本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥、植物病害防治，特別涉及一株委內(nèi)瑞拉鏈霉菌及其在抑制植物病原菌中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、草果為藥食兩用的中藥材大宗品種之一，是姜科豆蔻屬草果亞屬多年生常綠叢生草本植物。主要分布于我國(guó)云南的怒江州、文山州、紅河州的一些縣市，近年來，云南多地努力將草果打造成具有地方特色的農(nóng)產(chǎn)品，為種植戶增加收入來源。隨著種植面積的擴(kuò)大和配套管理不完善，其病害呈現(xiàn)局部蔓延趨勢(shì)，萎蔫病為主要病害，這是以盤龍鐮刀霉為主的復(fù)合真菌引起的一類土傳病害?，F(xiàn)防治草果萎蔫病的手段主要為化學(xué)防治，其對(duì)植株會(huì)產(chǎn)生一定的藥害、殺傷有益微生物、導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性，產(chǎn)品安全性問題沒有保障等問題；而微生物防治對(duì)環(huán)境友好、具有安全性、快速抑制病原微生物的生長(zhǎng)繁殖等優(yōu)點(diǎn)。

2、微生物防治作為一種病害防治手段，就是利用生物物種間的相互作用，以一種或一類生物抑制另一種或另一類生物，從而對(duì)病害進(jìn)行防控。鏈霉菌是一種重要的土壤微生物，對(duì)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)起到了重要的作用。作為一種產(chǎn)生土壤殺菌物質(zhì)的細(xì)菌，它可以在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮重要的生態(tài)作用，鏈霉菌的生產(chǎn)及其在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用是農(nóng)業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要方向，對(duì)于推動(dòng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方式的轉(zhuǎn)變和提升農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率有著重要意義。從草果根際土壤中分離和篩選具有生防功能的鏈霉菌，對(duì)其生防功能和生物學(xué)特性進(jìn)行評(píng)價(jià)，對(duì)下一步的草果專用生防菌劑和菌肥的開發(fā)，減少化學(xué)農(nóng)藥的施用量具有重要作用。

3、目前有關(guān)草果病害專用微生物菌劑研究的專利很少，只有專利號(hào)cn?115044481?b楊佩文等人報(bào)道隨機(jī)發(fā)現(xiàn)一株木霉菌，并將其與有機(jī)碳肥、油枯、甘蔗渣、茶渣以及氮磷鉀復(fù)合肥等物料復(fù)配后，對(duì)草果疫霉具有較好的防治效果，但是其存在的問題是所用木霉不是從草果地里分離出來的，施到草果地里后不確定是否能夠有效定殖，另外，該專利并未提供木霉的生防效果圖片，難以客觀評(píng)估該木霉的生防效果。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提出了一株委內(nèi)瑞拉鏈霉菌及其在抑制植物病原菌中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的鏈霉菌分離自怒江州福貢縣馬吉鄉(xiāng)草果根腐病植株旁的健康的根際土壤中，具有很好的田間定殖性。獲得的鏈霉菌對(duì)草果萎焉病的主要3種致病菌分布進(jìn)行了對(duì)峙培養(yǎng)、篩選發(fā)酵液、平板打孔法活性試驗(yàn)均表現(xiàn)出較好的生防功能，為該生防菌劑在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供重要依據(jù)。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

3、本發(fā)明首先提供一株委內(nèi)瑞拉鏈霉菌，該委內(nèi)瑞拉鏈霉菌分類命名為streptomyces?venezuelae，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號(hào)為gdmcc?no：64953，保藏日期2024年2月5日，保藏地址：廣州市先烈中路100號(hào)大院59號(hào)樓5樓。

4、本發(fā)明還提供所述委內(nèi)瑞拉鏈霉菌的發(fā)酵液，所述發(fā)酵液的制備方法包括以下步驟：將委內(nèi)瑞拉鏈霉菌接種至isp2培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)；所述isp2培養(yǎng)基由以下成分組成：麥芽提取物10.0g/l、葡萄糖4.0g/l、酵母粉4.0g/l、水。

