專利名稱：非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于水質(zhì)成分在線檢測分析技術(shù)領(lǐng)域，涉及水中的藻類和有色可溶性有 機(jī)物(Chromophoric dissolved organic matter，CD0M)的檢測，具體地說是一種非外置鞘 液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的方法。
背景技術(shù)：
藻類指是原生生物界一類真核生物(有些也為原核生物，如藍(lán)藻門的藻類)。主要 水生，無維管束，能進(jìn)行光合作用。其中含有藻膽蛋白，其主要功能是作為光合作用的捕光 色素復(fù)合體，由色素基團(tuán)藻膽素和載體蛋白共價(jià)結(jié)合而成。它分為藻紅蛋白、藻藍(lán)蛋白、藻 紅藍(lán)蛋白和別藻藍(lán)蛋白四種，由于它們?cè)诓煌孱愔械暮坎煌?，致使有的藻類呈現(xiàn)紅色， 有的則為綠色。國內(nèi)藍(lán)藻中含有的蛋白以藻藍(lán)蛋白為主，該蛋白的最大吸收峰在620nm附 近，能發(fā)射強(qiáng)烈的熒光，具有很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)率。藍(lán)藻水華是由于水體中氮、磷等營養(yǎng)物質(zhì)大量累積，在氣候條件適宜情況下，快速 繁殖并在水面聚集而產(chǎn)生的自然災(zāi)害現(xiàn)象。藍(lán)細(xì)菌為單細(xì)胞生物，個(gè)體比細(xì)菌大，一般直徑 或線度為;Γ15微米。藍(lán)藻可在短時(shí)間內(nèi)迅速繁殖，使水體透明度顯著下降。藍(lán)藻生長還加 快了水體氧的消耗，使水體缺氧，導(dǎo)致魚類和其它水生生物大量死亡，破壞生態(tài)功能和生物 多樣性。此外，某些藻類本身含有藻毒素，會(huì)危及飲水安全。如藍(lán)藻含有神經(jīng)毒素，可通過 食物鏈不斷富集。人們吃了含有神經(jīng)毒素的魚類、螃蟹等，將加速人腦神經(jīng)退化、肌肉萎縮， 加大老人癡呆癥發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；其中微囊藻毒素毒性非常強(qiáng)，將嚴(yán)重?fù)p害人的肝臟，導(dǎo)致肝癌。湖泊是人類最重要的水資源之一，在湖泊周圍也是我國人口和工業(yè)聚集區(qū)。因?yàn)?人類活動(dòng)的影響，湖泊的富營養(yǎng)化日趨嚴(yán)重，其直接后果就是藍(lán)藻水華的發(fā)生，2007年太湖 爆發(fā)的藍(lán)藻水華嚴(yán)重影響了周邊居民的正常生活。2009年山東境內(nèi)多處湖水暴發(fā)藍(lán)藻。今 年9月湖北武漢東湖的子湖水果湖暴發(fā)大量藍(lán)藻，沿湖行走就能聞到強(qiáng)烈臭味。同年江西 南昌市軍山湖水質(zhì)明顯變差，藍(lán)藻暴發(fā)，連村民家養(yǎng)的牛都不愿意喝湖水了。藍(lán)藻已成為我 國湖泊、河流等水體的主要污染之一。如何在藍(lán)藻水華爆發(fā)前進(jìn)行準(zhǔn)確的預(yù)警變得非常重要。目前我國對(duì)藍(lán)藻的監(jiān)測主 要采用顯微計(jì)數(shù)、葉綠素含量測定、衛(wèi)星遙感等技術(shù)。顯微計(jì)數(shù)需要由專業(yè)人員操作，花費(fèi) 的時(shí)間長，過程復(fù)雜，并且分析樣品的效率低。葉綠素含量測定是一種相對(duì)較快速簡單的 測量技術(shù)，但傳統(tǒng)的測量方法多為現(xiàn)場抽濾后帶回實(shí)驗(yàn)室抽提，然后進(jìn)行分光光度計(jì)分析、 熒光分光光度計(jì)分析或高效液相色普(HPLC)分析，但這種技術(shù)最快也需要廣2天才能獲得 結(jié)果。這兩種方法均不能立即反映出水體中的藻類信息，而是要經(jīng)過一段分析時(shí)間，從而降 低了生物監(jiān)測的時(shí)效性，大大影響有害藍(lán)藻的監(jiān)測/預(yù)警。衛(wèi)星遙感具備監(jiān)測范圍廣、數(shù)據(jù) 多、不受地理位置和人為條件限制等優(yōu)點(diǎn)，但其容易受天氣條件影響，且往往需要藻類細(xì)胞 累積到一定程度才能監(jiān)測到，往往達(dá)不到預(yù)警的效果，而且費(fèi)用高，數(shù)據(jù)分析復(fù)雜。