一種流動(dòng)注射熒光法測定過氧化氫的裝置制造方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種流動(dòng)注射熒光法測定過氧化氫的裝置。它包括有熒光劑流動(dòng)注射器（1）、水樣品流動(dòng)注射器（2）、離子交換柱（5）、毛細(xì)管（8）、反應(yīng)槽（9）和熒光檢測光譜儀（10），熒光劑流動(dòng)注射器（1）經(jīng)第一閥門（3）連通反應(yīng)槽（9），水樣品流動(dòng)注射器（2）經(jīng)第二閥門（4）連通離子交換柱（5），離子交換柱（5）出口的一條管路經(jīng)第三閥門（6）連通反應(yīng)槽（9）、另一條管路經(jīng)第四閥門（7）和固定過氧化氫酶的毛細(xì)管（8）后連通反應(yīng)槽（9），反應(yīng)槽（9）連接熒光檢測光譜儀（10）。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：檢測精度高，檢出限低，檢測速度快，可實(shí)現(xiàn)完全自動(dòng)化，試劑耗量少，避免了多次添加試劑，多次測定的麻煩，使得實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性好。
【專利說明】一種流動(dòng)注射熒光法測定過氧化氫的裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種過氧化氫的測量裝置，具體涉及一種流動(dòng)注射熒光法測定過氧化
氫的裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]過氧化氫是環(huán)境分析、臨床檢驗(yàn)和酶分析的重要檢測對象，天然水體中的H2O2與水體中的光化學(xué)反應(yīng)、氧化還原反應(yīng)有密切關(guān)系，是影響化學(xué)物質(zhì)(金屬離子、腐殖質(zhì)等）在水環(huán)境中的遷移、轉(zhuǎn)化、歸宿及生態(tài)效應(yīng)的重要因素。因此，對于水中H2O2的檢測受到廣泛的關(guān)注。目前，國內(nèi)外對水環(huán)境中H2O2的分析方法主要分為化學(xué)發(fā)光法、突光法、分光光度法、過氧化氫傳感法，其中化學(xué)發(fā)光法和熒光法應(yīng)用最為廣泛。
[0003]采用普通的莨菪亭一熒光法、對羥基苯乙酸一熒光法雖然檢出限低，但實(shí)驗(yàn)過程復(fù)雜、人力消耗大、耗時(shí)長、重復(fù)性差、酶消耗量大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題就是提供一種流動(dòng)注射熒光法測定過氧化氫的裝置，它在測定水中微量過氧化氫含量時(shí)使用簡便、測試速度快、重復(fù)性好、酶耗量少。
[0005]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過這樣的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，它包括有熒光劑流動(dòng)注射器、水樣品流動(dòng)注射器、離子交換柱、毛細(xì)管、反應(yīng)槽和熒光檢測光譜儀，熒光劑流動(dòng)注射器經(jīng)第一閥門連通反應(yīng)槽，水樣品流動(dòng)注射器經(jīng)第二閥門連通離子交換柱，離子交換柱出口的一條管路經(jīng)第三閥門連通反應(yīng)槽、另一條管路經(jīng)第四閥門和固定過氧化氫酶的毛細(xì)管后連通反應(yīng)槽，反應(yīng)槽連接熒光檢測光譜儀。
[0006]所述離子交換柱為填充有酚羥基修飾的超高交聯(lián)吸附樹脂、陽離子樹脂與陰離子樹脂混合物的玻璃管，玻璃管兩端塞上玻璃棉，以防止混合物樹脂流失。所述陽離子樹脂選用732型陽離子交換樹脂；所述陰離子樹脂選用717型陰離子交換樹脂。酚羥基修飾的超高交聯(lián)吸附樹脂對水中有機(jī)物特別是腐殖酸有較好的吸附性，陰陽離子交換樹脂均勻混合，可同時(shí)去除水中陰陽離子。
[0007]毛細(xì)管上固定有過氧化氫酶，既可以減少過氧化氫酶的消耗，又可以增加過氧化氫酶的穩(wěn)定性，通過毛細(xì)管固定過氧化氫酶發(fā)生酶促反應(yīng)，反應(yīng)條件溫和，酶不易脫落，酶耗量少。
