專利名稱：肌酸酐測定用試片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在肌酸酐的測定中使用的試片。
背景技術(shù)：
在臨床醫(yī)療領(lǐng)域中，由于肌酸酐作為腎功能的指標非常有用，所以對肌酸酐進行測定。
作為上述肌酸酐的測定方法，例如一般有化學法和酶法。作為上述化學法，例如采用利用在堿性條件下肌酸酐與苦味酸反應顯橙紅色的性質(zhì)的Jaffe法(例如參照Bonsnes和Taussky，Journal of BiologicalChemistry(J.Biol.Chem)，1945年，158，p.581)，以及使用3，5-二硝基苯甲酸代替苦味酸的Benedict·Behre法(例如參照Benedict和Behre，Journal of Biological Chemistry(J.Biol.Chem)，1936年，113，p.515)等。另一方面，作為上述酶法，采用使酶作用于肌酸酐生成氨，用比色法測定其的肌酸酐脫氨酶法，以及通過肌酸酐酶將肌酸酐轉(zhuǎn)變成肌酸，將此肌酸用肌氨酸氧化酶和過氧化物酶處理，用比色法測定的肌酸酐氨基水解酶法(肌酸酐酶法)(例如參照Tanganelli等人，Clinical Chemistry(Clin.Chem)，1982年，28，p.1461)等。

發(fā)明內(nèi)容
上述Jaffe法和Benedict法由于利用化學縮合反應，所以使用的試劑成本非常低廉。但是，如果反應溫度例如達不到35℃以上，該反應就難以發(fā)生，因此需在高溫下進行長時間(例如10分鐘以上)的反應。而且，由于在強堿條件(pH11以上)下反應，使用強堿試劑，因此測定需要特殊的裝置和器具等，測定后的廢液處理也是個大問題。
另一方面，上述酶法與上述化學法相比，例如在中性附近的溫和條件下進行反應，對肌酸酐的特異性也高，解決了化學法的大部分缺點。但是，例如，使用的酶的價格非常高，還有，由于使用的酶的種類也多，因此試劑成本高，存在的狀況是除能夠微量測定的特殊設(shè)備以外難以進行測定。
特別是近年來，作為生活習慣病的糖尿病在世界范圍內(nèi)增長著，由此引起的糖尿病的并發(fā)癥之一糖尿病性腎病，甚至嚴重的腎功能不全在增加。而且，問題是對于這種疾病，例如需要進行腎透析和腎移植。因此，為了早期防止這種腎病，特別是糖尿病性腎病，期待著安全且快速簡便地測定作為腎功能指標的肌酸酐的新型測定方法。
因此，本發(fā)明的目的是提供在肌酸酐測定中使用的試片。
為了達成上述目的，本發(fā)明的肌酸酐測定用試片是含有下述式(1)表示的化合物的肌酸酐測定用試片， 上述式(1)中，R1為H、SO3X、COOX；R4和R6可以相同也可以不同，各自為OH、SO3X、COOX；R2、R3、R5和R7可以相同也可以不同，各自為H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；上述R1、R4和R6中的X可以相同也可以不同，各自為H、Na、K、NH4。
本發(fā)明人為了開發(fā)肌酸酐的新型測定方法，嘗試在絡(luò)合物生成劑與金屬的顯色絡(luò)合物生成反應中，通過肌酸酐的共存，使發(fā)生競爭性絡(luò)合物生成反應，利用上述顯色絡(luò)合物的退色測定肌酸酐的量。結(jié)果，本發(fā)明人首次發(fā)現(xiàn)，上述式表示的化合物，在不存在肌酸酐的情況下與過渡金屬形成顯色絡(luò)合物，而當存在肌酸酐時，肌酸酐阻礙上述顯色絡(luò)合物的形成，肌酸酐與上述過渡金屬形成非顯色絡(luò)合物。因此，使用含有這種化合物的本發(fā)明的肌酸酐測定用試片，例如，通過測定上述顯色絡(luò)合物有無形成及形成的程度，便可知道肌酸酐阻礙上述顯色絡(luò)合物形成的程度，由此可以求出試樣中的肌酸酐的量。另外，使用本發(fā)明的測定用試片進行的測定，例如，由于可以在室溫下進行反應，所以也不需要象以往的酶法那樣將反應溫度調(diào)節(jié)至酶的最佳溫度，而且可以在短時間內(nèi)進行反應。因此，可以快速且容易地進行測定。所以，本發(fā)明的測定用試片，作為腎功能指標的肌酸酐的測定方法，在臨床醫(yī)療領(lǐng)域等特別有用。


