本申請涉及聚合物染料領(lǐng)域,特別涉及水溶性聚合物染料和聚合物串聯(lián)染料領(lǐng)域。
背景技術(shù):
1、熒光染料是當(dāng)被它們所吸收的波長的光照射時發(fā)射(通常)不同波長的光的化合物。熒光染料可用于生物化學(xué)、生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中的多種應(yīng)用,例如用于診斷試劑盒、顯微鏡檢查或藥物篩選。熒光染料的特征在于允許使用者根據(jù)所需目的選擇合適的染料的許多參數(shù)。感興趣的參數(shù)包括激發(fā)波長最大值、發(fā)射波長最大值、斯托克斯位移、消光系數(shù)、熒光量子產(chǎn)率和熒光壽命??梢愿鶕?jù)感興趣的應(yīng)用選擇染料,以便例如允許激發(fā)輻射穿透到生物樣品中,使背景熒光最小化和/或達(dá)到高的信噪比。
2、分子識別涉及兩個分子的特異性結(jié)合。對靶生物分子具有結(jié)合特異性的分子可用于多種研究和診斷應(yīng)用,諸如分析物的標(biāo)記和分離、流式細(xì)胞術(shù)、原位雜交、酶聯(lián)免疫吸附測定(elisa)、蛋白質(zhì)印跡分析、磁性細(xì)胞分離和色譜法。靶生物分子可以通過用熒光染料標(biāo)記來檢測。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、提供了水溶性聚合物染料和聚合物串聯(lián)染料。聚合物染料包括水溶劑化捕光多發(fā)色團(tuán),所述水溶劑化捕光多發(fā)色團(tuán)具有芳基或雜芳基共聚單體的共軛鏈段,所述芳基或雜芳基共聚單體包括支鏈非離子水溶性基團(tuán)(wsg),所述支鏈非離子水溶性基團(tuán)(wsg)包含兩種或更多種水溶性聚合物。在一些情況下,本公開的支鏈非離子水溶性基團(tuán)(wsg)能夠賦予多發(fā)色團(tuán)超過50mg/ml的水中溶解度。聚合物串聯(lián)染料還包括與多發(fā)色團(tuán)共價連接的信號發(fā)色團(tuán),所述多發(fā)色團(tuán)與所述信號發(fā)色團(tuán)處于能量接收接近。還提供了包括主題水溶性聚合物染料的抵抗聚集的標(biāo)記的特異性結(jié)合成員。還提供了針對靶分析物的存在對樣品進(jìn)行評估的方法和應(yīng)用主題聚合物染料標(biāo)記靶分子的方法。還提供了用于實(shí)踐主題方法的系統(tǒng)和試劑盒。
1.一種水溶性捕光多發(fā)色團(tuán),其中所述多發(fā)色團(tuán)具有式(ii)的結(jié)構(gòu)的共軛片段:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水溶性捕光多發(fā)色團(tuán),其中l(wèi)1具有以下結(jié)構(gòu):
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的水溶性捕光多發(fā)色團(tuán),其中所述芳基或雜芳基共聚單體獨(dú)立地選自以下結(jié)構(gòu)之一:
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的水溶性捕光多發(fā)色團(tuán),其中x+y為100%。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的水溶性捕光多發(fā)色團(tuán),其中y是0。
6.一種聚合物串聯(lián)染料,其包含:
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的聚合物串聯(lián)染料,其中所述信號發(fā)色團(tuán)為熒光團(tuán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的聚合物串聯(lián)染料,其中所述信號發(fā)色團(tuán)為猝滅劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求6-8中任一項(xiàng)所述的聚合物串聯(lián)染料,其中所述信號發(fā)色團(tuán)選自羅丹明、香豆素、呫噸、花菁、聚甲炔、芘、氟化硼二吡咯、萘酰亞胺、藻膽蛋白、多甲藻黃素葉綠素蛋白、它們的共軛物以及它們的組合。
10.根據(jù)權(quán)利要求6-9中任一項(xiàng)所述的聚合物串聯(lián)染料,其中:
11.根據(jù)權(quán)利要求6-10任一項(xiàng)所述的聚合物串聯(lián)染料,其中所述多發(fā)色團(tuán)包含末端基團(tuán)-l3-z,其中l(wèi)3為連接基并且z為特異性結(jié)合成員。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的聚合物串聯(lián)染料,其中所述連接基選自由以下組成的組:烷基、取代的烷基、烷基-酰氨基、烷基-酰氨基-烷基和peg部分。
13.根據(jù)權(quán)利要求11-12中任一項(xiàng)所述的聚合物串聯(lián)染料,其中z為生物分子。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的聚合物串聯(lián)染料,其中z為抗體或其結(jié)合片段。
15.一種抵抗聚集的標(biāo)記的特異性結(jié)合成員,其包含:
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的標(biāo)記的特異性結(jié)合成員,其還包含與所述多發(fā)色團(tuán)共價連接的信號發(fā)色團(tuán),所述多發(fā)色團(tuán)與所述信號發(fā)色團(tuán)處于能量接收接近。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的標(biāo)記的特異性結(jié)合成員,其中所述信號發(fā)色團(tuán)為熒光團(tuán)。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的標(biāo)記的特異性結(jié)合成員,其中所述信號發(fā)色團(tuán)選自羅丹明、香豆素、呫噸、花菁、聚甲炔、芘、氟化硼二吡咯、萘酰亞胺、藻膽蛋白、多甲藻黃素葉綠素蛋白、它們的共軛物以及它們的組合。
19.根據(jù)權(quán)利要求15-18中任一項(xiàng)所述的標(biāo)記的特異性結(jié)合成員,其中所述特異性結(jié)合成員為抗體或其結(jié)合片段。
20.一種針對靶分析物的存在對樣品進(jìn)行評估的方法,所述方法包括:
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法,其中所述靶分析物與細(xì)胞相關(guān)聯(lián)。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法,其中所述靶分析物為所述細(xì)胞的細(xì)胞表面標(biāo)記物。
23.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法,其中所述細(xì)胞表面標(biāo)記物選自由細(xì)胞受體和細(xì)胞表面抗原組成的組。
24.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法,其中所述靶分析物為細(xì)胞內(nèi)靶標(biāo),并且所述方法還包括透化或裂解所述細(xì)胞。