專利名稱：一種冬蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物發(fā)酵領(lǐng)域，具體的說是一種蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝。
背景技術(shù)：
冬蟲夏草又稱冬蟲草，蟲草，它是麥角菌科真菌冬蟲夏草 Cordycrpssinensis (Berk. ) Sacc.寄生在幼蟲蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復(fù)合 體，是一種傳統(tǒng)的名貴滋補(bǔ)中藥材，與天然人參、鹿茸并列為三大滋補(bǔ)品。它藥性溫和，一年 四季均可食用，老、少、病、弱、虛者皆宜，比其他種類的滋補(bǔ)品有更廣泛的藥用價(jià)值，自古以 來，人們就把其作為滋補(bǔ)品和藥用品，冬蟲夏草主要生長(zhǎng)在高海拔、高寒地區(qū)，生長(zhǎng)環(huán)境的構(gòu)成十分苛刻和復(fù)雜，加之人 們對(duì)蟲草的需求量不斷增加及不合理的采挖，致使蟲草自然資源逐步減少。因此，為了解決 藥源，人們不得不通過人工來栽培蟲草，但多少年來，人工栽培蟲草生產(chǎn)工藝復(fù)雜、生產(chǎn)周 期短、產(chǎn)量低一直困擾著人們。通過科研工作者的努力，一種全新的蟲草產(chǎn)品——蟲草菌絲體開發(fā)出來了，這種 菌絲體就是使用深層液體發(fā)酵獲得的。安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)曾經(jīng)對(duì)蟲草菌絲體進(jìn)行了有效成分分析，其結(jié)果表明菌絲體中氨 基酸種類和冬蟲夏草生藥一致，但氨基酸總量和必需氨基酸總量明顯高于冬蟲夏草生藥， 必需氨基酸占總氨基酸的比例也高于后者，必需氨基酸中蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨 酸、賴氨酸的含量更遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于后者，菌絲體中粗蛋白、總糖及甘露醇的含量均高于冬蟲夏草 生藥；菌絲體的脂肪酸組成中，不飽和脂肪酸占脂肪酸組成的85. 38%，其中亞油酸、亞麻 酸等多價(jià)不飽和脂肪酸占脂肪酸組成的58. 87%，而亞油酸的含量占整個(gè)脂肪酸組成的一 半以上(51.04%)；發(fā)酵菌絲體含有豐富的對(duì)人體健康非常重要的Zn、Fe、Ca等金屬元素， 尤以Ca的含量為高。用深層液體發(fā)酵蟲草菌絲體，周期短、效率高、穩(wěn)定等特點(diǎn)，是人工培養(yǎng)蟲草產(chǎn)品 的主要發(fā)展方向?，F(xiàn)有的技術(shù)中，專利申請(qǐng)?zhí)枮?2134573. 2的巴西蟲草菌絲體深層發(fā)酵培養(yǎng)方法 及專利申請(qǐng)?zhí)枮?3104709. 9的蟲草菌絲發(fā)酵生產(chǎn)工藝，都是采用三級(jí)深層發(fā)酵，完成整個(gè) 發(fā)酵過程需要12-15天，生產(chǎn)周期長(zhǎng)，使用價(jià)格昂貴的發(fā)酵罐進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)酵條件高，培養(yǎng) 基所使用原料復(fù)雜、造價(jià)高。專利申請(qǐng)?zhí)枮?1141350. 6的一種冬蟲草菌粉類綠色飼料添加 劑采用的是固體發(fā)酵，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，但把菌絲培養(yǎng)好需要大概2個(gè)月的時(shí)間，生產(chǎn)周期更 長(zhǎng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種不用造價(jià)昂貴的發(fā)酵罐，而是使用旋轉(zhuǎn)式搖床進(jìn)行培 養(yǎng)，這種模式培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單、原料易得、周期短、效率高、穩(wěn)定等。生產(chǎn)出來的菌絲體產(chǎn)品質(zhì) 優(yōu)且產(chǎn)生成本很低。
