本發(fā)明屬于分子生物學，尤其涉及一種可同時檢測鴨和鵝源性成分的分子生物學方法。

背景技術(shù)：

1、本發(fā)明中的鴨為家鴨，屬于鴨科(anatidae)，鴨屬(anas)，國內(nèi)飼養(yǎng)的主要品種有櫻桃谷、北京鴨、金定鴨、高郵鴨等。鵝，屬于鴨科(anatidae)，雁屬(anser)，飼養(yǎng)的品種主要有太湖鵝、揚州鵝、浙東白鵝、四川白鵝等。

2、鴨、鵝雖然同屬于水禽，但在生產(chǎn)效率方面，鴨遠高于鵝。如：種鴨年產(chǎn)蛋量可以達250枚以上，而種鵝年產(chǎn)蛋量最高只有70枚左右；鴨一般40天左右便可出欄，而鵝一般要70天左右。受利益驅(qū)使，鴨鵝產(chǎn)品的摻假現(xiàn)象頻繁發(fā)生，如：加拿大鵝、哥倫比亞、匡威等著名羽絨制品品牌，都出現(xiàn)過以“鴨絨”冒充“鵝絨”的現(xiàn)象；鴨肉冒充鵝肉、牛肉、羊肉等在市場更是屢見不鮮。

3、目前同時檢測多種家禽源性成分的方法多為每種類型家禽設(shè)計一對引物或探針，然后進行多重擴增，不同引物和探針會相互干擾，影響結(jié)果準確性。因此亟需一種快速、準確而又易于操作的技術(shù)檢測鴨和鵝源性成分，保證我國家禽行業(yè)有序、健康、穩(wěn)定發(fā)展，滿足人民多元化的家禽產(chǎn)品需求。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的之一在于針對現(xiàn)有技術(shù)不足，提供可同時檢測鴨和鵝源性成分的分子生物學方法。

2、本發(fā)明的目的之二在于提供用于檢測上述分子標記的引物。

3、本發(fā)明的目的之三在于提供上述分子標記的用途。

4、本發(fā)明的目的之四在于提供利用上述分子標記的檢測方法。

5、本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：

6、一種可同時檢測鴨和/或鵝源性成分的分子標記，所述分子標記利用毛細管電泳峰值來區(qū)分是否含有鴨和鵝源性成分，當峰值為999bp含有鴨源性成分，當峰值為992bp含有鵝源性成分，當峰值為999bp和992bp為同時含有鴨和鵝源性成分。

7、本發(fā)明還提供一種可同時檢測鴨和鵝源性成分的分子標記的引物對，其中：

8、正向引物(seq?id?no.1)：5'-tattcaggtttgtgttactggaa-3'

9、反向引物(seq?id?no.2)：5'-gatgcatgcaaagaactccagc-3'。

10、本發(fā)明還提供含有上述引物對的用于同時檢測鴨和鵝源性成分的試劑盒。

11、本發(fā)明還提供上述分子標記或引物或試劑盒在檢測鴨源性成分中的應用。

12、本發(fā)明還提供上述分子標記或引物或試劑盒在檢測鵝源性成分中的應用。

13、本發(fā)明還提供上述分子標記或引物或試劑盒在同時檢測鴨和鵝源性成分中的應用。

14、一種可同時檢測鴨和/或鵝源性成分的方法，通過seq?id?no.1和seq?id?no.2所示引物對待檢測樣品基因組dna進行pcr擴增，，毛細管電泳后，進行序列比對，當峰值為999bp表明含有鴨源性成分，當峰值為992bp表明含有鵝源性成分，當峰值為999bp和992bp表明同時含有鴨和鵝源性成分。

15、本發(fā)明還提供一種篩選鴨或鵝源性成分的方法，通過seq?id?no.1和seq?id?no.2所示引物對待檢測樣品基因組dna進行pcr擴增，毛細管電泳后，進行序列比對分析，當峰值為999bp表明含有鴨源性成分，當峰值為992bp表明含有鵝源性成分，當峰值為999bp和992bp表明同時含有鴨和鵝源性成分。

