一種鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法
【專(zhuān)利摘要】一種鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，該方法包括取待檢降糖中藥進(jìn)行薄層層析，在吡格列酮和羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值處找到疑似斑點(diǎn)，其特征在于，還包括以下三個(gè)步驟：1、采集疑似斑點(diǎn)的一系列的一維表面增強(qiáng)拉曼光譜，得到待檢降糖中藥的動(dòng)態(tài)譜圖，2、對(duì)動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理，并繪制得到待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖；3、根據(jù)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖，判斷待檢降糖中藥中是否有吡格列酮和羅格列酮。根據(jù)本發(fā)明所提供的技術(shù)方案，能夠?qū)堤侵兴幹惺欠裉砑舆粮窳型蛄_格列酮進(jìn)行快速鑒別，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，成本低，操作方便。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，屬于醫(yī)藥分析【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]近年來(lái)，一些藥廠(chǎng)為了謀求高額利益，在降糖中藥中添加價(jià)格低廉、藥效相當(dāng)?shù)慕堤俏魉廂}酸吡格列酮、馬來(lái)酸羅格列酮或二者的混合物，這些降糖西藥雖然也能起到降糖作用，但毒副性較大，尤其是馬來(lái)酸羅格列酮，因其會(huì)大幅增加服用者心臟病發(fā)作及卒中風(fēng)的幾率，美國(guó)食品和藥物管理局已于2011年全面下架該產(chǎn)品?；颊呷绻L(zhǎng)期服用添加了這些降糖西藥降糖中藥，不僅會(huì)引起低血糖等多種不良反應(yīng)，甚至?xí)＜吧?，產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。因此，鑒定降糖類(lèi)中藥中是否添加了吡格列酮或羅格列酮，是藥監(jiān)部門(mén)的一項(xiàng)重要工作。
[0003]目前針對(duì)降糖中藥中摻雜馬來(lái)酸羅格列酮和鹽酸吡格列酮的檢測(cè)的方法主要有TLC、HPLC、LC-MS等。TLC法雖然簡(jiǎn)單快速，但僅能對(duì)降糖藥中是否摻假作出粗淺判斷，對(duì)摻假降糖中藥中具體摻雜的是什么成份不能進(jìn)行鑒定，且該方法易受中藥基質(zhì)和摻假量的影響而顯示出假陽(yáng)性或假陰性的結(jié)果。HPLC和LC-MS雖然能夠?qū)郊俳堤侵兴幹芯唧w摻雜的是吡格列酮還是羅格列酮還是二者的混合物作出判斷，但分析周期長(zhǎng)、實(shí)驗(yàn)條件苛刻，需要特定的色譜柱、流動(dòng)相等，檢測(cè)成本較高，尤其是當(dāng)藥監(jiān)部門(mén)需要在現(xiàn)場(chǎng)對(duì)降糖中藥中是否添加鹽酸吡格列酮或馬來(lái)酸羅格列酮或二者均有添加作出檢測(cè)和判斷時(shí)，這些方法將難以適用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，以解決上述問(wèn)題。
[0005]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是:
[0006]一種降糖中藥中添加吡格列酮或羅格列酮的鑒定方法，該方法包括取待檢降糖中藥進(jìn)行薄層層析，在吡格列酮和羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值處找到疑似斑點(diǎn)，其特征在于，還包括以下三個(gè)步驟:
[0007]步驟一:動(dòng)態(tài)光譜圖的采集
[0008]取表面增強(qiáng)劑點(diǎn)于疑似斑點(diǎn)上，采用拉曼光譜儀，選取一定強(qiáng)度的激光對(duì)疑似斑點(diǎn)持續(xù)照射進(jìn)行微擾，并采集疑似斑點(diǎn)的一系列的一維表面增強(qiáng)拉曼光譜，得到待檢降糖中藥的動(dòng)態(tài)譜圖，每張一維表面增強(qiáng)拉曼光譜的積分時(shí)間相同，一定強(qiáng)度為IOOmW?200mW之間的任意數(shù)值，表面增強(qiáng)劑為金溶膠、銀溶膠或金銀合膠，表面增強(qiáng)劑的點(diǎn)樣量為2 μ L ?10 μ L ;
[0009]步驟二:二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的繪制
[0010]對(duì)動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理，包括選取300CHT1?1700CHT1譜段、采用Sgolay法進(jìn)行平滑并采用airPLS法進(jìn)行基線(xiàn)校正，得到待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖，根據(jù)預(yù)處理拉曼光譜圖，繪制得到待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖；
[0011]步驟三:對(duì)是否添加吡格列酮或羅格列酮進(jìn)行鑒定
[0012]根據(jù)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖，當(dāng)該譜圖中含有與吡格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相差I(lǐng)~w波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中含有吡格列酮，當(dāng)該譜圖中含有與羅格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中含有羅格列酮，當(dāng)該譜圖中不含有與吡格列酮和羅格列酮的的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中不含有吡格列酮和羅格列酮，W為IcnT1~5cm_1之間的任意數(shù)值,吡格列酮的相關(guān)峰的出峰位置為MHcnT1, 430cm_1, 475cm_1, 824cm_1,羅格列酮的相關(guān)峰的出峰位置為:739011' 1255CHT1，1329cm^0
[0013]本發(fā)明還提供了這樣的技術(shù)方案:
[0014]一種降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的鑒定方法，該方法包括:取待檢降糖中藥進(jìn)行薄層層析，在吡格列酮和羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值處找到疑似斑點(diǎn)，其特征在于，還包括以下三個(gè)步驟:[0015]步驟一:動(dòng)態(tài)光譜圖的采集
[0016]將待檢降糖中藥、吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行薄層層析后，在薄層板上找到疑似斑點(diǎn)、吡格列酮和羅格列酮三個(gè)斑點(diǎn)，
