專利名稱：一種藥物組合物制劑的含量測定方法和鑒別方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物制劑的檢測方法，特別涉及一種藥物組合物制劑的含 量測定方法和/或鑒別方法。
背景技術(shù)：
冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)一直是危害人類健康甚至生命的嚴重疾 病，冠心病的發(fā)生，致使相當數(shù)量的患者不同程度的喪失勞動能力，既給患者造成生活上的 困難，肉體上的痛苦，又給國家、社會帶來一系列問題和嚴重損失。祖國醫(yī)學認為，冠心病的 發(fā)生雖為標實，實為本虛，制法上活血祛瘀可治其標，但更應(yīng)益氣固本以補其虛，本發(fā)明即 是根據(jù)這一理論而創(chuàng)立的具有固正扶本，益氣活血，行脈止痛的有效中成藥。它的研制成功 克服了部分藥品單純活血化瘀而耗氣上癮的不良傾向，又避免了部分藥品采用名貴緊缺動 植物，價格昂貴，不宜推廣的不足。中藥的處方成分比較多，是多成分得鑒別，前處理難度比較大，干擾多。本發(fā)明檢 測方法先進，消除了干擾，精密度及重現(xiàn)性好，能夠全面的對該藥品進行質(zhì)量控制，保證產(chǎn) 品質(zhì)量的穩(wěn)定性均一性。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的在于公開一種藥物組合物的含量測定方法及其檢測方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)本發(fā)明藥物組合物制劑的檢測方法包括如下鑒別和含量測定中的一種或幾種含量測定方法照高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水= 25-40 60-80為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于2000; 取黃芪甲苷對照品，精密稱定，加甲醇制成每體積份含0. 0002-0. 0003重量份的溶液，即得 對照品溶液；取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的5/9-5/6，加甲醇40-60體積份，超聲 處理30-90分鐘，濾過，藥渣及濾器用甲醇洗滌，洗液并入濾液中，蒸干，殘渣加水20-40體 積份微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4-6次，每次用正丁醇5-40體積份，合并正丁 醇提取液，用氨水洗滌2-4次，每次用氨水10-40體積份，棄去堿液，正丁醇液蒸干，殘渣加 甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5體積份量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品 溶液；分別精密吸取0. 005-0. 015體積份、0. 01-0. 03體積份與供試品溶液0. 01 0. 02體 積份，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數(shù)方程計算；本發(fā)明藥物組合物制劑每日用 制劑量中含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于360 μ g或不得少于540 μ g或不得少于 600 μ g或不得少于900 μ g ；鑒別方法A.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的7/18-7/12，加甲醇20-30體積份，加熱 回流40-80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0. 5-2體積份使溶解，作為供試品溶液；另取黃連對照藥材0. 04-0. 06重量份，加甲醇20-30體積份，加熱回流40-80分鐘，放冷，濾 過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0. 5-2體積份使溶解，制成對照藥材溶液；取鹽酸小檗堿對照品， 加甲醇制成每體積份含0. 0002-0. 0008重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B 的薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各0. 001-0. 003體積份，分別點于同一硅膠G薄層板 上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-氨水=11-13 5-7 2-4 2-4 0. 5-1. 5為 展開劑，置以氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品 色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點；B.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量5/6-5/9，加乙醇40_60體積份，加熱回 流40-80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水8-12體積份和氨水3-5體積份，混勻，加乙 醚提取2-4次，每次10-20體積份，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇1-3體積份，溶解，作為供 試品溶液；另取延胡索乙素對照品，加乙醇制成每體積份含0. 0005-0. 0015重量份的溶液， 作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各0. 005-0. 015 體積份，分別點于同一用0. 5-2%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮= 8-10 1-3為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中顯色至斑點顯色清晰，取出，揮盡板上 吸附的碘后，置365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同顏色的熒光斑點；C.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量7/12-7/18，加60-80%乙醇20-30體積 份，加熱回流40-80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸至近干，殘渣加水8-12體積份使溶解，用稀鹽 酸調(diào)PH值至1-3，用乙酸乙酯振搖提取1-3次，每次8-12體積份，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘 渣加乙醇0. 