專利名稱：富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，尤其是一種以靈芝液態(tài)發(fā)酵、可 明顯提高有機(jī)鍺含量、安全可靠的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
當(dāng)今醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)，有機(jī)鍺含有多個(gè)Ge-O鍵，參與體內(nèi)代謝具有多
種功效有機(jī)鍺所載負(fù)電荷氧原子可從癌細(xì)胞中奪取電子，使其電位下降， 使腫瘤細(xì)胞處在不利于生存的環(huán)境，從而抑制癌細(xì)胞繁殖并防止其向它處擴(kuò)散； 有機(jī)鍺能排成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)與體內(nèi)污染物、重金屬相結(jié)合成為鍺化合物后而迅速排 出體外；同時(shí)能捕捉代謝產(chǎn)物中的氫，起到凈化血液的作用，可消除血管壁 上的脂類附著物，抑制血栓形成，使血液循環(huán)暢通；有機(jī)鍺可增強(qiáng)紅血球攜氧 能力，使治癌藥物能到達(dá)病灶，充分發(fā)揮制癌、止痛效果；有機(jī)鍺與人體血紅 蛋白結(jié)合，可保證細(xì)胞的有氧代謝，促進(jìn)細(xì)胞新陳代謝，抵御病害的侵蝕， 延緩機(jī)體的衰老。為此，含有機(jī)鍺的產(chǎn)品相繼問世。
靈芝，是祖國中醫(yī)藥寶庫中的珍品，素有"仙草"之譽(yù)。古今藥理與臨床研 究均證明，靈芝確有防病治病、延年益壽之功效。東漢時(shí)期的《神農(nóng)本草經(jīng)》、 明代著名醫(yī)藥學(xué)家李時(shí)珍的《本草綱目》，都對(duì)靈芝的功效有詳細(xì)的極為肯定的 記載?，F(xiàn)在，靈芝作為藥物已正式被國家藥典收載，同時(shí)它又是國家批準(zhǔn)的新 資源食品，無毒副作用，可以藥食兩用。雖然靈芝的藥理成分非常豐富，其中 有效成份可分為十大類，包括靈芝多糖、靈芝多肽、三萜類、16種氨基酸(其 中含有七種人體必需氨基酸)、蛋白質(zhì)、甾類、甘露醇、香豆精苷、生物堿、有 機(jī)酸(主含延胡索酸)，以及微量元素Ge、 P、 Fe、 Ca、 Mn、 Zn等。但是現(xiàn)有 靈芝中有機(jī)鍺含量較少，因此其藥理作用的主要成分還是靈芝多糖。
為了提高靈芝中有機(jī)鍺的含量，中國專利申請(qǐng)?zhí)?00410041827.3的發(fā)明專 利申請(qǐng)公開了一種"富鍺紫靈芝及其生產(chǎn)工藝"，是將闊葉木粒、麩皮、米糠、 石膏粉、蛋白胨、硫酸鎂、二氧化鍺的草酸溶液混合作為固體培養(yǎng)基對(duì)紫靈芝 菌種進(jìn)行培養(yǎng)。因培養(yǎng)基中所用的二氧化鍺是無機(jī)鍺且與草酸按重量比1: 5 配比，其有效量只是培養(yǎng)基總重量的0.002 0.15%,故無機(jī)鍺轉(zhuǎn)化為靈芝中的有機(jī)鍺成分有限且不排除無機(jī)鍺殘留的靈芝中的可能性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述技術(shù)問題，提供一種以靈芝液態(tài) 發(fā)酵、可明顯提高有機(jī)鍺含量、安全可靠的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明的技術(shù)的技術(shù)解決方案是 一種富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特 征在于按以下步驟進(jìn)行 一種富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于按以下 步驟進(jìn)行-
a. 制備富鍺玉米浸泡液；
b. 在富鍺玉米浸泡液中加入碳源、氮源、中量元素、豆油制備培養(yǎng)基并滅 菌、冷卻；
