí)投喂小球藻(Chlorella sp.)密度1. 5X 106cells/ml，每 隔2d清底一次；12日齡開始增加投喂鹵蟲無節(jié)幼體(Artemia salina)，鹵蟲密度0. 5ind. / ml，輪蟲密度保持8ind. /ml,日投喂2次；19日齡停止投喂輪蟲和小球藻，增加鹵蟲投喂量， 密度lind./ml ；31日齡誘導(dǎo)投喂人工配合飼料；46日齡停止投喂鹵蟲。餌料系列L型褶 皺臂尾輪蟲+小球藻一鹵蟲無節(jié)幼體一人工配合飼料，活餌料每次投喂前1 進(jìn)行營養(yǎng)強(qiáng) 化。營養(yǎng)強(qiáng)化強(qiáng)化劑(升索牌，山東省海洋水產(chǎn)研究所生產(chǎn))主要成分為DHA、EPA、 卵磷脂及復(fù)合維生素，用量為輪蟲10-20g/億ind.，鹵蟲SO-IOOg/億ind.，強(qiáng)化時(shí)間12h。 仔稚魚期前期培育使用3m3的圓形玻璃鋼水槽小水體培育(培育時(shí)間35d)，直至仔魚左眼 開始向右側(cè)翻轉(zhuǎn)，進(jìn)入變態(tài)期、個(gè)別稚魚開始伏底時(shí)，分池、分苗并移入較大的水池(30m3)內(nèi)， 進(jìn)行稚魚后期和幼魚前期大水體二級培育(1000-1200尾/m2)，然后轉(zhuǎn)入幼魚期正常培育。整個(gè)培育過程中，育苗用水鹽度31，DO 彡 6mg/L，ρΗ7· 6-8. 5，[ΝΗ4+_Ν] ( 0. 3mg/ L，光照300-5001ux ；初孵仔魚1-3日齡培育水溫為(10 士 0. 5)°C，第4日齡逐漸升 高(0.5°C/2d)至15士0.5°C，此后維持不變。培育期間，每天隨機(jī)取樣30尾，解剖鏡 (NIK0N-MSZ800)鏡檢觀察記錄仔稚魚形態(tài)特征，測量卵黃囊長短徑、仔魚全長等數(shù)量性狀， 記錄仔魚攝食率和存活率、仔稚幼魚發(fā)育特征及生物學(xué)特性。本發(fā)明與已有技術(shù)對比具有的有益效果本發(fā)明利用了條斑星鰈雄魚比圓斑星鰈雄魚個(gè)體大2-3倍的生長優(yōu)勢，且親緣關(guān) 系較近的特點(diǎn)，進(jìn)行了雜交培育新品種的探索。本發(fā)明根據(jù)圓斑星鰈雌魚親魚和條斑星鰈雄魚親魚的性腺發(fā)育規(guī)律，經(jīng)前期的強(qiáng) 化培育，采用溫度+光照+營養(yǎng)強(qiáng)化的綜合生殖調(diào)控方法，促使誘導(dǎo)圓斑星鰈雌魚和條斑星 鰈雄魚親魚最終性腺同步發(fā)育成熟。本發(fā)明使圓斑星鰈雌魚親魚成熟率高達(dá)70%，雌雄親魚成熟基本同步，通過干法 人工受精，受精率平均達(dá)到50%，孵化率平均達(dá)到50%以上。使用本發(fā)明方法的條件培育，從仔稚魚培育到平均30mm幼魚的成活率為20%，可 實(shí)現(xiàn)規(guī)?；绶N繁育。


圖1 :70日齡圓斑星鰈雌魚X條斑星鰈雄魚雜交Fl
