專利名稱：用于處理樣品的方法、套件和系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及處理用于微生物分析的樣品的方法、套件、系統(tǒng)和裝置。
背景技術(shù)：
對于是否存在大腸桿菌類(以及其他微生物和污染物)的確定是評價水的衛(wèi)生質(zhì)量的一個基本分析。樣品中糞便大腸桿菌的存在性是樣品水受到糞便污染的主要指示并且可以指示其他病原生物體的可能存在性。水樣中微生物計數(shù)的方法是熟知的并且多數(shù)已經(jīng)得到了標準化。水樣中細菌計數(shù)的當前可用標準方法通常是昂貴的并且需要多個步驟、精密的儀器和訓練有素的人員。膜過濾是實現(xiàn)對大體積水樣中以低濃度存在的微生物的直接計數(shù)的常用技術(shù)。大多數(shù)膜過濾技術(shù)(真空歧管)或離心(電動設(shè)備)的操作要求使它們不適于現(xiàn)場應(yīng)用。另外，由于迫使樣品通過孔尺寸足夠小以分離細菌的膜(0. 22至0. 45微米)所需的壓力，通過使用機械裝置(通過活塞或壓桿)或手動施壓的大體積過濾是非常勞動密集的。因此， 需要簡單的、非勞動密集型的、低成本的、便攜的用于處理大樣品體積的樣品采集方法。

發(fā)明內(nèi)容
本文公開了從樣品中分離微生物的方法，所述樣品包含樣品基質(zhì)和微生物，所述方法包括以下步驟提供接收器，所述接收器被構(gòu)造用于允許過濾樣品和可逆地容納樣品和濃集劑；將樣品加入至接收器中，其中將在接收器中形成結(jié)合微生物的組合物，所述結(jié)合微生物的組合物具有結(jié)合濃集劑的微生物和樣品基質(zhì)；以及通過過濾器過濾結(jié)合微生物的組合物從而在過濾器上收集結(jié)合濃集劑的微生物，其中過濾器的平均孔徑大于微生物的平均尺寸。本文公開了套件，其包括濃集劑；和從樣品分離微生物的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括接收器，其被構(gòu)造用于允許過濾樣品和可逆地容納樣品和濃集劑；和過濾器，所述過濾器具有第一表面和第二表面，并且具有平均孔徑大于微生物平均尺寸的孔。本文公開了從樣品中分離微生物的系統(tǒng)，所述樣品具有樣品基質(zhì)和微生物，所述系統(tǒng)包括內(nèi)膽，其被構(gòu)造用于提供濃集劑與樣品的接觸并且提供包含樣品基質(zhì)和結(jié)合濃集劑的微生物的結(jié)合微生物的組合物；過濾器，所述過濾器具有第一表面和第二表面，并且具有平均孔徑大于微生物平均尺寸的孔；過濾器支承件，其被構(gòu)造用于接觸過濾器的第一表面并且提供結(jié)合微生物的組合物與過濾器的第二表面的接觸，其中內(nèi)膽和過濾器支承件被構(gòu)造用于提供結(jié)合微生物的組合物通過過濾器的過濾從而在過濾器的第二表面上收集結(jié)合濃集劑的微生物。
本文公開了套件，其包括濃集劑；和從樣品中分離微生物的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括 內(nèi)膽，其被構(gòu)造用于提供濃集劑與樣品的接觸，從而提供了包含樣品基質(zhì)和結(jié)合濃集劑的微生物的結(jié)合微生物的組合物；過濾器，所述過濾器具有第一表面和第二表面，并且具有平均孔徑大于微生物平均尺寸的孔；過濾器支承件，其被構(gòu)造用于接觸過濾器的第一表面并且提供結(jié)合微生物的組合物與過濾器第二表面的接觸，其中內(nèi)膽和過濾器支承件被構(gòu)造用于提供結(jié)合微生物的組合物通過過濾器的過濾，以便在過濾器的第二表面上收集具有結(jié)合的微生物的濃集劑。本文公開了從樣品中分離微生物的方法，所述樣品具有樣品基質(zhì)和微生物，所述方法包括以下步驟將具有開口的內(nèi)膽置于容器中以形成接收器組件，所述容器被構(gòu)造用于至少部分接納內(nèi)膽；將樣品加入至內(nèi)膽中以在該內(nèi)膽中形成結(jié)合微生物的組合物，所述結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和結(jié)合濃集劑的微生物；將過濾器置于內(nèi)膽開口的至少一部分上；將過濾器支承件置于過濾器上以形成過濾器組件，所述過濾器組件包括內(nèi)膽、容器、過濾器和過濾器支承件；翻轉(zhuǎn)過濾器組件；和通過過濾器過濾結(jié)合微生物的組合物，從而在過濾器上收集結(jié)合濃集劑的微生物。


結(jié)合以下結(jié)合附圖對本發(fā)明的各種實施例的詳細說明，可以更全面地理解本發(fā)明，其中附圖未必按比例繪制。在附圖中使用的相同的標號表示相同的部件。然而，應(yīng)當理解，在給定附圖中使用標號指示部件并非意圖限制另一個附圖中用相同標號標記的部件。圖1示出了本文所公開的示例性方法；
圖2示出了本文所公開的另--種示例性方法；
圖3示出了本文所公開的另--種示例性方法；
圖4示出了本文所公開的另--種示例性方法；
圖5示出了本文所公開的另--種示例性方法；
圖6示出了本文所公開的示例性套件；
圖7A和7B是可以在本文所述的方法、套件或系統(tǒng)中使用的示例性裝置的分解透
視圖(圖7A)和俯視圖(圖7B)；圖8A-8F是可以在本文所述的方法、套件或系統(tǒng)中使用的示例性裝置的分解圖 (圖8A和8B)、示意圖(圖8C)、橫截面圖(圖8D)、俯視圖(圖8E)和透視圖(圖8F)；并且圖9A-9C是可以在本文所述的方法、套件或系統(tǒng)中使用的示例性裝置的分解圖 (圖9A)、橫截面圖(圖9B)和俯視圖(圖9C)。
具體實施例方式在下面的說明中，參考了附圖，附圖形成說明的一部分，并且在附圖中通過舉例說明的方式示出了若干特定實施例。應(yīng)當理解的是，在不脫離本發(fā)明的范圍或精神的情況下， 設(shè)想到并可作出其他的實施例。因此，以下的具體實施方式
不應(yīng)被理解成具有限制性意義。除非另外指明，否則本文所用的所有科技術(shù)語具有在本領(lǐng)域中通常使用的含義。本文給定的定義旨在有利于理解本文頻繁使用的某些術(shù)語，并無限制本發(fā)明范圍之意。除非另外指明，否則在所有情況下，說明書和權(quán)利要求書中用來表述特征尺寸、數(shù)量和物理特性的所有數(shù)字均應(yīng)理解為由術(shù)語“約”來修飾。因此，除非另外指明，否則上述說明書和所附權(quán)利要求書中給出的數(shù)值參數(shù)均為近似值，根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員利用本文所公開的教導內(nèi)容尋求獲得的所需特性情況，這些近似值可有所不同。用端點來表述的數(shù)值范圍包括該范圍內(nèi)包含的所有數(shù)字(例如，1至5包括1、 1. 5、2、2. 75,3,3. 80,4和5)以及該范圍內(nèi)的任意范圍。本說明書和所附權(quán)利要求中的單數(shù)形式“一種”、“一個”和“所述”均涵蓋具有多個指代物的實施例，除非其內(nèi)容明確指示另外的情況。如本說明書和所附權(quán)利要求書中所用，術(shù)語“或”的含義一般來講包括“和/或”，除非該內(nèi)容明確地表示其他含義。本文公開了用于處理樣品的方法、系統(tǒng)、套件和裝置。所述方法、系統(tǒng)、套件和裝置可在處理樣品方面呈現(xiàn)出優(yōu)勢，因為它們提供了快速、方便、簡單且相對廉價的方法來制備(例如)用于微生物分析的水樣。其他優(yōu)勢在于從較大體積完成通用樣品濃縮選擇以檢測低水平的細菌、孢子或病毒的能力。所述方法和裝置可顯著減少通常與用于微生物分析的過濾有關(guān)的反壓和滲漏問題(這是因為通常需要極小孔徑的過濾器)。所述方法和裝置可以是快速、簡單、便攜的并且不需要昂貴的設(shè)備或高水平的技術(shù)人員。當使用較大孔徑的過濾器(例如，至少約10 μ m或更大)時，可以直接在諸如3M PETRIFILM 大腸桿菌 (E. Coli)/大腸桿菌計數(shù)板(3M公司(M.Paul MN))之類的市售培養(yǎng)膜中進行大腸桿菌計數(shù)。當與一次性接收器一起使用時，只有系統(tǒng)的一次性部分接觸樣品，從而消除了在下次使用前對裝置清潔和滅菌的需要。圖1中示出了示例性方法。圖1中所示的方法包括步驟110，提供接收器；步驟 120，將樣品加入至接收器中；和步驟130，過濾樣品。示例性方法中的第一步(步驟110)包括提供接收器。提供接收器的步驟可以僅包括獲得接收器或制備接收器。例如，可以購買在所述方法中使用的接收器，可以改變購買的制品來獲得接收器或者可以(例如)根據(jù)本文所提供的教導制備接收器。一般來講，可以在本文中使用的接收器被構(gòu)造為至少可逆地容納樣品并且允許過濾樣品。在本文所公開的方法和套件中可以使用多種類型和構(gòu)造的接收器。接收器可以是單開口接收器或多開口接收器。單開口接收器可以被構(gòu)造成提供從相同開口加入樣品(和其他任選組分)和過濾樣品。多開口接收器可以被構(gòu)造成提供通過一個開口加入樣品(和其他任選組分)和通過第二開口過濾樣品。在一個實施例中，多開口接收器包括兩個開口并且在本文中稱為雙開口接收器。在一個實施例中，應(yīng)用可以決定要使用的接收器類型?？梢杂啥喾N材料形成可在本文中使用的接收器，其包括(但不限于)聚合物材料、 金屬(例如，鋁、不銹鋼等)、陶瓷、玻璃以及它們的組合。聚合物材料的例子可包括(但不限于)聚烯烴(如聚乙烯、聚丙烯及其組合等)、聚碳酸酯、丙烯酸樹脂、聚苯乙烯、高密度聚乙烯(HDPE)、聚丙烯、能夠形成獨立式和/或自支承式容器的其他合適聚合物材料或它們的組合。在一個實施例中，接收器可以由相對廉價的材料制成，并因此可以是一次性的。根據(jù)待分析來源的類型、量和尺寸，接收器可以是半透明的(或甚至是透明的)或不透明的， 并且可以是任何適合的尺寸。在一個實施例中，應(yīng)用可以決定要使用樣品的量。在一個實施例中，接收器可以具有任何可用體積的容量，例如，約5mL至約IOOOmL的容量。在一個實施例中，接收器可以具有約5mL至約500mL的容量。在一個實施例中，接收器可以具有約5mL 至約250mL的容量。在一個實施例中，接收器可以具有約IOmL至約250mL的容量。例如， 在一些實施例中，接收器可以具有10mL、50mL、100mL、250mL或(例如)更大的容量?？梢栽诒疚闹惺褂玫慕邮掌鞅粯?gòu)造成至少可逆地容納樣品?？赡娴厝菁{樣品表示接收器可以包含樣品(和其他組分)，但是通過(例如)過濾，可以從接收器中除去樣品或樣品的至少一部分。因此，要使用的接收器的尺寸可以至少部分取決于要收集的樣品的尺寸。在一個實施例中，可以在不同的容器中處理樣品(即與濃集劑混合)并隨后可以使用接收器過濾。在一個實施例中，接收器可以容納有比要收集的樣品更大的體積或更小的體積?？梢愿鶕?jù)要收集的樣品的尺寸選擇接收器，或者可以根據(jù)接收器尺寸來選擇要收集的樣品尺寸?？梢栽诒疚闹惺褂玫慕邮掌鞅粯?gòu)造成允許樣品過濾。一般來講，這意味著接收器被構(gòu)造用于與過濾器可操作地連接。在一個實施例中，接收器可以包含或可以被構(gòu)造用于與支承過濾器的元件連接。在一個實施例中，該元件可以稱為過濾器支承件。過濾器支承件可以起到維持過濾器與接收器可操作連通的作用。過濾器支承件的示例性類型可以在過濾器的基本整個表面區(qū)域上或在過濾器的不到整個表面區(qū)域上提供支承。在本文中，過濾器、接收器和過濾器支承件的組合可以被稱為過濾器組件。在具有一次性內(nèi)膽和接納該一次性內(nèi)膽的容器的實施例(在下文中將會更詳細地討論)中，過濾器、容器、內(nèi)膽和過濾器支承件的組合可以被稱為過濾器組件。接收器的具體示例性類型可見于下列共同轉(zhuǎn)讓的專利申請，它們的公開內(nèi)容以引用方式并入本文中提交于2007年11月20日的名稱為“制備和分析樣品的系統(tǒng)和方法(SYSTEM AND METHOD FOR PREPARING AND ANALYZING SAMPLES) ” 的美國專利申請No. 