專利名稱：中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種食用菌菌根苗的人工培育方法，尤其是涉及中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法。
背景技術(shù)：
塊菌(T.ruffles)為子囊菌類塊菌目(Tuberales)塊菌科(Tuberaceae)塊菌屬(Tuber)，是一類與維管束植物形成共生關(guān)系，具有很高經(jīng)濟(jì)及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的地下名貴食用真菌。中國(guó)塊菌和印度塊菌為我國(guó)特產(chǎn)，主要分布于我國(guó)西南各省，出產(chǎn)季節(jié)為每年的10月-第2年2月，孢體中實(shí)，幼時(shí)白色至灰白色，成熟呈黑色，具有清晰的乳白色菌脈，食之味美，含有豐富的蛋白質(zhì)及多種維生素，尤其是維生素A、維生素B2含量極高。由于中國(guó)塊菌和印度塊菌的生長(zhǎng)必需與合適的宿主植物根系營(yíng)共生生活，否則將無(wú)法形成子囊果，這就意味著人工栽培塊菌離不開活體宿主植物，因而塊菌人工栽培比較困難，技術(shù)含量高，要實(shí)現(xiàn)塊菌的人工栽培必須首先突破菌根苗的培育技術(shù)。目前國(guó)外主要在黑孢塊菌和夏塊菌的菌根苗培育和人工栽培技術(shù)方面較為成熟，國(guó)內(nèi)雖然對(duì)我國(guó)特產(chǎn)的中國(guó)塊菌和印度塊菌在生理生態(tài)方面的研究較多，但至今卻未見(jiàn)有關(guān)對(duì)塊菌菌根苗合成培育技術(shù)的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的人工培育方法，以滿足人類日益增長(zhǎng)的高品質(zhì)的物質(zhì)生活的需求，具有廣闊的市場(chǎng)前景。
本發(fā)明是通過(guò)實(shí)施如下的技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的。
中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于包括如下的工藝步驟A、塊菌菌種的收集在塊菌成熟的季節(jié)收集成熟、個(gè)頭大、外型好、無(wú)損傷、香味相對(duì)較濃的中國(guó)塊菌和印度塊菌子實(shí)體，先用牙刷輕輕洗凈表面泥土，再在75％的酒精中浸泡3min對(duì)其表面滅菌，同時(shí)再在酒精燈火焰上快速灼燒后與121-126℃高溫高壓下滅菌2小時(shí)的河沙混合，并于3-5℃的溫度下冷藏保存?zhèn)溆谩?br> B、供試宿主植物種子的收集收集優(yōu)質(zhì)的云南松、華山松及板栗植物種子，云南松和華山松用水選去除空殼后晾干，裝在玻璃罐中常溫儲(chǔ)藏備用；板栗種子水選去除霉?fàn)€和不飽滿的種子，晾干表面水分，與濕度為25-35％的潔凈河沙按體積比種子∶河沙＝1∶2的比例混合，裝入紙箱中并置于5℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?br> C、宿主植物種子的處理將步驟B收集的種子用0.1％的高錳酸鉀液浸泡處理30min后，用自來(lái)水沖洗去表面殘留的高錳酸鉀溶液，然后再用清水浸泡1-4天，在這期間每天換一次清水。
D、宿主植物的培育將經(jīng)步驟C處理后的植物種子播入混合基質(zhì)中，用清水將基質(zhì)澆透后放置于25℃的恒溫室中進(jìn)行催芽，待80％以上的種子發(fā)芽后再移入溫度為10-35℃的大棚中進(jìn)行植株培育，同時(shí)將基質(zhì)的濕度保持在50-80％。
