專利名稱：用于在母豬的輸卵管中引入和獲得含有配子、胚胎、或任何其他類型溶液的流體的裝置和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于在母豬的輸卵管內(nèi)通過腹腔鏡方式引入和/或收集可含有或可不含有細(xì)胞的流體的裝置。本發(fā)明能夠在短時(shí)間內(nèi)將少量的精子、胚胎、或治療溶液成功引入到輸卵管內(nèi)。本發(fā)明也可適用于任何其他的動(dòng)物物種。
背景技術(shù)：
在養(yǎng)豬場(chǎng)中，不存在利用極少量精子成功授精或?qū)⑴咛ヒ浦驳捷斅压苤械姆椒ǎ?除通過腹腔鏡的外科方法之外。盡管如此，該方法在家畜生產(chǎn)中也為不能實(shí)施的方法。生殖器官的腹腔鏡方法為自20世紀(jì)70年代已用于人類(當(dāng)時(shí)在使精子通過子宮的過程中存在障礙)或動(dòng)物物種(當(dāng)時(shí)在使導(dǎo)管穿過宮頸的過程中存在技術(shù)問題)的技術(shù)。在馴養(yǎng)動(dòng)物中，在綿羊身上已產(chǎn)生了最大發(fā)展。在此背景下，已得到證明的是，在子宮中授精的稀釋為低至1百萬和10百萬的劑量的著床精子也可能實(shí)現(xiàn)良好的受精率結(jié)果。除了生殖有效性之外，就待授精的少量精子而言，腹腔鏡授精提供其他優(yōu)點(diǎn)。此外，存在在授精的同時(shí)探測(cè)生殖器官的可能性，這使得可觀測(cè)正在發(fā)生的功能變化，尤其是卵巢內(nèi)的變化，并且能夠以此方式來檢測(cè)不能通過非外科系統(tǒng)處理的病理。另外可均化一年期間內(nèi)的受精率結(jié)果， 當(dāng)使用其他授精操作時(shí)這通常是不可能的。就豬而言，子宮深部授精的非外科操作允許使低至50百萬精子含量的精子成功著床于母豬的子宮內(nèi)。另外已嘗試在子宮角內(nèi)利用至少20百萬精子進(jìn)行腹腔鏡授精，從而因該物種的子宮壁特性而獲得可變的受精率結(jié)果。此外，精子數(shù)量阻止通過流式細(xì)胞儀選定的或通過其他技術(shù)處理的精子授精，其中每單位時(shí)間產(chǎn)生的精子數(shù)為極低的。其他類似裝置在現(xiàn)有技術(shù)中為已知的，例如描述于Murcia大學(xué)的EP1177776B1中的裝置，但本發(fā)明相比已知的現(xiàn)有技術(shù)具有若干不同和優(yōu)點(diǎn)。描述于文獻(xiàn)EP 1177776B1中的裝置為下述非外科裝置，所述非外科裝置被引入穿過陰道、宮頸、和子宮體直至其到達(dá)作為最深解剖學(xué)位置的子宮角深度。授精精子的數(shù)量應(yīng)為至少50百萬精子以便實(shí)現(xiàn)成功受精。發(fā)明概述本發(fā)明描述了下述裝置，所述裝置用于將可含有或可不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)，從而使得可從輸卵管的內(nèi)部引入精子、胚胎、或任何類型的治療溶液，并且獲得含有或不含有細(xì)胞(配子-精子和/或卵母細(xì)胞-和胚胎)的流體。所述裝置包括剛性管體，該剛性管體由腹腔鏡套針引導(dǎo)并且可通過其內(nèi)部引入柔性管，所述裝置具有下述主要特征剛性管體和內(nèi)部柔性管為同軸的，內(nèi)部柔性管的近端連接至斜口針，柔性管允許斜口針以45度的角度插入到輸卵管內(nèi)，柔性管的遠(yuǎn)端連接至由一個(gè)或多個(gè)活塞封閉的一個(gè)或多個(gè)套管，所述活塞通過套管的內(nèi)部滑動(dòng)，并且能夠精確弓I入少量體積的流體。