專利名稱：多人多項檢測板及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種同時檢測多人血液中多個項目的檢測板，屬于醫(yī)學(xué)設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種多人多項檢測板及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
人體血液中各項生化指標(biāo)的準確檢測對于臨床醫(yī)學(xué)診斷具有重要意義。目前，血液中各項生化指標(biāo)的檢測通常根據(jù)被測物相關(guān)檢測原理由生化分析儀及相應(yīng)反應(yīng)試劑控制完成，其應(yīng)用已較為廣泛。但其也存在一定缺點，如一般生化分析儀本身體積較大、樣本檢測時間長、操作相對復(fù)雜等。近年來，干式化學(xué)檢測技術(shù)發(fā)展迅速，成為一項新型生化檢驗技術(shù)的儀器。干式化學(xué)檢測技術(shù)以其獨特的性能正在為臨床實驗室所接受，成為臨床生化檢驗常規(guī)和急診檢測工作的新生力量。與傳統(tǒng)方法相比，它具有操作簡單、速度快、污染少、結(jié)果穩(wěn)定準確等諸多優(yōu)點。干式化學(xué)檢測的方式，通常是將參與反應(yīng)的各化學(xué)、生物試劑按比例配成溶液，加于固相反應(yīng)載體之上，經(jīng)干燥后可用于臨床檢測。檢測過程中，干式化學(xué)檢測方法中應(yīng)用的化學(xué)試劑溶解速度快、局部濃度高、反應(yīng)速度快，同時，可保證一些試劑在固體干物料狀態(tài)下保持長期穩(wěn)定。干式化學(xué)檢測技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)檢測領(lǐng)域?qū)儆谛屡d技術(shù)，在國內(nèi)外應(yīng)用中，大多數(shù)只是單獨的針對一人一種血液指標(biāo)進行檢測，雖然具有速度快，穩(wěn)定性高等特點，但不能很好的實現(xiàn)多人且同時檢測多個項目?，F(xiàn)有技術(shù)中對干式化學(xué)檢測技術(shù)的專利報道主要針對采用光電信號傳輸?shù)臋z測儀，通過采集信號、分析數(shù)據(jù)，快速得出結(jié)果。對于基于干式化學(xué)法檢測原理，對血液信息采集分析的檢測板鮮見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種多人多項檢測板及其制備方法和應(yīng)用，解決多人血液樣本中多項指標(biāo)的檢測問題，大大提高了檢測效率，降低成本，檢測效果良好準確，操作簡單，使用方便。本發(fā)明是通過以下的技術(shù)方案實現(xiàn)的一種多人多項檢測板，包括血標(biāo)本分離裝置和固相試劑反應(yīng)載體，所述血標(biāo)本分離裝置為若干個，開設(shè)在承載基板上，其內(nèi)部固定樣本載體，所述固相試劑反應(yīng)載體安裝在承載蓋板上，所述承載基板和承載蓋板通過連接裝置固定安裝。所述血標(biāo)本分離裝置為槽式容器，本體內(nèi)嵌在所述承載基板上。所述樣本載體根據(jù)檢測項目需要可選擇不同材料的市售的血標(biāo)本過濾或承載材料，作為樣本載體，如不同孔徑的玻璃纖維材料、棉質(zhì)材料等。所述承載基板是由聚乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯和有機玻璃中的一種材料制成。除上述優(yōu)選材料之外，其他硬度高的疏水高分子材料也可以用于承載基板的制備。
