水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測試劑盒及制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種可消除試劑空白影響的水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測試劑盒，為此，本發(fā)明還提供了該試劑盒的制備方法。本發(fā)明試劑盒在pH5.0醋酸-醋酸鈉緩沖液中，水中的亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸和鹽酸萘乙二胺發(fā)生反應(yīng)生成紅色配合物，此紅色配合物的顏色深淺與亞硝酸鹽濃度成正比，將扣除試劑空白的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡顏色與空白管顏色疊加后與測試管對比，得出待測水樣中亞硝酸鹽濃度，特別適合水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測。
【專利說明】
水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測試劑盒及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及水質(zhì)檢測領(lǐng)域，尤其涉及一種水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測試劑盒及制 備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 亞硝酸鹽廣泛地存在于自然界中，尤其是在氣態(tài)水、地表水和地下水中W及動植 物體與食品內(nèi)。亞硝酸鹽現(xiàn)已被公認(rèn)為我們?nèi)粘Ｉ铒嬎械囊豁椫饕廴疚镏笜?biāo)，該指 標(biāo)一定程度上反映了水中受到含氮類有機(jī)物污染的程度。該物質(zhì)一旦進(jìn)入人體后將會引發(fā) 高鐵血紅蛋白癥，出現(xiàn)常見的組織缺氧癥狀，還可W與仲胺類物質(zhì)結(jié)合成致癌物質(zhì)，嚴(yán)重地 影響和威脅人類的身體健康?；趤喯跛猁}的危險性廣泛存在，國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)明確規(guī) 定了生活飲用水中N02《1. Omg/L。長期攝入亞硝酸鹽濃度高的飲用水，亞硝酸鹽會與人體 蛋白質(zhì)結(jié)合形成具有強(qiáng)致癌性的亞硝胺，送種物質(zhì)會引起食道癌、胃癌、肝癌和大腸癌等。
[0003] 水中亞硝酸鹽的檢測多采用紫外分光光度法、可見光分光光度法、化學(xué)發(fā)光法、離 子色譜法等，送些方法均需將水樣帶回?？诘膶嶒炇?，由專業(yè)的操作技術(shù)人員化驗完成，大 部分方法還需要價格高昂的大型專用儀器，不能滿足快速、簡便的現(xiàn)場檢測要求，在一些特 殊時間和地點還存在采樣不及時、不能客觀反映采樣現(xiàn)場水體質(zhì)量的情況。
[0004] 目前市場上現(xiàn)有的亞硝酸鹽現(xiàn)場檢測試劑多為W比色法為基礎(chǔ)的干粉型檢測試 劑，該檢測試劑在進(jìn)行測量時取一定量的水樣與干粉型檢測試劑混合、溶解、反應(yīng)一段時間 后產(chǎn)生特定的顏色，直接與標(biāo)準(zhǔn)色卡對照得出水樣待測物質(zhì)的濃度。此類方法快速、方便、 公眾參與度高，但測量時無法消除試劑空白的變化對測定結(jié)果的影響，只有在試劑空白恒 定不變時才具有較高的準(zhǔn)確性。但是，實際檢測發(fā)現(xiàn)，無論是液體型還是干粉型的檢測試 劑，在存儲過程中都不可避免的存在試劑空白逐漸變大或變小的情況。此外，使用干粉型的 檢測試劑進(jìn)行水樣檢測時，需要先用待測水樣把檢測試劑充分溶解，再與水樣中的具體污 染物進(jìn)行反應(yīng)產(chǎn)生特定顏色。由于不同季節(jié)、不同區(qū)域采集的水樣溫度不盡相同，溶解干粉 型檢測試劑時所需時間也不盡相同，整個檢測過程所需時間難W有效控制，也對檢測結(jié)果 的準(zhǔn)確性造成不利影響。