南非的湖泊學(xué)家保羅·奧博郝斯特博士研究出一種可以預(yù)測有毒的藍(lán)綠藻在淡水環(huán)境(如江河湖 泊)中暴發(fā)的方法，其采用水蛭作為生物指示物，因?yàn)榕c某些大型無脊椎動(dòng)物相反，水蛭可 以在被藍(lán)藻釋放的有毒物質(zhì)污染的水中生存，它們的存在往往是水質(zhì)差的證明。如果水蛭 出現(xiàn)在比較稠密的藍(lán)藻周圍，說明這種藍(lán)藻極有可能是有毒的。但水蛭不能說明水體中的 毒性水平到底有多高。同時(shí)這種方法需要專業(yè)的人員進(jìn)行操作，耗時(shí)長，方法的通用性差。要想在藍(lán)藻水華爆發(fā)前進(jìn)行準(zhǔn)確的預(yù)警，對(duì)水中藍(lán)藻含量進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測是切實(shí)可 行的途徑。目前的連續(xù)監(jiān)測主要依靠流失細(xì)胞儀來監(jiān)測分析，流式細(xì)胞儀檢測的基本原理 為根據(jù)流體動(dòng)力學(xué)原理讓液體中的顆粒(包括細(xì)胞)逐一通過激光束(檢測區(qū))，激光照射 到顆粒上會(huì)引起光的散射，如果顆粒(如藻細(xì)胞)含有色素還可以發(fā)出熒光，這些散射光和 熒光被檢測器收集后轉(zhuǎn)換成電信號(hào)存儲(chǔ)下來，并利用軟件進(jìn)行自動(dòng)分析。水中的浮游植物 細(xì)胞做為一個(gè)個(gè)顆粒，當(dāng)然可以進(jìn)行流式細(xì)胞計(jì)數(shù)，由此即可監(jiān)測水中藍(lán)藻的含量。有色可溶個(gè)生有機(jī)物(Chromophoric dissolved organic matter, CD0M)存在于所 有水體中，又稱黃質(zhì)。它是溶解性有機(jī)物庫的重要組成部分。由腐殖酸，芳烴聚合物等一系 列物質(zhì)組成，主要是土壤和水生植物降解的產(chǎn)物，在內(nèi)陸水體和海灣沿岸CDOM以河流陸源 排放為主，在遠(yuǎn)海CDOM濃度非常低，其來源主要是海水中低等植物殘?bào)w腐爛降解后形成。 由于有色可溶性有機(jī)物(CDOM)中含有豐富的碳、氮、磷等湖泊生源要素，在湖泊各種物理， 化學(xué)和生物反應(yīng)以及藻類暴發(fā)過程中都扮演了重要的角色。有色可溶性有機(jī)物(CDOM)存在于所有水體中，其濃度不能直接測定，現(xiàn)在常用的 檢測方法是用355nm的波長的光照射CD0M，以其熒光數(shù)值作為濃度的單位。目前該測試只 能在熒光分光光度計(jì)上完成，測試使用的專業(yè)設(shè)備不僅價(jià)格昂貴，而且體積龐大不能移動(dòng)， 測試結(jié)果不連續(xù)，不能實(shí)現(xiàn)對(duì)有色可溶性有機(jī)物的在線檢測。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù) 在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的方法，該方法采用非外置鞘液作為系統(tǒng)的鞘流，檢測 簡便、快速，可同時(shí)在線連續(xù)檢測水質(zhì)中的藻類和有色可溶性有機(jī)物(CD0M)，對(duì)水體的富營 養(yǎng)化進(jìn)行預(yù)警檢測，可以適用于野外的現(xiàn)場作業(yè)。本發(fā)明的目的是通過以下的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
所述非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的方法包括如下步
驟
(1)樣品采集與處理用進(jìn)樣器采集水樣，進(jìn)樣流速為廣2cm/s，水樣被進(jìn)樣器采集后， 首先濾除粒徑大于Imm的泥沙顆粒，然后在進(jìn)樣器內(nèi)部經(jīng)過篩選排除空氣和砂粒，余下的 浮游植物、浮游動(dòng)物和與它們密度相差不大的砂粒作為待檢測顆粒，進(jìn)入流動(dòng)室，進(jìn)行流式 細(xì)胞計(jì)數(shù)和其它分析；對(duì)于粒徑介于5(Γ100 μ m的砂粒而言，它們的沉降速率大于進(jìn)樣流 速，因此不會(huì)被進(jìn)樣器吸入；