60/989, 180 ；名稱為“用于環(huán)境采樣的樣品制備(SAMPLE PREPARATION FOR ENVIRONMENTAL SAMPLING) ”的PCT公開No. W02009/067503 ；名稱為“制備樣品的系統(tǒng)和方法(SYSTEM AND METHOD FOR PREPARING SAMPLES) ” 的 PCT 專利公開 No. W02007/137257 ； 提交于2007年11月20日的名稱為“制備和遞送樣品的系統(tǒng)和方法(SYSTEM AND METHOD FOR PREPARING AND DELIVERING SAMPLES) ”的美國專利申請 No. 60/989，175 ；和名稱為“收集和濃縮用于微生物分析的樣品的裝置和方法(DEVICES AND PROCESSES FOR COLLECTING AND CONCENTRATING SAMPLES FOR MICROBIOLOGICAL ANALYSIS) ” 的 PCT 公開 No. W02008/150779。下文中將討論與這些專利申請中所公開的一些接收器類型有關(guān)的其他詳細信息。圖1中所示的示例性方法的第二步是步驟120，將樣品加入至接收器中。一般來講，樣品包含樣品基質(zhì)和微生物。術(shù)語樣品基質(zhì)一般是指樣品內(nèi)除微生物以外的一切物質(zhì)。例如，水樣中的樣品基質(zhì)包括水、水樣中的溶解材料和未溶解材料(微生物除外)。術(shù)語“微生物”通常用來表示任何原核或真核微觀生物體，包括(但不限于)一種或多種細菌(如運動性細菌或植物性細菌、革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌)、病毒(如類諾瓦克病毒、諾瓦克病毒、輪狀病毒、腺病毒、DNA病毒、RNA病毒、有包膜病毒、無包膜病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)、人乳頭瘤病毒(HPV)等)、細菌孢子或內(nèi)生孢子、藻類、真菌 (如酵母、絲狀真菌、真菌孢子)、朊病毒、支原體以及原生動物。在一些情況下，特別要關(guān)注的微生物是病原性的那些，術(shù)語“病原體”用于指任何病原微生物。病原體的例子可包括(但不限于)腸桿菌禾斗(Enterobacteriaceae)成員、或微球菌禾斗(Micrococaceae)成員、或葡萄球菌屬Staphylococcus)物種、鏈球菌屬(Mr印tococcus)物種、假單胞菌屬(Pseudomonas)物種、腸球菌屬(Enterococcus)物種、沙門氏菌屬(Salmonella)物種、軍團菌屬(Legionella)物種、志賀氏菌屬(Shigella)物種、耶爾森菌屬(Yersinia) 物種、腸桿菌屬(Enterobacter)物種、埃希桿菌屬Escherichia)物種、芽孢桿菌屬 (Bacillus)物種、李斯特菌屬(Listeria)物種、彎曲菌屬(Campylobacter)物種、不動桿菌屬(AcinetcAacter)物種、弧菌屬(Vibrio)物種、梭菌屬(Clostridium)物種以及棒狀菌屬(Corynebacteria)物種。病原體的某些例子可包括(但不限于)大腸桿菌(Escherichia coli)，其包括腸出血性大腸桿菌(enterohemorrhagic E. coli)(如血清型0157:H7)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、賭狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、炭疽芽孢桿菌(Bacillus anthracis)、腸炎沙門氏菌(Salmonella enteritidis)、鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium)、單核細胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)、 肉毒梭狀芽孢桿菌(Clostridium botulinum)、產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌(Clostridium perfringens)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、而押氧西林金黃色葡萄球菌、 空腸彎曲菌(Campylobacter jejuni)、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Yersinia enterocolitica)、 創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)、艱難梭狀芽孢桿菌(Clostridium difficile)、耐萬古霉素腸球菌(Enterococcus)以及坂崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii)?？赡苡绊懳⑸锷L的環(huán)境因素可包括是否存在養(yǎng)分、PH值、含水量、氧化-還原電位、抗微生物化合物、溫度、大氣氣體組成和生物結(jié)構(gòu)或屏障。加入至接收器中的樣品的量可以至少部分取決于接收器的尺寸和構(gòu)造、要測試的樣品的量、本文中未討論的其他因素或它們的組合。在一個實施例中，要加入至接收器中的樣品的量可以在約5mL至IOOOmL之間。在一個實施例中，要加入至接收器中的樣品的量可以在約5mL至500mL之間。在一個實施例中，要加入至接收器中的樣品的量可以在約IOmL 至約250mL之間?？梢酝ㄟ^任何已知的方法實現(xiàn)樣品向接收器的加入，其包括(但不限于) 傾倒或以其他方式將樣品(從另一個容器)加入至接收器中和將接收器的至少一部分浸沒到更大部分的樣品中(例如，使用接收器從(例如)供水系統(tǒng)獲得樣品)。接收器的一個功能是允許包含微生物的樣品與濃集劑相互作用。濃集劑通常是當微生物在樣品基質(zhì)中分散時，這些微生物將結(jié)合的材料。濃集劑可以是顆粒材料或者可以是分散材料。合適的顆?；蚍稚⒉牧习?例如)金屬碳酸鹽(例如，碳酸鈣)和金屬磷酸鹽(例如，羥基磷灰石)。通過上述濃集劑進行的微生物的結(jié)合通常不特異性針對任何特定株系、種或類型的微生物，因此提供了對樣品中微生物全體群落的濃集。那么，可以使用任何已知的檢測方法從捕集的微生物群體中檢測特定的微生物菌株，例如，使用菌株特異性探針或使用菌株特異性培養(yǎng)基進行檢測。一旦樣品與接收器中的濃集劑混合，則獲得了結(jié)合微生物的組合物。結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和結(jié)合濃集劑的微生物。濃集劑的一個示例性類型包括硅藻土和表面處理過的硅藻土。這些濃集劑的特定實例可見于名稱為“微生物濃縮方法和試劑(MICROORGANISMS CONCENTRATION PROCESS AND AGENT)，，的共同轉(zhuǎn)讓的PCT專利公開No. W02009/046191，該專利的公開內(nèi)容以引用方式并入本文中。當分散或懸浮于水系統(tǒng)中時，無機材料呈現(xiàn)出可表征該材料和水系統(tǒng)PH的表面電荷。材料-水界面之間的電位被稱為“ζ電位”，它可以從電泳遷移率計算得出(即從材料顆粒在置于水系統(tǒng)中的帶電電極之間的移動速率計算得出)。在一個實施例中，濃集劑可以具有至少在一定程度上比未處理過的硅藻土的正電性更強的ζ電位，并且濃集劑比未處理過的硅藻土在濃集表面一般趨向于帶負電的微生物(如細菌)方面可令人驚訝地明顯更有效。濃集劑的一個示例性類型包括硅藻土。濃集劑的另一個示例性類型包括表面處理過的硅藻土。示例性的表面處理物包括表面改性劑，如二氧化鈦、細小的納米級金或鉬或它們的組合。這些表面處理物比未處理過的硅藻土在濃集微生物方面可令人驚訝地更有效。 表面處理物另外還可包括金屬氧化物，其選自氧化鐵、氧化鋅、氧化鋁等以及它們的組合。 在一個實施例中，使用了氧化鐵。盡管已知諸如金之類的貴金屬顯示具有抗微生物特性，但含金的濃集劑不僅在結(jié)合微生物方面是有效的而且在出于檢測或分析的目的使微生物存活方面也是有效的?？捎玫谋砻娓男詣┌毿〉募{米級金；細小的納米級鉬；與至少一種金屬氧化物(例如，二氧化鈦、氧化鐵或它們的組合)結(jié)合的細小的納米級金；二氧化鈦；與至少一種其他金屬氧化物(即二氧化鈦以外的金屬氧化物)結(jié)合的二氧化鈦；等，以及它們的組合。在一個實施例中，可以使用表面改性劑，如細小的納米級金；細小的納米級鉬；與至少氧化鐵或二氧化鈦結(jié)合的細小的納米級金；二氧化鈦；與至少氧化鐵結(jié)合的二氧化鈦；或它們的組合。在一個實施例中，可以使用如下的表面改性劑細小的納米級金；細小的納米級鉬；與氧化鐵或二氧化鈦結(jié)合的細小的納米級金；二氧化鈦；與氧化鐵結(jié)合的二氧化鈦；以及它們的組合。在一個實施例中，可以使用細小的納米級金；與氧化鐵或二氧化鈦結(jié)合的細小的納米級金；與氧化鐵結(jié)合的二氧化鈦；以及它們的組合。在一個實施例中，還可以使用細小的納米級金、與氧化鐵或二氧化鈦結(jié)合的細小的納米級金以及它們的組合。濃集劑的另一種示例性類型包括Y -FeO (OH)(還稱為纖鐵礦)。這些濃集劑的具體實例可見于名稱為“微生物濃縮方法(MICROORGANISM CONCENTRATION PROCESS) ”的共同轉(zhuǎn)讓的PCT專利公開No.W02009/046183，該專利的公開內(nèi)容以引用方式并入本文中。已發(fā)現(xiàn)這些濃集劑令人驚訝地比其他含鐵濃集劑在捕集革蘭氏陰性細菌方面更有效，而革蘭氏陰性細菌是與食源性和水源性疾病以及人類細菌感染有關(guān)的重要關(guān)注問題。濃集劑還可包括(除了 Y-FeO(OH)以外)其他組分(例如，水軟鋁石(a-AW(OH))、粘土、氧化鐵和氧化硅)。在包含這些其他組分的實施例中，它們通常不會明顯干擾樣品與濃集劑的緊密接觸。Y-FeO(OH)是已知的，可通過已知方法化學合成(例如，通過在中性或弱酸性 PH下對氫氧化亞鐵進行氧化，如在美國專利No. 4，729，846 (Matsui等人)中為磁帶生產(chǎn)目的所描述的，其說明內(nèi)容以引用方式并入本文中)。Y-FeO(OH)還可商購獲得(例如， 得自 Alfa Aesar, A Johnson Matthey Company, Ward Hill, ΜΑ,禾口得自 Sigma—Aldrich Corporation, St.Louis, M0)。在使用、-FeO(OH)作為濃集劑的實施例中，、-FeO(OH)通常為微粒形式。在一個實施例中，它為粒度(最大尺寸)在約3微米(在其他實施例中，約5微米；或約10微米) 至約100微米(在其他實施例中，約80微米；或約50微米；或約35微米；其中本范圍的任何下限可以與任何上限配對)范圍內(nèi)的微粒形式。在一個實施例中，顆粒是較小顆粒的聚集體。顆?？梢园ǔ叽缧∮诩s1微米(在一個實施例中，尺寸小于約0.5微米)的微晶體。所述微晶體可作為針狀微晶體存在，作為包含針狀微晶體的筏狀結(jié)構(gòu)存在，或作為針狀微晶體和筏狀結(jié)構(gòu)的組合存在。在一個實施例中，如通過BET(Brunauer-Emmett-Teller)法(通過氮氣分子的物理吸附所進行的固體表面積計算)所測量的，濃集劑具有大于約25平方米/克(m2/g)的表面積；在一個實施例中，具有大于約50m2/g的表面積；并且在另一個實施例中，具有大于約75m2/g的表面積。