所述植物種子播入的混合基質(zhì)為蛭石與珍珠的混合物，其體積比為蛭石∶珍珠巖＝1∶1。
所述云南松或華山松種子經(jīng)培育發(fā)芽后2-3個(gè)月可以進(jìn)行接種。
所述板栗種子經(jīng)培育發(fā)芽后2個(gè)月可以進(jìn)行接種。
E、塊菌的接種選擇一張潔凈的不銹鋼工作臺(tái)，用75％的酒精將桌面擦干凈后，再將滅菌接種基質(zhì)倒在桌上或已用5％的甲酚皂液浸泡3小時(shí)的塑料筐中；選擇長(zhǎng)勢(shì)好，根系發(fā)達(dá)的宿主植株，用剪刀剪去主根，放在已滅菌處理過(guò)的容器中備用；選擇一只黑色的育苗杯，先在杯中裝入占杯體積1/3的滅菌土，再將植株放入杯中央，用小勺將配制好的塊菌菌劑撒在根上，最后加入滅菌接種基質(zhì)至距育苗杯邊緣0.5cm處。
所述滅菌接種基質(zhì)的制備方法為將腐殖土、蛭石、河沙按1∶1∶2的比列混合均勻后，在121-126℃下滅菌2小時(shí)即可。
所述塊菌菌劑的配制方法為先稱取一定量的塊菌，將其粉碎成粒徑小于1mm的粉末，再將上述制得的滅菌接種基質(zhì)用1mm的篩網(wǎng)過(guò)篩，然后按塊菌與基質(zhì)的質(zhì)量比為1∶9的比例混合均勻。
所述塊菌菌劑一般應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配，如果配制好的塊菌菌劑未用完，可暫時(shí)存放于3-5℃的冰箱中備用。
所述育苗杯的大小為10*15cm。
所述塊菌菌劑的接種量為0.5-2g/株。
F、接種菌根苗的培育將經(jīng)步驟E已接種過(guò)塊菌的植株放置于溫度為10-35℃的潔凈大棚中，每隔2-4天澆一次自來(lái)水，并使育苗基質(zhì)的濕度保持在50-80％，經(jīng)6個(gè)月的培育后即可形成塊菌菌根苗。
所述塊菌菌根苗的檢測(cè)結(jié)果如下采用正交抽樣檢測(cè)的方式，每個(gè)樹種重復(fù)檢測(cè)三次，統(tǒng)計(jì)塊菌菌根的合成情況和生長(zhǎng)情況，塊菌檢測(cè)結(jié)果顯示接種塊菌的菌根感染率最低為95％，最高可達(dá)100％，接種塊菌合成菌根后能明顯促進(jìn)植物的生長(zhǎng)。接種塊菌的菌根形態(tài)多為棒狀、二叉狀、多叉狀和珊瑚狀，菌根初期，端部呈白色或淺色，之后顏色逐漸變深呈淺肉色或淺棕色；在顯微鏡下可清晰看到表面有半透明的晶狀體的結(jié)構(gòu)，晶狀體不分叉無(wú)序地長(zhǎng)在菌根表面；菌根表層形成哈蒂氏網(wǎng)層的鞘細(xì)胞組織。
本發(fā)明培育方法清楚、簡(jiǎn)單，且成本低，接種塊菌的菌根感染率高，從而解除了野生中國(guó)塊菌和印度塊菌因大量采挖可能瀕臨滅絕的后患，同時(shí)還滿足了人類日益增長(zhǎng)的高品質(zhì)的物質(zhì)生活需求，具有廣闊的市場(chǎng)前景。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1一種中國(guó)塊菌的培育方法，其特征在于包括如下的工藝步驟A、塊菌菌種的收集在塊菌成熟的季節(jié)收集成熟、個(gè)頭大、外型好、無(wú)損傷、香味相對(duì)較濃的中國(guó)塊菌和印度塊菌子實(shí)體，先用牙刷輕輕洗凈表面泥土，再在75％的酒精中浸泡3min對(duì)其表面滅菌，同時(shí)再在酒精燈火焰上灼燒后與121℃下滅菌2小時(shí)的河沙混合，并于3-5℃的溫度下冷藏保存?zhèn)溆谩?br> B、供試宿主植物種子的收集收集優(yōu)質(zhì)的云南松種子用水選去除空殼后晾干，裝在玻璃罐中常溫儲(chǔ)藏備用。
C、宿主植物種子的處理將步驟B收集的種子用0.1％的高錳酸鉀液浸泡處理30min后，用自來(lái)水沖洗去表面殘留的高錳酸鉀溶液，然后再用清水浸泡3天，每天換一次清水。