(2)藻類檢測步驟(1)中的待檢測顆粒被不含任何顆粒的鞘液包裹著流過流動(dòng)室，所 述鞘液為非外置鞘液；鞘液包繞著待檢測顆粒高速流動(dòng)，組成一個(gè)圓形的流束，待檢測顆粒 在鞘液的包被下單行排列，依次通過藻類檢測區(qū)域；這個(gè)過程中，顆粒間的距離被拉開，當(dāng) 顆粒被與之呈90度角的激光束照射時(shí)，顆粒的散射光和熒光會(huì)被檢測系統(tǒng)檢測；所述檢測系統(tǒng)檢測顆粒的前向散射光(FWC)、側(cè)向散射光(SWC)和多色熒光，這些光信號(hào)被檢測系統(tǒng) 收集儲(chǔ)存以對(duì)不同類型的顆粒進(jìn)行聚類分析；
(3 )濾除藻類在所述流動(dòng)室內(nèi)的藻類檢測區(qū)域后設(shè)置一個(gè)過濾器，將已經(jīng)被檢測的藻 類等物質(zhì)濾除，濾液在流動(dòng)室內(nèi)繼續(xù)流動(dòng)并通過CDOM檢測區(qū)域；
(4)⑶OM檢測步驟(3)中的濾液流過⑶OM檢測區(qū)域，被波長為355nm的激光束照射， 檢測系統(tǒng)收集濾液在38(T600nm的波長范圍內(nèi)的光吸收信號(hào)和熒光信號(hào)，并將信號(hào)輸送到 智能儀表；
(5)結(jié)果輸出與計(jì)算智能儀表根據(jù)接收到的光吸收信號(hào)和熒光信號(hào)，計(jì)算吸光度 D(A)，然后結(jié)合光程路徑r，根據(jù)下面的公式(1)計(jì)算獲得波長λ未校正的吸收系數(shù) α (λ)'，該吸收系數(shù)α (λ)'用于表示CDOM的濃度；
α (λ ) ‘ =2. 303D(A )/r(1)
式(1)中λ為波長；α (λ)'為波長λ未校正的吸收系數(shù)，其單位為(m-l);DU)為 吸光度；r為光程路徑，其單位為m。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，由于上述步驟(3)中的濾液還有可能殘留細(xì)小顆粒， 可能會(huì)引起散射，所以需要對(duì)步驟(5)中獲得的波長λ未校正的吸收系數(shù)α (λ)'進(jìn)行 校正，以消除濾液中可能殘留細(xì)小顆粒而引起的散射效應(yīng)，校正后獲得波長λ的吸收系數(shù) α (λ)；校正根據(jù)下面的公式(2)進(jìn)行；
α (λ ) = α (λ ) ‘ -α (750) X λ/750(2)
式(2)中α (λ)為波長λ的吸收系數(shù)，α (λ)'為波長λ未校正的吸收系數(shù)，它們 的單位都為(m-1)。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述步驟(2)中的藻類檢測采用波長范圍為 30(T800nm的激光束照射。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述鞘液采用純凈水、磷酸鹽緩沖液或碳酸鹽緩沖液。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)，所述磷酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液的pH值范圍在2 11 之間。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比優(yōu)點(diǎn)在于
(1)本發(fā)明中使用的鞘液是非外置鞘液，它是通過對(duì)樣品進(jìn)行初步處理和過濾去除 其中的藻類之后直接使用的，既省去了更換鞘液的麻煩，又避免了系統(tǒng)液流系統(tǒng)的生物污 染；
(2)本發(fā)明能夠同時(shí)對(duì)水中的藻類和有色可溶性有機(jī)物(CDOM)進(jìn)行在線檢測分析，在 一次測量過程中，能夠同時(shí)檢測出藻類濃度和CDOM濃度，熒光值，吸收系數(shù)等參數(shù)，能夠?qū)?水質(zhì)的富營養(yǎng)度進(jìn)行預(yù)警，提前預(yù)防藍(lán)藻水華的爆發(fā)；
