一種檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法，包括如下步驟：設定色譜條件；樣品測定：采用外標法：系統(tǒng)適用性實驗、精密度實驗、線性實驗、回收率實驗、檢測限及定量限實驗、樣品檢驗。本發(fā)明采用有機溶劑和水的混合溶劑作為溶媒，能夠提高原料藥中殘留有機溶劑的釋放，提高方法的檢測靈敏度。同時采用小比例有機溶劑：水作為溶媒能夠減少分析過程中有機溶劑的使用量，從而能夠減少試驗過程對環(huán)境和實驗人員的傷害。
【專利說明】
一種檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法
技術領域
[0001] 本發(fā)明屬于藥物分析檢測領域，具體涉及一種檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘 留的方法，尤其是頂空進樣氣相色譜同時檢測苯磺順阿曲庫銨中乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲 醇、乙酸乙酯、乙醚和丙酮殘留的方法。
【背景技術】
[0002] 苯橫順阿曲庫銨(Cisatracurium besilate)是阿曲庫銨十種同分異構體中的一 種，是最新一代肌松劑。具有與苯磺酸阿曲庫銨相似的肌松效應及代謝過程。苯磺順阿曲庫 銨具有通過非肝臟途徑代謝的特點和心血管穩(wěn)定性，肌松作用比阿曲庫銨作用強3倍，且不 釋放組胺，心血管反應小，是較為理想的中時效非去極化肌松藥。苯磺順阿曲庫銨主要適用 于全身麻醉，并能廣泛應用在氣管插管、肝腎功能障礙、心血管手術及老年和兒科病人。該 藥自1996年在英國首次上市后，國外已逐漸代替維庫溴銨，成為臨床肌松的主流。
[0003] 各國藥典均要求對原料藥進行殘留溶劑檢查，以控制生產(chǎn)過程中使用的有機溶劑 和揮發(fā)性雜質在原料藥中的殘留量，以保證用藥安全。本發(fā)明針對苯磺順阿曲庫銨中，由合 成工藝引入的乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮7種有機溶劑殘留，利用頂 空進樣氣相色譜法，并選擇在合適的色譜條件下同時檢測這7種有機溶劑殘留。

【發(fā)明內容】

[0004] 發(fā)明目的：為了解決現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明提供了一種檢測苯磺順阿曲庫銨中 有機溶劑殘留的方法，是一種簡便、準確、耗費小且對環(huán)境和人體傷害小的，并能同時檢測 苯磺順阿曲庫銨中的乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮7種有機溶劑殘留量 的方法。
[0005] 技術方案:一種檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法，包括如下步驟：
[0006] 1.設定色譜條件：
[0007] 色譜柱：08-1順0歡父（30111*0.32臟*0.2511111);
[0008] 柱溫:起始溫度30°C，維持10分鐘，再以每分鐘10°C的速率升溫至200°C，維持5分 鐘；
[0009] 進樣 口溫度：190 ~210°C;
[0010] 檢測器溫度:220~260 °C;
[0011] 載氣:N2;
[0012] 載氣流速:0.8~1.2ml/min;
[0013] 分流比：5:1;
[0014]進樣方式:頂空進樣法；
[0015] 平衡時間：25~35min;
[0016] 平衡溫度:75~90 °C;
[0017] 2.樣品測定
[0018] 采用外標法，其具體步驟為：
[0019] (1)系統(tǒng)適用性實驗
[0020] 取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮對照品溶液和以上7種有機溶 劑的混合對照品溶液，分別進樣，繪制譜圖；
[0021] (2)精密度實驗
[0022]分別取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合對照品溶液各6份進 樣，紀錄各對照品的相對標準偏差RSD;
[0023] (3)線性實驗
[0024]分別取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮對照品配制成高濃度混 合對照品貯備液，稀釋到不同濃度后，進樣，分別以乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、 乙醚、丙酮對照品的峰面積為縱坐標，以濃度為橫坐標建立線性回歸曲線；
