專利名稱：一種人工誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育成熟的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，是一種鰻鱺的人工繁殖技術(shù)，具體涉及激素誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育成熟的方法。
背景技術(shù)：
花鰻鱺(Anguilla marmorata)俗名鱸鰻、花鰻、雪鰻、鱔王、溪鰻等，在分類學(xué)中屬于硬骨魚綱(Osteichthyes)、鰻鱺目(Anguilliformes)、鰻鱺科(Anguillidae)、鰻鱺屬 (Anguilla)，是鰻鱺屬魚類中分布最廣的種類，分布范圍東至太平洋的中部諸島，西至印度洋的馬達(dá)加斯加島，南至澳大利亞南部，北至朝鮮、日本南部。在我國(guó)主要見于海南、廣東、 福建、臺(tái)灣等省的河流及海域中?；狑~是一種降海生殖洄游性魚類，在淡水河流湖泊中生長(zhǎng)，性成熟后洄游到離海岸數(shù)千里之外的產(chǎn)卵場(chǎng)進(jìn)行產(chǎn)卵。自然狀態(tài)下，鰻鱺在降海生殖洄游過(guò)程中完成性腺的發(fā)育，到達(dá)產(chǎn)卵場(chǎng)時(shí)性腺成熟。近年來(lái)，由于過(guò)度捕撈、環(huán)境污染、攔河建壩等人類活動(dòng)加劇，花鰻鱺的自然資源明顯衰退，我國(guó)已將其列為二級(jí)保護(hù)動(dòng)物?；狑~不但肉質(zhì)鮮美，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，而且有藥用價(jià)值，素有“淡水人參”之稱，系優(yōu)質(zhì)食用魚類。目前，海南等地積極發(fā)展花鰻鱺人工養(yǎng)殖業(yè)， 市場(chǎng)前景廣闊，產(chǎn)業(yè)發(fā)展勢(shì)頭良好，已成為淡水養(yǎng)殖的名貴新品種。然而，鰻鱺屬魚類的人工繁殖技術(shù)至今仍未解決。養(yǎng)殖鰻苗全部依賴于捕撈野生鰻苗，造成自然資源的急劇衰退。鰻鱺的人工繁殖技術(shù)屬于世界性的難題，相關(guān)研究始于上個(gè)世紀(jì)40年代，由于其生活史的特殊性，國(guó)內(nèi)外學(xué)者做了大量的研究工作，現(xiàn)有的人工誘導(dǎo)鰻鱺方法主要依賴多次注射外源激素，并在日本鰻鱺上已獲得階段性成功。然而，花鰻鱺人工催產(chǎn)催熟的研究在國(guó)內(nèi)外是一片空白，本方法通過(guò)人工誘導(dǎo)花鰻鱺催產(chǎn)催熟，將為花鰻鱺的人工繁殖打下基石出。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種人工誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育成熟的方法，解決花鰻鱺在人工飼養(yǎng)條件下，其性腺無(wú)法自然發(fā)育成熟的問(wèn)題。本發(fā)明所提供的誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育成熟的方法如下(1)親魚的馴養(yǎng)親魚選用3齡以上的健康人工塘養(yǎng)花鰻鱺；其中挑選的雄性花鰻鱺規(guī)格要求體重0. 425-0. 875kg,體長(zhǎng)55_66cm ；挑選的雌性花鰻鱺規(guī)格要求體重 1. 305-2. 89kg，體長(zhǎng)73-99cm。馴養(yǎng)期間水溫控制在22_26°C ；全天M小時(shí)避光；活餌料和鰻魚粉混合投喂，每日3次；親魚養(yǎng)殖密度為1尾/缸(規(guī)格為IOOcmX60cmX50cm的玻璃缸)；馴養(yǎng)時(shí)間為1個(gè)月。(2)馴養(yǎng)結(jié)束后，停止投喂，雌性花鰻鱺需要過(guò)度至半海水后開始催熟，而雄性花鰻鱺在淡水中進(jìn)行催熟。(3)誘導(dǎo)性腺發(fā)育成熟雄性花鰻鱺采用肌肉注射HCG進(jìn)行催熟；雌性花鰻鱺采用肌肉注射LHRH-A2和鯉魚腦垂體勻漿進(jìn)行催熟。