所述顆粒的聚集形式可提供微細顆粒系統(tǒng)的吸附能力，而又沒有通常與微細顆粒相關(guān)的操作危害和其他危害。另外，這些聚集顆粒可以容易地在流體中沉降并因此可以提供微生物與流體相的快速分離(以及允許過濾時的低反壓)。濃集劑的另一種示例性類型包括金屬硅酸鹽。這些濃集劑的具體例子可見于名稱為“微生物濃縮方法(MICROORGANISM CONCENTRATION PROCESS) ”的共同轉(zhuǎn)讓的PCT專利公開NO.W02009/085357，該專利的公開內(nèi)容以引用方式并入本文中。示例性的金屬硅酸鹽可具有金屬原子與硅原子的比小于或等于約0. 5 (在一個實施例中，小于或等于約0. 4 ；在另一個實施例中，小于或等于約0. 3 ；在另一個實施例中，小于或等于約0. 2)的表面組成， 如通過X-射線光電子能譜(XPS)所確定的。在一個實施例中，所述表面組成還包含至少約 10的平均原子百分比的碳(在一個實施例中，至少約12的平均原子百分比的碳；在另一個實施例中，至少約14的平均原子百分比的碳)，如通過X-射線光電子能譜(XPS)所確定的。 XPS是可以確定樣品表面最深約3至10納米(nm)的元素組成的技術(shù)，并且它對元素周期表中除氫和氦之外的所有元素敏感。XPS是定量技術(shù)，它對大多數(shù)元素的檢測極限在0. 1至1 原子百分比濃度范圍內(nèi)。XPS的示例性表面組成評價條件可以包括相對于樣品表面所測量的90度的飛離角，其中立體角的可接受值為士 10度。當分散或懸浮于水系統(tǒng)中時，諸如金屬硅酸鹽之類的無機材料呈現(xiàn)出表征該材料和水系統(tǒng)PH的表面電荷。材料-水界面之間的電位被稱為“ ζ電位”，它可以從電泳遷移率計算得出(即從材料顆粒在置于水系統(tǒng)中的帶電電極之間的移動速率計算得出)。示例性濃集劑可以具有比(例如)常見金屬硅酸鹽(如一般的滑石)的ζ電位的負電性更強的ζ電位。然而，濃集劑在濃集表面通常趨向于帶負電的微生物(如細菌)方面令人驚訝地比滑石更有效。在一個實施例中，濃集劑在PH約7時具有負的ζ電位(在一個實施例中，PH約7時的斯莫魯科夫斯基ζ電位(Smoluchowski zeta potential)在約_9mV至約-25mV的范圍內(nèi)，在另一個實施例中，pH約7時的斯莫魯科夫斯基ζ電位在約-IOmV至約-20mV的范圍內(nèi)，在另一個實施例中，ρΗ約7時的斯莫魯科夫斯基ζ電位在約-IlmV至約-15mV的范圍內(nèi))?？捎玫慕饘俟杷猁}包括(但不限于)無定形的金屬硅酸鹽，金屬例如為鎂、鈣、鋅、 鋁、鐵、鈦等等以及它們的組合。在一個實施例中，可以使用鎂、鋅、鐵、鈦或它們的組合。在另一個實施例中，使用了鎂。在一個實施例中，可以使用處于至少部分熔融的顆粒形式的無定形金屬硅酸鹽。在一個實施例中，可以使用無定形的球化金屬硅酸鹽。在另一個實施例中，可以使用無定形的球化硅酸鎂。金屬硅酸鹽是已知的，并且可通過已知方法化學合成或通過天然粗礦石的開采和加工獲得。一些無定形的金屬硅酸鹽是市售的。例如，無定形的球化硅酸鎂可商購用于化妝品制劑中(例如，如3M化妝品微球CM-111，得自3M公司(St. Paul, MN))。除了無定形的金屬硅酸鹽，濃集劑還可包括其他材料，包括金屬(例如，鐵或鈦) 的氧化物、結(jié)晶金屬硅酸鹽、其他結(jié)晶材料等等，前提條件是濃集劑具有上述表面組成。在一個實施例中，濃集劑基本不含結(jié)晶二氧化硅。可以使用任何適合樣品接觸和微生物捕集的形式的濃集劑。在一個實施例中，使用了顆粒形式的濃集劑。在一個實施例中，濃集劑處于微粒形式。在一個實施例中，濃集劑處于微粒形式，其粒度在約1微米(在一個實施例中，約2微米)至約100微米(在一個實施例中，約50微米；在另一個實施例中，約25微米；在另一個實施例中，約15微米；其中該范圍的任何下限可以與任何上限配對)的范圍內(nèi)。如圖1中所舉例說明的，可以在將樣品加入至樣品通道141之前或在將樣品加入至接收器通道143之后將濃集劑加入至接收器中。還可以在加入樣品的基本同時加入濃集劑。此外，在一個實施例中(圖1中未示出)，可以獲得濃集劑已包含在其中的接收器，并因此加入濃集劑的單獨步驟將不是必要的?？梢允褂靡阎夹g(shù)將濃集劑加入至接收器中(如果需要)。例如，可以簡單地將濃集劑加入至接收器中或者可以結(jié)合另一種組分(例如，液體)將濃集劑加入至接收器中。在一個實施例中，(在樣品加入之前、之后或同時)簡單地將濃集劑本身加入至接收器中。加入至接收器中的濃集劑的量可以至少部分取決于所使用的濃集劑的類型、樣品大小、接收器的類型和尺寸、樣品混合、具體應(yīng)用、本文中未具體討論的其他因素或它們的組合。一般可以通過增加微生物與濃集劑的接觸時間來提高捕集效率(樣品中結(jié)合濃集劑的微生物的百分比)。還可以通過使用更高濃度的濃集劑來提高捕集效率，高濃度的濃集劑降低了微生物被捕集時所必須移動的平均擴散距離，從而導致了更短的培育時間。因此，一般來說，加入的濃集劑越多，則捕集相同量的微生物所需的培育時間越短。在一個實施例中，考慮到等待微生物與濃集劑結(jié)合所需的時間(稱為“捕集時間”)，適當?shù)臐饧瘎┑牧靠梢允遣煌?。例如，對?分鐘的捕集時間，IOOOmg濃集劑/IOmL 樣品可以是適當?shù)模粚τ?0分鐘的捕集時間，IOOmg濃集劑/IOmL樣品可以是適當?shù)模欢鴮τ?0分鐘的捕集時間，IOmg濃集劑/IOmL樣品可以是適當?shù)?。在一個實施例中，每IOmL樣品可以使用約Img至約IOOmg濃集劑。在一個實施例中，每IOmL樣品可以使用約Img至約 50mg濃集劑。在一個實施例中，每IOmL樣品可以使用約IOmg至約25mg濃集劑。在使用 (例如)金屬硅酸鹽濃集劑的實施例中，每IOmL樣品可以使用約IOmg金屬硅酸鹽濃集劑。 在使用(例如)金屬硅酸鹽濃集劑的實施例中，每IOmL樣品可以使用約25mg金屬硅酸鹽濃集劑。如上所討論的，一旦樣品和濃集劑處于接收器中，則可以在接收器中形成結(jié)合微生物的組合物(結(jié)合濃集劑的微生物和樣品基質(zhì))。如圖1中所示，所述方法中的下一步驟是步驟130，過濾樣品。術(shù)語“過濾”通常用來描述按粒度、電荷和/或功能分離物質(zhì)的過程。例如，過濾可包括將可溶物和溶劑(如稀釋劑或樣品基質(zhì))與不可溶物分離，或可包括將可溶物、溶劑和相對較小的不可溶物與相對較大的不可溶物分離。在一個實施例中，過濾使結(jié)合濃集劑的微生物與樣品基質(zhì)分開。過濾步驟一般起到收集過濾器上結(jié)合濃集劑的微生物的作用，并且允許樣品基質(zhì)透過過濾器并被收集或棄去?！斑^濾器”通常用來描述用于分離液體組合物中的可溶物(或可溶物和相對較小的不可溶物)和溶劑與不可溶物(或相對較大的不可溶物)的裝置。在一個實施例中，過濾器將樣品基質(zhì)與結(jié)合濃集劑的微生物分離。過濾器的例子可以包括(但不限于)織造或非織造網(wǎng)(例如，絲網(wǎng)、布網(wǎng)、塑料網(wǎng)等)、織造或非織造聚合物網(wǎng)(例如，包括在均勻或不均勻過程中生產(chǎn)的可被壓延的聚合物纖維)、篩、玻璃棉、玻璃料、濾紙、泡沫等以及它們的組合?？讖酱笥诨虻扔?微米的示例性過濾器可商購自多個來源，市售過濾器的例子包括(但不限于)得自 3M CUNO, General Electric Company、Millipore 和 Pall Corporation的過濾器。10微米孔徑的示例性過濾膜可商購自GE Osmonics Lab More (例如，GE聚碳酸酯膜)和Pal 1 Corporation (MMM-不對稱超微米膜)。如名稱為“功能化基底(FUNCTIONALIZED SUBSTRATES)”的共同轉(zhuǎn)讓的美國專利No. 7，553，417和名稱為“具有相對較大平均孔徑的微孔膜及其制備方法(MICR0P0R0US MEMBRANES HAVING A RELATIVELY LARGE AVERAGE PORE SIZE AND METHODS OF MAKING THE SAME) ” 的 PCT 公開 No. W02009/048743中所公開的，還可以制備示例性過濾器，以上專利的公開內(nèi)容以引用方式并入本文中。可以通過它的孔徑(例如，通過它的泡點孔徑)來描述過濾器。過濾器的泡點孔徑通常是過濾器最大孔徑的平均值。在一個實施例中，使用了平均孔徑大于微生物的平均孔尺寸的過濾器。在一個實施例中，過濾器可以具有小于濃集劑平均尺寸的平均孔徑。當與從樣品(如水樣)中分離微生物的其他方法相比時，使用具有這些相對較大孔徑的過濾器的能力為本文所公開的方法提供了顯著的優(yōu)勢。在一個實施例中，過濾器可以具有至少約1微米(ym)或更大的平均孔徑。在一個實施例中，過濾器可以具有至少約1.5μπι或更大的平均孔徑。在一個實施例中，過濾器可以具有至少約5μπι或更大的平均孔徑。在一個實施例中，過濾器可以具有至少約ΙΟμπι 或更大的平均孔徑。使用較大孔徑的過濾器時，由于反壓隨孔徑的增大而減小，因此樣品的過濾將更容易且更快速?？梢允褂靡阎椒▽崿F(xiàn)樣品過濾。在一個實施例中，所選擇的過濾方法可以至少部分取決于所述方法的特定應(yīng)用。例如，可以使用真空負壓、通過施加正壓、通過重力過濾樣品。用于過濾樣品的特定技術(shù)可以至少部分取決于用于實施所述方法的裝置類型。例如，為了使用真空負壓，所述裝置可以被構(gòu)造具有可以或可逆地與真空源連接的口 ；并且為了施加正壓，所述裝置可以被構(gòu)造成允許用戶通過手動施加作用力來施加正壓。在一個實施例中，可以通過施加正壓來過濾樣品。使用正壓(或使用重力)的過濾可以提供以下優(yōu)勢即在不需要如真空泵的任何其他設(shè)備的情況下，能夠在野外容易地實施所述方法。圖2示出了本文所公開的另一種示例性方法。該示例性方法包括以下步驟提供接收器(步驟210)，將樣品加入至接收器中(步驟220)，任選將濃集劑加入至接收器中(步驟240)，過濾樣品(步驟230)和檢測微生物(步驟250)。在一個實施例中，檢測微生物包括鑒別微生物、定量微生物或兩者?？梢允褂枚喾N方法鑒別和/或定量微生物，包括(但不限于)微生物測定、生物化學測定(例如，免疫測定法)、核酸分析或它們的組合?？梢允褂玫臏y試方法的具體例子包括(但不限于)側(cè)向流測定、滴定、熱分析、顯微鏡法(例如，光學顯微鏡、熒光顯微鏡、免疫熒光顯微鏡、掃描電子顯微鏡(SEM)、透射電子顯微鏡(TEM))、光譜法(例如、質(zhì)譜、核磁共振(NMR)光譜、拉曼光譜、紅外(IR)光譜、χ-射線光譜、衰減全反射光譜、傅里葉變換光譜、伽馬射線光譜等)、分光光度法(例如，吸光度、熒光、發(fā)光等)、色譜法(例如，氣相色譜、液相色譜、離子交換色譜、親和色譜等)、電化學分析、基因技術(shù)(例如，聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、 轉(zhuǎn)錄介導擴增(TMA)、雜交保護測定(HPA)、DNA或RNA分子識別測定等)、腺苷三磷酸(ATP) 檢測測定、免疫測定(例如，酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA))、細胞毒性測定法、病毒空斑測定法、細胞病變效應(yīng)評估技術(shù)、如可以使用生長培養(yǎng)基(例如，瓊脂)和/或3M PETRIFIIi^l (例如，使用3M PETRIFILM平板讀取器(3M Company (St. Paul,MN))成像、定量和/或說明的)所進行的那些培養(yǎng)技術(shù)、其他合適的分析物測試方法或它們的組合。在一個實施例中， 可以通過培養(yǎng)微生物并對菌落計數(shù)來檢測微生物。在一個實施例中，可以通過比色測定法、 電化學法、熒光測定法或發(fā)光測定法來檢測微生物。在一個實施例中，可以通過培養(yǎng)或通過使用免疫測定法、酶測定法或遺傳分析來檢測微生物。在一個實施例中，可以在收集并濃縮樣品后立即進行微生物分析。