5-2體積份使溶解，作為供試品溶液；另取丹酚酸B對照品，加乙醇制成每體積 份含0.0005-0. 0015重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗， 吸取上述兩種溶液各0. 002-0. 008體積份，分別點于同一硅膠G薄層.板上，以甲苯-三氯 甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸1-3 2-4 3-5 0.2-0.8 1-3為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以2-4%三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相 同顏色的斑點；D、取葛根素對照品，甲醇制成每體積份含0. 0005-0. 0015重量份的溶液，作為 對照品溶液；取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的7/18-7/12，加甲醇20-30體積份， 加熱回流40-80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0. 5-2體積份使溶解，作為供試 品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液0. 002-0. 008體積份及對 照品溶液0. 002-0. 004體積份，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水 =60-70 30-40 8-12的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置 365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒 光斑點。本發(fā)明藥物組合物制劑的檢測方法優(yōu)選包括如下含量測定方法和鑒別方法中的 一種或幾種含量測定方法照高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水=32 68 為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于2000 ；取黃芪甲苷對 照品，精密稱定，加甲醇制成每體積份含0. 00025重量份的溶液，即得對照品溶液；取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的5/9-5/6，加甲醇50體積份，超聲處理60分鐘，濾過，藥渣 及濾器用甲醇洗滌，洗液并入濾液中，蒸干，殘渣加水30體積份微熱使溶解，用水飽和的正 丁醇振搖提取5次，每次用正丁醇依次為30體積份、30體積份、20體積份、20體積份和10體 積份，合并正丁醇提取液，用氨水洗滌3次，每次用氨水30體積份、20體積份和20體積份， 棄去堿液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5體積份量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖 勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液0. 01體積份、0. 02體積份 與供試品溶液0. 01 0. 02體積份，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數(shù)方程計算；本 發(fā)明藥物組合物制劑每日用制劑量中含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于360yg或 不得少于540 μ g或不得少于600 μ g或不得少于900 μ g ；鑒別方法A.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的7/18-7/12，加甲醇25體積份，加熱回 流60分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1體積份使溶解，作為供試品溶液；另取黃連 對照藥材0. 05重量份，加甲醇25體積份，加熱回流60分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加 甲醇1體積份使溶解，制成對照藥材溶液；取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每體積份含 0. 0005重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述三 種溶液各0. 002體積份，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙 醇-氨水=12 6 3 3 1為展開劑，置以氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干， 置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相 同的黃色熒光斑點；B.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量5/6-5/9，加乙醇50體積份，加熱回流60 分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10體積份和氨水4體積份，混勻，加乙醚提取3次，每 次15體積份，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇2體積份，溶解，作為供試品溶液；另取延胡索 乙素對照品，加乙醇制成每體積份含0. 001重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各0. 01體積份，分別點于同一用1 %氫氧化鈉溶液 制備的硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮=9 2為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中顯色 至斑點顯色清晰，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中， 在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；C.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量7/12-7/18，加70%乙醇25體積份，加 熱回流60分鐘，放冷，濾過，濾液蒸至近干，殘渣加水10體積份使溶解，用稀鹽酸調(diào)pH值 至2，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次10體積份，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇1體 積份使溶解，作為供試品溶液；另取丹酚酸B對照品，加乙醇制成每體積份含0. 