圖1是顯示本發(fā)明的實施例中肌酸酐濃度與反射率的關(guān)系的圖。
圖2是顯示本發(fā)明的實施例中肌酸酐濃度與反射率的關(guān)系的圖。
具體實施例方式
本發(fā)明的肌酸酐測定用試片，如上所述，是含有上述式(1)表示的化合物的試片。
作為上述化合物，例如，優(yōu)選下述式(2)表示的化合物，更加優(yōu)選下述式(3)表示的化合物，特別優(yōu)選下述式(4)表示的化合物。由于這些化合物為水溶性的，例如，在測定液體試樣等的肌酸酐時，易于反應，可以以更加優(yōu)異的靈敏度進行測定。

上述式(2)中，R1為H、SO3X、COOX；R4和R6可以相同也可以不同，各自為OH、SO3RX、COOX；R2、R3、R5和R7可以相同也可以不同，各自為H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；上述R1、R4和R6中的X可以相同也可以不同，各自為H、Na、K、NH4。
上述式(3)中，R1為H、SO3X、COOX；R2和R3可以相同也可以不同，各自為H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；X可以相同也可以不同，各自為H、Na、K、NH4。
這些化合物中，優(yōu)選下述式(4)～(7)表示的化合物。

再者，上述式(4)的化合物名為2，6-二氯-4′-羥基-3′，3″-二甲基-3-磺基品紅酮-5′，5″-二羧酸三鈉鹽[以下稱為鉻天青S(Chromazurol S)]；上述式(5)的化合物名為2，6-二氯-4′-羥基-3′，3″-二甲基品紅酮-5′，5″-二羧酸二鈉鹽[以下稱為鉻天青B(Chromazurol B)]；上述式(6)的化合物名為Chromoxane cyanine R[以下稱為鉻花青R(Eriochrome CyanineR)]；上述式(7)的化合物名為鄰苯二酚磺酞[以下稱為鄰苯二酚紫(Pyrocatechol violet)]。
上述各化合物的制備方法沒有特別限制，可以根據(jù)以往公知的合成方法制備。另外，作為上述化合物，可以使用市售品。上述鉻天青S，例如有商品名為Chrome Azurol S(Nacalai公司生產(chǎn))；上述鉻天青B，例如有商品名為Chromazurol B(同仁化學公司生產(chǎn))；上述鉻花青R，例如有商品名為Eriochrome Cyanine R(Nacalai公司生產(chǎn))；上述鄰苯二酚紫，例如有商品名為Pyrocatechol violet(同仁化學公司生產(chǎn))。
本發(fā)明的肌酸酐測定用試片，優(yōu)選多孔材料含有上述化合物。
上述多孔材料的種類沒有特別限制，例如可以使用濾紙、玻璃濾器、樹脂制多孔膜等多孔材料。其中，從成本和操作性等理由看，優(yōu)選濾紙。另外，作為上述樹脂制多孔膜的材料，例如有聚砜、聚酯、尼龍、硝化纖維素、聚碳酸酯等。并且，此多孔材料的平均孔徑，例如，只要能夠浸透、保持液體試樣即可，例如為3～10μm的范圍。
本發(fā)明的肌酸酐測定用試片優(yōu)選還含有與上述化合物形成顯色絡(luò)合物的金屬或其鹽(以下均稱為“金屬”)。
作為上述金屬，例如優(yōu)選過渡金屬或它們的鹽。作為上述過渡金屬，例如有Cu(II)、Pd(II)、U(VI)、Zr(IV)、Ti(IV)、Mn(II)、Fe(III)、Co(II)、Ni(II)、Mo(VI)、Sn(IV)等或它們的鹽。其中優(yōu)選Cu(II)、Pd(II)，更加優(yōu)選Pd(II)。另外，作為它們的鹽，優(yōu)選鹵化物、硫酸鹽這些水溶性高的物質(zhì)。
作為上述化合物與金屬的組合，例如有鉻天青S與Pd(II)的組合、鉻天青B與Pd(II)的組合、鉻花青R與Cu(II)的組合、鄰苯二酚紫與Cu(II)的組合等。其中優(yōu)選鉻天青S與Pd(II)的組合。
本發(fā)明的肌酸酐測定用試片優(yōu)選還含有緩沖劑。作為上述緩沖劑，例如可以使用磷酸鹽、硼酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、三羥甲基氨基甲烷等，優(yōu)選磷酸鹽、硼酸鹽、乙酸鹽，更加優(yōu)選磷酸鹽。