用于將流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)的裝置的管體進(jìn)而被無菌管殼遮蓋。在另一個(gè)可供選擇的構(gòu)造中，該無菌管殼為一次性的。在另一個(gè)可供選擇的構(gòu)造中，所述裝置的柔性管的遠(yuǎn)端連接至兩個(gè)各自由活塞封閉的套管，所述活塞在套管內(nèi)滑動(dòng)，所述兩個(gè)套管通過雙向旋塞連接至柔性管，從而能夠交替地排出容納在各個(gè)套管中的流體。所述裝置的抽出是通過打開套管、將斜口針拉回到剛性管體內(nèi)來完成的。本發(fā)明還描述了通過使用本發(fā)明的裝置將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)的方法。該方法可將精子、胚胎、或任何類型的治療溶液引入到母豬的輸卵管內(nèi)，并且從母豬的輸卵管內(nèi)獲得配子(精子和/或卵母細(xì)胞)、胚胎、或任何類型的溶液。在此方法中，進(jìn)入母豬的輸卵管內(nèi)的裝置被引入到輸卵管安瓿的鄰近區(qū)域中，配子、胚胎、和/ 或溶液可從該區(qū)域柔和且無困難的通過。在這種用于將具有精子、胚胎、或治療溶液的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)的方法中，斜口注射針被定向?yàn)閺妮斅压艿陌碴车捷斅压艿膷{部。這種用于將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)的方法可通過輸卵管壁的暫時(shí)性膨脹來驗(yàn)證接種的正確可見性。另外描述了利用雙套管系統(tǒng)將處于受精卵至4-卵裂球期的階段中的胚胎移植到母豬的輸卵管內(nèi)的方法，所述雙套管可單獨(dú)地引入容納在這些套管中的每一個(gè)內(nèi)的流體。附圖簡(jiǎn)述為了更好地理解本發(fā)明，提供了一系列附圖，其作為本發(fā)明的一體化部分以示例性且非限制性的方式示出了本發(fā)明的主題。


圖1示出了本發(fā)明的裝置的提起側(cè)視圖，其中示出了組成所述裝置的不同元件。圖2為本發(fā)明的適于移植胚胎的裝置的提起側(cè)視圖。圖3示出了本發(fā)明的在母豬的腹腔內(nèi)處于工作狀態(tài)的裝置的示意圖。在附圖中，下述附圖標(biāo)記涉及下文所述的相應(yīng)元件。1-剛性管體。2-無菌管殼。3-柔性管。4-斜口針。5-輸卵管安瓿。6-套管/活塞裝置。7-套管。8-活塞。9-柔性管(3)的后端10-觀察系統(tǒng)11-鑷子。12-輸卵管。13-雙套管。14-雙向旋塞。
15-第一套管。16-第二套管。發(fā)明詳述為了解決現(xiàn)有技術(shù)中指出的缺陷，本發(fā)明開發(fā)了新型裝置和方法，所述新型裝置和方法可將含有或不含有細(xì)胞的流體在發(fā)生受精的一側(cè)引入到處于特倫德倫堡 (Trende 1 enburg)體位和全身麻醉下的母豬的卵巢中。為此，本發(fā)明的方法涉及在全身麻醉下進(jìn)行的在臍區(qū)具有2cm切口的小手術(shù)。通過該切口，在直接觀察下引入套針以便開始產(chǎn)生氣腹。此后，在2個(gè)大氣壓的壓強(qiáng)下通過端接至套針的2mm直徑的管引入C02。氣體的引入是在最長(zhǎng)時(shí)間段為10-15秒內(nèi)完成的。本發(fā)明由剛性管體⑴構(gòu)成，剛性管體內(nèi)部穿行有柔性管(3)，柔性管的底部連接至斜口針G)。另一端連接至包括由活塞(8)封閉的套管(7)的裝置(6)，其中活塞在套管 (7)內(nèi)滑動(dòng)并且允許精確引入少量體積的液體。該管體(1)又被無菌管殼( 遮蓋，從而允許其用于不同的動(dòng)物；所述無菌管殼( 可為一次性的。