[0017]取表面增強(qiáng)劑分別點(diǎn)于三個(gè)斑點(diǎn)上，采用拉曼光譜儀，選取一定強(qiáng)度的激光分別對(duì)三個(gè)斑點(diǎn)持續(xù)照射進(jìn)行微擾，并分別采集三個(gè)斑點(diǎn)的一系列一維表面增強(qiáng)拉曼光譜，得到疑似斑點(diǎn)、吡格列酮和羅格列酮的動(dòng)態(tài)光譜圖，每個(gè)斑點(diǎn)的所有一維表面增強(qiáng)拉曼光譜的積分時(shí)間均相同，一定強(qiáng)度為IOOmW~200mW之間的任意數(shù)值，表面增強(qiáng)劑為金溶膠、銀溶膠或金銀合膠，表面增強(qiáng)劑的點(diǎn)樣量為2μ L~10μ L ;
[0018]步驟二:二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的繪制
[0019]分別對(duì)待檢降糖中藥、吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理，包括選取SOOcnr1~HOOcnT1譜段、采用Sgolay法進(jìn)行平滑并采用airPLS法進(jìn)行基線(xiàn)校正，得到待檢降糖中藥、吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理拉曼光譜圖，根據(jù)預(yù)處理拉曼光譜圖，分別繪制得到三者的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖；
[0020]步驟三:二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的分析與判斷
[0021]將待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖分別與吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品以及羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖進(jìn)行比對(duì)，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中含有與吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~w波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中含有吡格列酮，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中含有與羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中含有羅格列酮，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中不含有與吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中不含有批格列酮和羅格列酮，W為1cm-1~5cm-1之間的任意數(shù)值。
[0022]本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步特征在于:吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品為鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品，羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品為馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品。
[0023]上述本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步特征在于:一定強(qiáng)度為200mW。[0024]上述本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步特征在于:二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖為同步
-1'TfeP曰。
[0025]上述本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步特征在于:激光由拉曼光譜儀自身的激光光源提供。
[0026]上述本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步特征在于:表面增強(qiáng)劑為納米銀溶膠。
[0027]上述本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步特征在于:表面增強(qiáng)劑的點(diǎn)樣量為4μ L?6μ L。
[0028]上述本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步特征在于:w為5CHT1。
[0029]與【背景技術(shù)】相比，本發(fā)明的技術(shù)方案的優(yōu)點(diǎn)和積極效果如下:
[0030]1.能夠?qū)堤侵兴幹惺欠裉砑舆粮窳型蛄_格列酮進(jìn)行快速鑒別
[0031]本發(fā)明的技術(shù)方案采用激光對(duì)疑似斑點(diǎn)處進(jìn)行微擾，采用拉曼光譜儀檢測(cè)得到待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖，通過(guò)判斷該維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中是否含有與吡格列酮或羅格列酮的出峰位置相同的自動(dòng)峰或相關(guān)峰，即可實(shí)現(xiàn)對(duì)待檢降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮進(jìn)行判定，與HPLC和LC-MS相比，不需要苛刻的實(shí)驗(yàn)條件和復(fù)雜的樣品前處理工作，即可快速的鑒定出待檢降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮。
[0032]2.特征性強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠
[0033]由于拉曼光譜法具有極強(qiáng)的特征性，且對(duì)檢測(cè)物質(zhì)的含量要求很低，因此根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案所得出的鑒定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，與TLC相比，避免了假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果的出現(xiàn)，能夠?yàn)樗幈O(jiān)部門(mén)的工作人員提供科學(xué)的依據(jù)和指導(dǎo)。
[0034]3.成本低，操作方便