本發(fā)明的肌酸酐測定用試片，例如，從可以控制由上述式(1)表示的化合物與金屬形成的顯色絡(luò)合物的穩(wěn)定性的觀點看，優(yōu)選進一步含有表面活性劑。即，所說的通過表面活性劑的存在可以調(diào)節(jié)上述顯色絡(luò)合物的穩(wěn)定性，是指當肌酸酐存在時，與金屬和上述化合物形成顯色絡(luò)合物相比，金屬與肌酸酐更易發(fā)生形成絡(luò)合物的競爭反應，所以可以提高金屬與肌酸酐的反應活性。因此，可以進行更高精度的肌酸酐測定。
作為上述表面活性劑，沒有特別限制，例如，可以使用非離子型表面活性劑、陰離子型表面活性劑、陽離子型表面活性劑等，這些表面活性劑可以使用一種，也可以兩種以上并用。
作為上述非離子型表面活性劑，例如，可以使用聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚丙二醇、聚乙二醇、Triton類、Tween類、Brij類等，其中優(yōu)選PVA、Triton-X 100、聚乙二醇，更加優(yōu)選聚乙二醇。
作為上述陰離子型表面活性劑，例如，可以使用十二烷基硫酸鈉(SDS)、十二烷基苯磺酸鈉、膽酸鈉、脫氧膽酸鈉等，其中優(yōu)選SDS、膽酸鈉，更加優(yōu)選SDS。
作為上述陽離子型表面活性劑，例如，可以使用芐基三甲基溴化銨、十六烷基三甲基溴化銨、苯扎氯銨、芐基二甲基十四烷基氯化銨(Zephiramine)等，其中優(yōu)選芐基三甲基溴化銨、十六烷基三甲基溴化銨，更加優(yōu)選芐基三甲基溴化銨。
上述表面活性劑可以使用任意一種，也可以兩種以上并用。作為其組合，例如有非離子型與陰離子型的組合，具體有PVA與SDS的組合、聚乙二醇與膽酸鈉的組合、Triton-X 100與SDS的組合等。另外，作為非離子型與陽離子型的組合，例如有聚乙二醇與芐基三甲基溴化銨的組合、PVP與十六烷基三甲基溴化銨的組合等。
另外，例如，如上所述，由于表面活性劑對由上述式(1)的化合物與金屬形成的顯色絡(luò)合物的穩(wěn)定性和顯色性有影響，所以優(yōu)選根據(jù)上述化合物及金屬的種類來適當確定表面活性劑。
(實施方式1)下面是關(guān)于本發(fā)明在上述多孔材料中含有上述式(1)的化合物、上述金屬和緩沖劑的試片的一個實例。
上述多孔材料中各種試劑的含量沒有特別限制，可以根據(jù)試樣的量等適當確定。作為具體的實例，例如，上述多孔材料每立方厘米體積，上述化合物為3×10-3～1.5μmol的范圍，金屬為6×10-3～0.9μmol的范圍，緩沖劑為9～45μmol的范圍。優(yōu)選上述化合物為0.03～0.9μmol的范圍，金屬為0.06～0.45μmol的范圍，緩沖劑為12～30μmol的范圍。再者，每立方厘米上述多孔材料添加的試樣的體積通常為20～40μl的范圍。
上述化合物(A)和上述金屬(B)的添加比例(摩爾比A∶B)例如為30∶1～1∶15，優(yōu)選15∶1～1∶10，特別優(yōu)選3∶1～1∶4。另外，化合物(A)和緩沖劑(C)的添加比例(摩爾比A∶C)例如為1∶10～1∶1000，優(yōu)選1∶20～1∶500，特別優(yōu)選1∶50～1∶200。
另外，當還含有表面活性劑時，例如，上述多孔材料每立方厘米體積，表面活性劑為3～600μg的范圍，優(yōu)選30～300μg的范圍?；衔?A)和表面活性劑(D)的添加比例(摩爾比A∶D)例如為50∶1～3∶1，優(yōu)選30∶1～4∶1，特別優(yōu)選20∶1～5∶1。
例如，準備混合上述各種試劑的溶液，使上述多孔材料浸漬上述溶液，通過干燥可以調(diào)制這樣的試片。再者，上述混合溶液的pH可以通過上述緩沖劑的種類等進行調(diào)制，例如，優(yōu)選pH5～9的范圍，更加優(yōu)選pH6～8的范圍。這樣，由于可以設(shè)定到中性附近，例如，與含有堿性物質(zhì)或酸性物質(zhì)的試片不同，可以防止多孔材料受到損傷。因此，成為穩(wěn)定性也優(yōu)良的試片。