C.在培養(yǎng)基中接種經(jīng)斜面培養(yǎng)的靈芝液體菌種，培養(yǎng)菌種至生成靈芝菌絲體。
可將C步驟得到的含有靈芝菌絲體的液態(tài)產(chǎn)品過濾，將所得到的靈芝菌絲 體在58 62"C烘干，粉碎成粉末狀。
所述的a步驟是以有機(jī)鍺含量為0.5 1.5mg/kg的富鍺玉米為原料，用水浸 泡、濃縮而得到有機(jī)鍺含量為0.4~0.6mg/L的濃縮液。
所述b步驟中碳源、氮源、中量元素、豆油的加入量是每100ml培養(yǎng)基含 碳源4 5g、氮源l 2g、中量元素0.05 0.1g、豆油0.1g、富鍺玉米浸泡液余量。
所述b步驟的滅菌、冷卻處理是將培養(yǎng)在121'C滅菌30分鐘，冷卻至28°C 以下。
所述c步驟是在培養(yǎng)基中加入總體積2 10%的靈芝液體菌種，在25~28°C 通氣攪拌培養(yǎng)60~100小時(shí)。
所述碳源為葡萄糖、蔗糖、飴糖、紅薯粉、玉米粉、谷類淀粉中的至少一種。
所述氮源為酵母粉、黃豆粉、玉米漿、蛋白胨、花生餅粉中的至少一種。 所述中量元素是磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉中的 至少一種。
本發(fā)明是以富鍺玉米的浸泡液為原料，與碳源、氮源、中量元素及豆油配 合制成靈芝培養(yǎng)液對(duì)靈芝菌種深層發(fā)酵而生產(chǎn)靈芝菌絲體?？蓪⒂袡C(jī)鍺元素(玉 米鍺)轉(zhuǎn)化為靈芝鍺生物大分子，明顯提高了靈芝中有機(jī)鍺含量(12.5g/kg)， 使靈芝在有效發(fā)揮靈芝多糖作用的前提下，還可以充分發(fā)揮有機(jī)鍺的作用。
具體實(shí)施例方式
a. 稱取鍺含量為0.5~1.5mg/kg的富鍺玉米，去除蟲蝕粒、病斑粒、破損粒、 生芽粒、生霉粒、熱損傷粒后，再用水進(jìn)行漂洗，除去表面灰塵，然后用水浸 泡約18 36小時(shí)，再將浸泡好的水打入濃縮罐進(jìn)行減壓濃縮，濃縮至鍺含量達(dá) 到0.4~0.6mg/L，即制備成富鍺玉米浸泡液。
0.5-1.5mg/kg的富鍺玉米可以通過外購，也可以在種植玉米時(shí)，施加的富 鍺氨基酸肥，收獲得到富鍺玉米。
富鍺氨基酸肥是按照以下步驟得到的。
在搪瓷反應(yīng)釜中加入豆粕及水，豆粕與水的質(zhì)量比為l: 1.5，浸泡至豆粕 吸水均勻；加入與豆粕質(zhì)量相等的工業(yè)濃硫酸，密封，使反應(yīng)釜罐內(nèi)溫度升溫 到110 12(TC，攪拌水解IO小時(shí)；在釜罐內(nèi)溫度降溫至8(TC時(shí)，加碳酸氫銨調(diào) PH至中性，繼續(xù)冷卻至常溫；按順序邊攪拌邊加入如下以豆粕量為基數(shù)的組 分1.6-1.7倍磷酸氫二氨、0.97 0.98倍尿素、0.012倍硫酸鋅、0.012倍硫酸 銅、0.016倍硼酸、0.016倍鉬酸銨、0.008倍的硝酸烯釷、0.0001 0.001倍二 氧化鍺、1.3倍氯化鉀、1.3 1.4倍菜籽餅粉、0.0012倍中性蛋白酶；干燥造粒 或靜置過夜取10%的上清液。
b. 取鍺含量為0.4~0.6mg/L富鍺玉米浸泡液，加入碳源、氮源、中量元素及 豆油，加入量是每100ml培養(yǎng)基含碳源4 5g、氮源l~2g、中量元素0.05 0.1g、 豆油O.lg，用富鍺玉米浸泡液定容。將配置好的培養(yǎng)液在12rC滅菌30分鐘， 冷卻至28"C以下。
碳源為葡萄糖、蔗糖、飴糖、紅薯粉、玉米粉、谷類淀粉中的至少一種。 氮源為酵母粉、黃豆粉、玉米漿、蛋白胨、花生餅粉中的至少一種。 中量元素是磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉中的至少 一種。
c. 在培養(yǎng)基中加入總體積2 10%經(jīng)斜面培養(yǎng)的靈芝液體菌種，在25~28°C 通氣攪拌培養(yǎng)60~100小時(shí)，培養(yǎng)菌種至生成靈芝菌絲體。
靈芝液體菌種采用CGMCC多孔菌科靈芝屬真菌靈芝(GWwo^rmflf/""V/ww 5.616)，斜面培養(yǎng)同現(xiàn)有技術(shù)。