上述的血標(biāo)本分離裝置和其加裝固定的樣本載體組成了血標(biāo)本分離區(qū)，采集的血標(biāo)本滴入血標(biāo)本分離裝置后經(jīng)樣本載體處理，在這個區(qū)域?qū)崿F(xiàn)全血中的血清或血漿與血細胞的自動分離。所述承載蓋板上設(shè)置若干與所述血標(biāo)本分離裝置位置相對應(yīng)的窗口。所述固相試劑反應(yīng)載體是一種高分子膜。所述每一個窗口粘貼覆蓋一個固相試劑反應(yīng)載體。這樣固相試劑反應(yīng)載體的膜結(jié)構(gòu)彼此分開，互相獨立，可用于一人份或多人份血液不同項目的檢測。所述連接裝置是一個彈性墊，彈性墊具有一定的厚度和彈性，兩邊有粘合劑，將載體基板和載體蓋板進行非密封連接。承載蓋板和固相試劑反應(yīng)載體組成了固相試劑反應(yīng)區(qū)，將需要檢測的各種化學(xué)反應(yīng)試劑和顯色劑預(yù)先固定在固相試劑反應(yīng)載體上。樣本載體和固相試劑反應(yīng)載體之間在特定儀器控制下相接觸，在血標(biāo)本分離區(qū)分離完成后的血清或血漿被測物與固相試劑反應(yīng)載體上的化學(xué)試劑接觸后，發(fā)生顯色反應(yīng)， 經(jīng)特定的檢測儀檢測，通過光學(xué)傳感器，檢測反應(yīng)膜上的顏色變化，進而計算出被測物的濃度。本發(fā)明還提供這種多人多項檢測板的制備方法，是通過以下的步驟實現(xiàn)的(1)切割固定按照互相配合的規(guī)格加工制作承載基板和承載蓋板，在承載基板上開設(shè)血標(biāo)本分離裝置凹槽，在承載蓋板上開設(shè)窗口，切割對應(yīng)尺寸的固相試劑反應(yīng)載體、 樣本載體，將樣本載體固定在血標(biāo)本分離裝置后一同固定在承載基板上，將固相試劑反應(yīng)載體通過熱合方式粘貼覆蓋在承載蓋板的窗口上；(2)點樣將檢測項目所需要的反應(yīng)試劑，定量點樣于固相試劑反應(yīng)載體和樣本載體上；(3)干燥將點樣后的固相試劑反應(yīng)載體和樣本載體在30 60°C烘箱中干燥 30 120min。(4)組裝將承載蓋板和承載基板通過連接裝置進行非密封連接。所述步驟(1)中的熱合溫度為300 500°C。本發(fā)明的有益效果為臨床使用時可在短時間內(nèi)同時檢測出多人多項血液指標(biāo)， 突破了國內(nèi)外無法實現(xiàn)多項目同時檢測的缺陷；本發(fā)明涉及產(chǎn)品多人多項目檢測板的設(shè)計開發(fā)及技術(shù)路線科學(xué)、合理，自動化程度高，功能齊全，外觀精巧，方便易用。


圖1是Hb、ALT雙人雙項檢測板結(jié)構(gòu)示意2是TG、ALT雙人雙項檢測板結(jié)構(gòu)示意3是固相試劑反應(yīng)載體和承載蓋板的放大圖
具體實施例方式以下結(jié)合附圖和實施例，對本發(fā)明做進一步說明。實施例1 Hb、ALT雙人雙項檢測板
1、原理Hb、ALT雙人雙項檢測板在檢測方面的應(yīng)用基于疊氮高鐵血紅蛋白法和丙酮酸氧化酶法，實現(xiàn)血紅蛋白(Hb)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)在不同窗口完成定量測定，該法檢測結(jié)果穩(wěn)定、準確度高。檢測板分為兩個區(qū)，且每個區(qū)包括樣品區(qū)和反應(yīng)區(qū)。其中全血分別在兩個區(qū)的樣品區(qū)擴散后分別傳送到反應(yīng)區(qū)，反應(yīng)區(qū)的固相反應(yīng)載體膜上預(yù)先固化著反應(yīng)試劑。反應(yīng)試劑分別與血紅蛋白(Hb)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)發(fā)生反應(yīng)，最終在載體膜上產(chǎn)生明顯顏色變化，根據(jù)被測物Hb、ALT濃度的不同，呈現(xiàn)出不同程度的顏色變化，再由干片式快速檢測儀利用反射光度法比色原理進行定量檢測，通過對反應(yīng)終點的顏色測定計算標(biāo)本中Hb 濃度，通過反應(yīng)過程中的顏色變化速率計算ALT濃度。化學(xué)反應(yīng)式如下Hb Hb+NaN02 — HiHi+NaN3 — HiN3ALT
丙氨酸+ α-酮戊二酸喊alt^ 丙酮酸+谷氨酸
丙酮酸+磷酸鹽+O2+ H2O丙酮酸氧化酶乙酰磷酸+ H2O2+ CO2
