一種含有絲裂霉素的抗結腸癌藥物組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，具體而言，涉及一種抗腫瘤藥物，尤其涉及一種含有絲 裂霉素的抗結腸癌藥物組合物。
【背景技術】
[0002] 目前，腫瘤是當前嚴重影響人類健康、威脅人類生命的主要疾病之一。腫瘤與心腦 血管疾病和意外事故一起，構成當今世界所有國家三大死亡原因。因此，世界衛(wèi)生組織和各 國政府衛(wèi)生部門都把攻克腫瘤列為一項首要任務。世界上治療腫瘤的方法主要有三種，一 是采用手術切除法，切除病變組織，防止腫瘤細胞擴散；而是采用化療或放療，以殺死腫瘤 細胞。采用手術切除的方法增加了病人的痛苦，傷其元氣，費用巨大。用放療的方法，在殺 死腫瘤細胞的同時，也傷及紅細胞和白細胞，病人苦不堪言。
[0003] 結腸癌是最常見的癌癥之一，在我國的發(fā)病率和死亡率成逐年上升趨勢，其發(fā)病 機制涉及多種分子生物學和生物化學事件。因此，聯(lián)合用藥或具有多種途徑作用的藥物應 具有良好的臨床療效。以奧沙利鉑為基礎的聯(lián)合藥物在結腸癌的聯(lián)合化療方案中表現(xiàn)出溫 和但有效的抗腫瘤作用（Kuebler J P，Wieand H S, O'Connell M J，et al.Oxaliplatin combined with weekly bolus fluorouracil and leucovorin as surgical adjuvant chemotherapy for stage II and III colon cancer:Results from NSABP C-〇7[J]. J Clin Oncol，2007, 25(16) :2198-2204.)。
[0004] 絲裂霉素是臨床常用的抗腫瘤藥物，廣泛用于直腸癌、乳腺癌、肝癌、頭頸部腫瘤、 胰腺癌等腫瘤。常見的副作用表現(xiàn)為胃腸道反應、骨髓抑制癥狀及腎臟、肝臟損害等。臨床 上為了達到明顯的抗腫瘤效果，常為大劑量用藥，毒副作用多，影響了患者用藥的依存性。 目前，尚沒有絲裂霉素聯(lián)用脫氫乙酸鈉抗腫瘤的文獻報道，更沒有二者聯(lián)用治療結腸癌的 文獻報道。

【發(fā)明內容】

[0005] 為了發(fā)揮絲裂霉素的抗腫瘤功效，同時降低其毒副作用，本發(fā)明人創(chuàng)造性地降低 絲裂霉素的用量，并將其與脫氫乙酸鈉聯(lián)合應用，意外發(fā)現(xiàn)二者用藥后不僅具有協(xié)同增效 的抗腫瘤效果，而且脫氫乙酸鈉具有減輕絲裂霉素所致毒副作用的功效。
[0006] 基于此研究，本發(fā)明的目的在于提供一種含有絲裂霉素的抗結腸癌藥物組合物。 具體地，本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的：
[0007] -種含有絲裂霉素的抗結腸癌藥物組合物，其中所述的藥物組合物中活性成分由 絲裂霉素和脫氫乙酸鈉組成。
[0008] 優(yōu)選地，如上所述的抗結腸癌藥物組合物，其中所述的活性成分中絲裂霉素和脫 氫乙酸鈉的重量用量比為1 :6_30。
[0009] 進一步優(yōu)選地，如上所述的抗結腸癌藥物組合物，其中所述的活性成分中絲裂霉 素和脫氫乙酸鈉的重量用量比為1 :12-15。
[0010] 本發(fā)明所述的抗結腸癌藥物組合物通過注射給藥后即可發(fā)揮藥效，因此將其制備 為注射劑，所述的注射劑包括注射液、凍干粉針劑。
[0011] 在多個動物試驗中，本發(fā)明人選擇人結腸癌LoVo細胞株在裸鼠皮下接種，制備裸 鼠移植瘤模型，建模成功率為100%。給藥后結果表明，與模型組相比，絲裂霉素單獨給藥組 和聯(lián)合給藥組顯示不同程度的腫瘤抑制作用，而脫氫乙酸鈉單獨給藥并沒有顯示出明顯的 抑瘤作用。然而，脫氫乙酸鈉與絲裂霉素的聯(lián)合給藥組對裸鼠移植瘤的生長具有非常顯著 的抑制作用，抑瘤率達到了 46. 09 %，顯著高于絲裂霉素組。
[0012] 另外，試驗結果還顯示，脫氫乙酸鈉與絲裂霉素聯(lián)合用藥后可誘導細胞凋亡。光鏡 觀察可見，絲裂霉素單獨給藥組和聯(lián)合給藥組裸鼠腫瘤細胞水變性、核固縮、溶解及細胞崩 解均較模型組顯著，提示氫乙酸鈉與絲裂霉素可通過誘導細胞凋亡和壞死發(fā)揮體內抗腫瘤 作用。
[0013] 綜上，氫乙酸鈉能協(xié)同絲裂霉素抑制LoVo細胞裸鼠移植瘤的生長，顯著增強對腫 瘤的抑制作用。因此，本發(fā)明還提供一種制藥用途，即：絲裂霉素和脫氫乙酸鈉組成的活性 成分在制備抗腫瘤（結腸癌）的藥物中的應用。
[0014] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明涉及的藥物組合物具有如下優(yōu)點和顯著進步：絲裂霉素 和脫氫乙酸鈉聯(lián)用后具有協(xié)同抗腫瘤效果，以及降低藥物毒副作用的效果，同時，絲裂霉素 用量僅僅為常規(guī)用量的四分之一，因此費用、副作用和不良反應率也較低。