管的柔性以及針的直徑和長(zhǎng)度的上述特征可將含有或不含有細(xì)胞的流體安全地設(shè)置在輸卵管(1 內(nèi)。此外，輸卵管壁在授精時(shí)間期間的膨脹確認(rèn)流體的適當(dāng)設(shè)置。為了引起流體的引入或其排空(根據(jù)情況而定)，使動(dòng)物經(jīng)受稱為微創(chuàng)手術(shù)操作的操作。為此，如上文所述，在處于特倫德倫堡體位和全身麻醉下的母豬的腹部皮膚中切出大約2cm長(zhǎng)度的切口。在引入例如圖3所示的觀察系統(tǒng)(10)之后，接下來將足量的CO2 引入到動(dòng)物的腹腔中，從而使得可觀察器官。這種引入氣體的過程是直接在大約2個(gè)大氣壓的壓強(qiáng)下完成的。一旦腹腔的內(nèi)部條件已得到確認(rèn)后，就繼續(xù)在動(dòng)物的側(cè)腹引入兩個(gè)附屬套針。這些套針的第一套針將用于引入非創(chuàng)傷性鑷子(11)以有助于操作和夾持輸卵管 (12)。第二套針用于引入本發(fā)明的特定器械。用于授精、移植胚胎或引入流體并且執(zhí)行本發(fā)明所必需的器械包括注射系統(tǒng)，所述注射系統(tǒng)包括剛性外部管體(1)，該剛性外部管體適應(yīng)現(xiàn)存套針，從而使其被插入到母豬的腹腔內(nèi)。該管體(1)又被無菌管殼( 遮蓋，從而允許其用于不同的動(dòng)物。柔性管(3) 同軸地穿行，其近端連接至斜口針G)，從而允許其以45度的角度插入到輸卵管(1 中，并且更具體地講插入到輸卵管安瓿(5)附近。柔性管的遠(yuǎn)端連接至包括在另一端由活塞(8) 封閉的套管(7)的裝置，其中活塞在套管(7)內(nèi)滑動(dòng)并且能夠精確引入少量體積的液體。當(dāng)將所述裝置用于具有極少量精子的授精模式中時(shí)，接下來填充套管/活塞裝置 (6)，該套管/活塞裝置包括由活塞(8)封閉的套管(7)，其中活塞在套管(7)內(nèi)滑動(dòng)并且能夠精確引入少量體積的液體。一旦套管/活塞裝置(6)已得到填充后，就將其連接至與剛性管體(1)同軸的柔性管(3)的后端，接下來填充柔性管。通過套針插入整體，直至剛性管體(1)的前端設(shè)置在輸卵管安瓿(5)附近以用于此目的，然后移動(dòng)同軸柔性管C3)直至位于柔性管后端(9)處的套管(7)完全被鎖定在剛性管體(1)中。這種布置方式能夠易于通過使用45度的進(jìn)入角將斜口針(4)插入到輸卵管的內(nèi)腔中。進(jìn)入輸卵管的點(diǎn)應(yīng)出現(xiàn)在輸卵管安瓿(5)中，針的末端被定向至輸卵管(12)的峽部，如圖3所示。所述裝置的特征降低了因穿透輸卵管的對(duì)側(cè)壁引起的事故風(fēng)險(xiǎn)。一旦柔性管C3)通過針(4)與輸卵管安瓿( 連通后，就開始在套管(7)上移動(dòng)活塞(8)，以排出預(yù)定體積的流體。流體適當(dāng)排出的驗(yàn)證方式為觀察一般來講輸卵管(1 壁并且具體地講輸卵管安瓿(5)的暫時(shí)性膨脹。系統(tǒng)抽出的完成方式為打開套管(7)，使得斜口針(4)可隱藏在剛性管體⑴內(nèi)， 以避免鄰近區(qū)域中的可能事故。母豬的痊愈發(fā)生于隨后的幾分鐘內(nèi)。使用該方法使得可在同一雌性動(dòng)物中以連續(xù)循環(huán)方式重復(fù)授精。當(dāng)所述裝置用于胚胎移植模式中時(shí)，該系統(tǒng)包括兩個(gè)套管，第一套管(1 和第二套管(16)，其中每個(gè)套管由其自身的活塞封閉并且通過雙向旋塞系統(tǒng)(14)連接至柔性管 (3)，如圖2中可見；在該情況中，未示出無菌管殼( 。接下來通過連接僅容納胚胎移植介質(zhì)的套管的開口來填充柔性管(3)，所述胚胎移植介質(zhì)容納在(例如)第一套管(15)中。 