樣品過濾后， 可以除去包含微生物的過濾器以用于微生物分析。在一個實施例中，可以將過濾器置于具有半固體微生物培養(yǎng)基的裝置中。這些裝置的非限制性例子包括含有各種瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿、含有EASYGEL 培養(yǎng)基(Micrology Laboratories (Goshen IN))的培養(yǎng)皿和幾種干燥、可再水化的培養(yǎng)基，如3M PETRIFILM有氧計數(shù)板(3MCompany ( . Paul，MN))、3M PETRIFILM大腸桿菌計數(shù)板、3MPETRIFILM大腸桿菌/大腸桿菌計數(shù)板、C0MPACTDRY全計數(shù)板(Nissui Pharmaceutical Company, Ltd. CTokyo，JP))、SANITA_KUN 大腸桿菌板(Chisso Corporation (Tokyo, JP))和SANITA-KUN有氧全計數(shù)板。在一個實施例中，在插入過濾器之前使干燥、可再水化的培養(yǎng)基再水化。本發(fā)明所公開的方法的優(yōu)點在于該便攜、易用的方法可以與易用的可再水化培養(yǎng)基一起使用，從而能夠在具有最基本的實驗室設(shè)備(如用于將過濾器無菌轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基上的小區(qū)域或手套箱)的野外場所進行微生物分析。可任選地， 小型培養(yǎng)箱可以在野外場所為培養(yǎng)基的培育提供溫度控制。在一個實施例中，在將過濾器置于培養(yǎng)基上后，可以將培養(yǎng)基在適當?shù)臏囟扰嘤m當?shù)臅r間。微生物菌落生長的適當溫度和時間將是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的并且可根據(jù)標準方法進行。本文所公開的方法可以用于濃集(例如)水樣中常見的微生物。水樣中特別關(guān)注的微生物包括(例如)尤其是大腸桿菌、糞便大腸桿菌、大腸桿菌(Escherichia coli) 禾口假單胞菌屬(Pseudomonas)、氣單胞菌屬(Aeromonas)、腸球菌屬(Enterococcus)、軍團菌屬(Legionella)和分枝桿菌屬(Mycobacterium)的某些種。例如，可以通過在約35°C的溫度下培育M-48小時來進行大腸桿菌測試；糞便大腸桿菌測試可以在約45°C的溫度下培育。培育一段時間后，可以檢查過濾器中是否存在細菌菌落并且可以記錄每種菌落的數(shù)目和類型。諸如紫中性紅膽鹽(VRB)瓊脂之類的某些微生物培養(yǎng)基含有將某種細菌(如乳糖發(fā)酵菌)與其他細菌區(qū)分開的指示劑。在一個實施例中，可以對菌落進行手動計數(shù)?？捎脮r，可以使用諸如放大透鏡和/或暗視場放大裝置(如魁北克菌落計數(shù)儀)之類的裝置來輔助菌落計數(shù)。作為另外一種選擇，可以使用自動平板計數(shù)儀對平板進行計數(shù)，所述平板計數(shù)儀如(例如)來自 Synbiosis (Fredrick,MD)的 ProtoCOL SR 或 HR 菌落計數(shù)系統(tǒng)或來自 3M 公司的 PETRIFILM 平板讀取器，但前提條件是在該程序中所使用的過濾器和生長培養(yǎng)基與自動菌落計數(shù)系統(tǒng)兼容。在一個實施例中，可以將過濾器從接收器上移除，置于(對特定細菌的生長特異或?qū)θ可L非特異的)培養(yǎng)皿上，使它們生長一定時間段并通過這樣檢測菌落使用生物發(fā)光試劑并使用諸如MILLIFLEX 快速微生物檢測和計數(shù)系統(tǒng)(Mi 11 ipore (Bedford, MA))之類的成像系統(tǒng)對平板進行成像。在一個實施例中，可以在過濾器上收集并濃縮樣品，并且可通過向過濾器中加入生物發(fā)光試劑來在其上直接檢測微生物?？梢酝ㄟ^對過濾器成像或在發(fā)光計中測量生物發(fā)光來定量生物發(fā)光。在一個實施例中，可以在過濾器上收集并濃縮樣品?？梢匀芜x清洗過濾器，可以將裂解試劑加入至過濾器中以便裂解微生物并釋放檢測分析物，如ATP?？梢允占尫诺?ATP并通過向裂解物中加入生物發(fā)光試劑進行檢測?？梢酝ㄟ^在發(fā)光計中測量生物發(fā)光來定量生物發(fā)光。在其他實施例中，可以收集并濃縮樣品，并且可以將整個裝置轉(zhuǎn)移至實驗室中進行檢測。在另一個實施方案中，可以收集并濃縮樣品，可以移除過濾器并將其置于無菌容器中以運輸?shù)綄嶒炇抑羞M行檢測。在一個實施例中，可以設(shè)計容器從而在運輸過程中保持過濾器濕潤以避免微生物存活力的損失?？扇芜x地，可以向容器中加入防腐劑以維持運輸過程中微生物的存活力。圖3示出了本文所公開的另一種示例性方法。本方法包括結(jié)合圖2所討論的步驟，但是還包括其他任選的步驟。步驟360包括攪動接收器。攪動接收器的步驟起到將樣品與濃集劑混合的作用并且可以增強微生物與濃集劑的接觸。術(shù)語“攪拌”及其衍生術(shù)語一般用于描述使液體組合物運動，從而(例如)使該液體組合物的內(nèi)容物混合或共混的方法?？梢允褂枚喾N攪動方法，包括(但不限于)手動搖動、機械搖動(例如，線性搖動)、超聲振動、渦動攪動、手動攪動、機械攪動(例如，通過機械攪拌槳、磁力攪拌棒或另外的輔助攪動裝置，如滾珠)、手動振動、機械振動、混合、捏合以及它們的組合。攪動可以包括任何上述方法，例如，可具有線性軌跡、圓形軌跡、橢圓軌跡、隨機軌跡以及它們的組合，或者可采用其他方式，以確保有效地混合樣品和濃集劑。在攪動期間， 可以通過夾緊或其他方式進一步固定接收器以使得接收器中內(nèi)容物的濺出和/或損失最在一個實施例中，可以通過用手的手動搖動來攪動接收器內(nèi)的液體組合物。在該實施例中，可以將含有液體組合物的接收器手動搖動約15秒至約5分鐘。在該實施例中， 可以將含有液體組合物的接收器手動搖動約30秒至約3分鐘。在該實施例中，可以將含有液體組合物的接收器手動搖動約1分鐘至約2分鐘。在一個實施例中，可以通過使用滴定板搖動器平臺(Lab-Line Instruments (Melrose Park, IL))來攪動接收器中的液體組合物。該示例性搖動器平臺可以在從0至約10的設(shè)置下操作。在一個實施例中，搖動器平臺可以在設(shè)置2下操作，其大約為70rpm。包含液體組合物的接收器可以在該示例性搖動器平臺上搖動約15分鐘至約2 小時。在一個實施例中，包含液體組合物的接收器可以在該示例性搖動器平臺上搖動約30 分鐘至約90分鐘。在一個實施例中，包含液體組合物的接收器可以在該示例性搖動器平臺上搖動約60分鐘(1小時)。在一些實施例中，可通過以下方式攪拌接收器中的液體組合物將樣品制備和遞送系統(tǒng) 801 連接到 Burell Model 75 型手動搖篩機(Burrell Scientif ic (Pittsburgh,時間內(nèi)以10至2000rpm的頻率攪拌，在一些實施例中，頻率為200至 500rpm。在一些實施例中，可以將接收器安裝在距搖篩機臂5cm至50cm的距離處，并且在一些實施例中，距IOcm至20cm。在一些實施例中，接收器可以劃出5度至30度的弧線，并且在一些實施例中，該弧線在15度至20度之間?？梢詫⒔邮掌髦械囊后w組合物攪動至少 10秒，在一些實施例中，至少15秒，在一些實施例中，至少30秒，在一些實施例中，至少40 秒并且在一些實施例中，至少60秒。在一些實施例中，可以將接收器中的液體組合物攪動最多15分鐘，在一些實施例中，最多10分鐘，在一些實施例中，最多5分鐘并且在一些實施例中，最多3分鐘。在一些實施例中，接收器中的液體組合物可在VX-2500多管旋渦振蕩器(VWR Scientific Products (West Chester, PA))中以 200 至 5000rpm 的攪動頻率渦旋所選時間， 在一些實施例中，攪動頻率為1000至3000rpm。渦旋軌跡可為線性、圓形、橢圓、隨機或它們的組合。在一些實施例中，軌跡在0. 25cm至5cm之間；在一些實施例中，在Icm至3cm之間。通過將其設(shè)置在板、臂或其他裝置上，并在攪動前利用重力、夾具或其他方式固定，可以同時攪動多個接收器。例如，在一些實施例中，在單個攪動裝置或多個攪動裝置上同時攪動一個至約五十個接收器；而在一些實施例中，為約10個至約25個接收器。在一個實施例中，可以通過鋼滾珠、磁性攪棒、刀片和其他方式來輔助濃集劑在樣品中的破碎和/或分散從而實現(xiàn)接收器中液體組合物的攪動。上述攪動方法僅以舉例的方式包括在本文中，并非意圖進行限制。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解到可以采用其他類似的攪動方法。圖3還包括培育濃集劑和樣品的任選步驟，步驟370。培育濃集劑和樣品的步驟可以起到增強微生物與濃集劑接觸的作用。在一個實施例中，可將濃集劑和樣品在室溫下或在控制溫度下培育。在一個實施例中，可將濃集劑和樣品在高于室溫的溫度下培育。在一個實施例中，可將濃集劑和樣品在約35 °C的溫度下培育。在一個實施例中，可將濃集劑和樣品在約45°C的溫度下培育。濃集劑和樣品的培育時間也可以不同。在一個實施例中，可將濃集劑和樣品培育約5分鐘至約4小時。在一個實施例中，可將濃集劑和樣品培育約15分鐘至約2小時。在一個實施例中，可將濃集劑和樣品培育約30分鐘至約1小時。在一個實施例中，可以對樣品實施步驟360(攪動樣品)和步驟370(培育樣品)。 在一個實施例中，可以同時實施攪動步驟和培育步驟。例如，可使?jié)饧瘎┖蜆悠吩谂嘤凉饧瘎┖蜆悠返娜繒r間內(nèi)搖動；可使?jié)饧瘎┖蜆悠吩谂嘤凉饧瘎┖蜆悠返闹辽俨糠謺r間內(nèi)搖動；或者可以搖動濃集劑和樣品，然后再培育濃集劑和樣品。圖4示出了本文所公開的另一示例性方法。圖4所示的方法包括結(jié)合圖2所討論的步驟，并且還包括任選步驟480和490。步驟480包括從接收器中移除至少一些微生物。 這可通過從接收器上物理移除過濾器、從過濾器中物理移除(例如，刮去)一些結(jié)合濃集劑的微生物、從過濾器中洗脫一些結(jié)合濃集劑的微生物、從過濾器中的濃集劑上洗脫一些微生物或者上述方式的組合來實現(xiàn)。在一個實施例中，通過(例如)使用鑷子夾住過濾器并將其從接收器上移除來將過濾器從接收器上移除。本領(lǐng)域的技術(shù)人員通過閱讀本說明書將理解如何能實現(xiàn)微生物的移除以及移除微生物可能所期望的環(huán)境。圖4所示的示例性方法還包括步驟490，裂解微生物?？蓪⒔Y(jié)合的微生物裂解，以使它們的遺傳物質(zhì)可供檢測。裂解方法是熟知的，包括例如下述處理聲裂法、滲壓震擾、高溫處理(例如，約50°C至約100°C )以及與酶一起培育，該酶例如為溶菌酶、葡萄糖酶、酵母裂解酶(zymolose)、溶細胞酶、蛋白酶K、蛋白酶E和病毒內(nèi)溶素。本領(lǐng)域的技術(shù)人員通過閱讀本說明書將了解為檢測微生物而應(yīng)裂解微生物的時機。圖5示出了本文所公開的方法的另一示例性實施例。本示例性方法包括以下步驟提供接收器(步驟510)、將樣品加入至接收器中(步驟520)、在將樣品加入至接收器中之前、之后或同時將濃集劑加入至接收器中(步驟M0)、攪動包含樣品和濃集劑的接收器(步驟560)、培育濃集劑和樣品(步驟570)、過濾樣品(步驟530)、從接收器移除過濾器 (步驟58 和培養(yǎng)微生物(步驟550)。當要確定樣品中微生物的量時，該示例性方法是有用的。該示例性方法提供了可以在野外由技術(shù)水平相對有限的技術(shù)人員實施的簡單方法。