其特征在于(1)親魚選用3齡以上健康塘養(yǎng)花鰻鱺；馴養(yǎng)期間水溫控制在22_26°C ；全天M小時(shí)避光；活餌料和鰻魚粉混合投喂，每日3次；親魚養(yǎng)殖密度為1尾/缸；馴養(yǎng)時(shí)間為1個(gè)月。(2)雌性花鰻鱺催產(chǎn)池逐步增加鹽度至半海水，每日鹽度提高2-3，直至鹽度為
14-17為止。(3)雄性花鰻鱺在催熟期間均采用淡水培育。(4)雄性花鰻鱺采用肌肉注射HCG進(jìn)行催熟，劑量為500U/kg ·體重，每周注射一次，注射6周；雌性花鰻鱺采用肌肉注射LHRH-A2和鯉魚腦垂體(CPE)勻漿進(jìn)行催熟， LHRH-A2劑量為250 μ g/kg ·體重，CPE的劑量為4粒/kg ·體重，每7-9天注射一次，注射
15-18次。在誘導(dǎo)雄性花鰻鱺精巢發(fā)育成熟過(guò)程中，分別對(duì)在海水和淡水的中雄性花鰻鱺的催熟效果對(duì)比，結(jié)果顯示兩組魚的精巢均發(fā)育成熟，其精子活力均在15%左右，快速運(yùn)動(dòng)時(shí)間和壽命沒(méi)有明顯差異，說(shuō)明雄性花鰻鱺在海水和淡水中的催熟效果是一樣的。因此，在淡水中進(jìn)行雄性花鰻鱺催熟是本發(fā)明專利技術(shù)的一個(gè)創(chuàng)新點(diǎn)，這樣會(huì)減少不必要的人力和物力的損耗。采用LHRH-A2和鯉魚腦垂體勻漿的混合物誘導(dǎo)雌性花鰻鱺性腺發(fā)育成熟是本發(fā)明專利技術(shù)的又一個(gè)創(chuàng)新點(diǎn)，利用促性腺激素釋放素類似物誘導(dǎo)花鰻鱺自身產(chǎn)生內(nèi)源型促性腺激素，并且配合外源促性腺激素(鯉魚腦垂體)共同作用，效果良好。通過(guò)實(shí)施本方案，親魚性腺發(fā)育成熟，腹部明顯突起，用手撫摸腹面凸處，明顯感到性腺松軟有彈性。在任意挑選的15尾實(shí)驗(yàn)組雌魚中，5尾卵巢發(fā)育完全成熟，平均 GSI(性腺系數(shù))為20.9 士 5. 04% (最大達(dá)到27.3%) ；5尾卵巢發(fā)育至成熟期，平均GSI為 7. 2士2. 86% ；5尾卵巢發(fā)育至卵黃生成期，平均GSI為2. 32士 1.5% ；而對(duì)照組的性腺停留在未發(fā)育的II期(GSI為1. 18士0. 39%)，解剖實(shí)驗(yàn)組雌魚人工催產(chǎn)催熟觀察發(fā)現(xiàn)，卵巢上可見大量卵子。而雄性花鰻鱺GSI (性腺系數(shù))達(dá)到9. 5士2. 1%，擠壓腹部可收集到乳白色精液。


圖1 對(duì)照組雄性花鰻鱺腹部解剖2 實(shí)驗(yàn)組雄性花鰻鱺腹部解剖3 對(duì)照組雌性花鰻鱺腹部解剖4 實(shí)驗(yàn)組雌性花鰻鱺腹部解剖圖
具體實(shí)施例方式下列實(shí)施方法是本發(fā)明的一個(gè)具體應(yīng)用實(shí)例，而不僅限于此實(shí)例。(1)將收集的人工塘養(yǎng)鰻鱺按1尾/缸的密度放入玻璃缸中馴養(yǎng)，采用室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)，全天M小時(shí)避光，水溫控制在22-26°C。馴養(yǎng)時(shí)間為1個(gè)月，馴養(yǎng)期間活餌料和鰻魚粉混合投喂，每日3次，每次投喂3小時(shí)后將吃剩的飼料清理干凈。(2)親魚從淡水進(jìn)入半海水需要經(jīng)過(guò)滲透壓及生理調(diào)節(jié)的整個(gè)過(guò)程，需要一定時(shí)間。雌性花鰻鱺鹽度調(diào)節(jié)期間不投喂餌料。停止投喂的第2天起，每日鹽度提高2-3，直至鹽度提高到14-17為止，歷時(shí)7-9天，觀察親魚若有不適表現(xiàn)，立即停止提高鹽度，等親魚狀態(tài)穩(wěn)定后再繼續(xù)增加鹽度直至達(dá)到要求為止。(3)過(guò)渡半海水后開始花鰻鱺催熟實(shí)驗(yàn)。雄性花鰻鱺催熟過(guò)程將親魚從玻璃缸中撈出，放入冰水混合物中麻醉10-20分鐘；麻醉后使用浸過(guò)冰水的毛巾包住親魚頭部，將魚類生理鹽水溶解的HCG(劑量為500U/kg 體重)，注射器從背部肋間扎入，注射完畢后在針孔處擦涂紅霉素軟膏，以防止感染，每周注射一次，共注射6次。