本發(fā)明涉及中藥含量測定領(lǐng)域，具體涉及一種荷葉及其制劑中有效成分含量的測定方法。

背景技術(shù)：

1、荷葉為睡蓮科植物蓮(nelumbo?nuficera?gaertn)的葉，又名蓮葉、藕葉，在我國南北方均有種植。性味苦寒，平，歸肝、脾、胃、心經(jīng)，具有清暑利濕，生發(fā)清陽，清心去熱，止血利水的活性。荷葉中主要含有生物堿類、黃酮類、多糖類等成分，現(xiàn)代藥理研究表明荷葉具有降脂減肥、抗氧化、抗衰老、抑制脂肪肝、抑菌、抑制hiv增殖、抗病毒、抗炎、抗過敏等作用。

2、《中國藥典》2020年版荷葉項下僅收載了采用高效液相色譜法測定荷葉堿單一成分含量的方法。研究表明，荷葉水提液中含有多種活性成分，主要活性成分槲皮素--3-o-葡萄糖酸苷和異槲皮苷含量較高。槲皮素-3-o-葡萄糖酸苷具有抗炎和細(xì)胞保護(hù)作用，防止順鉑(含鉑的抗癌化合物)在腎小管細(xì)胞中的細(xì)胞毒性并且能抑制癌細(xì)胞增殖。異槲皮苷能調(diào)節(jié)機體免疫系統(tǒng)，表現(xiàn)為具有抗炎能力。

3、目前，對荷葉水提取物中有效成分含量測定方法的研究多集中在單一成分測定，未有對荷葉水提取物中多種成分同時測定的適宜方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種荷葉及其制劑中有效成分含量的測定方法，該方法能夠?qū)扇~、荷葉水提物和/或荷葉水提制劑中金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮素-3-o-葡萄糖酸苷、荷葉堿四種活性成分含量進(jìn)行同時測定。

2、為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案：

3、一種荷葉及其制劑中有效成分含量的測定方法，包括采用高效液相色譜法對對照品溶液和荷葉藥材及其制劑的溶液進(jìn)行測定；

4、色譜條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，檢測波長為265nm-275nm，以乙腈為流動相a，以0.05％-0.2％磷酸溶液為流動相b，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；

5、

6、色譜柱的柱溫為10℃-20℃，流速0.9ml/min-1.1ml/min。

7、優(yōu)選地，所述流動相b為0.1％磷酸溶液；所述檢測波長為270nm。

8、所述荷葉藥材及其制劑為荷葉藥材、荷葉飲片、荷葉浸膏、荷葉顆粒制劑中選出的至少一種。

9、當(dāng)所述荷葉藥材及其制劑為荷葉藥材或荷葉飲片時，荷葉藥材及其制劑的溶液的制備過程為：取供試品，精密稱定，加入溶劑，預(yù)處理，濾過，合并濾液，記錄體積，取少量，即得。

10、當(dāng)所述荷葉藥材及其制劑為荷葉顆?；蚝扇~浸膏時，荷葉藥材及其制劑的溶液的制備過程為：取供試品，精密稱定，置容量瓶中，加入溶劑，密塞，預(yù)處理，再加相同溶劑定容，搖勻，即得。

11、進(jìn)一步地，所述荷葉藥材或荷葉飲片的荷葉藥材及其制劑的溶液的制備過程中，加入的溶劑為水，預(yù)處理過程為先加水浸泡，再加熱回流。

12、進(jìn)一步地，所述荷葉藥材或荷葉飲片的荷葉藥材及其制劑的溶液的制備過程為，取供試品粗粉2g，精密稱定，置燒杯中，加水20ml，浸泡30min，將飲片和水轉(zhuǎn)移到圓底燒瓶中，用30ml水潤洗燒杯，潤洗液轉(zhuǎn)移到燒瓶中，加熱回流40min，濾過，濾渣加水46ml，加熱回流30min，濾過，合并濾液，記錄體積，取少量，即得。

13、進(jìn)一步地，所述荷葉顆?；蚝扇~浸膏的荷葉藥材及其制劑的溶液的制備過程中，加入的溶劑為水，所述預(yù)處理為超聲處理，制成溶液濃度為10mg/ml。

14、進(jìn)一步地，所述對照品為金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮素-3-o-葡萄糖酸苷、荷葉堿對照品，對照品溶液制備方法為，取對照品，分別加溶劑溶解，即得。

15、進(jìn)一步地，所述對照品所加溶劑為甲醇，制成的對照品溶液濃度分別為金絲桃苷37.96μg/ml、異槲皮苷39.20μg/ml、槲皮素-3-o-葡萄糖酸苷78.40μg/ml、荷葉堿31.36μg/ml。

16、本發(fā)明的技術(shù)方案的優(yōu)點包括：

17、1.本發(fā)明提供了一種荷葉及其制劑中有效成分含量的測定方法，能夠?qū)扇~、荷葉水提物和/或荷葉水提制劑中的金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮素-3-o-葡萄糖酸苷、荷葉堿四種活性成分含量進(jìn)行同時測定。

18、2.該方法有效實現(xiàn)了金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮素-3-o-葡萄糖酸苷、荷葉堿四種成分峰的分離，方法準(zhǔn)確度高，且簡便、快速。

技術(shù)特征：

1.一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于，色譜柱的柱溫為10℃-20℃，流速0.9ml/min-1.1ml/min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于，所述流動相b為0.1％磷酸溶液；所述檢測波長為270nm。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于，所述荷葉藥材及其制劑為從荷葉顆粒、荷葉浸膏、荷葉提取液、荷葉藥材、荷葉飲片中選出的至少一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于，

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于，所述荷葉藥材或荷葉飲片的溶液的制備過程中，加入的溶劑為水，預(yù)處理過程為先加水浸泡，再加熱回流。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于，所述荷葉藥材或荷葉飲片的溶液的制備過程為，取供試品粗粉2g,精密稱定，置燒杯中，加水20ml，浸泡30min，將飲片和水轉(zhuǎn)移到圓底燒瓶中，用30ml水潤洗燒杯，潤洗液轉(zhuǎn)移到燒瓶中，加熱回流40min，濾過，濾渣加水46ml，加熱回流30min，濾過，合并濾液，記錄體積，取少量，即得。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于，所述荷葉顆?；蚝扇~浸膏的溶液的制備過程中，加入的溶劑為水，所述預(yù)處理為超聲處理，制成溶液濃度為10mg/ml。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于：

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，其特征在于：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種荷葉藥材及其制劑中有效成分含量的測定方法，采用高效液相色譜法對對照品溶液和供試品溶液進(jìn)行測定；色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，檢測波長為265nm?275nm，以乙腈為流動相A，以0.05％?0.2％磷酸溶液為流動相B，進(jìn)行梯度洗脫。本方法能夠?qū)扇~、荷葉水提物和/或荷葉水提制劑中金絲桃苷、異槲皮苷、槲皮素?3?O?葡萄糖酸苷、荷葉堿四種活性成分含量進(jìn)行同時測定；有效實現(xiàn)四種成分峰的分離，方法準(zhǔn)確度高，且簡便、快速。

技術(shù)研發(fā)人員：李梢
受保護(hù)的技術(shù)使用者：清華大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10