如從圖3可見，通過套針引入所述裝置，直至剛性管體(1)的前端設(shè)置在輸卵管安瓿(5)附近以用于此目的，然后移動(dòng)同軸柔性管(3)直至完全鎖定雙套管系統(tǒng)并且所述柔性管(3) 的后端設(shè)置在在剛性管體(1)中。然后開始關(guān)閉容納胚胎移植介質(zhì)的套管，例如第一套管(15)，并且打開容納胚胎的套管，例如第二套管(16)，所述胚胎將被移植100-200 μ 1的總體積。胚胎的移植應(yīng)處于受精卵至4-卵裂球期的發(fā)育階段之間。進(jìn)入輸卵管的點(diǎn)應(yīng)位于輸卵管安瓿(5)中，針(4) 的尖端被定向至輸卵管(1 的峽部。所述裝置的特征降低了因穿透輸卵管的對(duì)側(cè)壁引起的事故風(fēng)險(xiǎn)。一旦柔性管(3)通過針(4)與輸卵管安瓿(5)連通后，就開始在容納胚胎的套管 (例如，第二套管(16))上移動(dòng)活塞(8)，以排出其中容納的一定體積的流體。流體適當(dāng)排出的驗(yàn)證方式為觀察輸卵管安瓿(5)壁的暫時(shí)性膨脹。此后，開始關(guān)閉容納胚胎的套管，例如第二套管(16)，并且打開容納胚胎移植介質(zhì)的套管，例如第一套管(15)，以便排出100 μ 1 的附加體積，從而允許胚胎從柔性管的內(nèi)腔移至輸卵管(1 內(nèi)部。系統(tǒng)抽出的實(shí)現(xiàn)方式為打開雙套管系統(tǒng)，使得斜口針⑷可隱藏在剛性管體⑴內(nèi)腔中，以避免鄰近區(qū)域中的可能事故。母豬的痊愈發(fā)生于隨后的幾分鐘內(nèi)。該方法可在同一雌性動(dòng)物中以連續(xù)循環(huán)方式重復(fù)移植。
權(quán)利要求
1.一種用于將流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)使得可引入含有精子、胚胎、或任何類型的治療溶液的流體，以及從所述輸卵管的內(nèi)部獲得含有或不含有細(xì)胞(配子-精子和/或卵母細(xì)胞-和/或胚胎)的流體的裝置，包括由腹腔鏡套針引導(dǎo)并且可穿過其內(nèi)部引入柔性管(3)的剛性管體(1)，其特征在于所述剛性管體⑴和所述內(nèi)部柔性管⑶為同軸的，所述內(nèi)部柔性管(3)的近端連接至斜口針G)，所述柔性管⑶允許所述斜口針⑷以45度的角度插入到所述輸卵管(12)內(nèi)，所述柔性管(3)的遠(yuǎn)端連接由一個(gè)或多個(gè)活塞(8)封閉的一個(gè)或多個(gè)套管(7) ((15)、 (16))，所述活塞通過所述套管(7) ((15)、(16))的內(nèi)部滑動(dòng)，并且能夠精確引入少量體積的流體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)的裝置，其特征在于所述管體(1)進(jìn)而被無菌管殼( 遮蓋。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)的裝置，其特征在于所述無菌管殼( 為一次性的。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的用于將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)的裝置，其特征在于所述柔性管(3)的遠(yuǎn)端連接至兩個(gè)各自由活塞(8)封閉的套管(15)、(16)，所述活塞在所述套管(15),(16)內(nèi)滑動(dòng)，所述兩個(gè)套管(15),(16)通過雙向旋塞(14)連接至所述柔性管(3)，從而能夠交替地使容納在各個(gè)套管(1幻、(16)中的所述流體通過。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的用于將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)的裝置，其特征在于所述裝置的抽出是通過打開所述套管(7)((1幻、(16))、將所述斜口針⑷拉回到所述剛性管體⑴的內(nèi)腔中來完成的。