上述混合溶液中的各種試劑的濃度，例如，可以根據(jù)保持在上述多孔材料中的上述各種試劑的設(shè)定量來確定。例如，上述化合物為0.1～50mmol/L的范圍，金屬為0.2～30mmol/L的范圍，緩沖劑為0.3～1.5mol/L的范圍。優(yōu)選上述化合物為1～30mmol/L的范圍，金屬為2～15mmol/L的范圍，緩沖劑為0.4～1mol/L的范圍。另外，當還含有表面活性劑時，例如，表面活性劑為0.01～2重量％的范圍，優(yōu)選0.1～1重量％的范圍。再者，對于上述多孔材料在上述混合溶液中的浸漬和干燥可以反復進行，也可以調(diào)節(jié)保持量。
作為上述混合溶液的溶媒，沒有特別限制，可以使用水、緩沖液等。如上所述，由于作為試劑包括緩沖劑，所以優(yōu)選含有上述緩沖劑的緩沖液作為溶媒。另外，例如，也優(yōu)選含有乙醇、甲醇、丙酮等有機溶劑。
再者，預先混合上述化合物和金屬時，上述兩者反應形成顯色絡(luò)合物，即使使上述混合溶液浸漬在多孔材料中，通過添加含肌酸酐的試樣，肌酸酐與金屬形成絡(luò)合物也沒有問題。推測其原因是肌酸酐不僅阻礙上述兩者形成顯色絡(luò)合物，即使已經(jīng)形成顯色絡(luò)合物，也具有從此顯色絡(luò)合物奪取上述金屬，與上述金屬形成絡(luò)合物的能力。
如上所述，在上述混合溶液中，即使上述化合物和金屬形成顯色絡(luò)合物，也不影響肌酸酐與金屬形成絡(luò)合物。但是，在預先抑制顯色絡(luò)合物形成的場合，例如，分別配制含有上述化合物的溶液以及含有金屬和緩沖劑的溶液，上述多孔材料在各溶液中的浸漬和干燥可以分別進行。具體地說，例如，將肌酸酐測定用化合物溶解于金屬難以溶解的有機溶劑中，另一方面，將金屬和緩沖劑溶解于水中，配制水溶液。然后，浸漬上述水溶液，干燥后，再浸漬上述有機溶劑的肌酸酐測定用化合物溶液。這樣，上述化合物與金屬沒有發(fā)生反應，可以保持在多孔材料中。作為上述金屬難以溶解的有機溶劑，例如有丙酮、甲苯、乙醇等。
另外，從操作性優(yōu)良方面考慮，也可以將含有各種試劑的上述多孔材料層壓在支持體上。這種場合下，上述支持體的材料沒有特別限制，例如，優(yōu)選透明樹脂等。
下面說明使用上述試片測定液體試樣的肌酸酐量的一個實例。
首先，在上述試片中滴加上述液體試樣，反應一定時間。上述液體試樣浸透到上述多孔材料內(nèi)部，由此，上述多孔材料中的上述化合物與金屬接觸，形成顯色絡(luò)合物。另一方面，當上述液體試樣中含有肌酸酐時，上述肌酸酐阻礙上述顯色絡(luò)合物的形成。這樣，由于根據(jù)上述液體試樣中肌酸酐的有無以及含量，多孔膜內(nèi)部的上述顯色絡(luò)合物的形成量不同，所以此顯色絡(luò)合物的形成的程度即表示肌酸酐的有無或含量。
上述反應條件沒有特別限制，例如，反應溫度優(yōu)選10～40℃的范圍，更加優(yōu)選20～35℃的范圍；反應時間優(yōu)選30秒～5分鐘的范圍，更加優(yōu)選1～3分鐘的范圍。再者，當于室溫以上的溫度下反應時，優(yōu)選在測定前將試樣再放置于室溫下。
進行上述反應后，測定上述顯色絡(luò)合物的形成的程度，即通過肌酸酐阻礙上述顯色絡(luò)合物的形成的程度。這可以例如通過光學測定上述試片來進行。另一方面，預先用本發(fā)明的試片對已知濃度的肌酸酐標準溶液同樣進行光學測定，依據(jù)上述測定值和肌酸酐濃度繪制標準曲線。然后，通過將上述液體試樣的測定值代入上述標準曲線，可以求出試樣的肌酸酐濃度。
作為上述試片的光學測定方法，例如有反射率的測定和吸光度的測定。
由于上述反射率和吸光度的測定波長根據(jù)由上述化合物和金屬形成的顯色絡(luò)合物的種類而不同，所以，例如可以根據(jù)使用的化合物和金屬的組合適當確定。例如，在鉻天青S與Pd(II)的組合、鉻天青B與Pd(II)的組合、鉻花青R與Cu(II)的組合或鄰苯二酚紫與Cu(II)的組合的場合，測定波長優(yōu)選560～700nm的范圍，更加優(yōu)選600～670nm的范圍，特別優(yōu)選620～650nm的范圍。
(實施例)下面對實施例與比較例一起進行說明。