具體實(shí)施例方式圓斑星鰈的雄魚個(gè)體較小，雌雄差異較大，而條斑星鰈雄魚個(gè)體較大，兩者同屬于 一屬，親緣關(guān)系較近，雜交后代有可能遺傳各自的優(yōu)良基因、出現(xiàn)優(yōu)勢互補(bǔ)。在國家“863” 計(jì)劃(No. 2006AA10A414)和(No. 2010AA10A402)項(xiàng)目資助下，2009-2010年我們對圓斑星鰈 雌魚X條斑星鰈雄魚雜交進(jìn)行了試驗(yàn)研究，探索培育新的優(yōu)質(zhì)養(yǎng)殖品種。兩者盡管同屬一 屬，但亦各自有各自的生物學(xué)特性。如何使二者發(fā)育同步，是首先遇到的問題；人工受精、受 精卵孵化、仔稚魚培育、規(guī)模化苗種繁育等也是新的問題。下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)敘述，本研究于2009-2010年在山東海陽 基地進(jìn)行，具體實(shí)施過程如下一、確定親本母本選用圓斑星鰈雌魚，父本選用條斑星鰈雄魚。二、親魚培育包捂親魚的優(yōu)選、餌料及營養(yǎng)強(qiáng)化、水溫和光照綜合生殖調(diào)控及其 它日常管理等。1、親魚的優(yōu)選實(shí)驗(yàn)選用圓斑星鰈雌魚3齡以上親魚30尾，條斑星鰈雄魚2齡以上親魚50尾 (30早50 $ )，圓斑星鰈雌魚全長達(dá)400-550mm、平均470mm，體重1300-3000g，平均體重 2105g ；條斑星鰈雄魚全長^0_450mm、平均362mm，體重600_1500g、平均950g。親魚體形、 體色正常，健康無損傷。親魚放入2個(gè)方形抹角培育池(5. 5X5. 5 = 30. 25m2，水深1. Om)
進(jìn)行培育。2、親魚的飼料、飼喂及營養(yǎng)強(qiáng)化培育親魚的飼料餌料以小黃花魚、小蝦、牡蠣肉等為主。親魚的飼喂日投喂2次，日投喂量為魚體體重的1. 5%。營養(yǎng)強(qiáng)化自控溫控光開始，在每公斤餌料中添加1. 5%。維生素C、0. 3%。維生素Ε、 1%。復(fù)合維生素，1. 5% DHAU. 5%卵磷脂。3、水溫和光照調(diào)控水溫調(diào)控當(dāng)自然水溫16°C時(shí)，此時(shí)開始控溫，控溫方法初始水溫16°C，每5d水 溫緩慢降低rc，降至6°C時(shí)，此后維持6°C水溫IOd;然后水溫從6°C開始回升，每5d水溫 緩慢升高1°C，直至升高至9-10°C時(shí)，此后水溫維持不變，定期觀察親魚性腺發(fā)育情況；水 溫靠地下井水和自然海水混合調(diào)節(jié)控制。光照調(diào)控自親魚放入培育池始，親魚培育池就用黑色遮光簾(留有窗口，人工控 光前透射自然光用)遮光。控光方法水溫16°C時(shí)開始控光，使用普通白熾燈提供照明，調(diào) 節(jié)水面光照強(qiáng)度150-2801UX，光照節(jié)律時(shí)間變化從他延長至16h。初始光照時(shí)間為他；當(dāng) 水溫降至6°C時(shí)，開始延長光照時(shí)間，每5d增加光照時(shí)間lhaaiiin. /d)，直至光照時(shí)間達(dá)到 16h，此后光照時(shí)間維持不變。定時(shí)器精確控制每天的光照時(shí)間。4、培育條件和日常管理親魚培育期間，連續(xù)充氣、流水培育，換水率500%，定時(shí)清池?fù)Q水；培育用水為砂 濾自然海水和井水混合調(diào)配，水質(zhì)條件D0彡6. Omg/L, pH 8. 2，鹽度31。日常管理投喂過程中及時(shí)清除殘餌、排污。每日觀察親魚情況；做好記錄。三、人工受精和孵化經(jīng)過80d控溫、控光和營養(yǎng)強(qiáng)化培育綜合生殖調(diào)控后，圓斑星鰈雌魚親魚性腺發(fā)