本文還公開了從包含樣品基質(zhì)和微生物的樣品中分離微生物的其他方法，其包括以下步驟將用作接收器的具有開口的內(nèi)膽置于容器中以形成接收器組件，所述容器被構(gòu)造用于至少部分地接納內(nèi)膽；將樣品加入至內(nèi)膽中以在該內(nèi)膽中形成結(jié)合微生物的組合物，所述結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和結(jié)合濃集劑的微生物；將過濾器置于內(nèi)膽開口的至少一部分上；將過濾器支承件置于過濾器上以形成過濾器組件，所述過濾器組件包括內(nèi)膽、容器、過濾器和過濾器支承件；翻轉(zhuǎn)過濾器組件；和通過過濾器過濾結(jié)合微生物的組合物，從而在過濾器上收集結(jié)合濃集劑的微生物，在此期間內(nèi)膽變形或伸縮。本文還公開了套件。圖6中示出了示例性套件600，其包括接收器610、過濾器620 和濃集劑630。上文討論了可以用作接收器610的接收器的一般特征。接收器的具體構(gòu)造和類型還將在下文中進一步討論。本文所公開的套件可以包括一個或不止一個接收器。上文還討論了可用作過濾器620的過濾器的一般特征。在一個實施例中，過濾器具有第一表面和第二表面并且一般為平面的。如上所述，示例性的過濾器可以包括(但不限于)織造或非織造網(wǎng)(例如，絲網(wǎng)、布網(wǎng)、塑料網(wǎng)等)、織造或非織造聚合物網(wǎng)(例如，包括在均勻或不均勻過程中生產(chǎn)的可被壓延的聚合物纖維)、篩、玻璃棉、玻璃料、濾紙、泡沫等以及它們的組合。在一個實施例中，使用了平均孔徑大于微生物的平均孔尺寸的過濾器。 在一個實施例中，過濾器的平均孔徑小于套件中所包含的濃集劑的平均尺寸。在一個實施例中，可以使用平均孔徑為至少約Iym的過濾器。在一個實施例中，可以使用平均孔徑為約10 μ m的過濾器。使用這些較大的過濾器尺寸的能力可以提供能夠在無需額外設(shè)備的情況下相對快速地過濾樣品的優(yōu)勢。上文還討論了可以用作濃集劑630的濃集劑的一般特征。示例性的濃集劑包括 (但不限于)顆?；蚍稚⒌腨-FeO(OH)、可以(但不必需)用二氧化鈦或細小的納米級金或鉬進行表面處理的硅藻土、金屬硅酸鹽或它們的組合。一般來講，可以用約IOmg至約IOOmg 的濃集劑實現(xiàn)體積約IOOmL的水樣的處理。套件可包括一個或多個過濾器、一個或多個接收器、足以處理一個或多個樣品的一定量的濃集劑。套件還可包括其他任選部件。在一個實施例中，套件可以包括可用于檢測微生物的部件。如果需要，可以在本發(fā)明所公開的套件中包括一種或多種添加劑(例如， 裂解試劑、生物發(fā)光測定試劑、核酸捕集試劑(例如，磁珠)、微生物生長培養(yǎng)基、緩沖液(例如，用于潤濕固體樣品)、微生物染色試劑、清洗緩沖液(例如，清洗掉未結(jié)合的材料)、洗脫試劑(例如，血清白蛋白)、表面活性劑(例如，Triton X-100非離子表面活性劑，得自 Union Carbide Chemicals and Plastics (Houston, TX))、機械摩擦 / 洗脫劑(例如，玻璃珠)等)。示例性的套件包括濃集劑；和用于從樣品中分離微生物的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括接收器，其被構(gòu)造用于允許過濾樣品以及可逆地容納樣品和濃集劑；以及過濾器，其具有平均孔徑大于微生物平均尺寸的孔?？梢杂糜趯嵤┍疚乃_的方法的一種示例性設(shè)備是真空設(shè)備。圖7A中示出了示例性真空設(shè)備。真空設(shè)備700包括濾液隔室710、過濾器720和樣品隔室730。樣品隔室 730是雙開口接收器的實例。濾液隔室710包括真空口 712，其允許濾液隔室可操作地與真空源連接。濾液隔室710通過濾液槽716與真空裝置700的其余部分連通。濾液隔室710 還包括過濾器支承件，它是由外周邊上的凸緣714和從凸緣714開始并在濾液槽716結(jié)束的過濾器支承結(jié)構(gòu)718所組成的。當可操作地構(gòu)造了真空裝置700時，過濾器支承結(jié)構(gòu)718 起到為過濾器720提供支承的作用。使用時，可以將過濾器720置于過濾器支承結(jié)構(gòu)718上并置于凸緣714的中間。然后，將樣品隔室730鄰近過濾器720布置并且可向其中加入樣品。可以在樣品隔室中將樣品與濃集劑一起攪動、培育或兩者均進行，然后可通過真空口 712對濾液隔室710施加真空以使得結(jié)合濃集劑的微生物從樣品基質(zhì)中過濾出來。這將造成在過濾器720上收集結(jié)合濃集劑的微生物并且在濾液隔室710中收集樣品基質(zhì)?？梢允褂脴悠飞w740覆蓋或密封樣品隔室730以最大程度減小或阻止(例如)攪動或運輸時樣品的濺出。與圖7A和7B中所示裝置類似的示例性裝置為Nalgene—次性無菌過濾單元；膜，格柵，CN ；容量，150mL ；孔徑，0. 45 μ m,它可得自多個供應(yīng)商，包括(但不限于) Cole-Parmer (Vernon Hills, IL)，產(chǎn)品號EW-06730_04。這一特定產(chǎn)品具有由聚丙烯制成的樣品容器和由高抗沖聚苯乙烯制成的濾液容器；具有內(nèi)徑為1/4"和3/8"的用于真空連接的快速斷開管路轉(zhuǎn)接器；并且使用了直徑為47mm的過濾器。該示例性裝置(以及適當?shù)倪^濾器)可以與套件中的濃集劑一起使用或者用于實施本文所公開的方法?？捎糜趯嵤┍疚乃_的方法的另一類型的示例性裝置是正壓裝置?？梢允褂玫囊环N示例性正壓裝置包括在如本文所引用的名稱為“收集和濃集用于微生物分析的樣品的裝置和方法(DEVICES AND PROCESSES FOR COLLECTING AND CONCENTRATING SAMPLES FOR MICROBIOLOGICAL ANALYSIS) ” 的共同轉(zhuǎn)讓的 PCT 公開 No. W02008/150779 中所述的裝置。圖8A和8B中示出了本裝置的示例性實施例。圖8A和圖8B示出了示例性裝置 810的組成部分的分解圖。裝置810包括中空、伸長的主體820，其與可拆除的支承件830 連接。伸長的主體820是雙開口接收器的實例。將壓桿840成形并成比例地安裝在主體 820的內(nèi)部并在主體820的內(nèi)部縱向移動。將其上可放置過濾器850的可拆除的支承件830 與主體820可分離地連接。在壓桿840的下端設(shè)置密封圈860。在主體820的下端設(shè)置密封墊圈870。密封圈860和密封墊圈870保持裝置810密封以防止其使用期間的滲漏，并且它們在適當?shù)那闆r下可以由彈性體材料制成，如以商品名SANT0PRENE 商購自ADVANCED ELASTOMER SYSTEMS (總部設(shè)在Akron，Ohio, United States)的熱塑性彈性體、以商品名 CHEMIGUM 商購自 GOODYEAR TIRE&RUBBER CO.(總部設(shè)在 Akron，Ohio, USA)的丙烯腈和丁二烯共聚物(其也稱為丁腈橡膠(buna N))或硅橡膠，如商購自DOW CORNING(總部設(shè)在Midland,Michigan,USA)的橡膠。在某些實施例中，可以將圖8A中所示的任選的預(yù)過濾器 890設(shè)置在裝置810中相對于過濾器850的流路上游的位置。過濾器850可以由以上結(jié)合示例性過濾器所討論的材料制成并且具有以上結(jié)合示例性過濾器所討論的特征。圖8C-F示出了示例性的可拆除支承件830的詳細信息。將可拆除的支承件830 與裝置810的主體820以可將其從該主體上分離的方式連接。用于可拆除的連接和分離的結(jié)構(gòu)或方法一般是機械性的，并且可以具有各式各樣的構(gòu)造(未示出)，如(例如)通過栓釘和栓球、鉤環(huán)型機械固定系統(tǒng)、螺栓和螺釘系統(tǒng)。能夠使主體820和可拆除的支承件830 彼此可拆卸地固定在一起的其他適合的結(jié)構(gòu)在本領(lǐng)域中是已知的，并且可以與該示例性裝置一起使用。在一些實施例中，可拆除的支承件830具有突出832，其可安裝至主體820基部擬4上的突出夾具828中?？刹鸪闹С屑?30還具有在過濾的物質(zhì)已通過過濾器850 后用于將其釋放的濾液排管831。在圖8C、8D和8E中所示的一些實施例中，可拆除的支承件具有排放殼體833和任選的排放孔834以有助于液體和/或空氣通過排放殼體833。排放孔834可以被構(gòu)造為具有多種形狀、數(shù)目和尺寸。在使用裝置810期間，將與圖8A所示的類似的可拆除的支承體830置于基本光滑的平表面上時，排放孔834為濾液提供了出口。使用裝置810濃集液體樣品前，將過濾器850置于可拆除的支承件830上，或者在一個實施例中，置于可拆除的支承件830內(nèi)(如圖8A-B中所示)。在一個實施例中，通過在可拆除的支承件830的內(nèi)壁上形成的擱架836和橫桿838來在基本垂直于液流的方向上支承過濾器850，但是通過其將液體導向通過過濾器的任何適合的布置也可以使用。擱架836 和橫桿838基本構(gòu)成了多孔支承結(jié)構(gòu)來將過濾器定位在液體流路中。過濾器850的厚度和直徑應(yīng)與可拆除的支承件830的擱架836的直徑以及密封墊圈870的直徑相容。在組裝的裝置810中，優(yōu)選將密封墊圈870定位在過濾器850外邊緣的頂上，從而在過濾器850和密封邊緣8 之間形成基本不透水的密封。在圖示實施例中，可拆除的支承件830包括橫桿838，其從可拆除的支承件830的上端縱向向下突出至底板837并且從擱架836徑向向內(nèi)延伸。在該實施例中，底板837具有中心開口、濾液排管831，其有助于將液體流導向至可拆除的支承件830之外，如圖8E所示。如圖8E和8F所示，擱架836具有位于可拆除的支承件830內(nèi)部的固體環(huán)形式，并且與主體820的密封墊圈870和密封邊緣829、擱架836 —起輔助形成不透水的密封。在裝置810使用期間，橫桿838為過濾器850提供了多孔支承結(jié)構(gòu)。盡管在圖8A-B 中作為橫桿838示出，多孔支承結(jié)構(gòu)可以具有多種其他構(gòu)造。替代形式的設(shè)計(未示出) 可包括由基本為實心的，優(yōu)選平坦的表面組成的單個支撐構(gòu)件，該構(gòu)件具有多個孔，所述孔提供了在整個表面上間隔布置的用于使液體流出可拆除支承件的通道。多孔支承結(jié)構(gòu)為過濾器850提供了足夠的支承，使得在對過濾器850施加流體靜壓的過程中過濾器不會破裂或穿過多孔支承結(jié)構(gòu)中的孔。可以以適當?shù)男问接删酆衔锊牧仙a(chǎn)可拆除的支承件830及其部件。這些材料的實例包括(但不限于)聚丙烯、聚乙烯、聚酯和聚碳酸酯。另一個示例性正壓型裝置可見于圖9中。如圖9所示，樣品制備系統(tǒng)900包括容器902、內(nèi)膽904、環(huán)980、封蓋906、卡圈908和頂蓋909。所述系統(tǒng)還包括過濾器，但是它在圖9A的視圖中不可見。在該實施例中，內(nèi)膽904是單開口接收器的實例。在名稱為“制備和分析樣品的系統(tǒng)和方法(SYSTEM AND METHOD FOR PREPARING AND ANALYZING SAMPLES) ”的共同轉(zhuǎn)讓的美國專利申請No. 60/989, 180、名稱為“用于環(huán)境采樣的樣品制備(SAMPLE PREPARATION FOR ENVIRONMENTAL SAMPLING) ” 的 PCT 公開 No. WO 2009/067503、名稱為“制備樣品的系統(tǒng)和方法(SYSTEM AND METHOD FOR PREPARING SAMPLES) ”的PCT公開No. WO 2007/137257和名稱為“制備和遞送樣品的系統(tǒng)和方法(SYSTEM AND METHOD FOR PREPARING AND DELIVERING SAMPLES) ” 的美國專利申請 No. 60/989, 175中說明了具有與樣品制備系統(tǒng)900類似的特征的系統(tǒng)，本文引用了以上每篇專利。