[0035]本發(fā)明的技術(shù)方案采用薄層板和拉曼光譜儀即可施行，設(shè)備和實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求簡(jiǎn)單，成本低，操作方便，當(dāng)采用的拉曼光譜儀為便攜式或手持式時(shí)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)降糖中藥中是否添加馬來(lái)酸羅格列酮和鹽酸吡格列酮進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速鑒定。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0036]圖1為本發(fā)明的技術(shù)方案在實(shí)施例一中的流程圖；
[0037]圖2為實(shí)施例一中待檢降糖中藥的預(yù)處理后拉曼光譜圖；
[0038]圖3為實(shí)施例一中鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理后拉曼光譜圖；
[0039]圖4為實(shí)施例一中馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理后拉曼光譜圖；
[0040]圖5為實(shí)施例一中待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜；
[0041]圖6為實(shí)施例一中鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜；
[0042]圖7為實(shí)施例一中馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜；
[0043]圖8為本發(fā)明的技術(shù)方案在實(shí)施例二中的流程圖；
[0044]圖9為實(shí)施例二中待檢降糖中藥的預(yù)處理后拉曼光譜圖；
[0045]圖10為實(shí)施例二中待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜；[0046]圖11為實(shí)施例三中待檢降糖樣品的預(yù)處理后拉曼光譜圖；以及
[0047]圖12為實(shí)施例三中待檢降糖樣品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜。
【具體實(shí)施方式】
[0048]以下結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明所涉及的藥品中是否添加結(jié)構(gòu)類(lèi)似物的檢測(cè)方法做進(jìn)一步說(shuō)明。
[0049]以下實(shí)施例中所涉及的概念解釋:
[0050]同步譜:表征的是兩個(gè)波數(shù)處信號(hào)強(qiáng)度變化的方向和協(xié)同程度，當(dāng)兩個(gè)動(dòng)態(tài)變化同相(反相)，值為正(負(fù))；當(dāng)動(dòng)態(tài)變化正交時(shí)，值為零。
[0051]相關(guān)峰:對(duì)角線(xiàn)和非對(duì)角線(xiàn)區(qū)域均會(huì)出現(xiàn)，包括自動(dòng)峰和交叉峰。
[0052]自動(dòng)峰:位于主對(duì)角線(xiàn)上的相關(guān)峰，表示的是同一擾動(dòng)下的同一個(gè)波數(shù)的自相關(guān)光譜峰，其強(qiáng)度反映體系對(duì)外擾的敏感程度。
[0053]交叉峰:位于非對(duì)角線(xiàn)上的交叉峰，表示位于不同波數(shù)的峰的同步變化，表示兩個(gè)峰的變化有共同的機(jī)理和起源。
[0054]<實(shí)施例一 >
[0055]一、儀器和樣品
[0056](I)儀器:BWS415_785H型便攜式拉曼光譜儀(美國(guó)必達(dá)泰克公司)，激發(fā)波長(zhǎng)785nm ；
[0057](2)銀溶膠制備:取硝酸銀(AgNO3) 17mg加二次去離子水IOOml溶解，加入I %的檸檬酸三鈉1.6ml，置微波爐中以高火加熱6min，溶液呈灰綠色，冷卻至室溫，加水至刻度處，備用。
[0058](3)待檢降糖中藥溶液和對(duì)照品溶液的制備:取A藥廠(chǎng)某批次生產(chǎn)的降糖中藥作為待檢降糖中藥，分別取待檢降糖中藥、鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品、及馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品適量，制成lmol/L的待檢降糖中藥、鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品、及馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的甲醇溶液。
[0059]二、對(duì)待檢降糖中藥進(jìn)行檢測(cè)
[0060]圖1為本發(fā)明的技術(shù)方案在實(shí)施例一中的流程圖。
[0061]如圖1所示，在本實(shí)施例一中，測(cè)定該待檢降糖中藥中是否添加鹽酸吡格列酮或馬來(lái)酸羅格列酮，包括以下三個(gè)步驟:
[0062]步驟一(SI):動(dòng)態(tài)光譜圖的采集
[0063]取I μ I待檢降糖中藥、鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品及馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的甲醇溶液分別點(diǎn)于硅膠薄層板(以下簡(jiǎn)稱(chēng)薄層板)上，經(jīng)二氯甲烷-甲醇-水(體積比8:2:0.2)展開(kāi)后，取出揮干，于紫外燈254nm下檢視鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品在薄層板上的斑點(diǎn)位置，分別標(biāo)記為吡格列酮和羅格列酮，檢視該待檢降糖中藥的色譜條帶中與鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品相應(yīng)位置的也存在色譜斑點(diǎn)，將該色譜斑點(diǎn)標(biāo)記為疑似斑點(diǎn)，取5μ I銀溶膠，分別滴于疑似斑點(diǎn)、吡格列酮和羅格列酮三個(gè)斑點(diǎn)上。
[0064]將拉曼光譜儀的激光強(qiáng)度調(diào)至200mW，采用該拉曼光譜儀自身的激光光源提供的200mff的激光，對(duì)疑似斑點(diǎn)處持續(xù)照射進(jìn)行微擾，同時(shí)采集疑似斑點(diǎn)處的一系列表面增強(qiáng)拉曼光譜，每張表面增強(qiáng)拉曼光譜的積分時(shí)間均為5s，所得一系列表面增強(qiáng)拉曼光譜即為待檢降糖中藥的動(dòng)態(tài)光譜。在光譜采集過(guò)程中，保持激光強(qiáng)度不變，激光照射點(diǎn)不變。
[0065]參照上述方法，分別得到鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的的動(dòng)態(tài)光譜。
[0066]步驟二(S2):二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的繪制
[0067]圖2為實(shí)施例一中待檢降糖中藥的預(yù)處理后拉曼光譜圖。
[0068]圖3為實(shí)施例一中鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理后拉曼光譜圖。