[0025] (4)回收率實驗
[0026]取苯磺順阿曲庫銨適量，精密稱量，加入不同濃度乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙 酸乙酯、乙醚、丙酮混合對照品溶液作為回收率樣品溶液，進樣，紀錄色譜圖，計算回收率：
[0028] (5)檢測限及定量限實驗
[0029]依次分別以稀釋劑稀釋乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合對 照品溶液，以信噪比S/N=3計算檢測限，以信噪比S/N= 10計算定量限；
[0030] (6)樣品檢驗
[0031 ]取苯磺順阿曲庫銨適量，精密稱量，加稀釋劑溶解制成供試品溶液，混合對照品溶 液和供試品溶液分別進樣，紀錄色譜圖，按外標法以峰面積計算苯磺順阿曲庫銨中乙腈、二 氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的含量。
[0032]作為優(yōu)化:所述（1)系統(tǒng)適用性實驗中對照品溶液為:分別稱取82mg乙腈，120mg二 氯甲燒，178mg甲苯，600mg甲醇，lOOOmg乙酸乙酯，lOOOmg乙醚，lOOOmg丙酮于100ml容量瓶 中。
[0033]作為優(yōu)化:所述(6)樣品檢驗中稀釋劑為：5~35%比例的N，N-二甲基甲酰胺的水 溶液。
[0034]作為優(yōu)化:所述(4)回收率試驗中，精密稱量苯磺順阿曲庫銨O.lg共9份，分別置于 頂空瓶中，并在在其中加入指標量80%、100%、120%三個不同濃度各溶劑混合物5ml。頂空 進樣，紀錄色譜圖，由下式計算回收率。
[0035]作為優(yōu)化:所述(6)樣品檢驗中具體操作為:精密稱定苯磺順阿曲庫銨O.lg，加入 稀釋劑5ml，作為供試品溶液。精密量取混合對照品溶液5ml，作為對照品溶液。頂空進樣，紀 錄色譜圖，按外標法計算峰面積，含乙腈不得過0.041%、含二氯甲烷不得過0.060%、含甲 苯不得過0.089%、含甲醇不得過0.3%、含乙酸乙酯不得過0.5%、含乙醚不得過0.5%、含 丙酮不得過0.5%;照上述方法檢測樣品的殘留溶劑，供試品含二氯甲烷0.001%、乙腈 0.001 %，其余溶劑均未檢出。
[0036] 有益效果:本發(fā)明的具體優(yōu)勢如下：
[0037] 1、本發(fā)明采用有機溶劑和水的混合溶劑作為溶媒，能夠提高原料藥中殘留有機溶 劑的釋放，提高方法的檢測靈敏度。同時采用5~35%的小比例有機溶劑:水作為溶媒能夠 減少分析過程中有機溶劑的使用量，從而能夠減少試驗過程對環(huán)境和實驗人員的傷害。 [0038] 2、本發(fā)明采用氣相色譜法同時檢測乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、 丙酮7種有機溶劑的含量，靈敏度改，重復性好，精密度高。
[0039] 3、本發(fā)明的方法適用于苯磺順阿曲庫銨原料藥及制劑中乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲 醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的檢測。
【附圖說明】
[0040] 圖1為乙醚系統(tǒng)適用性氣相色譜圖；
[0041 ]圖2為丙酮系統(tǒng)適用性氣相色譜圖；
[0042]圖3為乙酸乙酯系統(tǒng)適用性氣相色譜圖；
[0043] 圖4為甲醇系統(tǒng)適用性氣相色譜圖；
[0044] 圖5為二氯甲烷混合系統(tǒng)適用性氣相色譜圖；
[0045] 圖6為乙腈混合系統(tǒng)適用性氣相色譜圖；
[0046] 圖7為甲苯混合系統(tǒng)適用性氣相色譜圖；
[0047]圖8為乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合系統(tǒng)適用性氣相色譜 圖。
【具體實施方式】
[0048] 下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0049] 實施例 [0050] 1 ?儀器與試藥
[0051 ] 儀器:島津GC-2014色譜儀，F(xiàn)ID檢測器，自動頂空進樣器DANI HSS 86.50PLUS。
[0052]試藥:所有試劑均為分析純;苯磺順阿曲庫銨。
[0053] 色譜條件：