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本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的1、篩選符合工業(yè)化生產(chǎn)、菌絲生長(zhǎng)旺盛并無感染的斜面菌種。2、配制液體培養(yǎng)基馬鈴薯6斤，玉米粉3斤，黃豆粉1斤，白糖2斤，抗壞血酸60 克，尿素80克，水100斤。先將馬鈴薯打成漿，然后依次往水中放入玉米粉、黃豆粉、白糖、 抗壞血酸、尿素，用慢火將水煮開備用。3、將制配好、無需過濾的液體培養(yǎng)基分裝到耐高溫高壓的透明玻璃瓶中，裝入量 為容具實(shí)際容量的一半，然后用棉花將瓶口塞緊。接下來消毒滅菌，滅菌時(shí)間為高溫高壓 滅菌40-50分鐘，常壓滅菌4-5個(gè)小時(shí)。4、在無菌環(huán)境下接入菌種，并靜止培養(yǎng)3-5天。5、把菌種萌發(fā)好、無污染的液體培養(yǎng)基移到旋轉(zhuǎn)式搖床進(jìn)行動(dòng)態(tài)培養(yǎng)，搖床旋轉(zhuǎn) 速度為150-300轉(zhuǎn)，搖床的轉(zhuǎn)動(dòng)使液體培養(yǎng)基也隨之轉(zhuǎn)動(dòng)，菌種在液體培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)動(dòng)及培 養(yǎng)基里面的渣塊碰撞下不斷的被分撕成若干個(gè)菌球(片、絲)，3天后獲得有豐富菌球(片、 絲)的液體菌種。6、進(jìn)行二次發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)基為米糠50斤、麩皮50斤、糖4斤、培養(yǎng)好的液體菌 種120斤。把上述各種物料混合攪拌均勻，并把混合物的濕度調(diào)節(jié)到55-60%。7、把混合物鋪在地板上，其厚度控制在15-20公分，然后用消過毒的編織袋遮蓋 進(jìn)行好氧發(fā)酵。8,2-3天后當(dāng)料面長(zhǎng)滿潔白的菌絲時(shí)既完成整個(gè)發(fā)酵過程，在60度下烘干即得到 優(yōu)質(zhì)的蟲草菌絲體。與現(xiàn)有的技術(shù)相比，本發(fā)明既有如下優(yōu)點(diǎn)1、本發(fā)明使用的原料簡(jiǎn)單、易購、成本低；2、本發(fā)明使用的容具亦簡(jiǎn)單、易購、成本低；3、本發(fā)明采用旋轉(zhuǎn)式搖床進(jìn)行深層發(fā)酵培養(yǎng)，液體菌種在培養(yǎng)過程不需多級(jí)培 養(yǎng)，不但縮短生產(chǎn)周期，同時(shí)也降低了因多級(jí)轉(zhuǎn)接菌種培養(yǎng)而容易感染之風(fēng)險(xiǎn)；4、本發(fā)明通過二次發(fā)酵培養(yǎng)，使用的是廣泛及價(jià)廉的農(nóng)產(chǎn)品下腳料，通過二次發(fā) 酵培養(yǎng)后，不但使菌絲體變得更多更旺盛，還使價(jià)廉的農(nóng)產(chǎn)品下腳料得以增值；5、本發(fā)明液體菌種培養(yǎng)過程僅須3-5天，再進(jìn)行二次發(fā)酵也只須2-3天，整個(gè)生產(chǎn) 周期也就5-8天。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的方法進(jìn)一步說明。1、篩選符合工業(yè)化生產(chǎn)、菌絲生長(zhǎng)旺盛并無感染的斜面菌種。2、配制液體培養(yǎng)基馬鈴薯6斤，玉米粉3斤，黃豆粉1斤，白糖2斤，抗壞血酸60 克，尿素80克，水100斤。先將馬鈴薯打成漿，然后拌入水中，同時(shí)依次放入玉米粉、黃豆粉、 白糖、抗壞血酸、尿素，用慢火將水煮開。3、培養(yǎng)基使用時(shí)無需過濾，但使用前需把制配好的液體培養(yǎng)基拌勻，使其中的渣 液分布均勻，然后分裝到耐高溫高壓及透明的20升玻璃瓶容器中，裝入液體培養(yǎng)基的量為 10升，把瓶口抹干凈后再用棉花塞緊瓶口。接下來開始消毒滅菌，滅菌時(shí)間為在1.5平方 /cm的壓力下進(jìn)行高溫高壓滅菌40-50分鐘，常壓滅菌4-5個(gè)小時(shí)。
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4、在無菌環(huán)境下接入菌種，接入的菌種要小塊及薄、接入時(shí)動(dòng)作要輕緩，這樣才不 使接入的菌種沉入液體里面。接入的菌種不應(yīng)其中在一處，而是均勻的分布在液體培養(yǎng)基 的面上。菌種接好后要靜止培養(yǎng)2天，一方面使菌種得以恢復(fù)及萌發(fā)，另一方面可以觀察接 入菌種后是否有無感染。5、把菌種萌發(fā)好、無污染的液體培養(yǎng)基移到旋轉(zhuǎn)式搖床進(jìn)行動(dòng)態(tài)培養(yǎng)，搖床旋轉(zhuǎn) 速度為150-300轉(zhuǎn)，在搖床的帶動(dòng)下，液體培養(yǎng)基也隨之轉(zhuǎn)動(dòng)，并產(chǎn)生大量的氧，菌種在液 體培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)動(dòng)及培養(yǎng)基里面的渣塊碰撞下不斷的被分撕成若干個(gè)菌球(片、絲)。