001重量 份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各 0. 005體積份，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯_三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸 2 3 4 0.5 2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜 中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；D、取葛根素對照品，甲醇制成每體積份含0. 001重量份的溶液，作為對照品溶液； 取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的7/18-7/12，加甲醇25體積份，加熱回流60分鐘， 放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1體積份使溶解，作為供試品溶液；照藥典附錄VI B的薄 層色譜法試驗，吸取供試品溶液0. 005體積份及對照品溶液0. 003體積份，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水=65 35 10的下層溶液為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以三氯化鋁試液，置365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相 應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。 本發(fā)明所指藥物組合物制劑的原料藥組成及配比如下(按重量份)
黃芪 100-150重量份 黨參 丹參 60-100重量份 葛根 山楂60-100重量份
延胡索(或炙延胡索)40-70重量份
80-120重量份 60-100重量份
當歸 40-70重量份 人參 20-30重量份
甘草(或炙甘草) 20-30重量份。
本發(fā)明藥物組合物制劑的原料藥組成優(yōu)選配比為(按重量份)
黃芪140重量份黨參90重量份
丹參90重量份葛根 70重量份
山楂70重量份當歸 45重量份
延胡索(或炙延胡索)45重量份人參 22重量份
甘草(或炙甘草) 28重量份。
本發(fā)明藥物組合物制劑的原料藥組成優(yōu)選配比為(按重量份) 黃芪110重量份黨參 110重量份
丹參70重量份葛根 90重量份
山楂90重量份當歸 65重量份
延胡索(或炙延胡索)65重量份人參 28重量份
甘草(或炙甘草) 22重量份。
本發(fā)明藥物組合物制劑的原料藥組成優(yōu)選配比為(按重量份)
黃芪 丹參 山楂 人參
延胡索(或炙延胡索)
120重量份 80重量份 80重量份 25重量份 60重量份t
黨參 葛根 當歸
100重量份
80重量份 60重量份
甘草(或炙甘草)25重量份
上述本發(fā)明藥物組合物制劑的原料藥還可以加入下述原料藥(按重量份) 淫羊藿
60-100重量份
地黃
40-70重量份黃連40-70重量份靈芝40-70重量份。上述本發(fā)明藥物組合物制劑的原料藥還可以加入下述原料藥(按重量份)優(yōu)選配 比為(按重量份)淫羊藿80重量份地黃60重量份黃連60重量份靈芝60重量份。以上九味或十三味藥按照常規(guī)方法可以制成臨床可接受的劑型，如片劑、顆粒劑、 膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋制劑、注射劑。本藥物組合物制劑的制備方法可以是以上九味，人參、延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余黨參等五味與剩 余黃芪加水煎煮1-3次，每次1-3小時，(優(yōu)選2次，第一次2小時，第二次1. 5小時)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.06-1. 12(90-95°C，優(yōu)選90°C )，放冷，加一倍量乙醇使 沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至相對密度1.26-1. 32 (90-95°C，優(yōu)選90°C )的清膏，與 上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋制劑、注射劑。本發(fā)明十三味原料藥藥物組合物的制備方法以上十三味藥，人參、黃連、延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余八味與 剩余黃芪加水煎煮1-3次，每次1-3小時，(優(yōu)選2次，第一次2小時，第二次1. 5小時)，合 并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.06-1. 12(90 95°C，優(yōu)選90°C )，放冷，加一倍量乙 醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至相對密度1. 26-1. 32(90 95°C，優(yōu)選90°C )的清 膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋制劑、注射劑。本發(fā)明上述十三味原料藥制備方法中，其中所述的回收乙醇并濃縮至90°C時相對 密度可以替換為1.20 1.22。本發(fā)明所述的重量份與體積份的比例為克/毫升。本發(fā)明藥物組合物含量測定方 法可以應(yīng)用于組合物的各種劑型，如片劑、膠囊、口服液、滴丸、噴霧劑、顆粒劑等臨床可接 受的劑型，由于不同劑型的制劑每日用制劑量中所含的相當生藥量是相同的，因此各個劑 型在進行含量測定時，所選用樣品量可統(tǒng)一折算為每日用制劑量，本含量測定方法所述的 每日用制劑量是指每日使用的總片數(shù)、總粒數(shù)或總丸數(shù)等。