[0005] 因此，需求一種使用液體型檢測試劑、可消除試劑空白對檢測結(jié)果影響、使用標(biāo)準(zhǔn) 色卡直接目視比色定量的水中亞硝酸鹽的檢測試劑盒，對于實現(xiàn)水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢 測顯得尤為重要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是要提供一種可消除試劑空白影響的水中亞硝酸鹽 現(xiàn)場快速檢測盒，為此，本發(fā)明還要提供一種該試劑盒的制備方法。
[0007] 本發(fā)明試劑盒的原理是；在抑5. 0醋酸-醋酸鋼緩沖液中，水中的亞硝酸鹽與對 氨基苯礙酸和鹽酸蔡己二胺發(fā)生反應(yīng)生成紅色配合物，此紅色配合物的顏色深淺與亞硝酸 鹽濃度成正比，將扣除試劑空白的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡顏色與空白管顏色疊加后與測試管對 比，得出待測水樣中亞硝酸鹽濃度。
[0008] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：
[0009] 用于水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測的試劑盒，它的組成為：
[0010] 1、液體型亞硝酸鹽檢測試劑；80mmol/L P冊.0醋酸-醋酸鋼緩沖液，含有2-5g/L 對氨基苯礙酸、0. 2-0. 5g/L鹽酸蔡己二胺、0. 1-0. 3ml/L乳化劑OP、10-20ml/L己二醇；
[001U 2、亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡：由扣除試劑空白、濃度分別為0. 05mg/L、0. lOmg/L、 0. 20mg/L、0. 30mg/L、0. 40mg/L、0. 50mg/L的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液反應(yīng)所產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)色組成。
[0012] 上述液體型亞硝酸鹽檢測試劑的制備方法為；稱取2-5g對氨基苯礙酸、0. 2-0. 5g 鹽酸蔡己二胺，加800ml 80mmol/L P冊.0醋酸-醋酸鋼緩沖液攬拌溶解，再加入0. 1-0. 3ml 乳化劑0P、10-20ml己二醇，攬拌溶解后用80mmol/L P冊.0醋酸-醋酸鋼緩沖液定容至 1000 ml。
[0013] 上述亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡的制備方法為：精密稱取0. 20g優(yōu)級純亞硝酸鋼，加去離 子水溶解并定容至1000 ml,得到濃度為200mg/L亞硝酸鹽（W亞硝酸鋼計）儲備液，再用去 離子水將亞硝酸鹽儲備液稀釋成濃度為0. 05mg/L、0. 10mg/L、0. 20mg/L、0. 30mg/L、0. 40mg/ L、0. 50mg/L的亞硝酸鹽（W亞硝酸鋼計）標(biāo)準(zhǔn)溶液；取7根IOml玻璃比色管，設(shè)置第I根 比色管為空白管、第2-7根比色管為標(biāo)準(zhǔn)管，分別在空白管和標(biāo)準(zhǔn)管中加入IOml去離子水 和IOml亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入0. 2ml液體型亞硝酸鹽檢測試劑，5-4(TC反應(yīng)5-15分 鐘；由比色管底部向上拍取各管反應(yīng)所產(chǎn)生的顏色，用地Otoshop 7. 0作圖軟件將各標(biāo)準(zhǔn) 管顏色扣除空白管顏色后，將所得的顏色及對應(yīng)的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度打印在厚度為 l-2mm的無色透明PVC塑料板上，得到扣除試劑空白后的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡。
[0014] 本發(fā)明的積極效果如下：
[0015] 具有方法簡單、準(zhǔn)確性高、易于操作的優(yōu)點；使用液體型亞硝酸鹽檢測試劑進(jìn)行檢 巧||，可有效控制整個檢測過程所需時間；通過將空白管顏色疊加在標(biāo)準(zhǔn)色卡上再與樣品管 進(jìn)行比色對照的方法，可有效消除試劑空白對檢測結(jié)果的影響，特別適合水中亞硝酸鹽現(xiàn) 場快速檢測。
[0016] 本發(fā)明的檢測試劑盒與現(xiàn)有的采用標(biāo)準(zhǔn)色卡直接比色的亞硝酸鹽檢測試劑盒相 比較，結(jié)果見表1。
[0017] 表 1
[0018]