[0069]圖4為實(shí)施例一中馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理后拉曼光譜圖。
[0070]利用Matlab7.6軟件對(duì)該待檢降糖中藥的動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理，包括譜段選取(300cm—1?1700cm-1)、平滑(Sgolay法)和基線(xiàn)校正(airPLS法)，得到如圖2所示的該待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖，參照預(yù)處理上述操作，分別得到如圖3所示的鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理后拉曼光譜圖、以及如圖4所示的馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理后拉曼光譜圖。
[0071]圖5為實(shí)施例一中待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜。
[0072]圖6為實(shí)施例一中鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜。
[0073]圖7為實(shí)施例一中馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜。
[0074]通過(guò)2Dshiger versionl.3軟件，軟件動(dòng)態(tài)光譜設(shè)置為平均光譜，contour參數(shù)為8，對(duì)待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖進(jìn)行處理，繪制得到該待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖，將鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜(300cm 1 ?1700cm O 劃分為如圖 5 所不的 300cm 1 ?500cm \ 500cm 1 ?IOOOcm \ 和IOOOcm 1 ?1700cm 1 三個(gè)區(qū)段，其中 5_a 為 IOOOcm 1 ?1700cm 1 區(qū)段，5_b 為 500cm 1 ?IOOOcm 1 區(qū)段，5_c 為 300cm 1 ?500cm 1 區(qū)段。
[0075]參照上述繪制方法和分區(qū)方法，分別繪制得到鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖并進(jìn)行分區(qū)，得到如圖6所示的鹽酸吡格列酮的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜和如圖7所示的馬來(lái)酸二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜，如圖6所示，6-a為鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜中IOOOcm 1 ?1700cm 1 區(qū)段圖，6_b 為 500cm 1 ?IOOOcm 1 區(qū)段，6_c 為 300cm 1 ?500cm 1 區(qū)段；如圖7所示，7-a為馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜中l(wèi)OOOcm—1?1700cm 1 區(qū)段圖，7_b 為 500cm 1 ?1000cm 1 區(qū)段，7_c 為 300cm 1 ?500cm 1 區(qū)段。
[0076]步驟三(S3):對(duì)是否添加吡格列酮或羅格列酮進(jìn)行鑒定
[0077]將待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖分別與吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品以及羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖進(jìn)行比對(duì)，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中含有與吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)峰的出峰位置相差-W?w波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中含有吡格列酮，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中含有與羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)峰的出峰位置相差-W?W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中含有羅格列酮，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中不含有與吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中不含有吡格列酮和羅格列酮，W為5CHT1。
[0078]對(duì)照?qǐng)D5，6，7，對(duì)該待檢降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮或二者均有添加進(jìn)行分析。
[0079]對(duì)照?qǐng)D5-a、圖6-a、圖7_a，在lOOOcnT1~HOOcnT1區(qū)段，待檢降糖中藥中含有與羅格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相同的自動(dòng)峰1255CHT1和1329CHT1。
[0080]對(duì)照?qǐng)D5-b、圖6-b、圖7-b，在500CHT1~lOOOcnT1區(qū)段，待檢降糖中藥中含有與吡格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相同的自動(dòng)峰627CHT1，還含有與羅格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相同的自動(dòng)峰739CHT1。
[0081]對(duì)照?qǐng)D5-c、圖6-c、圖7-c，在300(^1~δΟΟαιT1區(qū)段，待檢降糖中藥中含有475cm_1處自動(dòng)峰,及414CHT1與43001^1處的正交叉峰,均與吡格列酮的相關(guān)峰的出峰情況相同。
[0082]綜合1000cm 1 ~1700cm \500cm 1 ~1000cm 1 和 300cm 1 ~500cm 1 三個(gè)區(qū)段，待檢降糖中藥的譜圖中出現(xiàn)414cm—1，430cm—1，475cm—1，824cm—1處相關(guān)峰，說(shuō)明含有鹽酸吡格列酮，出現(xiàn)739CHT1，1255CHT1，1329cm^處相關(guān)峰，說(shuō)明含有馬來(lái)酸羅格列酮。
[0083]根據(jù)以上分析結(jié)果，說(shuō)明該藥廠(chǎng)該批次生產(chǎn)的降糖中藥摻有吡格列酮和羅格列酮。
[0084]<實(shí)施例二 >
[0085]一、儀器和樣品