圖1黃芪甲苷對照品溶液液相色譜圖；圖2本發(fā)明藥物組合物制劑供試品溶液液相色譜圖；圖3缺黃芪陰性對照溶液液相色譜圖；圖4黃芪甲苷標準曲線圖本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于改進原有的質(zhì)量標準，提高產(chǎn)品質(zhì)量的可控性。 本發(fā)明所研究的藥物組合物是由黃芪、黨參、丹參、葛根等藥材組成，黃芪作為本方的君藥， 其主要成分黃芪甲苷也是本品的有效成分，為了控制本發(fā)明藥物組合物制劑的質(zhì)量，保證 其療效，我們采用高效液相-蒸發(fā)光散射檢測法測定了黃芪甲苷在該制劑中的含量，并對 其測定方法進行了研究。通過本發(fā)明的含量測定方法和鑒別方法，提高了產(chǎn)品穩(wěn)定性，有利 于工業(yè)化生產(chǎn)的質(zhì)量控制。下面實驗例和實施例用于進一步說明但不限于本發(fā)明。實驗例1 儀器采用Agilent 1100高效液相色譜儀；Allerch ELSD-2000蒸發(fā)光散射檢測 器；METTLER TOLEDO AT201電子天平；1810-B型石英雙重純水蒸餾器。材料采用根據(jù)實施例1制成的本發(fā)明藥物組合物片劑；黃芪甲苷(中國藥品生物 制品檢定所，批號=110781-200512)；乙腈(色譜純)；其他試劑為分析純。取本品小片20片 或大片10片，糖衣片除去包衣，精密稱定，研細，取約3g，加甲醇50ml，超聲處理1小時(功 率500W，頻率40kHz)，濾過，藥渣及濾器用甲醇適量洗滌，洗液并入濾液中，蒸干，殘渣加水 30ml微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取5次(30ml，30ml，20ml，20ml，10ml)，合并正 丁醇提取液，用氨水洗滌3次(30ml，20ml，20ml)，棄去堿液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇溶 解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。按處方組成，取除黃芪外的其他藥材，按制備工藝要求制成不含黃芪的陰性對照樣品，按供試品溶 液的制備方法制備陰性對照溶液。取黃芪甲苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每Iml含 0. 25mg的溶液，即得對照品溶液。本法采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水(32 68)為流動相；蒸發(fā)光 散射檢測器。理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于2000。按上述色譜條件對供試品溶液、 黃芪甲苷對照品溶液、陰性對照溶液進行色譜分析，色譜圖見圖1、2、3，表明陰性對照液對 測定基本無干擾，供試品液中黃芪甲苷峰與雜質(zhì)峰分離良好，不干擾測定。實驗例2線形關(guān)系考察精密吸取黃芪甲苷對照品溶液(1.032mg/ml) 1. 0,2. 0,4. 0,6. 0,8. 0，10. 0μ 1，注
入液相色譜儀，以進樣量的常用對數(shù)值作為橫坐標，峰面積的常用對數(shù)值為縱坐標進行回 歸計算。表1黃芪甲苷線性關(guān)系
權(quán)利要求
一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中含有如下鑒別和含量測定中的一種或幾種含量測定方法照高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈 水＝25 40∶60 80為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于2000；取黃芪甲苷對照品，精密稱定，加甲醇制成每體積份含0.0002 0.0003重量份的溶液，即得對照品溶液；取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的5/9 5/6，加甲醇40 60體積份，超聲處理30 90分鐘，濾過，藥渣及濾器用甲醇洗滌，洗液并入濾液中，蒸干，殘渣加水20 40體積份微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4 6次，每次用正丁醇5 40體積份，合并正丁醇提取液，用氨水洗滌2 4次，每次用氨水10 40體積份，棄去堿液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5體積份量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取0.005 0.015體積份、0.01 0.03體積份與供試品溶液0.01～0.02體積份，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數(shù)方程計算；本發(fā)明藥物組合物制劑每日用制劑量中含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于360μg或不得少于540μg或不得少于600μg或不得少于900μg；鑒別方法A.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的7/18 7/12，加甲醇20 30體積份，加熱回流40 80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0.5 2體積份使溶解，作為供試品溶液；另取黃連對照藥材0.04 0.06重量份，加甲醇20 30體積份，加熱回流40 80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0.5 2體積份使溶解，制成對照藥材溶液；取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每體積份含0.0002 0.0008重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各0.001 0.003體積份，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯 乙酸乙酯 甲醇 異丙醇 氨水＝11 13∶5 7∶2 4∶2 4∶0.5 1.5為展開劑，置以氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點；B.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量5/6 5/9，加乙醇40 60體積份，加熱回流40 80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水8 12體積份和氨水3 5體積份，混勻，加乙醚提取2 4次，每次10 20體積份，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇1 3體積份，溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對照品，加乙醇制成每體積份含0.0005 0.0015重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各0.005 0.015體積份，分別點于同一用0.5 2％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以甲苯 丙酮＝8 10∶1 3為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中顯色至斑點顯色清晰，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；C.