在一些實施例中，如圖9所示，容器902是獨立式和/或自支承式的，并且包括基部927和側(cè)壁929。術(shù)語“獨立式”通常用來表示能夠在不倒塌、不變形且不需要另一物體固定的情況下獨立擺放的物體。術(shù)語“自支承式”通常用來表示在承受自重的情況下不會倒塌或變形的物體。例如，袋子通常不是“自支承式”的，因為其在自重作用下無法保持形狀，而是會倒塌或變形。自支承式物體不一定是獨立式的。容器902可以由多種材料形成，包括(但不限于)聚合物材料、金屬(如鋁、不銹鋼等)、陶瓷、玻璃、以及它們的組合。聚合物材料的例子可包括(但不限于)聚烯烴(如聚乙烯、聚丙烯及其組合等)、聚碳酸酯、丙烯酸樹脂、聚苯乙烯、高密度聚乙烯(HDPE)、聚丙烯、 能夠形成獨立式和/或自支承式容器的其他合適聚合物材料或它們的組合。容器902可以為半透明(或甚至透明)或不透明的，并且根據(jù)待分析來源的類型、量和尺寸可以為任何合適尺寸。例如，在一些實施例中，容器902可以具有50mL、100mL、250mL或更大的容量。在一些實施例中，如圖9所示，樣品制備系統(tǒng)900包括內(nèi)膽904，其形狀和尺寸被設(shè)計為可接納在容器902中。內(nèi)膽904可為一次性的(如可供使用一次)，以允許在污染風險不大且多次使用之間無需大范圍清洗的情況下重復(fù)使用容器902。如更詳細地說明的，樣品制備系統(tǒng)可以包括不具有容器的內(nèi)膽。當使用無容器內(nèi)膽時，其作用不是“內(nèi)膽”本身，并且通常可以稱為接收器或容器。如圖9中所示，容器902限定了第一貯存器920，而內(nèi)膽904限定了第二貯存器 922。內(nèi)膽904的形狀和尺寸被設(shè)計為可接納在容器902的貯存器920中。在一些實施例中，液體組合物914可以容納在第一貯存器920中。在一些實施例中，如圖9所示，使用了內(nèi)膽904，并且液體組合物914可以容納在第二貯存器922中，而內(nèi)膽904可以定位在第一貯存器920內(nèi)。無論是加入至第一貯存器920還是加入至第二貯存器922中，液體組合物 914通常包括(一旦兩者均加入至接收器中)結(jié)合濃集劑的微生物912和樣品基質(zhì)913。在一些實施例中，內(nèi)膽904是獨立式的并且內(nèi)膽904或容器902可以用作可容納液體組合物 914的獨立式接收器。內(nèi)膽904可以由多種材料形成，所述材料包括多種聚合物材料，包括(但不限于) 聚烯烴、聚酰胺(如NYLON )或它們的組合，所述聚烯烴包括(但不限于)聚乙烯(如低密度聚乙烯(LDPE))、聚丙烯和聚(甲基戊烯)。在一些實施例中，內(nèi)膽904由模塑工藝形成，例如熱成形工藝。內(nèi)膽904可以為半透明(或甚至透明)或不透明的。在一些實施例中，如圖9所示，內(nèi)膽904是獨立式的和/或自支承式的，其中任一種可以允許在內(nèi)膽904不倒塌或變形的情況下，在將內(nèi)膽904布置在容器902中之前將液體組合物914加載至內(nèi)膽904中。另外，獨立式和/或自支承式內(nèi)膽904可以輔助稱重、樣品或濃集劑(或兩者)的加入、運輸、處理和/或樣品移除。在一些實施例中，內(nèi)膽904為自支承式和/或獨立式的，并且也是可變形的。術(shù)語“可變形”用來指其原形狀或狀態(tài)在壓力(如正壓或負壓)或應(yīng)力下可以改變的結(jié)構(gòu)。在采用可變形內(nèi)膽904的實施例中，可以對內(nèi)膽904施壓，以使其尺寸從其原(即未受應(yīng)力的) 尺寸減小。使用該壓力有助于從內(nèi)膽904中移除液體組合物914(或其濾液)。在這些實施例中，內(nèi)膽904可充當可容納液體組合物914的可變形自支承式接收器。在一些實施例中， 可變形自支承式接收器也是獨立式的。由于內(nèi)膽的伸縮能力，與其他系統(tǒng)相比，圖9所示的利用可伸縮內(nèi)膽的系統(tǒng)可以提供優(yōu)勢?？缮炜s內(nèi)膽可以獲得更簡單的整體系統(tǒng)，這是因為防止負壓(真空)的排氣口或正壓源不是必需的。在一些實施例中，如圖9所示，容器902包括形成在其基部927上的孔924，使用者可以通過該孔進入內(nèi)膽904以將壓力施加到內(nèi)膽904上使其變形。這種壓力可以通過手動或通過另外的設(shè)備直接施加，并且可以是手動或自動過程?？?24的形狀和尺寸可以根據(jù)使用中所期望的應(yīng)用確定。在一些實施例中，容器902的基部927只不過是側(cè)壁929的底部，或者是側(cè)壁9 略微向內(nèi)突出的部分，因此很容易從容器902的底部觸及內(nèi)膽904。換句話講，在一些實施例中，容器902的孔擬4限定容器902底部的主要部分(例如，容器902 的大部分橫截面積)，而基部927只是容器902圍繞孔擬4的一小部分。在不采用內(nèi)膽904 的實施例中，容器902不需要包括孔924。在一些實施例中，內(nèi)膽904包括相對剛性的基座擬6和相對薄且可變形的側(cè)壁 928，使得當沿與內(nèi)膽904的縱向軸線相平行的方向(如經(jīng)容器902的孔924)將壓力施加到基座擬6上時，內(nèi)膽904沿縱向變形(如通過側(cè)壁928收縮而不是基座926)。作為另外一種選擇或除此之外，基部擬6可以比側(cè)壁擬8更厚。僅作為舉例，在一些實施例中，側(cè)壁擬8 的厚度為至少50 μ m ；在一些實施例中，為至少100 μ m ；在一些實施例中，為至少150 μ m ； 在一些實施例中，為至少200 μ m。在一些實施例中，基部擬6的厚度為至少225 μ m ；在一些實施例中，為275 μ m ；在一些實施例中，為至少300 μ m ；在一些實施例中，為至少350 μ m。內(nèi)膽904還可包括一個或多個擋板、褶縐、波紋、接縫、接頭、角撐板、削弱部分(例如，環(huán)狀削弱部分)或它們的組合，其可以加入以輔助控制內(nèi)膽904的變形和/或還可以減小內(nèi)膽904的內(nèi)體積。在一些實施例中，內(nèi)膽904可包括風琴褶型構(gòu)造。在一些實施例中， 內(nèi)膽904在其內(nèi)表面上，尤其是在基座擬6和側(cè)壁擬8之間的內(nèi)連接處不會包括任何凹槽。在一些實施例中，內(nèi)膽904故意變形，以中斷內(nèi)膽904的表面幾何形狀。這種中斷的表面幾何形狀有助于在攪動過程中分解源。例如，在一些實施例中，可以在內(nèi)膽904的側(cè)壁擬8與容器902之間放置障礙物(例如相對剛性材料)以在內(nèi)膽904的側(cè)壁擬8中形成不同的表面幾何形狀。如圖9所示，容器902可包括標記930，以指示容器902內(nèi)的內(nèi)容物液位(即體積)。合適標記的一個例子在美國專利No. 6，588，681中有所描述。作為另外一種選擇，內(nèi)膽904可包括標記。為了能夠使用容器902和/或內(nèi)膽904上的標記930，容器902和/或內(nèi)膽904可為半透明甚至透明的，以便透過容器902的側(cè)壁9 和/或內(nèi)膽904的側(cè)壁擬8 看到液體組合物914。側(cè)壁擬8和側(cè)壁929也可以具有其他類型的標記，例如商標、品牌名稱等。標記930也可設(shè)置在膜上，膜的尺寸被設(shè)計為可接納在容器902或內(nèi)膽904中，并且可由包括足夠內(nèi)應(yīng)力的材料制成，使得膜緊貼容器902或內(nèi)膽904的內(nèi)表面向外(即徑向) 壓迫。
系統(tǒng)900也包括封蓋906。如圖9A所示，封蓋906還包括口 932、尺寸被設(shè)計為接納在內(nèi)膽904中的圓柱形部分936和從圓柱形部分936延伸至口 932的一般圓錐形(例如， 截頭圓錐體)部分938。在圓柱形部分936和圓錐形部分938之間的接合處，封蓋906還包括從圓柱形部分936和圓錐形部分938徑向向外延伸的唇緣940?？?932包括具有開口內(nèi)表面952的開口 954。如圖9B所示，封蓋906的內(nèi)表面953包括下內(nèi)周邊緣968。過濾器支承件982連接到下內(nèi)周邊緣968而過濾器934直接鄰近于過濾器支承件982。本文所使用的過濾器934 一般包括第一表面和第二表面。過濾器支承件982與過濾器934的第一表面接觸(在一個實施例中，直接接觸)。過濾器934的第二表面接觸樣品?？墒褂靡陨蠈τ诜馍w906所述的相同連接裝置將過濾器支承件982連接至封蓋906。過濾器支承件982可永久性地或可拆卸地連接至封蓋906。過濾器支承件982和封蓋906之間的連接程度可以根據(jù)多個因素而改變，其包括(但不限于)過濾器支承件982材料、封蓋906材料、連接表面區(qū)域的尺寸和紋理以及所使用的連接方式的類型。例如，如果過濾器支承件982包括磨損邊緣，則可使用較寬和/或滾花的連接表面區(qū)域。這種較寬和/或滾花的超聲焊接可以捕集過濾器支承件982的磨損邊緣。為了使磨損量最小，可以使用激光切削過濾器支承件982，激光可以熔合過濾器支承件982的邊緣。由于所得的激光切削的過濾器支承件982將包括(如果有) 最小量的磨損，因此可以使用較窄的連接區(qū)域。在一些實施例中，連接區(qū)域完全圍繞過濾器支承件982的外周邊延伸。在一些實施例中，連接區(qū)域可具有最多5. Omm的平均寬度(即， 相同平面內(nèi)并且基本垂直于過濾器支承件982的外周邊的尺寸)并且在一些實施例中，平均寬度在1.0mm至3. Omm的范圍內(nèi)。作為另外一種選擇，可以通過(例如)模鑄工藝與封蓋906 —體地形成過濾器支承件982。過濾器支承件982可以由與封蓋906相同的材料或不同的材料形成。過濾器支承件982可以是柔性的或半剛性。在一些實施例中，過濾器支承件982是由尼龍非織造織物或織造織物形成，而封蓋906是由諸如聚丙烯之類的聚合物形成的注塑部件。在這些實施例中，尼龍過濾器支承件982可以通過超聲焊接技術(shù)連接至封蓋906。在超聲焊接期間，可使下內(nèi)周邊緣968的至少一部分熔化以機械地粘結(jié)過濾器支承件982。由于尼龍具有比聚丙烯高的熔融溫度，因此尼龍過濾器支承件982可以在超聲焊接加工過程中維持其結(jié)構(gòu)完整性。在這些實施例中，下內(nèi)周邊緣968的至少一部分可以進入到過濾器支承件982的一部分中，借此包封過濾器支承件982的一部分。過濾器支承件982可以具有對于給定應(yīng)用而改變的尺寸和形狀。過濾器支承件 982可以具有任何所需的形狀，包括(但不限于)圓形、正方形、長方形、三角形、多邊形、星形、其他適合的形狀以及它們的組合。在圖9B和9C所示的實施例中，過濾器支承件982具有基本為圓形的形狀。根椐封蓋906的尺寸，過濾器支承件982的尺寸可以是不同的。在一些實施例中， 過濾器支承件982具有范圍為15mm至IOOmm的最大尺寸(即長度、寬度或直徑)，盡管過濾器支承件982可以具有更小或更大的尺寸。例如，在一些實施例中，過濾器支承件982可以具有圓形形狀和56mm的直徑。在一些實施例中，過濾器934可以具有大于封蓋906的最小橫截面積的總表面積。 在封蓋906中，最小橫截面積為封蓋開口 ％4的橫截面積。