D、宿主植物的培育將經(jīng)步驟C處理后的植物種子播入蛭石與珍珠(體積比1∶1)混合基質(zhì)中，用清水將基質(zhì)澆透后放置于25℃的恒溫室中進(jìn)行催芽，待80％以上的種子發(fā)芽后再移入溫度為10-35℃的大棚中進(jìn)行植株培育，同時(shí)將基質(zhì)的濕度保持在50-80％。
E、塊菌的接種用75％的酒精將不銹鋼桌面擦干凈后，再將滅菌接種基質(zhì)倒在桌上；選擇長(zhǎng)勢(shì)好，根系發(fā)達(dá)已發(fā)芽3個(gè)月的云南松植株，用剪刀剪去主根，放在已滅菌處理過(guò)的容器中備用；選擇一只黑色的育苗杯(10*15cm)，先在杯中裝入占杯體積1/3的滅菌土，再將植株放入杯中央，用小勺將配制好的塊菌菌劑按0.5g/株的接種量撒在根上，最后加入滅菌接種基質(zhì)至距育苗杯邊緣0.5cm處。
所述滅菌接種基質(zhì)的制備方法為將腐殖土、蛭石、河沙按1∶1∶2的比列混合均勻后，在121℃下滅菌2小時(shí)即可。
所述塊菌菌劑的配制方法為先稱取一定量的中國(guó)塊菌，將其粉碎成粒徑小于1mm的粉末，再將上述制得的滅菌接種基質(zhì)用1mm的篩網(wǎng)過(guò)篩，然后按塊菌與基質(zhì)的質(zhì)量比1∶9混合。
F、接種菌根苗的培育將經(jīng)步驟E已接種過(guò)塊菌的植株放置于溫度為35℃的潔凈大棚中，每隔2-4天澆一次自來(lái)水，并使育苗基質(zhì)的濕度保持在50-80％，經(jīng)6個(gè)月的培育后即可形成塊菌菌根苗。
所述中國(guó)塊菌菌根苗的檢測(cè)結(jié)果如下采用正交抽樣檢測(cè)的方式，每個(gè)樹種重復(fù)檢測(cè)三次，統(tǒng)計(jì)塊菌菌根的合成情況和生長(zhǎng)情況，塊菌檢測(cè)結(jié)果顯示接種塊菌的菌根感染率最低為95％，最高可達(dá)100％，接種塊菌合成菌根后能明顯促進(jìn)植物的生長(zhǎng)。接種塊菌的菌根形態(tài)多為棒狀、二叉狀、多叉狀和珊瑚狀，菌根初期，端部呈白色或淺色，之后顏色逐漸變深呈淺肉色或淺棕色；在顯微鏡下可清晰看到表面有半透明的晶狀體的結(jié)構(gòu)，晶狀體不分叉無(wú)序地長(zhǎng)在菌根表面；菌根表層形成哈蒂氏網(wǎng)層的鞘細(xì)胞組織。
實(shí)施例2一種印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于包括如下的工藝步驟A、塊菌菌種的收集(同實(shí)施例1)B、供試宿主植物種子的收集收集優(yōu)質(zhì)的華山松種子用水選去除空殼后，晾干裝在玻璃罐中常溫儲(chǔ)藏備用。
C、宿主植物種子的處理(同實(shí)施例1)D、宿主植物的培育將經(jīng)步驟C處理后的華山松植物種子播入蛭石與珍珠(體積比1∶1)的混合基質(zhì)中，用清水將基質(zhì)澆透后放置于25℃的恒溫室中進(jìn)行催芽，待80％以上的種子發(fā)芽后再移入溫度為10-35℃的大棚中進(jìn)行植株培育，同時(shí)將基質(zhì)的濕度保持在50-60％E、塊菌的接種用75％的酒精將不銹鋼桌面擦干凈后，再將滅菌接種基質(zhì)倒在已用5％的甲酚皂液浸泡3小時(shí)的塑料筐中；選擇長(zhǎng)勢(shì)好，根系發(fā)達(dá)已發(fā)芽2個(gè)月的華山松植株，用剪刀剪去主根，放在已滅菌處理過(guò)的容器中備用；選擇一只黑色的育苗杯(10*15cm)，先在杯中裝入占杯體積1/3的滅菌土，再將植株放入杯中央，用小勺將配制好的塊菌菌劑按1g/株的接種量撒在根上，最后加入滅菌接種基質(zhì)至距育苗杯邊緣0.5cm處。
所述滅菌接種基質(zhì)的制備方法為將腐殖土、蛭石、河沙按1∶1∶2的比列混合均勻后，在125℃下滅菌2小時(shí)即可。