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量7/12 7/18，加60 80％乙醇20 30體積份，加熱回流40 80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸至近干，殘渣加水8 12體積份使溶解，用稀鹽酸調(diào)pH值至1 3，用乙酸乙酯振搖提取1 3次，每次8 12體積份，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇0.5 2體積份使溶解，作為供試品溶液；另取丹酚酸B對照品，加乙醇制成每體積份含0.0005 0.0015重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各0.002 0.008體積份，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯 三氯甲烷 乙酸乙酯 甲醇 甲酸1 3∶2 4∶3 5∶0.2 0.8∶1 3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2 4％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；D、取葛根素對照品，甲醇制成每體積份含0.0005 0.0015重量份的溶液，作為對照品溶液；取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的7/18 7/12，加甲醇20 30體積份，加熱回流40 80分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇0.5 2體積份使溶解，作為供試品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液0.002 0.008體積份及對照品溶液0.002 0.004體積份，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷 甲醇 水＝60 70∶30 40∶8 12的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；該方法中所指藥物組合物制劑的原料藥組成及配比為黃芪100 150重量份 黨參80 120重量份丹參60 100重量份葛根60 100重量份山楂60 100重量份當歸40 70重量份炙延胡索或延胡索40 70重量份 人參20 30重量份炙甘草或甘草20 30重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中含有如 下鑒別和含量測定中的一種或幾種 含量測定方法照高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水=32 68為流 動相；蒸發(fā)光散射檢測器，理論板數(shù)按黃芪甲苷峰計算應(yīng)不低于2000 ；取黃芪甲苷對照品， 精密稱定，加甲醇制成每體積份含0. 00025重量份的溶液，即得對照品溶液；取本發(fā)明藥物 組合物制劑日用制劑量的5/9-5/6，加甲醇50體積份，超聲處理60分鐘，濾過，藥渣及濾器 用甲醇洗滌，洗液并入濾液中，蒸干，殘渣加水30體積份微熱使溶解，用水飽和的正丁醇振 搖提取5次，每次用正丁醇依次為30體積份、30體積份、20體積份、20體積份和10體積份， 合并正丁醇提取液，用氨水洗滌3次，每次用氨水30體積份、20體積份和20體積份，棄去堿 液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5體積份量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾 過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液0. 01體積份、0. 02體積份與供試 品溶液0. 01 0. 02體積份，注入液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數(shù)方程計算；本發(fā)明藥 物組合物制劑每日用制劑量中含黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，不得少于360 μ g或不得少 于540 μ g或不得少于600 μ g或不得少于900 μ g ； 鑒別方法A.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的7/18-7/12，加甲醇25體積份，加熱回流60 分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1體積份使溶解，作為供試品溶液；另取黃連對照 藥材0. 05重量份，加甲醇25體積份，加熱回流60分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇 1體積份使溶解，制成對照藥材溶液；取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每體積份含0. 0005 重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各0. 002體積份，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-異丙醇-氨水 =12 6 3 3 1為展開劑，置以氨蒸氣飽和的展開缸內(nèi)，展開，取出，晾干，置365nm 紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照藥材和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色 熒光斑點； B.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量5/6-5/9，加乙醇50體積份，加熱回流60分 鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加水10體積份和氨水4體積份，混勻，加乙醚提取3次，每次 15體積份，合并乙醚液，蒸干，殘渣加乙醇2體積份，溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙 素對照品，加乙醇制成每體積份含0. 