[0086](I)儀器:BWS415_785H型便攜式拉曼光譜儀(美國(guó)必達(dá)泰克公司)，激發(fā)波長(zhǎng)785nm ；
[0087](2)銀溶膠制備:取硝酸銀(AgNO3) 17mg加二次去離子水100mL溶解，加入I %的檸檬酸三鈉1.6ml，置微波爐中以高火加熱6min，溶液呈灰綠色，冷卻至室溫，加水至刻度處，備用。
[0088](3)待檢降糖中藥溶液和對(duì)照品溶液的制備:取B藥廠(chǎng)某批次生產(chǎn)的降糖中藥作為待檢降糖中藥，制成lmol/L的待檢降糖中藥的甲醇(分析純)溶液。
[0089]二、對(duì)待檢降糖中藥進(jìn)行檢測(cè)
[0090]圖8為本發(fā)明的技術(shù)方案在實(shí)施例二中的流程圖。
[0091]如圖8所示，在本實(shí)施例二中，測(cè)定該待檢降糖中藥中是否添加鹽酸吡格列酮或馬來(lái)酸羅格列酮，該方法包括:取I μ I待檢降糖中藥的甲醇溶液點(diǎn)于硅膠薄層板(以下簡(jiǎn)稱(chēng)薄層板)上，經(jīng)二氯甲烷-甲醇-水(8:2:0.2)展開(kāi)后，取出揮干，于紫外燈254nm下檢視，在吡格列酮或羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值處找到疑似斑點(diǎn)(Rf值為0.9)，還包括以下三個(gè)步驟:
[0092]步驟一(SI’):動(dòng)態(tài)光譜圖的采集
[0093]取5 μ I銀溶膠滴于疑似斑點(diǎn)上，將拉曼光譜儀的激光強(qiáng)度調(diào)至200mW，采用該拉曼光譜儀自身的激光光源發(fā)射激光，對(duì)疑似斑點(diǎn)持續(xù)照射進(jìn)行微擾，同時(shí)采集疑似斑點(diǎn)的一系列表面增強(qiáng)拉曼光譜，得到該待檢降糖中藥的動(dòng)態(tài)光譜，每張表面增強(qiáng)拉曼光譜的積分時(shí)間均為5s，在光譜采集過(guò)程中，保持激光強(qiáng)度不變，激光照射點(diǎn)不變。[0094]步驟二(S2’ ):二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的繪制
[0095]圖9為實(shí)施例二中待檢降糖中藥的預(yù)處理后拉曼光譜圖。
[0096]圖10為實(shí)施例二中待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜。
[0097]利用Matlab7.6軟件對(duì)該待檢降糖中藥的動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理，包括譜段選取(300cm—1~1700cm-1)、平滑(Sgolay法)和基線(xiàn)校正(airPLS法)，得到如圖9所示的該待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖。
[0098]通過(guò)2Dshiger versionl.3軟件,軟件動(dòng)態(tài)光譜設(shè)置為平均光譜，contour參數(shù)為8，對(duì)待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖進(jìn)行處理，繪制得到如圖10所示的該待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖，將該待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜(300cm 1~1700cm:)劃分為如圖10所不的300cm 1~500cm \ 500cm 1~1000cm \和lOOOcnT1 ~1700cm-1 三個(gè)區(qū)段，其中 10_a 為 1000cm-1 ~1700cm-1 區(qū)段，10_b 為 δΟΟαι1 ~1000crn 1 區(qū)段，10_c 為 300cm 1 ~500cm 1 區(qū)段。
[0099]步驟三(S3’ ):對(duì)是否添加吡格列酮或羅格列酮進(jìn)行鑒定
[0100]根據(jù)該待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖，當(dāng)該譜圖中含有與吡格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相差I(lǐng)~w波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中含有吡格列酮，當(dāng)該譜圖中含有與羅 格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中含有羅格列酮，當(dāng)該譜圖中不含有與吡格列酮和羅格列酮的的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷待檢降糖中藥中不含有吡格列酮和羅格列酮，W為δαι1,吡格列酮的相關(guān)峰的出峰位置為MHcnT1, 430cm_1, 475cm_1, 82401^1,羅格列酮的相關(guān)峰的出峰位置為:739cm \ 1255cm \ 1329cm、
[0101]由圖10-a、10-b、10-C可知，本實(shí)施例所提供的待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖中在414cm—1，430cm—1，475cm—1，824cm—1處的存在相關(guān)峰，說(shuō)明該藥廠(chǎng)該批次生產(chǎn)的降糖中藥摻有吡格列酮。
[0102]〈實(shí)施例三〉
[0103]一、儀器和樣品
[0104](I)儀器:BWS415_785H型便攜式拉曼光譜儀(美國(guó)必達(dá)泰克公司)，激發(fā)波長(zhǎng)785nm ；
[0105](2)銀溶膠制備:取硝酸銀(AgNO3) 17mg加二次去離子水100mL溶解，加入I %的檸檬酸三鈉1.6ml，置微波爐中以高火加熱6min，溶液呈灰綠色，冷卻至室溫，加水至刻度處，備用。
[0106](3)待檢降糖中藥溶液和對(duì)照品溶液的制備:取C藥廠(chǎng)某批次生產(chǎn)的降糖中藥作為待檢降糖中藥，制成lmol/L的待檢降糖中藥的甲醇(分析純)溶液。
[0107]二、對(duì)待檢降糖中藥進(jìn)行檢測(cè)
[0108]在本實(shí)施例三中，取I μ I待檢降糖中藥的甲醇溶液點(diǎn)于硅膠薄層板(以下簡(jiǎn)稱(chēng)薄層板)上，經(jīng)二氯甲烷-甲醇-水(8:2:0.2)展開(kāi)后，取出揮干，于紫外燈254nm下檢視，在鹽酸吡格列酮或馬來(lái)酸羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值處找到疑似斑點(diǎn)，參照實(shí)施例二中步驟一至步驟三的操作，對(duì)疑似斑點(diǎn)進(jìn)行動(dòng)態(tài)光譜圖的采集、二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的繪制、以及對(duì)是否添加吡格列酮或羅格列酮進(jìn)行鑒定。[0109]圖11為實(shí)施例三中待檢降糖中藥的預(yù)處理后拉曼光譜圖；
[0110]圖12為實(shí)施例三中待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜劃分為三個(gè)區(qū)段后得到的同步相關(guān)光譜。