【具體實施方式】
[0015] 以下是本發(fā)明的具體實施例，對本發(fā)明的技術方案做進一步作描述，但是本發(fā)明 的保護范圍并不限于該實施例。
[0016] 實施例1絲裂霉素聯(lián)合脫氫乙酸鈉結腸癌荷瘤小鼠的影響試驗
[0017] 人結腸癌細胞株LoVo置于含10% FBS的RPMI 1640培養(yǎng)液中，37°C、5% C02、飽和 濕度條件下培養(yǎng)，每2~3天更換1次培養(yǎng)液，無菌條件下收集對數(shù)生長期細胞，調整細胞 密度為5X 106/mL得細胞懸液。裸鼠皮膚消毒后，用lmL注射器于每只裸鼠右腋皮下接種 O.lmL的細胞懸液。接種后繼續(xù)在SPF級條件下的層流架中飼養(yǎng)。每2~3天用游標卡尺 測量皮下腫瘤直徑，待腫瘤平均直徑為5~6_時，選擇無出血、無壞死、無感染的裸鼠進行 實驗。
[0018]模型制備成功后，將荷瘤裸鼠隨機分為四組，每組10只，模型組每次給予生理鹽 水0. lmL，脫氫乙酸鈉（DHA)組每次腹腔注射脫氫乙酸鈉12mg/kg(0. lmL)，絲裂霉素（MMC) 組每次腹腔注射絲裂霉素lmg/kg(0. lmL)，聯(lián)合給藥（MMC+DHA)組每次腹腔注射脫氫乙酸 鈉6mg/kg(0. lmL) +絲裂霉素0. 5mg/kg(0. lmL)，連續(xù)給藥10d，l次/d。實驗期間所有裸鼠 均自由采食、飲水。
[0019]每次給藥前稱裸鼠體質量，每2天用游標卡尺測量1次瘤塊的長徑（a)和短徑 (b)，計算腫瘤體積（V)。V = l/2XaXb2;實驗結束后，頸椎脫臼處死裸鼠，無菌條件下立即 完整剝離瘤塊，稱瘤質量，計算各組平均瘤質量和抑瘤率。
[0020] 抑瘤率=(對照組平均瘤質量一給藥組平均瘤質量）/對照組平均瘤質量
[0021] 根據(jù)表1的試驗統(tǒng)計結果可以看出，與模型組相比，絲裂霉素單獨給藥組和聯(lián)合 給藥組顯示不同程度的腫瘤抑制作用，而脫氫乙酸鈉單獨給藥并沒有顯示出明顯的抑瘤作 用。然而，脫氫乙酸鈉與絲裂霉素的聯(lián)合給藥組的抑瘤率達到了 46. 09%，顯著高于絲裂霉 素組。
[0022] 表1各組藥物對LoVo裸鼠移植瘤的影響比較
[0023]
[0024]與模型對照組比較，*P < 0. 05，**P < 0. 01 ;與 MMC 組比較，TP < 0. 05，ttP < 0? 01 ;與 DHA 組比較，*P < 0? 05，"P < 0? 01。
[0025] 另外，無菌條件下迅速剝離出腫瘤組織，肉眼觀察后迅速將一部分腫瘤組織 (0.5cm 3)置于中性緩沖福爾馬林溶液中固定，石蠟包埋，切片，HE染色，光學顯微鏡下觀察 (X400)組織病理學改變。HE染色并光鏡下可見，模型組和脫氫乙酸鈉組裸鼠腫瘤細胞排 列無規(guī)則，異型明顯，以圓形或橢圓形細胞為主，大小不一，細胞排列緊密，核染色質深，胞 核較大，核分裂相多。絲裂霉素及聯(lián)合給藥組裸鼠腫瘤細胞大小均勻，出現(xiàn)水變性，胞漿透 亮狀改變；核固縮、溶解，細胞崩解，部分腫瘤組織退變、壞死嚴重，核分裂相減少，可見一些 散在的腫瘤細胞凋亡，形成凋亡小體。
【主權項】
1. 一種含有絲裂霉素的抗結腸癌藥物組合物，其特征在于：所述的藥物組合物中活性 成分由絲裂霉素和脫氫乙酸鈉組成。2. 根據(jù)權利要求1所述的抗結腸癌藥物組合物，其特征在于：所述的活性成分中絲裂 霉素和脫氫乙酸鈉的重量用量比為1 :6_30。3. 根據(jù)權利要求2所述的抗結腸癌藥物組合物，其特征在于：所述的活性成分中絲裂 霉素和脫氫乙酸鈉的重量用量比為1 :12_15。4. 根據(jù)權利要求1-3任一項所述的抗結腸癌藥物組合物，其特征在于：所述的藥物組 合物為注射劑，所述的注射劑包括注射液、凍干粉針劑。5. 絲裂霉素和脫氫乙酸鈉組成的活性成分在制備抗結腸癌藥物中的應用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種含有絲裂霉素的抗結腸癌藥物組合物，該藥物組合物中活性成分由絲裂霉素和脫氫乙酸鈉組成。絲裂霉素和脫氫乙酸鈉聯(lián)用后具有協(xié)同抗腫瘤效果，以及降低藥物毒副作用的效果，可開發(fā)成抗結腸癌的藥物。
【IPC分類】A61P35/00, A61K31/366, A61K31/407
【公開號】CN105168204
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請人】江志鑫
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年9月6日