在圖9所示的實施例中，封蓋906可拆卸地連接到內(nèi)膽904，并且利用卡圈908進一步將封蓋906固定到容器902上。例如，在圖9中，容器902包括位于側(cè)壁擬9外表面上端的螺紋931，螺紋被加工成合適的尺寸和形狀，可以將卡圈908(具有能夠與容器902上的螺紋931接合的內(nèi)螺紋93 螺紋連接到容器902上端。作為使用卡圈908將封蓋906固定到容器902的替代方式，可采用包括夾具和/或下文所述任何其他連接裝置在內(nèi)的其他連接裝置。在一些實施例中，不采用內(nèi)膽904，并且封蓋906可直接連接到容器902。在這些實施例中，不需要采用卡圈908。因此，封蓋906可與容器902或內(nèi)膽904形成密封(如氣密性密封)。在一些實施例中，封蓋906和容器902(或封蓋906和內(nèi)膽904)整體形成或永久性地連接在一起。在封蓋906與內(nèi)膽904之間、封蓋906與容器902之間和/或卡圈908與容器902 之間可采用多種連接方式，以允許各自的部件可拆卸地彼此連接，這些連接方式包括(但不限于)重力(例如，可將一部件安放在另一部件或其配合部分的頂部)、螺紋、壓力配合式接合(有時也稱為“摩擦配合式接合”或“過盈配合式接合”)、搭扣配合式接合、磁力、粘接劑、熱密封、其他合適的可拆除連接方式以及它們的組合。在一些實施例中，在加入液體組合物914后，不需要再次打開樣品制備系統(tǒng)900，從而不需要將容器902、內(nèi)膽904、封蓋906 和卡圈908彼此可拆卸地連接，而是可以彼此永久性地或半永久性地連接。這種永久性或半永久性的連接手段可以包括，但不限于粘附、縫合、U形釘釘住、螺紋連接、釘子(nail)釘住、鉚釘釘住、角釘(brad)釘住、卷邊、焊接(例如聲學(如超聲)焊接)、任何熱粘結(jié)技術(shù) (例如對待連結(jié)的部件中的一個或二者施加熱和/或壓力)、搭扣配合式接合、壓力配合式接合、熱密封、其他合適的永久性或半永久性的連結(jié)手段、以及它們的組合。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將會知道，某些永久性或半永久性連接方法也適于被拆除，反之亦然，并且僅僅是為了舉例說明才按這種方式分類。內(nèi)膽904還可以包括從內(nèi)膽904的側(cè)壁擬8徑向向外突出的唇緣944，并且唇緣 944可以與容器902的上表面946以及封蓋906的唇緣940形成對接關(guān)系，從而在組裝樣品制備系統(tǒng)900時，將內(nèi)膽904的唇緣944布置在封蓋906的唇緣940和容器902的上表面946之間并形成密封(例如，氣密性密封)。如圖9所示，卡圈908包括向內(nèi)突出的唇緣 956，使得當卡圈908連接到容器902時，卡圈908的唇緣956壓迫封蓋906的唇緣940，使其接觸內(nèi)膽904的唇緣944，從而使唇緣944受壓接觸容器902的上表面946 (例如，以形成更完整的密封)。圖9所公開的系統(tǒng)還可包括接合環(huán)980。接合環(huán)980(如果使用)可以起到增加表面積的作用，以在封蓋906和內(nèi)膽904或容器902之間形成防水密封?？梢允褂貌痪哂薪雍檄h(huán)980的系統(tǒng)900。接合環(huán)980通常被構(gòu)造用于安裝在內(nèi)膽904的內(nèi)表面內(nèi)并形成用于接觸過濾器934的較大表面積。關(guān)于組裝樣品制備系統(tǒng)900以及在樣品制備系統(tǒng)900的部件之間形成密封的上述方式僅僅是以舉例方式進行了描述和展示。然而本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解到，可以采用各種其他機構(gòu)裝配樣品制備系統(tǒng)900的部件并形成密封(如不透液密封、氣密密封或它們的組合)，使得抑制樣品制備系統(tǒng)900在通常操作條件下泄露。雖然將圖9A、9B和9C所示實施例中的封蓋906顯示為具有一般圓錐形或截頭圓錐體形狀，但是應(yīng)當理解封蓋906可以具有多種其他形狀，包括(但不限于)圓柱形形狀、具有矩形或正方形橫截面的管狀形狀或適合與樣品制備系統(tǒng)900的其他部件連接的其他形狀。相似地，容器902、內(nèi)膽904和卡圈908可以具有與圖9A、9B和9C所示的基本圓柱形形狀不同的多種其他形狀。此外，封蓋906的尺寸可以適應(yīng)樣品制備系統(tǒng)900的其他部件。封蓋906可由多種材料形成，包括上文結(jié)合容器902所述的材料。取決于應(yīng)用，封蓋906可為半透明(甚至透明)或不透明的?？ㄈ?08可以由多種材料形成，包括但不限于多種聚合物材料、金屬材料、以及它們的組合。例如，卡圈908可以由模制塑料部件或加工金屬(如鋁)部件形成。在一些實施例中，卡圈908由包含玻璃纖維增強的聚丙烯的模制塑料部件形成。如圖9A所示，封蓋906的口 932的形狀通常是圓柱形和管狀，使得口 932限定了封蓋906的內(nèi)表面953的部分925和封蓋906中的開口 954。封蓋906為中空的并且在組裝樣品制備系統(tǒng)900時，與第二貯存器922流體連通?？?932不一定是圓柱形的，而是可根據(jù)給定應(yīng)用采用任何必要的形狀。在圖9所示實施例中，頂蓋909的形狀和尺寸被設(shè)計為接納口 932的至少一部分。 因此，頂蓋909可連接到封蓋906的口 932，以關(guān)閉封蓋906內(nèi)的開口卯4并密封(如氣密性密封)樣品制備系統(tǒng)900與環(huán)境隔開。頂蓋909可使用任何上述連接方式連接到封蓋 906?？梢耘c封蓋906 —體地形成頂蓋909(例如，拉蓋式彈簧扣蓋)，或者頂蓋909可以與封蓋906是分開的(例如，擰接蓋)。頂蓋909可由多種材料形成，包括上文結(jié)合容器902 或卡圈908所述的材料?？赏ㄟ^改裝可從3M公司(St. Paul,MN)商購獲得的3M PPS 油漆制備系統(tǒng)制備一種這樣的設(shè)備。下文中的實例2顯示了改裝3M PPS油漆制備系統(tǒng)以獲得可以在本文中使用的系統(tǒng)的示例性方法。在本文中還可以使用利用重力將結(jié)合濃集劑的微生物從樣品基質(zhì)中過濾出的裝置。在一個實施例中，上述裝置可用作重力過濾裝置，因為未施加真空或者未通過施加在接收器上的壓力來迫使樣品基質(zhì)(濾液)通過過濾器。在本文中還可以使用其他類型的系統(tǒng) (除了真空過濾、正壓系統(tǒng)和重力過濾系統(tǒng)以外)。本文還描述了從樣品中分離微生物的系統(tǒng)，所述樣品包含樣品基質(zhì)和微生物，所述系統(tǒng)包括內(nèi)膽，被構(gòu)造用于提供濃集劑與所述樣品的接觸，提供結(jié)合微生物的組合物， 所述結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和具有結(jié)合的微生物的濃集劑；過濾器，所述過濾器具有第一表面和第二表面，并且具有平均孔徑大于微生物平均尺寸的孔；過濾器支承件， 其被構(gòu)造用于接觸過濾器的第一表面并且提供結(jié)合微生物的組合物與過濾器的第二表面的接觸，其中內(nèi)膽和過濾器支承件被構(gòu)造用于提供結(jié)合微生物的組合物通過過濾器的過濾，從而在過濾器的第二表面上收集結(jié)合濃集劑的微生物。鍾所有培養(yǎng)物均得自美國模式培養(yǎng)物保藏所(ATCC(Manassas，VA))。實例1使用40mm雙螺桿擠出機制備微孔聚偏二氟乙烯(PVDF)膜。將PVDF聚合物粒料 (3M/Dyneon 1012)引入至擠出機的料斗中。將擠出機的螺桿速度設(shè)置為150RPM。使用得自 IKA Works, Inc. (Wilmington, NC)的 Ultra Turrax T-25 基本高剪切攪拌器將粉末形
式的成核劑(HYPERF0RM HPN-68L)與三乙酸甘油酯稀釋劑(TRIACETIN 三乙酸甘油酯)在2升批料中預(yù)混合約5分鐘的時間段(該裝置僅具有一個速度)，從而將該粉末以非凝聚的非砂質(zhì)的觸摸光滑的狀態(tài)均勻地分散，然后通過進料裝置與添加的稀釋劑一起通過端口進料到擠出機中。PVDF聚合物/稀釋劑/成核劑的重量比分別為39. 85/60. 00/0. 15。總擠出速率為約13. 6kg/hr ；澆注速度為1. 6m/min。擠出機具有八個區(qū)，其中區(qū)1至8的溫度分布為188°C。隨后將均勻混合的聚合物/稀釋劑/成核劑熔體經(jīng)泵通過維持在166°C的帶雙鉻涂層的衣架型槽膜模頭，并澆注至輪溫度維持在71°C，速度為3. 0米/分鐘(m/min) 的圖案化澆注輪上以形成膜。在清洗工位用去離子水在線清洗膜并將其風干。將清洗的膜連續(xù)進料到長度取向機中并在132°C以1. 6X2. 2的在線膜拉伸比拉伸。評價膜卷并發(fā)現(xiàn)其具有下列性質(zhì)平均膜厚度為1. 17mm ；泡點孔徑為11. 8 μ m ；對空氣流的格利阻力(Gurley resistance)為0. 4sec/50cc ；和對水流的阻力為1.如ec/100cc。有關(guān)制造該過濾器的其他詳細信息可見于本文所引用的名稱為“具有相對較大平均孔徑的微孔膜及其制備方法 (MICR0P0R0US MEMBRANES HAVING A RELATIVELY LARGE AVERAGE PORE SIZE AND METHODS OF MAKING THE SAME) ” 的 PCT 公開 No. WO 2009/048743。然后，通過用10 重量％的 SR344(Sartomer Co.，Inc. (Exton, PA))的甲醇溶液浸透膜來進一步處理PVDF過濾器從而制備了親水性聚亞烷基二醇二(甲基)丙烯酸酯官能化的大孔徑PVDF膜。然后，用20千戈(kGy)劑量的電子束輻射樣品，用水沖洗三次，并在加熱至70°C的水中放置一小時。有關(guān)該過濾器處理的其他詳細信息可見于本文所引用的名稱為“功能化基底(FUNCTIONALUED SUBSTRATES) ”的美國專利No. 7，553，417中的實例9。將分離的大腸桿菌(ATCC 51813)菌落接種到5ml的BBL大豆胰蛋白酶解酪蛋白肉湯(Becton Dickinson (Sparks, MD))中并在37°C培育18-20小時。用巴特菲爾德氏緩沖液(pH 7.2，VWR(West Chester, PA))稀釋約IO9菌落形成單位/毫升(CFU/ml)的該過夜培養(yǎng)物。用100ml飲用水，從102CfU/ml的稀釋液以1 1000進行進一步稀釋，從而得到0. 1/ml (總計10個cfu)的最終濃度。用70%的異丙醇水溶液清潔本文所引用的名稱為“收集和濃縮用于微生物分析的樣品的設(shè)備和方法(DEVICES AND PROCESSES FOR COLLECTING AND CONCENTRATING SAMPLES FOR MICROBIOLOGICAL ANALYSIS) ” 的 PCT 專利申請 No. US2008/064939 中所述的裝置，使其風干30分鐘，然后用無菌去離子水清洗。再風干30分鐘后，將孔徑10微米，直徑4. 4cm的膜過濾器置于裝置的可拆除的支承件上。使用鎖環(huán)將支承件緊固在裝置主體上，并使用直徑為3. 3cm的SCOTCH 包裝帶(3M公司(M.Paul，MN))片密封出口，然后加入加標樣品。加入100毫克無定形的球化硅酸鎂濃集劑(作為3M化妝品微珠([CM-Ill])由 3M公司(M.Paul，MN)出售)。將壓桿置于裝置頂上以將其覆蓋，然后將裝置中的內(nèi)容物通過在室溫(25 °C )下手動搖動2分鐘進行混合?；旌虾?，除去粘合劑阻塞密封，并通過將設(shè)備中的壓桿手動向下壓約5分鐘來施加壓力，以捕集過濾器上的無定形的球化硅酸鎂濃集劑。在該步驟中，通過裝置底部的出口將樣品排出裝置外。過濾后，打開裝置以暴露過濾器。用無菌鑷子將過濾器從封蓋上移除， 并以濃集劑一側(cè)向上置于3MPETRIFILM大腸桿菌(E coli) /大腸桿菌計數(shù)板上。根據(jù)制造商的說明，將平板用Iml無菌巴特菲爾德氏緩沖液水化，密封并在37°C的培養(yǎng)箱中培育。將來自初始102cfu/ml的1 1000稀釋液作為對照在3MPETRIFILM大腸桿菌(E coli)/大腸桿菌計數(shù)板上鋪板。過夜培育后，根據(jù)制造商的說明分析該平板上的細菌菌落。
使用下式計算結(jié)果(捕集效率)
權(quán)利要求