16、在一些實施例中，本發(fā)明待檢測樣品基因組dna可以選用本領(lǐng)域常用的樣品，例如羽毛、肌肉、血液或口腔拭子等。

17、在一些實施例中，本發(fā)明pcr反應體系為：2×pcr?mix(南京諾唯贊生物有限公司)25μl，10μmol/l正反方向引物各1μl，50-100μg/ml模板dna2μl，超純水21μl；在一些實施例中，本發(fā)明pcr反應程序為：

18、

19、本發(fā)明所述的鴨源包括北京鴨、櫻桃谷鴨、金定鴨、高郵鴨；本發(fā)明所述的鵝源包括太湖鵝、揚州鵝、浙東白鵝、四川白鵝。

20、有益效果：

21、本發(fā)明利用峰值檢測是否含有鴨和鵝源性成分，優(yōu)點在于能夠快速、準確檢測羽絨制品、肉制品中的鴨和鵝源性成分，打擊以次充好的不良商家。并且該法操作簡單、易于實驗室操作、便于基層推廣和使用，具有廣闊的市場應用前景，此外，基于本發(fā)明方法開發(fā)的檢測試劑盒，可產(chǎn)生可觀的經(jīng)濟效益和良好的社會價值。

技術(shù)特征：

1.一種同時檢測鴨和/或鵝源性成分的方法，其特征在于，通過seq?id?no.1和seq?idno.2所示引物對待檢測樣品基因組dna進行pcr擴增，毛細管電泳后，進行序列比對，當峰值為999bp表明含有鴨源性成分，當峰值為992bp表明含有鵝源性成分，當峰值為999bp和992bp表明同時含有鴨和鵝源性成分。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時檢測鴨和/或鵝源性成分的方法，其特征在于，待檢測樣品為羽毛、肌肉、血液或口腔拭子。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時檢測鴨和/或鵝源性成分的方法，其特征在于，pcr反應體系為：2×pcr?mix?25μl，10μmol/l正反方向引物各1μl，50-100μg/ml模板dna?2μl，超純水21μl。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時檢測鴨和/或鵝源性成分的方法，其特征在于，pcr反應程序為：

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時檢測鴨和/或鵝源性成分的方法，其特征在于，所述的鴨源包括北京鴨、櫻桃谷鴨、金定鴨、高郵鴨；所述的鵝源包括太湖鵝、揚州鵝、浙東白鵝、四川白鵝。

6.一種篩選鴨源或鵝源性成分的方法，其特征在于，通過seq?id?no.1和seq?id?no.2所示引物對待檢測樣品基因組dna進行pcr擴增，毛細管電泳后，進行序列比對分析，當峰值為999bp表明含有鴨源性成分，當峰值為992bp表明含有鵝源性成分，當峰值為999bp和992bp表明同時含有鴨和鵝源性成分。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選鴨源或鵝源性成分的方法，其特征在于，待檢測樣品為羽毛、肌肉、血液或口腔拭子。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選鴨源或鵝源性成分的方法，其特征在于，pcr反應體系為：2×pcr?mix?25μl，10μmol/l正反方向引物各1μl，50-100μg/ml模板dna?2μl，超純水21μl。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選鴨源或鵝源性成分的方法，其特征在于，pcr反應程序為：

10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選鴨源或鵝源性成分的方法，其特征在于，所述的鴨源包括北京鴨、櫻桃谷鴨、金定鴨、高郵鴨；所述的鵝源包括太湖鵝、揚州鵝、浙東白鵝、四川白鵝。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種可同時檢測鴨和鵝源性成分的分子生物學方法及應用，通過SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.2所示引物對待檢測樣品基因組DNA進行PCR擴增，毛細管電泳后，進行序列比對，當峰值為999bp表明含有鴨源性成分，當峰值為992bp表明含有鵝源性成分，當峰值為999bp和992bp表明同時含有鴨和鵝源性成分。基于本發(fā)明方法開發(fā)的檢測試劑盒，可產(chǎn)生可觀的經(jīng)濟效益和良好的社會價值。

技術(shù)研發(fā)人員：賈曉旭,高玉時,周倩,唐夢君,唐修君,樊艷鳳,張小燕,陳大偉,陸俊賢,張文濤
受保護的技術(shù)使用者：江蘇省家禽科學研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6