[0008]上述反應(yīng)槽帶有磁力攪拌器，通過攪拌能加水快樣品與熒光劑反應(yīng)速率以及提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。
[0009]本發(fā)明的工作原理是：待測水樣品經(jīng)過裝有酚羥基修飾的超高交聯(lián)吸附樹脂、732型陽離子交換樹脂與717型陰離子交換樹脂混合物的離子交換柱后，水樣品中去除了大部
分無機(jī)離子（Cr、Mg知、SO43、AT等）和有機(jī)物特別是腐殖酸，避免一些無機(jī)離子和有機(jī)
物對過氧化氫測定的干擾。首先，未加任何試劑的水樣品進(jìn)入反應(yīng)槽，由熒光檢測光譜儀測出水樣品自身所含有的熒光物質(zhì)濃度（NAT)。其次，通過熒光劑流動(dòng)注射器注入熒光劑，熒光劑與水樣品在反應(yīng)槽內(nèi)經(jīng)攪拌迅速反應(yīng)，熒光劑可與水樣品中有機(jī)過氧化物反應(yīng)生成熒光物質(zhì)，混合液通過熒光檢測光譜儀可測出水樣中總的過氧化物濃度（TFL )。最后，為消除水中其他過氧化物干擾，得到準(zhǔn)確的過氧化氫濃度，使去離子水樣品通過固定有過氧化氫酶的毛細(xì)管，利用酶的專一性，催化反應(yīng)水中的過氧化氫，得到不含過氧化氫的水樣品與熒光劑反應(yīng)，通過熒光檢測光譜儀可測得水樣品中不含過氧化氫的其他過氧化物濃度（FL)。由此可得出水樣品中過氧化氫濃度=TFL- (FL+NAT )。
[0010]本發(fā)明具有如下的優(yōu)點(diǎn)：檢測精度高，檢出限低，檢測速度快，可實(shí)現(xiàn)完全自動(dòng)化，并且試劑耗量少，避免了多次添加試劑，多次測定的麻煩，使得實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性好。通過更換熒光檢測光譜儀、熒光劑等可以實(shí)現(xiàn)多種微量物質(zhì)的測定。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0011]本發(fā)明的【專利附圖】

【附圖說明】如下：
圖I為本發(fā)明的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0012]圖中：1.熒光劑流動(dòng)注射器；2.水樣品流動(dòng)注射器；3.第一閥門；4.第二閥門；
5.離子交換柱；6.第三閥門；7.第四閥門；8.毛細(xì)管；9.反應(yīng)槽；10.熒光檢測光譜儀。
【具體實(shí)施方式】
[0013]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明：
如圖I所示，本發(fā)明包括有熒光劑流動(dòng)注射器I、水樣品流動(dòng)注射器2、離子交換柱5、毛細(xì)管8、反應(yīng)槽9和熒光檢測光譜儀10，熒光劑流動(dòng)注射器I經(jīng)第一閥門3連通反應(yīng)槽9，水樣品流動(dòng)注射器2經(jīng)第二閥門4連通離子交換柱5，離子交換柱5出口的一條管路經(jīng)第三閥門6連通反應(yīng)槽9、另一條管路經(jīng)第四閥門7和固定過氧化氫酶的毛細(xì)管8后連通反應(yīng)槽9，反應(yīng)槽9連接熒光檢測光譜儀10。
[0014]上述各部件之間的連接管均用聚四氟乙烯管。
[0015]使用本發(fā)明測定水樣品的過氧化氫分以下三個(gè)步驟：
首先，打開第二閥門4，同時(shí)關(guān)閉了第二閥門4的廢液排出口 ；關(guān)閉第四閥門7，打開第三閥門6，水樣品流動(dòng)注射器2中的水樣品進(jìn)入離子交換柱5，進(jìn)行離子交換和有機(jī)物的吸
附，去除水樣中巧、Mg知、CT、SOl等若干離子以及有機(jī)物的干擾，水樣品快速流至反應(yīng)
槽9，由熒光檢測光譜儀測得未加任何試劑待測樣品的熒光值（MT)。