[0111]通過(guò)Matlab7.6軟件對(duì)動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理后得到如圖11所示的該待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖，經(jīng)2Dshiger versionl.3軟件繪制得到如圖12所示的該降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖，
[0112]由圖12-a、12-b、12_c可知，本實(shí)施例所提供的待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖中在在739CHT1，1255cm-1, 1329^1處的存在相關(guān)峰，說(shuō)明該藥廠(chǎng)該批次生產(chǎn)的降糖中藥摻有馬來(lái)酸羅格列酮。
[0113]〈實(shí)施例四〉
[0114]一、儀器和樣品
[0115](I)儀器:BWS415-785H型便攜式拉曼光譜儀(美國(guó)必達(dá)泰克公司)，激發(fā)波長(zhǎng)785nm ；
[0116](2)銀溶膠制備:取硝酸銀(AgNO3) 17mg加二次去離子水100mL溶解，加入I %的檸檬酸三鈉1.6ml，置微波爐中以高火加熱6min，溶液呈灰綠色，冷卻至室溫，加水至刻度處，備用。
[0117](3)待檢降糖 中藥溶液和對(duì)照品溶液的制備:取D藥廠(chǎng)某批次生產(chǎn)的降糖中藥作為待檢降糖中藥，制成lmol/L的待檢降糖中藥的甲醇(分析純)溶液。
[0118]二、對(duì)待檢降糖中藥進(jìn)行檢測(cè)
[0119]在本實(shí)施例四中，取I μ I待檢降糖中藥的甲醇溶液點(diǎn)于硅膠薄層板(以下簡(jiǎn)稱(chēng)薄層板)上，經(jīng)二氯甲烷-甲醇-水(8:2:0.2)展開(kāi)后，取出揮干，于紫外燈254nm下檢視，在鹽酸吡格列酮或馬來(lái)酸羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值處找到疑似斑點(diǎn)，參照實(shí)施例二中步驟一至步驟三的操作，對(duì)疑似斑點(diǎn)進(jìn)行動(dòng)態(tài)光譜圖的采集、二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的繪制、以及對(duì)是否添加吡格列酮或羅格列酮進(jìn)行鑒定。
[0120]通過(guò)Matlab7.6軟件對(duì)動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理后得到該待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖，經(jīng)2Dshiger versionl.3軟件繪制得到該降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖，譜圖顯示，在414011' 430cm_1, 475cm_1, 824cm_1處沒(méi)有出現(xiàn)相關(guān)峰,說(shuō)明該待檢降糖中藥中不含有吡格列酮，在739CHT1，1255CHT1，1329cm^處也沒(méi)有出現(xiàn)相關(guān)峰，說(shuō)明該待檢降糖中藥中也不含有羅格列酮。
[0121]實(shí)施例的作用與效果
[0122]與【背景技術(shù)】相比，上述實(shí)施例一至四所提供的降糖中藥中添加吡格列酮或羅格列酮的鑒定方法的作用與積極效果為:
[0123]1.能夠?qū)堤侵兴幹惺欠裉砑舆粮窳型蛄_格列酮的進(jìn)行快速鑒別
[0124]本發(fā)明的技術(shù)方案采用激光對(duì)疑似斑點(diǎn)處進(jìn)行微擾，采用拉曼光譜儀檢測(cè)得到待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖，通過(guò)判斷該維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中是否含有與吡格列酮或羅格列酮的出峰位置相同的自動(dòng)峰或相關(guān)峰，即可實(shí)現(xiàn)對(duì)待檢降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮進(jìn)行判定，與HPLC和LC-MS相比，不需要苛刻的實(shí)驗(yàn)條件和復(fù)雜的樣品前處理工作，即可快速的鑒定出待檢降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮。[0125]2.特征性強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠
[0126]由于拉曼光譜法具有極強(qiáng)的特征性，且對(duì)檢測(cè)物質(zhì)的含量要求很低，因此根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案所得出的鑒定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，與TLC相比，避免了假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果的出現(xiàn)，能夠?yàn)樗幈O(jiān)部門(mén)的工作人員提供科學(xué)的依據(jù)和指導(dǎo)。
[0127]3.成本低，操作方便
[0128]本發(fā)明的技術(shù)方案采用薄層板和便攜式拉曼光譜儀進(jìn)行施行，設(shè)備和實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求簡(jiǎn)單，成本低，操作方便，可以對(duì)降糖中藥中是否添加馬來(lái)酸羅格列酮和鹽酸吡格列酮進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速鑒定。
[0129]4.微擾設(shè)計(jì)巧妙，簡(jiǎn)便快速、易于操作
[0130]采用實(shí)驗(yàn)所需的拉曼光譜儀自身的激光對(duì)點(diǎn)樣處進(jìn)行持續(xù)照射，從而產(chǎn)生熱量對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行微擾，獲得系列動(dòng)態(tài)SERS譜圖，進(jìn)而得到二維相關(guān)譜圖。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程無(wú)需外加干擾實(shí)驗(yàn)，只需調(diào)控激光能量即可，避免了人為施加微擾措施時(shí)可能出現(xiàn)的因溫度過(guò)高或PH變化過(guò)大等所致的樣品體系破壞的缺點(diǎn)，且操作簡(jiǎn)單，易于重現(xiàn)，便于藥監(jiān)人員進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。[0131]當(dāng)然，本發(fā)明所涉及的一種降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的鑒定方法并不僅僅限定于上述實(shí)施例中的內(nèi)容。以上內(nèi)容僅為本發(fā)明構(gòu)思下的基本說(shuō)明，而依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案所作的任何等效變換，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0132]另外，在上述實(shí)施例一至四中，拉曼光譜儀的激光強(qiáng)度為200mW。本發(fā)明的所涉及的激光強(qiáng)度可以為在動(dòng)態(tài)光譜采集過(guò)程中保證無(wú)樣品灼燒情況出現(xiàn)所采用的任何強(qiáng)度，優(yōu)選IOOmW~200mW之間的任意數(shù)值，優(yōu)選200mW。