001重量份的溶液，作為對照品溶液；照藥典附錄VI B 的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各0.01體積份，分別點于同一用氫氧化鈉溶液 制備的硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮=9 2為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中顯色 至斑點顯色清晰，取出，揮盡板上吸附的碘后，置365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中， 在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；C.取本發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量7/12-7/18，加70%乙醇25體積份，加熱回流 60分鐘，放冷，濾過，濾液蒸至近干，殘渣加水10體積份使溶解，用稀鹽酸調(diào)pH值至2，用乙 酸乙酯振搖提取2次，每次10體積份，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加乙醇1體積份使溶解， 作為供試品溶液；另取丹酚酸B對照品，加乙醇制成每體積份含0. 001重量份的溶液，作為 對照品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各0. 005體積份，分別 點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸2 3 4 0.5 2 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以3%三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對照品色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；D.取葛根素對照品，甲醇制成每體積份含0.001重量份的溶液，作為對照品溶液；取本 發(fā)明藥物組合物制劑日用制劑量的7/18-7/12，加甲醇25體積份，加熱回流60分鐘，放冷， 濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1體積份使溶解，作為供試品溶液；照藥典附錄VI B的薄層色 譜法試驗，吸取供試品溶液0. 005體積份及對照品溶液0. 003體積份，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水=65 35 10的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干， 噴以三氯化鋁試液，置365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位 置上，顯相同顏色的熒光斑點。
3.如權(quán)利要求1-2任一所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中 所指藥物組合物制劑的原料藥組成為黃芪140重量份黨參 90重量份丹參90重量份葛根 70重量份山楂70重量份當歸 45重量份炙延胡索或延胡索45重量份人參 22重量份炙甘草或甘草 28重量份。
4.如權(quán)利要求1-2任一所述的藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指 藥物組合物制劑的原料藥組成為黃芪 110重量份黨參 110重量份丹參70重量份葛根 90重量份山楂90重量份當歸 65重量份炙延胡索或延胡索65重量份人參 28重量份 炙甘草或甘草 22重量份。
5.如權(quán)利要求1-2任一所述的藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指 藥物組合物制劑的原料藥組成為黃芪120重量份黨參100重量份丹參80重量份葛根80重量份山楂80重量份當歸60重量份人參25重量份炙甘草或甘草25重量份炙延胡索或延胡索 60重量份。
6.如權(quán)利要求1-2任一所述的藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指 藥物組合物制劑的原料藥中還加入下述原料藥淫羊藿 60-100重量份地黃 40-70重量份黃連 40-70重量份靈芝 40-70重量份。
7.如權(quán)利要求6所述的藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指藥物組 合物制劑的原料藥中還加入的原料藥為淫羊藿 80重量份地黃 60重量份黃連 60重量份靈芝 60重量份。
8.如權(quán)利要求1-2任一所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中 所指藥物組合物制劑由如下方法制成人參、炙延胡索或延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余黨參等五味與剩余 黃芪加水煎煮2-3次，每次1-3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90-95 °C時相對密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90-95°C時相對密度 1. 26-1. 32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋 制劑、注射劑。
9.如權(quán)利要求3所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指藥 物組合物制劑由如下方法制成人參、炙延胡索或延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余黨參等五味與剩余 黃芪加水煎煮2-3次，每次1-3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90-95 °C時相對密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90-95°C時相對密度 1. 26-1. 32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋 制劑、注射劑。
10.如權(quán)利要求4所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指 藥物組合物制劑由如下方法制成人參、炙延胡索或延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余黨參等五味與剩余 黃芪加水煎煮2-3次，每次1-3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90-95 °C時相對密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90-95°C時相對密度 1. 26-1. 32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋 制劑、注射劑。