(實施例1～3)配制下述組成1的混合液50mL、組成2的混合液50mL以及組成3的混合液50mL，在各混合液中浸漬濾紙(厚340mm，商品名為Whatman 3MM ChrWhatman公司生產(chǎn))。將浸漬后的上述濾紙于50℃下干燥約10分鐘后，切成長5mm×寬5mm大小，用雙面膠帶粘貼在PET薄膜上，將其作為試片。將浸漬組成1的混合液的試片作為實施例1，將浸漬組成2的混合液的試片作為實施例2，將浸漬組成3的混合液的試片作為實施例3。再者，作為上述化合物，使用上述式(6)表示的商品名Eriochrome Cyanine R(Nacalai公司生產(chǎn))、上述式(4)表示的商品名Chrome Azurol S(Nacalai公司生產(chǎn))、上述式(5)表示的商品名Chromazurol B(同仁化學公司生產(chǎn))。
(混合液組成1)硼酸緩沖液(pH9.0)0.5M硫酸銅(II) 3.0mMEriochrome Cyanine R 6.0mM(混合液組成2)檸檬酸緩沖液(pH7.0) 0.5M氯化鈀 8mMChromazurol S 15mM聚乙二醇 0.5重量％(混合液組成3)硼酸緩沖液(pH9.0)0.5M氯化銅(II) 3.0mMChromazurol B3.0mM聚乙二醇 0.1重量％(肌酸酐的測定)準備生理鹽水、在生理鹽水中溶解肌酸酐(Nacalai公司生產(chǎn))的肌酸酐溶液(50、100和200mg/100mL)，分別作為測定試樣。然后，將制作的實施例1～3的上述試片在上述各測定試樣中分別浸漬約2秒鐘后，取出，于室溫下放置1分鐘。然后，使用色差計(商品名∑90；村上色彩技術(shù)研究所生產(chǎn))測定這些試片在630nm處的反射率(單位％)。其結(jié)果如下述表1和圖1所示。圖1是顯示肌酸酐濃度與反射率的相關(guān)關(guān)系的圖。
(表1)

如上述表1和圖1所示，各實施例中的肌酸酐濃度與反射率的相關(guān)式為，實施例1“y＝0.107x+25(相關(guān)系數(shù)r＝0.986)”，實施例2“y＝0.157x+8.6(相關(guān)系數(shù)r＝0.998)”，實施例3“y＝0.108x+43(相關(guān)系數(shù)r＝0.999)”。由此可以確認，肌酸酐濃度與根據(jù)實施例的試驗得到的反射率有良好的相關(guān)關(guān)系。
(實施例4)準備20個尿樣品作為測定試樣，預先使用Jaffe法的定量試劑(商品名Creatinine-HA Testwako；和光純藥公司生產(chǎn))和商品名為日立7070型自動分析裝置(日立制作所生產(chǎn))測定肌酸酐濃度。然后，將實施例2的上述試片在上述測定試樣中浸漬約2秒鐘后，取出，于室溫下放置1分鐘。然后，使用色差計(商品名∑90；村上色彩技術(shù)研究所生產(chǎn))測定這些試片在630nm處的反射率(單位％)。
根據(jù)上述Jaffe法測定的上述各測定試樣的肌酸酐濃度的結(jié)果和使用實施例2的上述試片測定的反射率的結(jié)果如下述表2和圖2所示。圖2中，x軸表示用上述自動分析裝置測定的各測定試樣的肌酸酐濃度(mg/100mL)，y軸表示用實施例2的上述試片測定的各測定試樣的反射率(％)。
(表2)

如上述表2和圖2所示，確認用上述Jaffe法測定的各測定試樣的肌酸酐濃度與由實施例2的上述試片得到的反射率的關(guān)系為由相關(guān)式“y＝0.201x+7.4(相關(guān)系數(shù)r＝0.938)”表示的良好的相關(guān)關(guān)系。
產(chǎn)業(yè)上的可利用性如上所述，本發(fā)明的肌酸酐測定用試片為使用上述肌酸酐測定用化合物的新型試片，利用肌酸酐阻礙顯色絡(luò)合物的形成，可以容易地測定肌酸酐量。因此，本發(fā)明在上述臨床醫(yī)療等中，對測定作為腎功能指標的肌酸酐有用。
權(quán)利要求