[0133]另外,在上述實(shí)施例一至四中，w為5cm-1,本發(fā)明的技術(shù)方案w可以選自IcnT1至5cm_1之間的任意數(shù)值,優(yōu)選5cm-1。
[0134]另外，在上述實(shí)施例中，表面增強(qiáng)劑的點(diǎn)樣量為5μ L,在本發(fā)明的技術(shù)方案中，表面增強(qiáng)劑的點(diǎn)樣量可以選自2 μ L~10 μ L之間的任意數(shù)值，優(yōu)選4μ L~6 μ L之間的數(shù)值。
[0135]另外，在上述實(shí)施例一至四中，選擇二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖的同步譜進(jìn)行分析，本發(fā)明的技術(shù)方案還可以針對(duì)二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖的異步譜進(jìn)行分析。
[0136]另外，在上述實(shí)施例一至四中，動(dòng)態(tài)光譜的采集是等間隔時(shí)間段進(jìn)行采集，本發(fā)明的技術(shù)方案還可以是按照間隔時(shí)間遞增或者按照間隔時(shí)間遞減進(jìn)行采集，只要保證每張譜圖的積分時(shí)間相同即可。
[0137]另外，在上述實(shí)施例一至四中，所采用的表面增強(qiáng)劑為納米銀溶膠，本發(fā)明的技術(shù)方案采用的表面增強(qiáng)劑還可以為金溶膠或者金銀合膠，優(yōu)選納米銀溶膠。
[0138]另外，在上述實(shí)施例一至四中，所采用的激光由拉曼光譜儀自身的激光光源提供，本發(fā)明的技術(shù)方案所需的激光還可以通過(guò)外加激光光源提供。
[0139]另外，在上述實(shí)施例一至四中，采用Matlab7.6軟件對(duì)動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理后得到待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖，采用2Dshiger versionl.3軟件繪制得到降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼同步光譜圖，所采用的譜圖處理軟件僅是本發(fā)明的技術(shù)方案的基本說(shuō)明，還可以選擇其他能夠?qū)σ痪S拉曼光譜圖進(jìn)行處理得到二維拉曼光譜圖的軟件。
[0140]另外，實(shí)施例一所采用的技術(shù)方案還可以對(duì)僅含有一種摻雜物或不含有摻雜物的待檢降糖中藥進(jìn)行鑒定，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中含有與吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)峰的出峰位置相差-W?W波數(shù)的相關(guān)峰，則待檢降糖中藥中含有吡格列酮，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中含有與羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)峰的出峰位置相差-W?W波數(shù)的相關(guān)峰，則待檢降糖中藥中含有羅格列酮，當(dāng)待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中不含有與吡格列酮和羅格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相差-W?W波數(shù)的相關(guān)峰，則待檢降糖中藥中不含有吡格列酮和羅格列酮。
[0141]另外，上述實(shí)施例二至四所采用的技術(shù)方案，也能夠?qū)诫s有羅格列酮和吡格列酮兩種摻假物的待檢降糖中藥進(jìn)行鑒定。
[0142]另外，在上述實(shí)施例二至四所采用的技術(shù)方案中，吡格列酮或羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值為0.9，本發(fā)明的技術(shù)方案所涉及的吡格列酮或羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值會(huì)存在一定的誤差，在0.85-0.95之間。
【權(quán)利要求】
1.一種鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，該方法包括:取待檢降糖中藥進(jìn)行薄層層析，在吡格列酮和羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值處找到疑似斑點(diǎn)，其特征在于，還包括以下三個(gè)步驟: 步驟一:動(dòng)態(tài)光譜圖的采集 取表面增強(qiáng)劑點(diǎn)于所述疑似斑點(diǎn)上，采用拉曼光譜儀，選取一定強(qiáng)度的激光對(duì)所述疑似斑點(diǎn)持續(xù)照射進(jìn)行微擾，并采集所述疑似斑點(diǎn)的一系列的一維表面增強(qiáng)拉曼光譜，得到所述待檢降糖中藥的動(dòng)態(tài)譜圖，每張一維表面增強(qiáng)拉曼光譜的積分時(shí)間相同，所述一定強(qiáng)度為IOOmW~200mW之間的任意數(shù)值，所述表面增強(qiáng)劑為金溶膠、銀溶膠或金銀合膠，所述表面增強(qiáng)劑的點(diǎn)樣量為2 μ L~10 μ L ; 步驟二:二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的繪制 對(duì)所述動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理，包括選取300cm-1~17OOcm-1譜段、采用Sgolay法進(jìn)行平滑并采用airPLS法進(jìn)行基線(xiàn)校正，得到所述待檢降糖中藥的預(yù)處理拉曼光譜圖，根據(jù)所述預(yù)處理拉曼光譜圖，繪制得到所述待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖； 步驟三:對(duì)添加吡格列酮或羅格列酮進(jìn)行鑒定 根據(jù)所述待檢降糖中藥的所述二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖，當(dāng)該譜圖中含有與所述吡格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相差I(lǐng)~w波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷所述待檢降糖中藥中含有所述吡格列酮，當(dāng)該譜圖中含有與所述羅格列酮的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~w波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷所述待檢降糖中藥中含有所述羅格列酮，當(dāng)該譜圖中不含有與所述吡格列酮和所述羅格列酮的的相關(guān)峰的出峰位置相差-W~w波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷所述待檢降糖中藥中不含有所述吡格列酮和所述羅格列酮，w為IcnT1~5cm—1之間的任意數(shù)值，所述吡格列酮的相關(guān)峰的出峰位置為:414(^1, 430cm_1, 475cm_1, 824(^1,所述羅格列酮的相關(guān)峰的出峰位置為:739cm \ 1255cm \ 1329cm、