11.如權(quán)利要求5所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指藥物組合物制劑由如下方法制成人參、炙延胡索或延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余黨參等五味與剩余 黃芪加水煎煮2-3次，每次1-3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90-95 °C時相對密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90-95°C時相對密度 1. 26-1. 32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋 制劑、注射劑。
12.如權(quán)利要求8所述的藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指藥物 組合物制劑由如下方法制成的人參、延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余黨參等五味與剩余黃芪加水煎 煮2次，第一次2小時，第二次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90°C時相對密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90°C時相對密度 1. 26-1. 32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋 制劑、注射劑。
13.如權(quán)利要求9-11任一所述的藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所 指藥物組合物制劑由如下方法制成的人參、延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余黨參等五味與剩余黃芪加水煎 煮2次，第一次2小時，第二次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90°C時相對密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90°C時相對密度 1. 26-1. 32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋 制劑、注射劑。
14.如權(quán)利要求6所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指 藥物組合物制劑由如下方法制成人參、黃連、炙延胡索或延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余八味與剩余 黃芪加水煎煮2-3次，每次1-3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90-95 °C時相對密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90-95°C時相對密度 1. 26-1. 32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋 制劑、注射劑。
15.如權(quán)利要求7所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所指 藥物組合物制劑由如下方法制成人參、黃連、炙延胡索或延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余八味與剩余 黃芪加水煎煮2-3次，每次1-3小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90-95°C時相對密度 1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90-95°C時相對密度 1.26-1.32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、控釋 制劑、注射劑。
16.如權(quán)利要求14或15所所述的藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中所 指藥物組合物制劑由如下方法制成的以上十三味藥，人參、黃連、延胡索、山楂與一半量的黃芪粉碎成細粉，其余八味與剩余 黃芪加水煎煮2次，第一次2小時，第二次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至90°C時相 對密度1.06-1. 12，放冷，加一倍量乙醇使沉淀，取上清液，回收乙醇，并濃縮至90°C時相對密度1. 26-1. 32的清膏，與上述藥粉混合，制成片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、 控釋制劑、注射劑。
17.如權(quán)利要求14或15所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中 藥物組合物制劑的制備中所述的回收乙醇并濃縮至90°C時相對密度替換為1. 20 1. 22。
18.如權(quán)利要求16所述的一種藥物組合物制劑的檢測方法，其特征在于該方法中藥物 組合物制劑的制備中所述的回收乙醇并濃縮至90°C時相對密度替換為1. 20 1. 22。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物組合物制劑的檢測方法，該方法中含有如下鑒別和含量測定中的一種或幾種本發(fā)明是以一定配比關(guān)系的黃芪、黨參、丹參等八味藥或十三味原料藥，按照常規(guī)制法制成臨床可接受的劑型，如片劑、顆粒劑、膠囊劑、口服液體制劑、滴丸、糖漿劑、控釋制劑、注射劑。各制劑以每日用制劑量的成品量為單位量，黃芪以黃芪甲苷(C41H68O14)計，黃芪甲苷不得少于600μg或不得少于900μg。通過本發(fā)明的含量測定方法和鑒別方法，提高了產(chǎn)品穩(wěn)定性，有利于提高產(chǎn)品質(zhì)量的可控性。
文檔編號G01N30/36GK101953915SQ200910088239
公開日2011年1月26日 申請日期2009年7月13日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月13日
發(fā)明者姜作玲, 王守農(nóng), 田紅偉 申請人:青島國風藥業(yè)股份有限公司