5、優(yōu)選的，發(fā)酵培養(yǎng)的條件為28℃～30℃、振蕩恒溫培養(yǎng)5～7d。

6、另一方面，本發(fā)明還提供所述委內(nèi)瑞拉鏈霉菌和/或其發(fā)酵產(chǎn)物在抑制草果病原菌生長(zhǎng)中的應(yīng)用。

7、優(yōu)選的，所述病原真菌包括禾谷鐮刀菌(fusarium?graminearum)、芒果畸形病鐮刀菌(fusarium?mangiferae)、層出鐮刀菌(fusarium?proliferatum)中的至少一種。

8、優(yōu)選的，所述發(fā)酵產(chǎn)物包括發(fā)酵產(chǎn)生的揮發(fā)性和/或非揮發(fā)性成分。

9、優(yōu)選的，所述發(fā)酵產(chǎn)物包括所述的發(fā)酵液。

10、本發(fā)明的有益效果：

11、本發(fā)明提供的委內(nèi)瑞拉鏈霉菌cao-82來源于草果根際土壤，保證了其回施至草果種植地后菌株可以有效定植和存活，為未來開發(fā)菌劑的實(shí)用性奠定基礎(chǔ)。

12、本發(fā)明首次將委內(nèi)瑞拉鏈霉菌應(yīng)用草果病原菌進(jìn)行生物防控，并探索出適宜該鏈霉菌cao-82的發(fā)酵工藝，為其后期生產(chǎn)菌劑奠定了基礎(chǔ)。

13、該生防菌cao-82具有通過釋放揮發(fā)性和非揮發(fā)性成分兩種方式，發(fā)揮拮抗草果病原真菌的功能。

14、平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)顯示，該菌株對(duì)草果病原菌禾谷鐮刀菌(fusarium?graminearum)、芒果畸形病鐮刀菌(fusarium?mangiferae)、層出鐮刀菌(fusarium?proliferatum)具有良好的抑制作用，抑制率分別為：49.1％、56.7％和53.3％。對(duì)扣平板實(shí)驗(yàn)顯示，對(duì)三株病原菌抑制率分別為52.8％，88.3％，66.7％。

技術(shù)特征：

1.一株委內(nèi)瑞拉鏈霉菌，其特征在于，該委內(nèi)瑞拉鏈霉菌保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號(hào)為gdmcc?no：64953。

2.權(quán)利要求1所述委內(nèi)瑞拉鏈霉菌的發(fā)酵液，其特征在于，所述發(fā)酵液的制備方法包括以下步驟：將委內(nèi)瑞拉鏈霉菌接種至isp2培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)；所述isp2培養(yǎng)基由以下成分組成：麥芽提取物10.0g/l、葡萄糖4.0g/l、酵母粉4.0g/l、水。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的發(fā)酵液，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)的條件為28℃～30℃、振蕩恒溫培養(yǎng)5～7d。

4.權(quán)利要求1所述委內(nèi)瑞拉鏈霉菌和/或其發(fā)酵產(chǎn)物在抑制草果病原菌生長(zhǎng)中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述病原真菌包括禾谷鐮刀菌(fusariumgraminearum)、芒果畸形病鐮刀菌(fusarium?mangiferae)、層出鐮刀菌(fusariumproliferatum)中的至少一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述發(fā)酵產(chǎn)物包括發(fā)酵產(chǎn)生的揮發(fā)性和/或非揮發(fā)性成分。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述發(fā)酵產(chǎn)物包括權(quán)利要求2～3任一項(xiàng)所述的發(fā)酵液。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一株委內(nèi)瑞拉鏈霉菌菌株cao?82，為委內(nèi)瑞拉鏈霉菌(Streptomyces?venezuelae)，其保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號(hào)為：GDMCC?No：64953。研究表明，委內(nèi)瑞拉鏈霉菌cao?82對(duì)草果鐮刀菌屬等真菌性植物病害具有抑菌活性，平板對(duì)扣試驗(yàn)顯示，該鏈霉菌揮發(fā)性成分可以有效抑制草果鐮刀霉生長(zhǎng)，最高抑制率達(dá)88.3％。

技術(shù)研發(fā)人員：元超,郭玉華,楊曉宇,楊毅,吳蓮張,于福來,江芊,楊昌彥
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6