[0054] 色譜柱:Agilent DB-INN0WAX(30m*0 ? 32mm*0? 25um);柱溫:起始溫度30°C，維持 10 分鐘，再以每分鐘10°C的速率升溫至200°C，維持5分鐘;進樣口溫度：190~210°C ;檢測器溫 度:220~260°C ;載氣:N2;載氣流速:0.8~1.2ml/min;分流比：5:1;進樣方式:頂空進樣法； 平衡時間：25~35min;平衡溫度:75~90°C。
[0055] 2 ?溶液配制
[0056] 稀釋劑(水:N，N-二甲基甲酰胺80:20)
[0057] 分別稱取82mg乙腈，120mg二氯甲燒，178mg甲苯，600mg甲醇，lOOOmg乙酸乙酯， lOOOmg乙醚，lOOOmg丙酮于100ml容量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，混勾。
[0058] 精密量取lml儲備溶液到100ml容量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，混勻;再準確移取 5.0ml該溶液到20ml頂空瓶中，加蓋密封。
[0059] 3.樣品測定
[0060] (1)系統(tǒng)適用性實驗
[0061] 精密量取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮對照品溶液、混合對照 品溶液5ml，頂空進樣。
[0062] 在上述色譜條件下各組分可以得到較好的分離，各組分保留時間及分離度見表1， 系統(tǒng)適用性圖譜見附圖1~8。
[0063] 表1各有機溶劑保留時間及分離度測定結果
[0065]在該方法中，相鄰溶劑峰之間的最小分離度為2.25(多2.0)，即各組分峰完全分 離。
[0066] (2)精密度試驗
[0067] 見表2。結果表明，RSD均在5%以內。
[0068]表2精密度試驗數(shù)據(jù)結果(n = 6)
[0071] (3)檢測限及定量限
[0072]以信噪比S/N=3計算檢測限，以信噪比S/N=10計算定量限，稀釋混合對照品貯備 液。取5ml頂空進樣，紀錄色譜圖，檢測限及定量限測定結果見表3。
[0073]表3各組分檢測限及定量限結果
[0075] (4)線性試驗
[0076]對各個溶劑，在L0Q濃度至200%指標濃度的范圍內取5個濃度點進行研究，線性關 系以測得的相應信號（峰面積)對被分析物濃度的函數(shù)作圖，用最小二乘法進行線性回歸， 結果表明各溶劑的線性回歸系數(shù)R2的數(shù)值均在0.990-1.000,證明線性關系良好。
[0077]表4線性試驗測定結果
[0080] (5)回收率試驗
[0081]精密稱量苯磺順阿曲庫銨O.lg共9份，分別置于頂空瓶中，并在在其中加入指標量 80 %、100 %、120 %三個不同濃度各溶劑混合物5ml。頂空進樣，紀錄色譜圖，由下式計算回 收率?？山邮艿幕厥章蕬?0%~110% (100% ±10%)。測定結果見表5。
[0082]表5回收率試驗測定結果

[0085] (6)樣品檢驗結果
[0086]精密稱定苯磺順阿曲庫銨0 . lg，加入稀釋劑5ml，作為供試品溶液。精密量取混合 對照品溶液5ml，作為對照品溶液。頂空進樣，紀錄色譜圖，按外標法計算峰面積，含乙腈不 得過0.041 %、含二氯甲烷不得過0.060 %、含甲苯不得過0.089 %、含甲醇不得過0.3 %、含 乙酸乙酯不得過0.5%、含乙醚不得過0.5%、含丙酮不得過0.5%。
[0087]照上述方法檢測樣品的殘留溶劑，供試品含二氯甲烷0.001%、乙腈0.001%，其余 溶劑未檢出。
[0088]本發(fā)明的具體優(yōu)勢如下：
[0089] 1、本發(fā)明采用有機溶劑和水的混合溶劑作為溶媒，能夠提高原料藥中殘留有機溶 劑的釋放，提高方法的檢測靈敏度。同時采用5~35%的小比例有機溶劑:水作為溶媒能夠 減少分析過程中有機溶劑的使用量，從而能夠減少試驗過程對環(huán)境和實驗人員的傷害。
[0090] 2、本發(fā)明采用氣相色譜法同時檢測乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、 丙酮7種有機溶劑的含量，靈敏度改，重復性好，精密度高。
[0091] 3、本發(fā)明的方法適用于苯磺順阿曲庫銨原料藥及制劑中乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲 醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的檢測。