d. 將c步驟得到的含有靈芝菌絲體的液態(tài)產(chǎn)品過濾，將所得到的靈芝菌絲 體在58 62'C烘干，用超微粉碎機(jī)粉碎成粉末狀，過100目篩，獲得富鍺靈芝 菌絲體產(chǎn)品。按照2005藥典中靈芝多糖的測(cè)試方法及GB/T5009.151-2003食品中鍺的 測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試結(jié)果
靈芝多糖 43g/kg。 靈芝鍺(以Ge計(jì)) 12.5g/kg。
權(quán)利要求
1.一種富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于按以下步驟進(jìn)行a.制備富鍺玉米浸泡液；b.在富鍺玉米浸泡液中加入碳源、氮源、中量元素、豆油制備培養(yǎng)基并滅菌、冷卻；c.在培養(yǎng)基中接種經(jīng)斜面培養(yǎng)的靈芝液體菌種，培養(yǎng)菌種至生成靈芝菌絲體。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于將c 步驟得到的含有靈芝菌絲體的液態(tài)產(chǎn)品過濾，將所得到的靈芝菌絲體在 58 62'C烘干，粉碎成粉末狀。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的 a步驟是以有機(jī)鍺含量為0.5 1.5mg/kg的富鍺玉米為原料，用水浸泡、濃縮而 得到有機(jī)鍺含量為0.4~0.6mg/L的濃縮液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于所述b 步驟中碳源、氮源、中量元素、豆油的加入量是每100ml培養(yǎng)基含碳源4 5g、 氮源l 2g、中量元素0.05 0.1g、豆油0.1g、富鍺玉米浸泡液余量。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于所述b 步驟的滅菌、冷卻處理是將培養(yǎng)在12rC滅菌30分鐘，冷卻至28。C以下。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于所 述c步驟是在培養(yǎng)基中加入總體積2~10%的靈芝液體菌種，在25 28'C通氣攪 拌培養(yǎng)60~100小時(shí)。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于所述碳 源為葡萄糖、蔗糖、飴糖、紅薯粉、玉米粉、谷類淀粉中的至少一種。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于所述氮源為酵母粉、黃豆粉、玉米漿、蛋白胨、花生餅粉中的至少一種。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于所述中 量元素是磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉中的至少一種。
全文摘要
本發(fā)明公開一種富鍺靈芝菌絲體的生產(chǎn)方法，其特征在于按以下步驟進(jìn)行制備富鍺玉米浸泡液；在富鍺玉米浸泡液中加入碳源、氮源、中量元素、豆油制備培養(yǎng)基并滅菌、冷卻；在培養(yǎng)基中接種經(jīng)斜面培養(yǎng)的靈芝液體菌種，培養(yǎng)菌種至生成靈芝菌絲體?？蓪⒂袡C(jī)鍺元素(玉米鍺)轉(zhuǎn)化為靈芝鍺生物大分子，明顯提高了靈芝中有機(jī)鍺含量，使靈芝在有效發(fā)揮靈芝多糖作用的前提下，還可以充分發(fā)揮有機(jī)鍺的作用。
文檔編號(hào)A01G1/04GK101558720SQ200910011338
公開日2009年10月21日 申請(qǐng)日期2009年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月29日
發(fā)明者平 楊, 譚新國 申請(qǐng)人:大連三禾生物有限公司