6.一種用于利用根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的裝置將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)從而使得可將精子、胚胎、或任何類型的治療溶液引入到所述母豬的輸卵管內(nèi)、或者可從所述母豬的輸卵管的內(nèi)部獲得配子(精子和/或卵母細(xì)胞)、胚胎、或溶液的方法，其特征在于將所述裝置引入到所述輸卵管(1 內(nèi)的所述輸卵管安瓿( 的鄰近區(qū)域中，配子、胚胎、和/或溶液從所述區(qū)域柔和且無困難的排出。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于利用根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的裝置將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)從而使得可將精子、胚胎、或任何類型的治療溶液引入到所述母豬的輸卵管內(nèi)、或者可從所述母豬的輸卵管的內(nèi)部獲得配子(精子和/或卵母細(xì)胞)、胚胎、或溶液的方法，其特征在于所述斜口注射針(4)被定向?yàn)閺乃鲚斅压艿陌碴?5)至所述輸卵管(12)的峽部。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7中任一項(xiàng)所述的用于利用根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的裝置將含有或不含有細(xì)胞的流體引入到母豬的輸卵管內(nèi)從而使得可將精子、胚胎、或任何類型的治療溶液引入到所述母豬的輸卵管內(nèi)、或者可從所述母豬的輸卵管的內(nèi)部獲得配子 (精子和/或卵母細(xì)胞)、胚胎、或溶液的方法，其特征在于可通過所述輸卵管(1 的壁的暫時(shí)性膨脹來驗(yàn)證接種的正確觀察。
9.利用根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的裝置將處于受精卵至4-卵裂球期的階段中的胚胎移植到母豬的輸卵管內(nèi)的方法，其特征在于所述方法使用雙套管系統(tǒng)(15)、(16)，從而使得可單獨(dú)地引入包含在這些套管(1 、(16)中的每一個(gè)內(nèi)的所述流體。
全文摘要
所述裝置包括注射系統(tǒng)，所述注射系統(tǒng)包括能夠?qū)⑵洳迦氲侥肛i腹腔內(nèi)的剛性外部管體(1)。該管體(1)又被能夠使其用于不同動(dòng)物的無菌管殼(2)遮蓋。柔性管(3)同軸穿行并且其遠(yuǎn)端與允許以45°角插入所述輸卵管(12)中的斜口針(4)相連。所述柔性管的近端與包括在另一端由活塞(8)封閉的套管(7)的裝置(6)連接，所述活塞在所述套管內(nèi)滑動(dòng)并且能夠精確引入少量體積的液體。
文檔編號(hào)A61D19/04GK102223854SQ200980147203
公開日2011年10月19日 申請(qǐng)日期2009年9月24日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月26日
發(fā)明者加西亞 E·馬蒂內(nèi)茲, 羅哈斯 J·L·巴斯克斯, 羅哈斯 J·M·巴斯克斯, 阿勒 J·羅卡 申請(qǐng)人:穆爾西亞大學(xué)