專利名稱：一種牛冷凍精液畸形率檢測的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種精液精子數(shù)的檢測方法，尤其涉及一種牛冷凍精液畸形率檢測的方法。
背景技術(shù)：
牛冷凍精液作為繁育改良和育種工作的重要手段，已成為國際貿(mào)易的重要商品，而其質(zhì)量的優(yōu)劣直接影響到農(nóng)牧企業(yè)的經(jīng)濟效益。牛冷凍精液在我國發(fā)展30多年來，從最初的冷配母牛2萬頭到目前全部實現(xiàn)冷配。經(jīng)歷了從無到有、從少到多、從低到高的發(fā)展過程，盡管在實際生產(chǎn)中已推廣應(yīng)用，但仍有一些問題有待研究。而精子畸形率作為評價精子質(zhì)量水平的一個重要指標(biāo)，如何更加準(zhǔn)確、簡便地檢測也開始為人們所重視。長期以來，我國一直采用傳統(tǒng)的技術(shù)路線進行冷凍精液的質(zhì)量檢測，要經(jīng)過抹片、固定、染色、鏡檢等程序；準(zhǔn)備過程耗時長、需要試劑繁多，而制片過程中的抹片操作方法，也會因人為操作不當(dāng)而造成畸形率的提高而影響質(zhì)量檢測的準(zhǔn)確性。這些因素都導(dǎo)致以往的技術(shù)很難在基層家畜改良單位推廣，在很大程度上限制了養(yǎng)殖戶農(nóng)民的利益。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是要提供一種操作簡便、省時且檢測數(shù)據(jù)更加精確的牛冷凍精液畸形率檢測的方法。
本發(fā)明的方法通過以下步驟來實現(xiàn)的a.配置P.B.S液分別稱取磷酸二氫鈉 0.24克磷酸氫二鈉 0.652克氯化鈉 0.45克用雙蒸餾水定容至100ml；b.配置0.2％甲醛緩沖液先用0.5ml的甲醛液加4.5ml的P.B.S液配置出10％甲醛緩沖液，然后，再用0.4ml的10％甲醛緩沖液加P.B.S液，配置出0.2％甲醛緩沖液；c.將精液滴于載玻片上，再在精液上滴一滴0.2％甲醛緩沖液，加蓋玻片，直接于顯微鏡下觀察；并用計數(shù)器讀出畸形精子數(shù)以及精子總數(shù)，從而計算出畸形精子率。
基于上述構(gòu)思，本發(fā)明的方法與現(xiàn)有技術(shù)的方法相比，具有如下的優(yōu)點(1)檢測效果好，由于避免采用傳統(tǒng)方法中抹片的步驟，也就避免了人為操作因素對檢測精確度的影響，提高了檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性；(2)操作簡便，本發(fā)明的方法無需抹片、染色、固定等步驟，只需將0.2％甲醛緩沖液配置好，即可隨時進行檢測；
(3)節(jié)省時間，因為本發(fā)明的方法明顯簡化了實際檢測步驟，與傳統(tǒng)方法相比可節(jié)省2小時左右。
因而本發(fā)明的牛冷凍精液畸形率檢測的方法具有顯著的創(chuàng)造性、經(jīng)濟性和實用性，是一種值得推廣的檢測方法。
具體實施例方式
下面結(jié)合典型實施例對本發(fā)明作進一步說明。
主要器材和原料顯微鏡、載玻片、計數(shù)器、蒸餾水、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、氯化鈉、甲醛；然后，按照以下步驟操作a.配置P.B.S液分別稱取磷酸二氫鈉 0.24克磷酸氫二鈉 0.652克氯化鈉 0.45克用雙蒸餾水定容至100ml；b.配置0.2％甲醛緩沖液先用0.5ml甲醛液加4.5mlP.B.S液配置10％甲醛緩沖液，然后，用0.4ml的10％甲醛緩沖液加P.B.S液，配置出0.2％甲醛緩沖液；c.將精液滴于載玻片上，再在精液上滴一滴0.2％甲醛緩沖液，加蓋玻片，直接于顯微鏡下觀察；并用計數(shù)器讀出畸形精子數(shù)以及精子總數(shù)。
然后按以下公式計算畸形精子率
權(quán)利要求
1.一種牛冷凍精液畸形率檢測的方法，主要包含下述步驟a.配置P.B.S液分別稱取磷酸二氫鈉 0.24克磷酸氫二鈉 0.652克氯化鈉 0.45克用雙蒸餾水定容至100ml；b.配置0.2％甲醛緩沖液先用0.5ml甲醛液加4.5mlP.B.S液配置10％甲醛緩沖液，然后，用0.4ml的10％甲醛緩沖液加P.B.S液，配置出0.2％甲醛緩沖液；c.將精液滴于載玻片上，再在精液上滴一滴0.2％甲醛緩沖液，加蓋玻片，直接于顯微鏡下觀察，并用計數(shù)器讀出畸形精子數(shù)以及精子總數(shù)，從而計算出畸形精子率。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種牛冷凍精液畸形率的檢測方法，主要包括以下步驟(a)按一定的質(zhì)量比例配置P.B.S液；(b)配置0.2％甲醛緩沖液；(c)將精液滴于載玻片上，再在精液上滴一滴0.2％甲醛緩沖液，加蓋玻片，然后直接于顯微鏡下觀察，并用計數(shù)器讀出畸形精子數(shù)以及精子總數(shù)，從而計算出畸形精子率。利用本發(fā)明的方法因為無需傳統(tǒng)方法中的抹片、染色、固定等步驟，所以具有操作簡便、省時且檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確等諸多優(yōu)點，是一種值得推廣的檢測方法。
文檔編號G01N21/84GK1731179SQ200510028389
公開日2006年2月8日 申請日期2005年8月2日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月2日
發(fā)明者夏偉銘 申請人:上海金暉家畜遺傳開發(fā)有限公司