[0019]

【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，W下所述，僅是對本發(fā)明的較佳實施 例而已，并非對本發(fā)明做其他形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述掲示 的技術(shù)內(nèi)容加 W變更為同等變化的等效實施例。凡是未脫離本發(fā)明方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明 的技術(shù)實質(zhì)對W下實施例所做的任何簡單修改或等同變化，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。 [00川 實施例1
[0022] -種水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測試劑盒，本試劑盒是由W下物質(zhì)組成的：
[0023] 液體型亞硝酸鹽檢測試劑1瓶（IOml)
[0024] 亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡 1張
[00巧]本試劑盒的制備方法是通過W下步驟實現(xiàn)的：
[0026] 1、液體型亞硝酸鹽檢測試劑的制備方法：
[0027] (1)、稱取3. 5g對氨基苯礙酸、0. 35g鹽酸蔡己二胺，加800ml80mmol/L P冊.0醋 酸-醋酸鋼緩沖液攬拌溶解；
[002引 似、加入0. 2ml乳化劑0P、15ml己二醇，攬拌溶解；
[0029] (3)、用SOmmol/L抑5. 0醋酸-醋酸鋼緩沖液定容至1000ml。
[0030] 2、亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡的制備方法：
[0031] (1)、精密稱取0.20g優(yōu)級純亞硝酸鋼，加去離子水溶解并定容至1000 ml,得到濃 度為200mg/L亞硝酸鹽（W亞硝酸鋼計）儲備液，再用去離子水將亞硝酸鹽儲備液稀釋成 濃度為 0. 〇5mg/L、0. 10mg/L、0. 20mg/L、0. 30mg/L、0. 40mg/L、0. 50mg/L 的亞硝酸鹽（W亞硝 酸鋼計）標(biāo)準(zhǔn)溶液；
[003引 似、取7根IOml玻璃比色管，設(shè)置第1根比色管為空白管、第2-7根比色管為標(biāo)準(zhǔn) 管，分別在空白管和標(biāo)準(zhǔn)管中加入IOml去離子水和IOml亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入0. 2ml 液體型亞硝酸鹽檢測試劑，在2(TC反應(yīng)10分鐘；
[0033] (3)、由比色管底部向上拍取各管反應(yīng)所產(chǎn)生的顏色，用地Otoshop 7. 0作圖軟件 將各標(biāo)準(zhǔn)管顏色扣除空白管顏色后，將所得的顏色及對應(yīng)的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度打印 在厚度為1mm的無色透明PVC塑料板上，得到扣除試劑空白后的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡。
[0034] 檢測方法：
[003引取2根IOml玻璃比色管，設(shè)置第1根比色管為空白管、第2根比色管為樣品管，分 別在空白管和樣品管中加入IOml去離子水和IOml待測水樣，再加入液體型亞硝酸鹽檢測 試劑0. 2ml，在2(TC反應(yīng)10分鐘；將標(biāo)準(zhǔn)色卡置于空白管底部，由比色管底部向上觀察空白 管與標(biāo)準(zhǔn)色卡疊加后的顏色，并與樣品管顏色對照，當(dāng)兩者顏色一致時，在10分鐘內(nèi)讀取 標(biāo)準(zhǔn)色卡所對應(yīng)的亞硝酸鹽濃度，得出水樣中亞硝酸鹽濃度。
[003引 實施例2
[0037] 為了進(jìn)一步證明本發(fā)明的創(chuàng)造性，本發(fā)明做了如下對比試驗，考察試劑空白的變 化對測定結(jié)果準(zhǔn)確性的影響。按本法實施例1所述的水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測試劑盒為 測試組，W不扣除試劑空白、采用標(biāo)準(zhǔn)色卡直接比色的檢測試劑盒為對照組，將兩組試劑盒 的檢測試劑分別置4°C冰箱和37水浴儲存7天，并對同一份已經(jīng)用鹽酸蔡己二胺分光光度 法測定亞硝酸鹽濃度為0. lOmg/L的水樣進(jìn)行測定，同時用去離子水代替水樣進(jìn)行試劑空 白測試，用721分光光度計記錄試劑空白值，測試時比色皿光徑為1cm，測試波長為550nm， 參比溶液為去離子水，結(jié)果見表2。