雌性花鰻鱺催熟過(guò)程將親魚從玻璃缸中撈出，放入冰水中麻醉10-20分鐘后，用浸過(guò)冰水的毛巾包住其頭部，用魚類生理鹽水溶解的LHRH-A2和鯉魚腦垂體(CPE)勻漿，采用ImL注射器肌肉注射，LHRH-A2 劑量為250 μ g/kg ·體重，CPE的劑量為4粒/kg ·體重，注射完畢后在針孔處擦涂紅霉素軟膏，以防止感染，每7-9天注射一次，共注射15-18次。通過(guò)實(shí)施本方案，親魚性腺發(fā)育成熟，腹部明顯突起，用手撫摸腹面凸處，明顯感到性腺呈松軟狀態(tài)。解剖發(fā)現(xiàn)雌性花鰻鱺的卵巢上可見大量卵子；雄性花鰻鱺通過(guò)擠壓腹部可收集到乳白色精液。這為進(jìn)一步研究花鰻鱺的全人工繁殖提供了前期的技術(shù)保證。
權(quán)利要求
1.一種人工誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育成熟的方法，其步驟和方法包括(1)親魚的馴養(yǎng)親魚選用3齡以上的健康人工塘養(yǎng)花鰻鱺；馴養(yǎng)期間水溫控制在 22-260C ；全天M小時(shí)避光；活餌料和鰻魚粉混合投喂，每日3次；親魚養(yǎng)殖密度為1尾/ 缸；馴養(yǎng)時(shí)間為1個(gè)月。(2)馴養(yǎng)結(jié)束后，停止投喂，雌性花鰻鱺需要過(guò)度至半海水后開始催熟；而雄性花鰻鱺在淡水中進(jìn)行催熟。(3)誘導(dǎo)性腺發(fā)育成熟雄性花鰻鱺采用肌肉注射HCG進(jìn)行催熟；雌性花鰻鱺采用肌肉注射LHRH-A2和鯉魚腦垂體勻漿進(jìn)行催熟。
2.按照權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育的方法，其特征在于親魚選用塘養(yǎng)花鰻鱺；其中挑選的雄性花鰻鱺規(guī)格要求體重0. 425-0. 87^g，體長(zhǎng)55-66cm ；挑選的雌性花鰻鱺規(guī)格要求體重1. 305-2. 89kg，體長(zhǎng)73-97cm。馴養(yǎng)期間水溫控制在2246°C ；全天M 小時(shí)避光；活餌料和鰻魚粉混合投喂，每日3次；親魚養(yǎng)殖密度為1尾/缸；馴養(yǎng)時(shí)間為1個(gè)月。
3.按照權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育的方法，其特征在于；逐步增加鹽度至半海水，每日鹽度提高2-3，直至鹽度調(diào)為14-17為止。
4.按照權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育的方法，其特征在于雄性花鰻鱺采用肌肉注射HCG進(jìn)行催熟，劑量為500U/kg·體重，每周注射一次，注射時(shí)間為6周；雌性花鰻鱺采用肌肉注射LHRH-A2和鯉魚腦垂體(CPE)勻漿進(jìn)行催熟，LHRH-A2劑量為250 μ g/kg 體重，CPE的劑量為4粒/kg ·體重，每7-9天注射一次，注射次數(shù)為15-18次。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種人工誘導(dǎo)花鰻鱺性腺發(fā)育成熟的方法，其方法如下雄性花鰻鱺采用肌肉注射HCG進(jìn)行催熟，劑量為500U/kg·體重，每周注射一次，注射時(shí)間為6周；雌性花鰻鱺采用肌肉注射LHRH-A2和鯉魚腦垂體(CPE)勻漿進(jìn)行催熟，LHRH-A2劑量為250μg/kg·體重，CPE的劑量為4粒/kg·體重，每7-9天注射一次，注射次數(shù)15-18次。通過(guò)實(shí)施本方案，親魚性腺發(fā)育成熟，腹部明顯突起，用手撫摸腹面凸處，明顯感到性腺呈松軟狀態(tài)，雌性花鰻鱺可以排出成熟卵子；雄性花鰻鱺通過(guò)擠壓腹部可收集到乳白色精液。這為進(jìn)一步研究花鰻鱺的全人工繁殖提供了前期的技術(shù)保證。
文檔編號(hào)A01K61/00GK102232363SQ20101016955
公開日2011年11月9日 申請(qǐng)日期2010年4月26日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月26日
發(fā)明者周雯伊, 尹紹武, 林浩然, 駱劍, 齊興柱, 齊鑫 申請(qǐng)人:海南大學(xué)