7育至四期至五期，外觀可觀察到雌魚腹部膨脹飽滿。同時(shí)，條斑星鰈雄魚也基本性腺成熟。 每天定時(shí)檢查親魚，人工擠壓圓斑星鰈親魚雌魚腹部，一般能夠獲得成熟的卵子，此時(shí)便可 從條斑星鰈雄魚體內(nèi)采集精液，進(jìn)行人工干法受精，人工受精后可獲得優(yōu)質(zhì)受精卵。1、擠卵、采精先撈出圓斑星鰈親魚雌魚，用手輕輕擠壓腹部，擠卵流入洗臉盆或 大燒杯，等待受精；撈出條斑星鰈雄魚邊擠壓邊用吸管采集精液滴入另一空燒杯；整個(gè)擠 卵過程在15min.內(nèi)完成、采精過程在IOmin內(nèi)完成。2、人工受精采用干法受精。向盛精液中的燒杯中加入50ml海水，攪動(dòng)激活精子， 把被激活精子迅速倒入盛卵容器，快速攪動(dòng)5min.，然后，向盛卵容器加入2000ml水溫為 10 士0. 5°C的清新海水，用玻璃棒攪動(dòng)lmin.，整個(gè)受精過程在IOmin.內(nèi)完成。3、洗卵受精完成15min.后，把受精卵倒入篩絹縫制的專用洗卵的手抄網(wǎng)，用清 新海水10士0. 5°C洗卵5遍，把洗好的受精卵倒入預(yù)盛有500ml鹽度35海水(預(yù)先調(diào)配好) 的2000ml量筒中，然后加海水至2000ml刻度，用量筒分離受精卵與未受精卵，浮卵基本為 受精卵，估算受精率。4、受精卵孵化圓斑星鰈雌魚X條斑星鰈雄魚受精卵在鹽度31海水中為懸浮性、 部分呈沉性、無油球卵，透明、圓球形、卵黃均勻分布，卵徑1.75 士 0. 08mm (η = 30)，350粒/ ml。孵化網(wǎng)箱為上部圓柱形，下部漏斗形，底部充氣，布卵密度為35萬粒/m3水體；在水溫 10士0. 5°C，鹽度31，DO彡6mg/L，pH8. 2，光照300-5001ux條件下孵化，受精卵經(jīng)160h脫膜孵出。估算孵化率孵化率(％) = [ (N-n) /N] X 100%η-孵化完畢后剩余的沉卵毫升數(shù)；N-孵化時(shí)放入的卵總毫升數(shù)。修正孵化率孵化期間，每天取100粒卵鏡檢，通過觀察胚胎發(fā)育比例情況，結(jié)合 (N-n)/N修正孵化率。四、仔稚魚和幼魚培育初孵仔魚全長4.82士0. 12mm，布池密度為1萬尾/m3，前3d靜水培育，培育池 初始水深500mm，從第4d開始每天加水100mm，至900mm，第6日齡時(shí)開始換水，換水率 由20%逐漸增加到100% ；1-19日齡微充氣；第20日齡時(shí)改為長流水，并加裝環(huán)流板，在 池中形成環(huán)流，充氣連加大。仔魚孵化后第7d開始投喂L型褶皺臂尾輪蟲(Brachionus plicatilis)，上下午各一次，投喂密度IOind./ml，同時(shí)投喂小球藻(Chlorella sp.) 密度1. 5X106cells/ml,每隔2d清底一次；12日齡開始增加投喂鹵蟲無節(jié)幼體 (Artemiasalina)，鹵蟲密度0. 5ind. /ml，輪蟲密度保持8ind. /ml,日投喂2次；19日齡停 止投喂輪蟲和小球藻，增加鹵蟲投喂量，密度lind. /ml ；31日齡誘導(dǎo)投喂人工配合飼料；46 日齡停止投喂鹵蟲；50日齡稚魚完成變態(tài)，左眼完全轉(zhuǎn)至右側(cè)，營底棲活動(dòng)；70日齡(全長