過氧化物酶
顯色劑(還原態(tài))+ H2O2 --顯色劑(氧化態(tài))+ H2O2、主要組成成份每片檢測板上每個Hb通道固相試劑反應(yīng)載體及樣本載體上含有下列物質(zhì)
疊氮化鈉20. Opg
亞硝酸鈉15. 5 Ug
去氧膽酸納30. 7 jig
輔料22. 8每片檢測板上每個ALT通道固相試劑反應(yīng)載體上含有下列物質(zhì)L-丙氨酸200|ngOC-酮戊二酸25. 7 μ gTPP10.9μ8丙酮酸氧化晦>1.2U過氧化物酶>20U顯色劑24. 8 jig3, Hb, ALT檢測板的制備(如圖1)①切割固定將固相反應(yīng)載體膜1、樣本墊4、加樣槽3按規(guī)格切割，加工制作尺寸配合的承載基板和承載蓋板，在本實施例中為硬質(zhì)基板5和塑料條架2。將樣本墊4加裝于加樣槽3 ；將固相反應(yīng)載體膜1覆蓋在塑料條架2上。②點樣按檢測Hb所需試劑配方，配制反應(yīng)工作液I，定量1. 5-2. 5 μ 1/片點樣于固相反應(yīng)載體膜上；反應(yīng)工作液II，定量15-18 μ 1/片點樣于樣本墊上。按檢測ALT所需的配方，配制工作液，定量1. 5-2. 5 μ 1/片點樣于固相反應(yīng)載體膜上。③干燥將點樣后的固相反應(yīng)載體膜和樣本墊在40°C干燥箱中干燥100 120mino④組裝將塑料條架2與硬質(zhì)基板5通過彈性墊6的上下兩層黏合劑固定在一起。 加裝干燥劑、除氧劑，密封于鋁箔袋中，2-8 °C冰箱中儲存、備用。4、臨床檢測取指尖末梢血，分別加于檢測板的不同加樣槽內(nèi)，并將檢測板放于檢測儀內(nèi)，4分鐘內(nèi)檢測儀自動顯示結(jié)果。實施例2TG、ALT雙人雙項檢測板1、原理TG、ALT雙人雙項檢測板利用血標(biāo)本中甘油三酯(TG)和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)在不同窗口與不同試劑反應(yīng)，制備多項目檢測板。該檢測板包括樣品區(qū)和反應(yīng)區(qū)。其中全血在樣品區(qū)擴散、過濾后，血清可傳送到反應(yīng)區(qū)，反應(yīng)區(qū)的固相反應(yīng)載體膜上預(yù)先固化著反應(yīng)試劑。反應(yīng)試劑分別與TG、ALT發(fā)生反應(yīng)，最終在載體膜上產(chǎn)生明顯顏色變化，根據(jù)被測物濃度的不同，呈現(xiàn)出不同程度的顏色變化，再由干片式快速檢測儀利用反射光度法比色原理進行定量檢測，通過對反應(yīng)終點的顏色或反應(yīng)過程顏色變化速率測定出標(biāo)本中被測物的濃度。反應(yīng)原理如下甘油三酯
LPL
甘油三酯+ 3H20 -- 甘油+ 3脂肪酸甘油+ ATP
GK, Mg2+
磷酸甘油+ O2 + 2H20
GPO
H2O2 +還原型顯色劑
POD
3-磷酸甘油+ ADP 2H202 +磷酸二羥丙酮
H2O +氧化型顯色劑ALT
丙孰酸+ OC-酮戊二酸
ALT
丙酮酸+谷氛酸乙醜碑酸+ H2O2+ CO2
H2O
丙酮酸+磷酸鹽+O2+ H2O丙胃薩傾 ι
顯色劑(還原態(tài))+ Η,Ο,過氧化物酶，顯色劑(氧化態(tài))2、主要組成成份每片檢測板每個固相試劑反應(yīng)載體上含有的物質(zhì)TG 通道
脂蛋白脂酶(LPL)>24U
甘油激酶(GK)>3. 6U
三磷酸腺苷(ATP)15 jug
磷酸甘油氧化酶(GPO ) > 22U 過氧化物酶>15U
顯色劑13. 5 HgALT 通道L-丙氛酸200 |ig
α-酮戊二酸25. 7 pg
TPP10. 9 Mg
丙酮酸氧化酶>1. 2U
過氧化物酶>2 OU
顯色劑24. 8 jug3、檢測板的制備(如圖2)①切割固定將固相反應(yīng)載體膜1、樣本墊4、加樣槽3按規(guī)格切割，加工制作尺寸
配合的承載基板和承載蓋板，在本實施例中為硬質(zhì)基板5和塑料條架2。將樣本墊4加裝于