菌種在 營(yíng)養(yǎng)豐富的液體培養(yǎng)基里及多氧環(huán)境下生長(zhǎng)迅猛，3天后獲得有豐富菌球(片、絲)的液體 菌種。6、液體菌種培養(yǎng)好后就可以進(jìn)行二次發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)基為米糠50斤、麩皮50斤、 糖4斤、培養(yǎng)好的液體菌種120斤。把上述各種物料在干凈、消過毒的地板混合攪拌均勻， 并把混合物的濕度調(diào)節(jié)到55-60%。7、把混合物鋪在干凈、消過毒的地板上，其厚度控制在在15-20公分以內(nèi)，并做 到天涼時(shí)鋪厚些，天熱時(shí)鋪薄些。然后用消過毒的編織袋遮蓋進(jìn)行好氧發(fā)酵。8,2-3天后當(dāng)料面長(zhǎng)滿潔白的菌絲時(shí)既完成發(fā)酵過程，把培養(yǎng)好的菌絲體在60度 下烘干即得到質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的蟲草菌絲體。
權(quán)利要求
一種冬蟲草菌絲體的生產(chǎn)工藝，其特征是包括以下步驟(1)篩選符合工業(yè)化生產(chǎn)、菌絲生長(zhǎng)旺盛并無感染的斜面菌種。(2)配制液體培養(yǎng)基馬鈴薯6斤，玉米粉3斤，黃豆粉1斤，白糖2斤，抗壞血酸60克，尿素80克，水100斤。先將馬鈴薯打成漿，然后依次往水中放入玉米粉、黃豆粉、白糖、抗壞血酸、尿素，用慢火將水煮開備用。(3)將制配好、無需過濾的液體培養(yǎng)基分裝到耐高溫高壓的透明玻璃瓶中，裝入量為容具實(shí)際容量的一半，然后用棉花將瓶口塞緊。接下來消毒滅菌，滅菌時(shí)間為高溫高壓滅菌40 50分鐘，常壓滅菌4 5個(gè)小時(shí)。(4)在無菌環(huán)境下接入菌種，并靜止培養(yǎng)3 5天。(5)把菌種萌發(fā)好、無污染的液體培養(yǎng)基移到旋轉(zhuǎn)式搖床進(jìn)行動(dòng)態(tài)培養(yǎng)，搖床旋轉(zhuǎn)速度為150 300轉(zhuǎn)，搖床的轉(zhuǎn)動(dòng)使液體培養(yǎng)基也隨之轉(zhuǎn)動(dòng)，菌種在液體培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)動(dòng)及培養(yǎng)基里面的渣塊碰撞下不斷的被分撕成若干個(gè)菌球(片、絲)，3天后獲得有豐富菌球(片、絲)的液體菌種。(6)進(jìn)行二次發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)基為米糠50斤、麩皮50斤、糖4斤、培養(yǎng)好的液體菌種120斤。把上述各種物料混合攪拌均勻，并把混合物的濕度調(diào)節(jié)到55 60％。(7)把混合物鋪在地板上，其厚度控制在15 20公分，然后用消過毒的編織袋遮蓋進(jìn)行好氧發(fā)酵。(8)2 3天后當(dāng)料面長(zhǎng)滿潔白的菌絲時(shí)既完成整個(gè)發(fā)酵過程，在60度下烘干即得到優(yōu)質(zhì)的蟲草菌絲體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種冬蟲草菌絲體發(fā)酵培養(yǎng)方法，它主要包括液體培養(yǎng)基的配制、通過旋轉(zhuǎn)式搖床培養(yǎng)出大量的菌球(絲)、利用農(nóng)作物下腳料和液體菌種進(jìn)行二次發(fā)酵獲取更多更優(yōu)質(zhì)的菌絲體等工序。本發(fā)明主要解決現(xiàn)有技術(shù)發(fā)酵條件高，培養(yǎng)基使用原料復(fù)雜、造價(jià)高等缺點(diǎn)，而是用旋轉(zhuǎn)式搖床進(jìn)行培養(yǎng)，這種模式培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單，原料易得、周期短、效率高、穩(wěn)定等。生產(chǎn)出來的菌絲體品質(zhì)優(yōu)，利用該方法生產(chǎn)的蟲草菌絲粉與天然蟲草的主要成分和藥理一致，并且該工藝可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)，生產(chǎn)成本底，具有較高的開發(fā)價(jià)值。
文檔編號(hào)A01G1/04GK101897270SQ200910141359
公開日2010年12月1日 申請(qǐng)日期2009年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月25日
發(fā)明者何寒, 吳烈秋 申請(qǐng)人:何寒;吳烈秋