[0016]第二步，打開第一閥門3，同時(shí)關(guān)閉了第一閥門3的廢液排出口 ；通過熒光劑流動(dòng)注射器I注入熒光劑，熒光劑選用莨菪亭或?qū)αu基苯乙酸，熒光劑與第一步流入反應(yīng)槽9的水樣品混合，經(jīng)磁力攪拌器攪拌均勻混合后由熒光檢測光譜儀測試，大約1-2分鐘后記錄其恒定的熒光信號(hào)（TFL);排除反應(yīng)槽9中的測試水樣品。
[0017]第三步，打開第四閥門7，關(guān)閉第三閥門6，通過離子交換柱的待測水樣品流過毛細(xì)管8，流速大約為I. 7ml/min,毛細(xì)管8上固定有過氧化氫酶，它能催化反應(yīng)水樣品中的過氧化氫，不含過氧化氫的水樣與熒光試劑進(jìn)入反應(yīng)槽9 ;打開第一閥門3從熒光劑流動(dòng)注射器I注入熒光劑到反應(yīng)槽9，經(jīng)磁力攪拌器混合均勻，再由熒光檢測光譜儀測定其熒光值(FL)。由此可得出水樣品中過氧化氫的熒光值=TFL-(FL+NAT)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后或清洗裝置后可打開閥門排出廢液。[0018]水樣品通過水樣品流動(dòng)注射器2進(jìn)入離子交換柱5，去除水樣中無機(jī)離子和有機(jī)物后進(jìn)入反應(yīng)槽9進(jìn)行測試；熒光劑(莨菪亭或?qū)αu基苯乙酸)通過熒光劑流動(dòng)注射器1進(jìn)入反應(yīng)槽9，通過對進(jìn)液時(shí)間的控制再進(jìn)行測試，兩次分別測得水樣品中熒光物質(zhì)濃度、水樣品中總過氧化物濃度。通過閥門控制，去離子水樣通過毛細(xì)管8，在過氧化物酶的催化下，測得剩余過氧化物濃度。經(jīng)計(jì)算獲得水樣品中的過氧化氫濃度。本發(fā)明綜合利用了各部分的優(yōu)勢，加快了實(shí)驗(yàn)速度，避免了水中無機(jī)離子對實(shí)驗(yàn)的干擾，使酶的利用率達(dá)到最大化，節(jié)省了酶的使用量，提高了反應(yīng)速度和實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)性。
[0019]本發(fā)明的所有控制閥門與控制器相連實(shí)現(xiàn)對樣品和試劑使用量、注入時(shí)間、管內(nèi)流速，廢液排除等完全自動(dòng)化控制。
[0020]本發(fā)明可以通過改變待測樣品、使用試劑或更換不同類型的測定儀器，實(shí)現(xiàn)多種物質(zhì)的測定。
【權(quán)利要求】
1.一種流動(dòng)注射熒光法測定過氧化氫的裝置，其特征是:包括有熒光劑流動(dòng)注射器(I)、水樣品流動(dòng)注射器(2)、離子交換柱(5)、毛細(xì)管(8)、反應(yīng)槽(9)和熒光檢測光譜儀(10)，熒光劑流動(dòng)注射器(I)經(jīng)第一閥門(3)連通反應(yīng)槽(9)，水樣品流動(dòng)注射器(2)經(jīng)第二閥門(4)連通離子交換柱(5 )，離子交換柱(5 )出口的一條管路經(jīng)第三閥門(6 )連通反應(yīng)槽(9)、另一條管路經(jīng)第四閥門(7)和固定過氧化氫酶的毛細(xì)管(8)后連通反應(yīng)槽(9)，反應(yīng)槽(9)連接熒光檢測光譜儀(10)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的流動(dòng)注射熒光法測定過氧化氫的裝置，其特征是:所述離子交換柱(5)為填充有酚羥基修飾的超高交聯(lián)吸附樹脂、陽離子樹脂與陰離子樹脂混合物的玻璃管，玻璃管兩端塞上玻璃棉。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的流動(dòng)注射熒光法測定過氧化氫的裝置，其特征是:所述陽離子樹脂為732型陽離子交換樹脂；所述陰離子樹脂為717型陰離子交換樹脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的流動(dòng)注射熒光法測定過氧化氫的裝置，其特征是:所述反應(yīng)槽(9)帶有磁力攪拌器。
【文檔編號(hào)】G01N21/64GK103837514SQ201410092311
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月13日
【發(fā)明者】馬華, 張潔 申請人:重慶大學(xué)