所述塊菌菌劑的配制方法為先稱取一定量的印度塊菌，將其粉碎成粒徑小于1mm的粉末，再將上述制得的滅菌接種基質(zhì)用1mm的篩網(wǎng)過(guò)篩，然后按塊菌與基質(zhì)的質(zhì)量比1∶9混合。
F、接種菌根苗的培育將經(jīng)步驟E已接種過(guò)塊菌的植株放置于溫度為10-35℃的潔凈大棚中，每隔2-4天澆一次自來(lái)水，并使育苗基質(zhì)的濕度保持在50-60％，經(jīng)6個(gè)月的培育后即可形成塊菌菌根苗。
所述印度塊菌菌根苗的檢測(cè)結(jié)果同實(shí)施例1。
實(shí)施例3一種中國(guó)塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于包括如下的工藝步驟A、塊菌菌種的收集(同實(shí)施例1)B、供試宿主植物種子的收集收集優(yōu)質(zhì)的板栗植物種子，水選去除霉?fàn)€和不飽滿的種子，晾干表面水分，與濕度為30％的潔凈河沙按體積比種子∶河沙＝1∶2的比例混合，裝入紙箱中并置于5℃的冰箱中保存?zhèn)溆谩?br> C、宿主植物種子的處理(同實(shí)施例1)D、宿主植物的培育將經(jīng)步驟C處理后的板栗植物種子播入蛭石與珍珠(體積比1∶1)的混合基質(zhì)中，用清水將基質(zhì)澆透后放置于25℃的恒溫室中進(jìn)行催芽，待80％以上的種子發(fā)芽后再移入溫度為10-35℃的大棚中進(jìn)行植株培育，同時(shí)將基質(zhì)的濕度保持在60-80％。
E、塊菌的接種用75％的酒精將不銹鋼桌面擦干凈后，再將滅菌接種基質(zhì)倒在桌上；選擇長(zhǎng)勢(shì)好，根系發(fā)達(dá)已發(fā)芽2個(gè)月的板栗植株，用剪刀剪去主根，放在已滅菌處理過(guò)的容器中備用；選擇一只黑色的育苗杯(10*15cm)，先在杯中裝入占杯體積1/3的滅菌土，再將植株放入杯中央，用小勺將配制好的塊菌菌劑按2g/株的接種量撒在根上，最后加入滅菌接種基質(zhì)至距育苗杯邊緣0.5cm處。
所述滅菌接種基質(zhì)的制備方法為將腐殖土、蛭石、河沙按1∶1∶2的比列混合均勻后，在126℃下滅菌2小時(shí)即可。
所述塊菌菌劑的配制方法為先稱取一定量的塊菌，將其粉碎成粒徑小于1mm的粉末，再將上述制得的滅菌接種基質(zhì)用1mm的篩網(wǎng)過(guò)篩，然后按塊菌與基質(zhì)的質(zhì)量比1∶9混合。
F、接種菌根苗的培育(同實(shí)施例1)所述中國(guó)塊菌菌根苗的檢測(cè)結(jié)果同實(shí)施例1。
權(quán)利要求
1.中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于包括如下工藝步驟A、塊菌菌種的收集在塊菌成熟的季節(jié)收集成熟、個(gè)頭大、外型好、無(wú)損傷、香味相對(duì)較濃的中國(guó)塊菌和印度塊菌子實(shí)體，先用牙刷輕輕洗凈表面泥土，再在75％的酒精中浸泡3min對(duì)其表面滅菌，同時(shí)再在酒精燈火焰上快速灼燒后與121-126℃下滅菌2小時(shí)的河沙混合，并于3-5℃的溫度下冷藏保存?zhèn)溆?；B、供試宿主植物種子的收集收集優(yōu)質(zhì)的云南松、華山松及板栗植物種子，云南松和華山松用水選去除空殼后晾干，裝在玻璃罐中常溫儲(chǔ)藏備用；板栗種子水選去除霉?fàn)€和不飽滿的種子，晾干表面水分，與濕度為25-35％的潔凈河沙按體積比種子∶河沙＝1∶2的比例混合，裝入紙箱中并置于5℃的冰箱中保存?zhèn)溆?。C、宿主植物種子的處理將步驟B收集的種子水選去出空殼，用0.1％的高錳酸鉀液浸泡處理30min后，用自來(lái)水沖洗去表面殘留的高錳酸鉀溶液，然后再用清水浸泡1-4天，在這期間每天換一次清水；D、宿主植物的培育將經(jīng)步驟C處理后的植物種子播入混合基質(zhì)中，用清水將基質(zhì)澆透后放置于25℃的恒溫室中進(jìn)行催芽，待80％以上的種子發(fā)芽后再移入溫度為10-35℃的大棚中進(jìn)行植株培育，同時(shí)將基質(zhì)的濕度保持在50-80％。