(3)本發(fā)明的流式細(xì)胞術(shù)檢測無論采用循環(huán)鞘液方式或非循環(huán)鞘液方式，都可以有效 檢測CD0M，并提高藻類檢測結(jié)果的精確性；
(4)本發(fā)明在增加有限使用成本的條件下，有助于獲取更多的水質(zhì)信息。


圖1是采用非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線檢測藻類和有色可溶性有機(jī)物(CDOM)的 流程示意圖。
圖2是采用非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)對(duì)水中的顆粒進(jìn)行在線檢測分析的結(jié)果圖。圖3是采用非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)對(duì)水中的藍(lán)藻進(jìn)行在線檢測分析的結(jié)果圖。圖4是采用非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線對(duì)冬季水中的CDOM進(jìn)行一個(gè)月的連續(xù)檢 測分析結(jié)果圖。圖5是采用非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線對(duì)夏季水中的CDOM進(jìn)行一個(gè)月的連續(xù)檢 測分析結(jié)果圖。圖6是圖4、圖5中的分析結(jié)果對(duì)比情況示意圖；圖中，曲線1為冬季檢測分析結(jié) 果、曲線2為夏季檢測分析結(jié)果。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，下述實(shí)施例僅用于對(duì)本發(fā)明 作進(jìn)一步的舉例說明，而不能理解為對(duì)說明書作出任何限定。本發(fā)明采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)藻類和CDOM進(jìn)行在線連續(xù)檢測。檢測對(duì)象中藻類中含 有藻膽蛋白，其主要功能是作為光合作用的捕光色素復(fù)合體，由色素基團(tuán)藻膽素和載體蛋 白共價(jià)結(jié)合而成。它分為藻紅蛋白、藻藍(lán)蛋白、藻紅藍(lán)蛋白和別藻藍(lán)蛋白四種，由于它們?cè)?不同藻類中的含量不同，致使有的藻類呈現(xiàn)紅色，有的則為綠色。國內(nèi)藍(lán)藻中含有的蛋白以 藻藍(lán)蛋白為主，該蛋白的最大吸收峰在620nm附近，能發(fā)射強(qiáng)烈的熒光，具有很好的吸光性 能和很高的量子產(chǎn)率。檢測對(duì)象中的有色可溶性有機(jī)物(CDOM)的檢測是利用355nm波長 的激光束照射，收集濾液在38(T600nm波長范圍內(nèi)的光吸收信號(hào)和熒光信號(hào)。相關(guān)研究表 明，即便CDOM來源和化學(xué)組成差異萬千，CDOM吸收與熒光強(qiáng)度均存在顯著線性關(guān)系，因此 可以利用其熒光強(qiáng)度和吸收的線性關(guān)系，反演得到CDOM吸收系數(shù)。如圖1所示，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例的具體操作如下
(1)樣品采集與處理用進(jìn)樣器采集水樣，進(jìn)樣流速為廣2 cm/s，水樣被進(jìn)樣器采集后， 首先濾除粒徑大于Imm的泥沙顆粒，然后在進(jìn)樣器內(nèi)部經(jīng)過篩選排除空氣和砂粒，余下的 浮游植物、浮游動(dòng)物和與它們密度相差不大的砂粒作為待檢測顆粒，進(jìn)入流動(dòng)室，進(jìn)行流式 細(xì)胞計(jì)數(shù)和其它分析；對(duì)于粒徑介于5(Γ100 μ m的砂粒而言，它們的沉降速率大于進(jìn)樣流 速，因此不會(huì)被進(jìn)樣器吸入。