1.含有下述式(1)表示的化合物的肌酸酐測定用試片， 上述式(1)中，R1為H、SO3X、COOX；R4和R6可以相同也可以不同，各自為OH、SO3X、COOX；R2、R3、R5和R7可以相同也可以不同，各自為H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；上述R1、R4和R6中的X可以相同也可以不同，各自為H、Na、K、NH4。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物為下述式(2)表示的化合物， 上述式(2)中，R1為H、SO3X、COOX；R4和R6可以相同也可以不同，各自為OH、SO3X、COOX；R2、R3、R5和R7可以相同也可以不同，各自為H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；上述R1、R4和R6中的X可以相同也可以不同，各自為H、Na、K、NH4。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物為下述式(3)表示的化合物， 上述式(3)中，R1為H、SO3X、COOX；R2和R3可以相同也可以不同，各自為H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；上述X可以相同也可以不同，各自為H、Na、K、NH4。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物為下述式(4)表示的化合物，
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物為下述式(5)表示的化合物，
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物為下述式(6)表示的化合物，
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物為下述式(7)表示的化合物，
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物含在多孔材料中。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其還含有與上述化合物形成顯色絡(luò)合物的金屬或其鹽。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的肌酸酐測定用試片，其中上述金屬為過渡金屬。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的肌酸酐測定用試片，其中上述過渡金屬為Cu(II)和Pd(II)中的至少一種。
12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物(A)和上述金屬或其鹽(B)的添加比例(摩爾比A∶B)為30∶1～1∶15。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其還含有緩沖劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物(A)和緩沖劑(C)的添加比例(摩爾比A∶C)為1∶10～1∶1000。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肌酸酐測定用試片，其還含有表面活性劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的肌酸酐測定用試片，其中上述化合物(A)和表面活性劑(D)的添加比例(摩爾比A∶D)為50∶1～3∶1。
全文摘要
本發(fā)明提供新型肌酸酐測定用試片。在多孔材料中含有下述式(1)的化合物、與上述化合物形成顯色絡(luò)合物的金屬以及緩沖劑，光學測定由上述化合物與上述金屬形成的顯色絡(luò)合物，通過測定肌酸酐阻礙上述顯色絡(luò)合物形成的程度來測定肌酸酐的量。下述式(1)中，R
文檔編號G01N33/70GK1705883SQ20038010139
公開日2005年12月7日 申請日期2003年10月15日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月15日
發(fā)明者小坂秀子 申請人:愛科來株式會社