E、塊菌的接種選擇一張潔凈的工作臺(tái)，用75％的酒精將桌面擦干凈后，再將滅菌接種基質(zhì)倒在桌上或已用5％的甲酚皂液浸泡3小時(shí)的塑料筐中；選擇長(zhǎng)勢(shì)好，根系發(fā)達(dá)的宿主植株，用剪刀剪去主根，放在已滅菌處理過(guò)的容器中備用；選擇一只黑色的育苗杯，先在杯中裝入占杯體積1/3的滅菌土，再將植株放入杯中央，用小勺將配制好的塊菌菌劑撒在根上，最后加入滅菌接種基質(zhì)至距育苗杯邊緣0.5cm處；F、接種菌根苗的培育將經(jīng)步驟E已接種過(guò)塊菌的植株放置于溫度為10-35℃的潔凈大棚中，每隔2-4天澆一次自來(lái)水，并使育苗基質(zhì)的濕度保持在50-80％，經(jīng)6個(gè)月的培育后即長(zhǎng)出塊菌菌根苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于步驟D中所述植物種子播入的混合基質(zhì)為蛭石與珍珠的混合物，其體積比為蛭石∶珍珠巖＝1∶1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于所述云南松或華山松種子經(jīng)培育發(fā)芽后2-3個(gè)月進(jìn)行接種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于所述板栗種子經(jīng)培育發(fā)芽后2個(gè)月進(jìn)行接種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于步驟E中所述滅菌接種基質(zhì)的制備方法為將腐殖土、蛭石、河沙按1∶1∶2的比例混合均勻后，在121-126℃下滅菌2小時(shí)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于步驟E中所述塊菌菌劑的配制方法為先稱取一定量的塊菌，將其粉碎成粒徑小于1mm的粉末，再將滅菌接種基質(zhì)用1mm的篩網(wǎng)過(guò)篩，然后按塊菌與基質(zhì)的質(zhì)量比為1∶9的比例混合均勻。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于步驟E中所述塊菌菌劑的接種量為0.5-2g/株。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗的培育方法，其特征在于植株經(jīng)接種塊菌后所長(zhǎng)出的菌根的形態(tài)為棒狀、二叉狀、多叉狀及珊瑚狀。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種中國(guó)塊菌和印度塊菌菌根苗培育方法，工藝步驟包括塊菌菌種的收集、供試宿主植物種子云南松、華山松和板栗的收集、宿主植物種子的處理、宿主植物的培育、塊菌的接種、接種菌根苗的培育及檢測(cè)。本發(fā)明培育方法清楚、簡(jiǎn)單，且成本低，接種塊菌的菌根感染率，從而解除了野生中國(guó)塊菌和印度塊菌因大量采挖可能瀕臨滅絕的后患，同時(shí)還滿足了人類日益增長(zhǎng)的高品質(zhì)的物質(zhì)生活需求，具有廣闊的市場(chǎng)前景。
文檔編號(hào)A01G31/00GK101061781SQ20071004894
公開日2007年10月31日 申請(qǐng)日期2007年4月23日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月23日
發(fā)明者唐平, 楊榮喜, 柳成益, 蔣祺, 蘭海, 孫克燕, 顧國(guó)棟, 安杰, 張奎 申請(qǐng)人:攀枝花市農(nóng)林科學(xué)研究院