(2)藻類檢測步驟(1)中的待檢測顆粒被不含任何顆粒的鞘液包裹著流過流動(dòng) 室，所述鞘液為非外置鞘液，鞘液選用純凈水；鞘液包繞著待檢測顆粒高速流動(dòng)，組成一個(gè) 圓形的流束，待檢測顆粒在鞘液的包被下單行排列，依次通過藻類檢測區(qū)域；這個(gè)過程中， 顆粒間的距離被拉開，當(dāng)顆粒被與之呈90度角的激光束照射(激光束采用波長為488nm的 激光束)時(shí)，顆粒的散射光和熒光會(huì)被檢測系統(tǒng)檢測；所述檢測系統(tǒng)檢測顆粒的前向散射光 (Forward Scatter，F(xiàn)WC)，根據(jù)前向散射光(FWC)的信號(hào)可以得到水體中顆粒物大小的信 息，檢測獲得的二維點(diǎn)圖如圖2所示，由圖中可以看出檢測水樣中的藻類直徑集中ΙΟμπι 以下，在1(Γ20μπι的較少。因藻類中含有的藻紅蛋白在激光照射下會(huì)有黃綠色熒光產(chǎn)生， 通過檢測樣品通過流動(dòng)室后產(chǎn)生的熒光信號(hào)(Fluorescence Light)和前向散射光信號(hào) (Forward Scatter)，可以檢測出水體中藍(lán)藻的相關(guān)信息，檢測獲得的二維點(diǎn)圖如圖3所示， 由圖中可以看出藍(lán)藻具有較強(qiáng)的熒光。(3)濾除藻類在所述流動(dòng)室內(nèi)的藻類檢測區(qū)域后設(shè)置一個(gè)過濾器，將已經(jīng)被檢測的藻類等物質(zhì)濾除，濾液在流動(dòng)室內(nèi)繼續(xù)流動(dòng)并通過CDOM檢測區(qū)域；
(4)⑶OM檢測步驟(3)中的濾液流過⑶OM檢測區(qū)域，被波長為355nm的激光束照射， 檢測系統(tǒng)收集濾液在38(T600nm的波長范圍內(nèi)的光吸收信號(hào)和熒光信號(hào)，并將信號(hào)輸送到 智能儀表；
(5)結(jié)果輸出與計(jì)算智能儀表根據(jù)接收到的光吸收信號(hào)和熒光信號(hào)，計(jì)算吸光度 D(A)，然后結(jié)合光程路徑r，根據(jù)下面的公式(1)計(jì)算獲得波長λ未校正的吸收系數(shù) α (λ)'，該吸收系數(shù)α (λ)'用于表示CDOM的濃度；
α (λ ) ‘ =2. 303D(A )/r(1)
式(1)中λ為波長；α (λ)'為波長λ未校正的吸收系數(shù)，其單位為(m-l);DU)為 吸光度；r為光程路徑，其單位為m。(6)校正計(jì)算由于上述步驟(3)中的濾液還有可能殘留細(xì)小顆粒，可能會(huì)引起散 射，所以需要對(duì)步驟(5)中獲得的波長λ未校正的吸收系數(shù)α (λ)'進(jìn)行校正，以消除濾 液中可能殘留細(xì)小顆粒而引起的散射效應(yīng)，校正后獲得波長λ的吸收系數(shù)α (λ)；校正根 據(jù)下面的公式(2)進(jìn)行；
α (λ ) = α (λ ) ‘ -α (750) X λ/750(2)
式(2)中α (λ)為波長λ的吸收系數(shù)，α (λ)'為波長λ未校正的吸收系數(shù)，它們 的單位都為(m-1)。本發(fā)明在冬季和夏季分別對(duì)太湖水質(zhì)的CDOM進(jìn)行了連續(xù)一個(gè)月的在線連續(xù)檢 測，檢測及計(jì)算結(jié)果如表1和表2所示
表1 冬季(2010年1月20號(hào) 2010年2月20號(hào))
權(quán)利要求
1.非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的方法，其特征在于包 括如下步驟(1)樣品采集與處理用進(jìn)樣器采集水樣，進(jìn)樣流速為1-2cm/s，水樣被進(jìn)樣器采集后， 首先濾除粒徑大于1 mm的泥沙顆粒，然后在進(jìn)樣器內(nèi)部經(jīng)過篩選排除空氣和砂粒，余下的 浮游植物、浮游動(dòng)物和與它們密度相差不大的砂粒作為待檢測顆粒，進(jìn)入流動(dòng)室，進(jìn)行流式 細(xì)胞計(jì)數(shù)和其它分析；對(duì)于粒徑介于5(Γ100 μ m的砂粒而言，它們的沉降速率大于進(jìn)樣流 速，因此不會(huì)被進(jìn)樣器吸入；(2)藻類檢測步驟(1)中的待檢測顆粒被不含任何顆粒的鞘液包裹著流過流動(dòng)室，所 述鞘液為非外置鞘液；鞘液包繞著待檢測顆粒高速流動(dòng)，組成一個(gè)圓形的流束，待檢測顆粒 在鞘液的包被下單行排列，依次通過藻類檢測區(qū)域；這個(gè)過程中，顆粒間的距離被拉開，當(dāng) 顆粒被與之呈90度角的激光束照射時(shí)，顆粒的散射光和熒光會(huì)被檢測系統(tǒng)檢測；所述檢測 