[0038] 表 2
[0039]
[0040] 從表2可W看出，在相同的實驗條件下，隨著試劑空白的逐漸增大，測試組的測定 結(jié)果保持不變，但對照組的測定結(jié)果明顯變大，表明本發(fā)明所述的方法可有效去除試劑空 白的變化對亞硝酸鹽測試結(jié)果的影響。
[0041] 盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可W 理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可W對送些實施例進(jìn)行多種變化、修改、替換 和變型，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。
【主權(quán)項】
1. 用于水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測的試劑盒，其特征在于：它的組成為： (1) 、液體型亞硝酸鹽檢測試劑：80mmol/L pH5. 0醋酸-醋酸鈉緩沖液，含有2-5g/L對 氨基苯磺酸、0. 2-0. 5g/L鹽酸萘乙二胺、0. 1-0. 3ml/L乳化劑OP、10-20ml/L乙二醇； (2) 、亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡：由扣除試劑空白、濃度分別為0· 05mg/L、0. 10mg/L、0. 20mg/ L、0. 30mg/L、0. 40mg/L、0. 50mg/L的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液反應(yīng)所產(chǎn)生的標(biāo)準(zhǔn)色組成。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測的試劑盒的制備方法，其特 征在于：液體型亞硝酸鹽檢測試劑的制備方法為：稱取2-5g對氨基苯磺酸、0. 2-0. 5g鹽酸 萘乙二胺，加800ml 80mmol/L pH5.0醋酸-醋酸鈉緩沖液攪拌溶解，再加入0. 1-0. 3ml乳化 劑OP、10-20ml乙二醇，攪拌溶解后用80mmol/L pH5. 0醋酸-醋酸鈉緩沖液定容至1000ml。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于水中亞硝酸鹽現(xiàn)場快速檢測的試劑盒的制備方法，其 特征在于：亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡的制備方法為：精密稱取0. 20g優(yōu)級純亞硝酸鈉，加去離子水 溶解并定容至l〇〇〇ml，得到濃度為200mg/L亞硝酸鹽（以亞硝酸鈉計）儲備液，再用去離 子水將亞硝酸鹽儲備液稀釋成濃度為0· 05mg/L、0. 10mg/L、0. 20mg/L、0. 30mg/L、0. 40mg/L、 0. 50mg/L的亞硝酸鹽（以亞硝酸鈉計）標(biāo)準(zhǔn)溶液；取7根10ml玻璃比色管，設(shè)置第1根 比色管為空白管、第2-7根比色管為標(biāo)準(zhǔn)管，分別在空白管和標(biāo)準(zhǔn)管中加入10ml去離子水 和10ml亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入0. 2ml液體型亞硝酸鹽檢測試劑，5-40°C反應(yīng)5-15分 鐘；由比色管底部向上拍取各管反應(yīng)所產(chǎn)生的顏色，用Photoshop 7. 0作圖軟件將各標(biāo)準(zhǔn) 管顏色扣除空白管顏色后，將所得的顏色及對應(yīng)的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度打印在厚度為 l_2mm的無色透明PVC塑料板上，得到扣除試劑空白后的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)色卡。
【文檔編號】G01N21/78GK105987904SQ201510093484
【公開日】2016年10月5日
【申請日】2015年3月3日
【發(fā)明人】袁巧仙, 高琴, 吳靈萍, 連國軍
【申請人】溫州醫(yī)科大學(xué)