3 士 3. 23) mm (η = 30))進(jìn)入幼魚期，幼魚體被鱗片逐漸形成，有眼側(cè)出現(xiàn)近圓形鱗片， 基部鱗棘約9枚，無眼側(cè)為長扇形鱗片，各鰭條均發(fā)育完善，基部鱗棘1個(gè)，體態(tài)和生活習(xí)性 與成魚無異，子一代Fl外形和生活習(xí)性酷似圓斑星鰈，見附圖1。餌料系列L型褶皺臂尾輪蟲+小球藻一鹵蟲無節(jié)幼體一人工配合飼料，活餌料投 喂前1 進(jìn)行營養(yǎng)強(qiáng)化。營養(yǎng)強(qiáng)化強(qiáng)化劑(升索牌，山東省海洋水產(chǎn)研究所生產(chǎn))主要成 分為DHA、EPA、卵磷脂及復(fù)合維生素，用量為輪蟲10-20g/億ind.，鹵蟲80_100g/億ind.， 強(qiáng)化時(shí)間12h。仔稚魚期前期培育使用3m3的圓形玻璃鋼水槽小水體培育(培育時(shí)間35d)，直至仔魚左眼開始向右側(cè)翻轉(zhuǎn)，進(jìn)入變態(tài)期、個(gè)別稚魚開始伏底時(shí)，分池、分苗并移入較大 的水池(30m3)內(nèi)，進(jìn)行稚魚后期和幼魚前期大水體二級培育(1000-1200尾/m2)，然后轉(zhuǎn)入 幼魚期正常培育。整個(gè)培育過程中，育苗用水鹽度^_33，D0彡6mg/L，pH7. 6-8. 5，[NH4+_N]彡0. 3mg/ L，光照300-5001ux ；初孵仔魚1-3日齡培育水溫為(10士0.5) °C，第4日齡逐漸升 高(0.5°C/2d)至15士0.5°C，此后維持不變。培育期間，每天隨機(jī)取樣30尾，解剖鏡 (NIK0N-MSZ800)鏡檢觀察記錄仔稚魚形態(tài)特征，測量卵黃囊長短徑、仔魚全長等數(shù)量性狀， 記錄仔魚攝食率和存活率、仔稚幼魚發(fā)育特征及生物學(xué)特性。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果圓斑星鰈雌魚親魚成熟率高達(dá)70%，雌雄親魚成熟基本同步，可采卵期共持續(xù) 60d左右，共采卵15批次，共獲得優(yōu)質(zhì)受精卵11800ml，受精率平均為50% ；獲得初孵仔魚 100萬尾，孵化率平均為52%。經(jīng)過80d培育，從初孵仔魚(4. 82 士 0. 12) mm培育到30mm左 右，幼魚的成活率為20% ；共培育出30mm左右的幼魚20萬尾，實(shí)現(xiàn)了規(guī)?；绶N緊育。
權(quán)利要求
1. 一種圓斑星鰈雌魚與條斑星鰈雄魚雜交育種育苗方法，其特征在于它的方法包括以 下步驟一)、親本選擇；二)、親魚培育和生殖調(diào)控；三)、人工受精和孵化；四)仔稚魚和幼 魚的培育；一)、親本選擇母本選用3齡以上圓斑星鰈雌魚，父本選用2齡以上條斑星鰈雄魚；二)、親魚培育和生殖調(diào)控；包括親魚的優(yōu)選；親魚的飼料、飼喂及營養(yǎng)強(qiáng)化；水溫和光照綜臺(tái)生殖調(diào)控；培育條 件及日常管理；1)、親魚優(yōu)選選擇形態(tài)、體色正常、個(gè)體大、健康無傷3齡以上的圓斑星鰈雌魚親魚，全長 達(dá)400-550mm，體重1300-3000g ；條斑星鰈雄魚達(dá)2齡以上，全長四0-450讓，體重達(dá) 600-1500g ；將優(yōu)選的親魚分批放入30m3親魚培育池內(nèi)，雌雄數(shù)量比例為早$ = 1 1 1. 