加樣槽3 ；將固相反應(yīng)載體膜1覆蓋在塑料條架2上。②點樣按檢測所需試劑配方，配制反應(yīng)工作液，分別加在固相反應(yīng)載體膜1上。③干燥將點樣后的固相反應(yīng)載體膜在40°C干燥箱中干燥100 120min。④組裝將塑料條架2與硬質(zhì)基板5通過彈性墊6的上下兩層黏合劑固定在一起。
加裝干燥劑、除氧劑，密封于鋁箔袋中，2-8 °C冰箱中儲存、備用。4、臨床檢測取指尖末梢血，分別加于檢測板的不同加樣槽內(nèi)，并將檢測板放于檢測儀內(nèi)，4分
鐘內(nèi)檢測儀自動顯示結(jié)果。如圖3，是固相試劑反應(yīng)載體和承載蓋板的放大圖，在上述兩個實施例中，固相反
應(yīng)載體膜1均是固定安裝在塑料條架2的窗口 7上。
權(quán)利要求
1.一種多人多項檢測板，包括血標(biāo)本分離裝置和固相試劑反應(yīng)載體，其特征在于所述血標(biāo)本分離裝置為若干個，開設(shè)在承載基板上，其內(nèi)部固定樣本載體，所述固相試劑反應(yīng)載體固定在承載蓋板上，所述承載基板和承載蓋板通過連接裝置固定安裝。
2.如權(quán)利要求1所述的多人多項檢測板，其特征在于所述血標(biāo)本分離裝置為槽式容器，本體內(nèi)嵌在所述承載基板上。
3.如權(quán)利要求1所述的多人多項檢測板，其特征在于所述承載基板是由聚乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯和有機玻璃中的一種材料制成。
4.如權(quán)利要求1所述的多人多項檢測板，其特征在于所述承載蓋板上設(shè)置若干與所述血標(biāo)本分離裝置位置相對應(yīng)的窗口。
5.如權(quán)利要求1或4所述的多人多項檢測板，其特征在于所述每一個窗口粘貼覆蓋一個固相試劑反應(yīng)載體。
6.如權(quán)利要求1所述的多人多項檢測板，其特征在于所述連接裝置是一個彈性墊，將所述載體基板和載體蓋板進行非密封連接。
7.一種多人多項檢測板的制備方法，其特征在于是通過以下的步驟實現(xiàn)的(1)切割固定按照互相配合的規(guī)格加工制作承載基板和承載蓋板，在承載基板上開設(shè)血標(biāo)本分離裝置凹槽，在承載蓋板上開設(shè)窗口，切割對應(yīng)尺寸的固相試劑反應(yīng)載體和樣本載體，將樣本載體固定在血標(biāo)本分離裝置后一同固定在承載基板上，將固相試劑反應(yīng)載體熱合粘貼覆蓋在承載蓋板的窗口上；(2)點樣將檢測項目所需要的反應(yīng)試劑，定量點樣于固相試劑反應(yīng)載體和樣本載體上；(3)干燥將點樣后的固相試劑反應(yīng)載體和樣本載體在30 60°C烘箱中干燥30 120min ；(4)組裝將承載蓋板和承載基板通過連接裝置進行非密封連接。
8.如權(quán)利要求7所述的多人多項檢測板的制備方法，其特征在于所述步驟(1)中的熱合溫度為300 500°C。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種多人多項檢測板及其制備方法和應(yīng)用，其特征在于包括血標(biāo)本分離區(qū)和固相試劑反應(yīng)區(qū)，其中血標(biāo)本分離區(qū)的若干個血標(biāo)本分離裝置將全血中的血清或血漿與血細胞自動分離并傳送至固相試劑反應(yīng)區(qū)對應(yīng)的反應(yīng)載體上進行顯色反應(yīng)，達到檢測效果；本發(fā)明亦公開了這種檢測板的制備方法。本發(fā)明一次檢測多個項目的設(shè)計，加快了檢測效率，降低成本，并且具有良好的檢測效果，自動化程度高，功能齊全，方便易用。
文檔編號G01N21/78GK102323260SQ20111021697
公開日2012年1月18日 申請日期2011年8月1日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月1日
發(fā)明者呂麗媛, 呂煒鋒, 白偉, 趙蕊, 鄭先龍, 郝曦東 申請人:無錫藍德生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司