1.一種從樣品中分離微生物的方法，所述樣品包含樣品基質(zhì)和微生物，所述方法包括以下步驟提供接收器，所述接收器被構(gòu)造用于允許過濾所述樣品以及可逆地容納所述樣品和濃集劑；將所述樣品加入至所述接收器中，其中將在所述接收器中形成結(jié)合微生物的組合物， 所述結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和結(jié)合濃集劑的微生物；和通過過濾器過濾所述結(jié)合微生物的組合物，從而在所述過濾器上收集所述結(jié)合濃集劑的微生物，其中所述過濾器的平均孔徑大于所述微生物的平均尺寸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括在將所述樣品加入至所述接收器之后，將所述濃集劑加入至所述接收器。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在將所述樣品加入至所述接收器之前，所述接收器容納有所述濃集劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述過濾步驟通過使用真空負壓、通過施加正壓或通過重力實現(xiàn)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括攪動所述接收器中的所述濃集劑和所述樣品。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括在通過所述過濾器過濾所述結(jié)合微生物的組合物之前，將所述接收器中的所述濃集劑和所述樣品培育一段時間。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括從所述濃集劑中洗脫所述微生物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括在所述過濾器上培養(yǎng)所述微生物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述方法還包括從所述過濾器中移出所述結(jié)合濃集劑的微生物的至少一部分，然后檢測所述微生物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，所述方法還包括在檢測前裂解所移出的結(jié)合濃集劑的微生物。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中檢測所述微生物是通過比色測定法、電化學法、 熒光測定法、發(fā)光測定法、通過培養(yǎng)、通過使用免疫測定法、通過使用酶測定法或通過遺傳分析實現(xiàn)的。
12.—種套件，所述套件包括濃集劑；和用于從樣品中分離微生物的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括接收器，被構(gòu)造用于允許過濾所述樣品以及可逆地容納所述樣品和所述濃集劑；和過濾器，具有平均孔徑大于所述微生物的平均尺寸的孔。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，其中所述濃集劑包括顆?；蚍稚⒌臐饧瘎?。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，其中所述濃集劑包括Y-FeO(OH)。
15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，其中所述濃集劑包括硅藻土。
16.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，其中所述濃集劑包括用二氧化鈦、細小的納米級金、 細小的納米級鉬進行表面處理過的硅藻土。
17.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，其中所述濃集劑包括金屬硅酸鹽。
18.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，其中所述濃集劑包括金屬碳酸鹽。
19.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，其中所述濃集劑包括金屬磷酸鹽。
20.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，其中所述過濾器的平均孔徑小于所述濃集劑的平均尺寸。
21.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，所述套件進一步包括多個接收器。
22.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，所述套件進一步包括多個過濾器。
23.根據(jù)權(quán)利要求12所述的套件，所述套件還包括檢測試劑。
24.根據(jù)權(quán)利要求23所述的套件，其中所述檢測試劑選自培養(yǎng)基、裂解試劑、酶、顯色酶底物、熒光酶底物或發(fā)光酶底物、指示染料、著色劑、抗體和多核苷酸。
25.一種從樣品中分離微生物的系統(tǒng)，所述樣品包含樣品基質(zhì)和微生物，所述系統(tǒng)包括內(nèi)膽，被構(gòu)造用于提供濃集劑與所述樣品的接觸，提供結(jié)合微生物的組合物，所述結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和具有結(jié)合的微生物的濃集劑；過濾器，所述過濾器具有第一表面和第二表面，并且具有平均孔徑大于所述微生物的平均尺寸的孔；過濾器支承件，被構(gòu)造用于接觸所述過濾器的所述第一表面，并提供所述結(jié)合微生物的組合物與所述過濾器的所述第二表面的接觸，其中所述內(nèi)膽和所述過濾器支承件被構(gòu)造用于提供所述結(jié)合微生物的組合物通過所述過濾器的過濾，從而在所述過濾器的所述第二表面上收集結(jié)合濃集劑的微生物。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的系統(tǒng)，其中所述內(nèi)膽是能變形的。
27.根據(jù)權(quán)利要求25所述的系統(tǒng)，其中所述過濾器的平均孔徑小于所述濃集劑的平均尺寸。
28.根據(jù)權(quán)利要求25所述的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)還包括容器，其中所述容器被構(gòu)造為至少部分地接納所述內(nèi)膽。
29.一種套件，所述套件包括濃集劑；和用于從樣品中分離微生物的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括內(nèi)膽，被構(gòu)造用于提供所述濃集劑與所述樣品的接觸，提供結(jié)合微生物的組合物，所述結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和具有結(jié)合的微生物的濃集劑；過濾器，所述過濾器具有第一表面和第二表面，并且具有平均孔徑大于所述微生物的平均尺寸的孔；過濾器支承件，被構(gòu)造用于接觸所述過濾器的所述第一表面，并提供所述結(jié)合微生物的組合物與所述過濾器的所述第二表面的接觸，其中所述內(nèi)膽和所述過濾器支承件被構(gòu)造用于提供所述結(jié)合微生物的組合物通過所述過濾器的過濾，以便在所述過濾器的所述第二表面上收集所述具有結(jié)合的微生物的濃集劑。
30.根據(jù)權(quán)利要求四所述的套件，其中所述內(nèi)膽是能變形的。
31.根據(jù)權(quán)利要求四所述的套件，其中所述過濾器的平均孔徑小于所述濃集劑的平均尺寸。
32.根據(jù)權(quán)利要求四所述的套件，所述套件還包括容器，其中所述容器被構(gòu)造為至少部分地接納所述內(nèi)膽。
33.一種用于從樣品中分離微生物的方法，所述樣品包含樣品基質(zhì)和微生物，所述方法包括以下步驟將具有開口的內(nèi)膽置于容器中以形成接收器組件，所述容器被構(gòu)造為至少部分地接納所述內(nèi)膽；將所述樣品加入至所述內(nèi)膽中，以在所述內(nèi)膽中形成結(jié)合微生物的組合物，所述結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和結(jié)合濃集劑的微生物，將過濾器置于所述內(nèi)膽的所述開口的至少一部分的上方，所述過濾器的平均孔徑大于所述微生物的平均尺寸；將過濾器支承件置于所述過濾器上以形成過濾器組件，所述過濾器組件包括所述內(nèi)膽、所述容器、所述過濾器和所述過濾器支承件；翻轉(zhuǎn)所述過濾器組件；以及通過所述過濾器過濾所述結(jié)合微生物的組合物，從而在所述過濾器上收集所述結(jié)合濃集劑的微生物。
34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，所述方法還包括在將所述樣品加入至所述內(nèi)膽之前，將所述濃集劑加入至所述內(nèi)膽中。
35.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，其中在加入所述樣品之前，所述濃集劑已存在于所述內(nèi)膽中。
36.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，所述方法還包括攪動所述內(nèi)膽中的所述濃集劑和所述樣品。
37.根據(jù)權(quán)利要求36所述的方法，所述方法還包括在攪動前將臨時頂蓋置于所述內(nèi)膽的所述開口的至少一部分上。
38.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，所述方法還包括在通過所述過濾器過濾所述結(jié)合微生物的組合物之前，將所述濃集劑和所述樣品培育一段時間。
39.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，其中過濾還包括對所述內(nèi)膽施加壓力。
40.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，所述方法還包括在過濾了所述結(jié)合微生物的組合物之后，從所述過濾器組件中移出所述過濾器。
41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的方法，所述方法還包括在所述過濾器上培養(yǎng)所述微生物。
42.根據(jù)權(quán)利要求40所述的方法，所述方法還包括從所述過濾器中移出所述結(jié)合濃集劑的微生物的至少一部分，然后檢測所述微生物。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于從樣品中分離微生物的方法，所述樣品包含樣品基質(zhì)和微生物，所述方法包括以下步驟提供接收器，所述接收器被構(gòu)造用于允許過濾所述樣品以及可逆地容納所述樣品和所述濃集劑；將所述樣品加入至所述接收器中，其中將在所述接收器中形成結(jié)合微生物的組合物，所述結(jié)合微生物的組合物包含樣品基質(zhì)和結(jié)合濃集劑的微生物；和通過過濾器過濾所述結(jié)合微生物的組合物，從而在所述過濾器上收集所述結(jié)合濃集劑的微生物，其中所述過濾器的平均孔徑大于所述微生物的平均尺寸。本文還公開了套件和系統(tǒng)。
文檔編號G01N33/569GK102325598SQ200980157402
公開日2012年1月18日 申請日期2009年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月31日
發(fā)明者庫爾特·J·霍爾沃森, 拉杰·拉賈戈帕爾, 曼基里·T·克希爾薩加爾 申請人:3M創(chuàng)新有限公司