5 ；飼 養(yǎng)密度:3kg/m3 ；2)、親魚的飼料、飼喂及營養(yǎng)強(qiáng)化培育親魚的飼料餌料以小黃花魚、小蝦、牡蠣肉為主；親魚的飼喂日投喂2次，日投喂量為魚體體重的1-3% ；營養(yǎng)強(qiáng)化培育自控溫控光開始，在每公斤餌料中添加1_3%。維生素C、0. 2-0. 5%。維生 素E、1%。復(fù)合維生素，1. 5%DHAU.5%的卵磷脂；3)、水溫和光照綜合生殖調(diào)控水溫調(diào)控當(dāng)自然水溫降至16°C時(shí)，此時(shí)開始控溫；控溫方式每5d水溫緩慢降低 1°C，降至6°C時(shí)，此后維持6°C水溫IOd ；然后水溫從6°C開始回升，每5d緩慢升高1°C，直 至升高到9-10°C時(shí)，此后水溫維持不變，定期觀察親魚性腺發(fā)育情況；光照調(diào)控自親魚放入培育池，水溫16°C始，調(diào)節(jié)水面光照強(qiáng)度150-2801UX，初始光照 時(shí)間為他；當(dāng)水溫降至6 °C時(shí)，開始延長光照時(shí)間，每5d增加光照時(shí)間Ih，直至光照時(shí)間達(dá) 到16h，此后光照時(shí)間長度維持不變；定時(shí)器精確管理每天的光照時(shí)間；4)、培育條件和日常管理日常管理親魚培育期間，連續(xù)充氣、流水培育，換水率500%，定時(shí)清池?fù)Q水；水質(zhì)條件=DO彡6. Omg/L, pH 7. 6-8. 5，鹽度29-33 ；及時(shí)清除殘餌、排污；三)、人工受精和孵化包括1、擠卵、采精；2、人工受精；3、洗卵；4、受精卵孵化；經(jīng)過80d控溫、控光和營養(yǎng)強(qiáng)化培育，圓斑星鰈雌魚親魚性腺發(fā)育至四期至五期，外觀可觀察到雌魚腹部膨脹飽滿，同時(shí)，條斑星鰈雄魚性腺也基本成熟；1)、擠卵、采精先撈出圓斑星鰈親魚，用手輕輕擠壓腹部，擠卵流入洗臉盆或大燒杯等 待受精；然后撈出條斑星鰈雄魚邊擠壓邊用吸管采集精液滴入另一空燒杯；整個(gè)擠卵過程 要求在15min.內(nèi)完成、采精過程要求在lOmin.內(nèi)完成；2)、人工受精采用干法受精，向盛精液的燒杯中加50ml海水，攪動(dòng)激活精子，把 被激活精子迅速倒入盛卵容器，快速攪動(dòng)5min.，然后，向盛卵容器加入2000ml水溫為 10 士 0. 5°C的清新海水，用玻璃棒攪動(dòng)lmin.，整個(gè)受精過程要求在IOmin.內(nèi)完成；3)、洗卵受精完成15min.后，把受精卵倒入篩絹縫制專用洗卵的手抄網(wǎng)，用 10士0. 5°C的清新海水洗卵5遍，把洗好的受精卵倒入預(yù)盛有500ml鹽度為35海水的2000ml量筒中，加鹽度35的海水至2000ml，分離受精卵與未受精卵，計(jì)算受精率；4)、受精卵孵化孵化網(wǎng)箱為上部圓柱形，下部漏斗形，底部充氣；布卵密度為35萬粒 /m3 水體，在水溫 10士0. 5°C，鹽度 31-33，DO ≥ 6mg/L，ρΗ7· 8-8. 