[0092] 本發(fā)明不局限于上述最佳實施方式，任何人在本發(fā)明的啟示下都可得出其他各種 形式的產(chǎn)品，但不論在其形狀或結構上作任何變化，凡是具有與本申請相同或相近似的技 術方案，均落在本發(fā)明的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法，其特征在于:包括如下步驟：1. 設定色譜條件： 色譜柱:DB-INN0WAX(30m*0 · 32mm*0 · 25um); 柱溫:起始溫度30°C，維持10分鐘，再以每分鐘10°C的速率升溫至200°C，維持5分鐘； 進樣口溫度：190~210°C; 檢測器溫度:220~260 °C; 載氣:N2; 載氣流速:0.8~1.2ml/min; 分流比：5:1; 進樣方式:頂空進樣法； 平衡時間：25~35min; 平衡溫度:75~90 °C;2. 樣品測定 采用外標法，其具體步驟為： (1) 系統(tǒng)適用性實驗 取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮對照品溶液和以上7種有機溶劑的 混合對照品溶液，分別進樣，繪制譜圖； (2) 精密度實驗 分別取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合對照品溶液各6份進樣， 紀錄各對照品的相對標準偏差RSD; (3) 線性實驗 分別取乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮對照品配制成高濃度混合對 照品貯備液，稀釋到不同濃度后，進樣，分別以乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、 丙酮對照品的峰面積為縱坐標，以濃度為橫坐標建立線性回歸曲線； (4) 回收率實驗 取苯磺順阿曲庫銨適量，精密稱量，加入不同濃度乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙 酯、乙醚、丙酮混合對照品溶液作為回收率樣品溶液，進樣，紀錄色譜圖，計算回收率：(5) 檢測限及定量限實驗 依次分別以稀釋劑稀釋乙腈、二氯甲烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮混合對照品 溶液，以信噪比S/N=3計算檢測限，以信噪比S/N= 10計算定量限； (6) 樣品檢驗 取苯磺順阿曲庫銨適量，精密稱量，加稀釋劑溶解制成供試品溶液，混合對照品溶液和 供試品溶液分別進樣，紀錄色譜圖，按外標法以峰面積計算苯磺順阿曲庫銨中乙腈、二氯甲 烷、甲苯、甲醇、乙酸乙酯、乙醚、丙酮的含量。2.根據(jù)權利要求1所述的檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法，其特征在于:所 述（1)系統(tǒng)適用性實驗中對照品溶液為：分別稱取82mg乙腈，120mg二氯甲烷，178mg甲苯， 600mg甲醇，lOOOmg乙酸乙酯，lOOOmg乙醚，lOOOmg丙酮于100ml容量瓶中。3. 根據(jù)權利要求1所述的檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法，其特征在于:所 述(6)樣品檢驗中稀釋劑為:5~35%比例的N，N-二甲基甲酰胺的水溶液。4. 根據(jù)權利要求1所述的檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法，其特征在于:所 述(4)回收率試驗中，精密稱量苯磺順阿曲庫銨O.lg共9份，分別置于頂空瓶中，并在在其中 加入指標量80%、100%、120%三個不同濃度各溶劑混合物5ml。頂空進樣，紀錄色譜圖，由 下式計算回收率。5. 根據(jù)權利要求1所述的檢測苯磺順阿曲庫銨中有機溶劑殘留的方法，其特征在于:所 述(6)樣品檢驗中具體操作為:精密稱定苯磺順阿曲庫銨O.lg，加入稀釋劑5ml，作為供試品 溶液。精密量取混合對照品溶液5ml，作為對照品溶液。頂空進樣，紀錄色譜圖，按外標法計 算峰面積，含乙腈不得過0.041 %、含二氯甲烷不得過0.060 %、含甲苯不得過0.089%、含甲 醇不得過0.3 %、含乙酸乙酯不得過0.5 %、含乙醚不得過0.5 %、含丙酮不得過0.5 % ;照上 述方法檢測樣品的殘留溶劑，供試品含二氯甲烷0.001%、乙腈0.001%，其余溶劑均未檢 出。
【文檔編號】G01N30/02GK105929045SQ201610238000
【公開日】2016年9月7日
【申請日】2016年4月18日
【發(fā)明人】張鑫, 賀乾輝, 杜芳, 潘鴻燕, 王小鎰
【申請人】上藥東英（江蘇）藥業(yè)有限公司