系統(tǒng)檢測顆粒的前向散射光、側(cè)向散射光和多色熒光，這些光信號(hào)被檢測系統(tǒng)收集儲(chǔ)存以 對(duì)不同類型的顆粒進(jìn)行聚類分析；(3)濾除藻類在所述流動(dòng)室內(nèi)的藻類檢測區(qū)域后設(shè)置一個(gè)過濾器，將已經(jīng)被檢測的藻 類等物質(zhì)濾除，濾液在流動(dòng)室內(nèi)繼續(xù)流動(dòng)并通過CDOM檢測區(qū)域；(4)⑶OM檢測步驟(3)中的濾液流過⑶OM檢測區(qū)域，被波長為355nm的激光束照射， 檢測系統(tǒng)收集濾液在38(T600nm的波長范圍內(nèi)的光吸收信號(hào)和熒光信號(hào)，并將信號(hào)輸送到 智能儀表；(5)結(jié)果輸出與計(jì)算智能儀表根據(jù)接收到的光吸收信號(hào)和熒光信號(hào)，計(jì)算吸光度 D(A)，然后結(jié)合光程路徑r，根據(jù)下面的公式(1)計(jì)算獲得波長λ未校正的吸收系數(shù) α (λ)'，該吸收系數(shù)α (λ)'用于表示CDOM的濃度；α (λ ) ‘ =2. 303D(A )/r(1)式(1)中λ為波長；α (λ)'為波長λ未校正的吸收系數(shù)，其單位為(m-l);DU)為 吸光度；r為光程路徑，其單位為m。
2.如權(quán)利要求1所述的非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的 方法，其特征在于對(duì)步驟(5)中獲得的波長λ未校正的吸收系數(shù)α (λ)'進(jìn)行校正，以消 除濾液中可能殘留細(xì)小顆粒而引起的散射效應(yīng)，校正后獲得波長λ的吸收系數(shù)α (λ)；校 正根據(jù)下面的公式(2)進(jìn)行；α (λ ) = α (λ ) ‘ -α (750) X λ/750(2)式(2)中α (λ)為波長λ的吸收系數(shù)，α (λ)'為波長λ未校正的吸收系數(shù)，它們 的單位都為(m-1)。
3.如權(quán)利要求1所述的非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的 方法，其特征在于所述步驟(2)中的藻類檢測采用波長范圍為30(T800nm的激光束照射。
4.如權(quán)利要求1所述的非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的 方法，其特征在于所述鞘液采用純凈水、磷酸鹽緩沖液或碳酸鹽緩沖液。
5.如權(quán)利要求4所述的非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的 方法，其特征在于所述磷酸鹽緩沖液、碳酸鹽緩沖液的PH值范圍在2 11之間。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種非外置鞘液流式細(xì)胞術(shù)在線分析藻類和有色可溶性有機(jī)物的方法。其包括樣品采集與處理、藻類檢測、濾除藻類、CDOM檢測和結(jié)果輸出與計(jì)算步驟。本發(fā)明中使用的鞘液是非外置鞘液，它是通過對(duì)樣品進(jìn)行初步處理和過濾去除其中的藻類之后直接使用，既省去了更換鞘液的麻煩，又避免了系統(tǒng)液流系統(tǒng)的生物污染；本發(fā)明能夠同時(shí)對(duì)水中的藻類和有色可溶性有機(jī)物(CDOM)進(jìn)行在線檢測分析，能夠?qū)λ|(zhì)的富營養(yǎng)度進(jìn)行預(yù)警，提前預(yù)防藍(lán)藻水華的爆發(fā)；本發(fā)明的流式細(xì)胞術(shù)檢測無論采用循環(huán)鞘液方式或非循環(huán)鞘液方式，都可以有效檢測CDOM，并提高藻類檢測結(jié)果的精確性；本發(fā)明在增加有限使用成本的條件下，有助于獲取更多的水質(zhì)信息。
文檔編號(hào)G01N15/14GK102128779SQ20101059557
公開日2011年7月20日 申請(qǐng)日期2010年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月20日
發(fā)明者楚建軍, 王歡, 趙丙強(qiáng), 邵建輝, 陳力 申請(qǐng)人:無錫榮興科技有限公司