5，光照 300_5001ux 孵化條 件下，受精卵經(jīng)160h孵化，仔魚脫膜孵出；四)、仔稚魚和幼魚的培育初孵仔魚布池密度為1萬尾/m3水體，前3天靜水培育，培育池初始水深500-600mm， 從第4d開始每天加水100mm，至800-900mm，第6日齡時(shí)開始換水，換水率由20%逐漸增加 到100% ；1-19日齡微充氣；第20日齡時(shí)改為長流水，并加裝環(huán)流板，在池中形成環(huán)流；充 氣量增大；仔魚孵出后第7d開始投喂L型褶皺臂尾輪蟲，上下午各一次，投喂密度IOind. / ml，同時(shí)投喂小球藻，密度1.5X106CellS/ml，每隔2天清底一次；12日齡開始增加投喂鹵 蟲無節(jié)幼體，鹵蟲密度0. 5ind./ml，輪蟲保持8ind./ml，日投喂2次；19日齡停止投喂輪 蟲和小球藻，鹵蟲投喂增加，密度lind. /ml ；31日齡誘導(dǎo)投喂人工配合飼料；46日齡停止 投喂鹵蟲；仔魚期前期培育使用3m3的圓形玻璃鋼水槽小水體培育，仔魚左眼開始向右側(cè) 翻轉(zhuǎn)，進(jìn)入變態(tài)期、個(gè)別稚魚開始伏底時(shí)，分池、分苗移入30m3水池內(nèi)進(jìn)行大水體二級培育， 1000-1200尾/m2，直至稚魚完成變態(tài)、伏底，然后轉(zhuǎn)入正常培育。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的圓斑星鰈雌魚與條斑星鰈雄魚雜交育種育苗方法，其特征在 于所述投喂的L型褶皺臂尾輪蟲和鹵蟲無節(jié)幼體在投喂前12h進(jìn)行營養(yǎng)強(qiáng)化。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的圓斑星鰈雌魚與條斑星鰈雄魚雜交育種育苗方法，其特征在 于所述整個(gè)培育過程中，育苗用水鹽度四-33，DO≥6mg/L, pH7. 5-8. 5，[NH4+-N]≤0. 3mg/ L，光照 300-5001ux。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的圓斑星鰈雌魚與條斑星鰈雄魚雜交育種育苗方法，期特征在 于所述初孵仔魚1-3日齡培育水溫為10 士 0.5°C，3d后，從第4日齡開始，每2d升高0.5°C， 最終至15 士 0. 5 °C.
全文摘要
一種圓斑星鰈雌魚與條斑星鰈雄魚雜交育種育苗方法，包括親本選擇，親魚培育和生殖調(diào)控，人工受精和孵化，仔稚魚和幼魚培育；母本選用3+齡圓斑星鰈，父本為2+齡條斑星鰈；通過控溫、控光和營養(yǎng)強(qiáng)化，促進(jìn)雌雄親魚性成熟同步。人工受精，受精率達(dá)到50％；孵化水溫(10±0.5)℃，受精卵160h后孵出仔魚，孵化率50％以上；飼料系列為L型輪蟲+小球藻→鹵蟲無節(jié)幼體→配合飼料。仔魚前期小水體(1-35日齡，水體3m3)培育，水溫(10±0.5)℃；3d后，每2d升高0.5℃，至(15±0.5)℃后則維持不變；后期培育水體30m3。經(jīng)80d培育，從仔魚培育到平均30mm幼魚的成活率為20％。本發(fā)明可培育新品種和實(shí)現(xiàn)規(guī)?；绶N繁育。
文檔編號(hào)A01K61/00GK102144596SQ201110118179
公開日2011年8月10日 申請日期2011年5月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月9日
發(fā)明者劉壽堂, 孫中之, 徐永江, 柳學(xué)周, 王妍妍, 王榮之 申請人:中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所