2.一種鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，該方法包括:取待檢降糖中藥進(jìn)行薄層層析，在吡格列酮和羅格列酮相對(duì)應(yīng)的Rf值處找到疑似斑點(diǎn)，其特征在于，還包括以下三個(gè)步驟: 步驟一:動(dòng)態(tài)光譜圖的采集 將所述待檢降糖中藥、吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行薄層層析后，在薄層板上找到疑似斑點(diǎn)、吡格列酮和羅格列酮三個(gè)斑點(diǎn)， 取表面增強(qiáng)劑分別點(diǎn)于三個(gè)所述斑點(diǎn)上，采用拉曼光譜儀，選取一定強(qiáng)度的激光分別對(duì)三個(gè)所述斑點(diǎn)持續(xù)照射進(jìn)行微擾，并分別采集三個(gè)所述斑點(diǎn)的一系列一維表面增強(qiáng)拉曼光譜，得到所述疑似斑點(diǎn)、所述吡格列酮和所述羅格列酮的動(dòng)態(tài)光譜圖，每個(gè)斑點(diǎn)的所有一維表面增強(qiáng)拉曼光譜的積分時(shí)間均相同，所述一定強(qiáng)度為IOOmW~200mW之間的任意數(shù)值，所述表面增強(qiáng)劑為金溶膠、銀溶膠或金銀合膠，所述表面增強(qiáng)劑的點(diǎn)樣量為2 μ L~10 μ L ; 步驟二:二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的繪制 分別對(duì)所述待檢降糖中藥、所述吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和所述羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的所述動(dòng)態(tài)光譜圖進(jìn)行預(yù)處理，包括選取SOOcnr1~HOOcnT1譜段、采用Sgolay法進(jìn)行平滑并采用airPLS法進(jìn)行基線(xiàn)校正，得到所述待檢降糖中藥、所述吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和所述羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的預(yù)處理拉曼光譜圖，根據(jù)所述預(yù)處理拉曼光譜圖，分別繪制得到三者的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖；步驟三:二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖的分析與判斷 將所述待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖分別與所述吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品以及所述羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖進(jìn)行比對(duì)，當(dāng)所述待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中含有與所述吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)峰的出峰位置相差I(lǐng)~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷所述待檢降糖中藥中含有吡格列酮，當(dāng)所述待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中含有與所述羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)峰的出峰位置相差I(lǐng)~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷所述待檢降糖中藥中含有羅格列酮，當(dāng)所述待檢降糖中藥的二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖中不含有與所述吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品和所述羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品的的相關(guān)峰的出峰位置相差I(lǐng)~W波數(shù)的相關(guān)峰，則判斷所述待檢降糖中藥中不含有吡格列酮和羅格列酮，W為Icm-1~5cm-1之間的任意數(shù)值。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，其特征在于:所述吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品為鹽酸吡格列酮標(biāo)準(zhǔn)品，所述羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品為馬來(lái)酸羅格列酮標(biāo)準(zhǔn)品。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，其特征在于:所述一定強(qiáng)度為200mW。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，其特征在于:所述二維相關(guān)表面增強(qiáng)拉曼光譜圖為同步譜。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，其特征在于:所述激光由拉曼光譜儀自身的激光光源提供。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，其特征在于:所述表面增強(qiáng)劑為納米銀溶膠。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，其特征在于:所述表面增強(qiáng)劑的點(diǎn)樣量為4μ L~6μ L。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的鑒定降糖中藥中是否添加吡格列酮或羅格列酮的方法，其特征在于:w為5CHT1。
【文檔編號(hào)】G01N21/65GK103954608SQ201410211927
【公開(kāi)日】2014年7月30日 申請(qǐng)日期:2014年5月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月20日
【發(fā)明者】陸峰, 朱青霞, 李皓, 柴逸峰 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)