本申請(qǐng)涉及栓塞微球，具體而言，涉及一種模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法。

背景技術(shù)：

1、淀粉栓塞微球是一種生物可降解材料，其在醫(yī)療領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，主要用于肝動(dòng)脈栓塞治療以及腦血管栓塞治療等。淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程(包括降解時(shí)間等)是衡量其性能的重要指標(biāo)之一。

2、目前，對(duì)于模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的研究相對(duì)較少，主要包括通過淀粉栓塞微球的總體積變化、粒徑變化或總質(zhì)量變化來分析降解過程；但是，上述方式與淀粉栓塞微球在體內(nèi)的真實(shí)降解過程之間的差異較大，無法較為準(zhǔn)確地模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的真實(shí)降解過程。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本申請(qǐng)的目的在于提供一種模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其能夠較為準(zhǔn)確地模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)的真實(shí)降解過程。

2、本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，該測(cè)試方法包括：將淀粉栓塞微球置于模擬液中孵育；且在孵育的過程中，每隔預(yù)設(shè)時(shí)間去除原來的模擬液，并添加新的模擬液；獲得淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量與孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，以確定淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程。其中，模擬液中含有豬胰腺α-淀粉酶以及tris-hcl緩沖液；tris-hcl緩沖液的ph為7.35～7.45；豬胰腺α-淀粉酶在模擬液中的酶活力濃度與所模擬的體內(nèi)血漿中的α-淀粉酶的酶活力濃度相同。孵育的溫度為36～38℃。預(yù)設(shè)時(shí)間≤24h。

3、本申請(qǐng)?zhí)峁┑姆椒ㄊ褂锰囟ǖ哪M液并配合每隔特定的預(yù)設(shè)時(shí)間更換模擬液，可以模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)真實(shí)的酶降解環(huán)境；通過獲取淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量與孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，反映出淀粉栓塞微球的降解隨孵育的時(shí)間的變化情況，進(jìn)而可以較為準(zhǔn)確地模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)的真實(shí)降解過程；本申請(qǐng)?zhí)峁┑姆椒梢杂脕碓u(píng)估淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解行為，可以為醫(yī)療器械的注冊(cè)審批過程提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)也有助于淀粉栓塞微球材料的開發(fā)和優(yōu)化，降低臨床試驗(yàn)的風(fēng)險(xiǎn)和成本。

4、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，預(yù)設(shè)時(shí)間為18～24h。

5、上述技術(shù)方案，可以使得孵育體系較為準(zhǔn)確地模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)真實(shí)的酶降解環(huán)境。

6、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，孵育在搖床中進(jìn)行，搖床的轉(zhuǎn)速為60～80rpm。

7、上述技術(shù)方案，可以使得孵育體系較為準(zhǔn)確地模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)真實(shí)的酶降解環(huán)境。

8、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，根據(jù)公式(1)獲得淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量mt。公式(1)如下：

9、mt＝ms+me

10、式中，ms為：孵育的過程中，去除的所有模擬液中的糖的總質(zhì)量；me為：對(duì)孵育的體系離心后的上清液中糖的質(zhì)量。

11、上述技術(shù)方案，可以獲得不同孵育時(shí)間時(shí)淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量mt，進(jìn)而獲得淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量與孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，以模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程。

12、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，測(cè)試方法包括：根據(jù)淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量與孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，獲得淀粉栓塞微球的降解率與孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，以確定淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程；其中，根據(jù)公式(2)獲得淀粉栓塞微球的降解率dr。

13、公式(2)如下：

14、式中，m0為：孵育前，淀粉栓塞微球中糖的質(zhì)量。

15、上述技術(shù)方案，可以根據(jù)確定出的淀粉栓塞微球的降解率與孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程。

16、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，測(cè)試去除的所有模擬液中的糖的濃度，以確定ms；測(cè)試上清液中的糖的濃度，以確定me。

17、可選地，采用蒽酮比色法測(cè)試去除的所有模擬液中的糖的濃度以及上清液中的糖的濃度。

18、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，在孵育前，對(duì)淀粉栓塞微球進(jìn)行預(yù)處理；預(yù)處理的步驟包括：將淀粉栓塞微球經(jīng)生理鹽水置換，離心后收集沉淀物，從沉淀物中獲取淀粉栓塞微球。

19、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，將預(yù)設(shè)體積的淀粉栓塞微球置于模擬液中進(jìn)行孵育；預(yù)設(shè)體積與孵育的過程中的模擬液的體積比為1:(20～30)。

20、上述技術(shù)方案，可以使得孵育體系較為準(zhǔn)確地模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)真實(shí)的酶降解環(huán)境。

21、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，淀粉栓塞微球具有核殼結(jié)構(gòu)，淀粉栓塞微球的內(nèi)核材料的降解速度大于淀粉栓塞微球的殼層材料的降解速度。

22、可選地，內(nèi)核材料為可溶解淀粉聚合物，或/和，殼層材料為支鏈淀粉聚合物。

23、可選地，淀粉栓塞微球中，內(nèi)核材料和殼層材料的質(zhì)量比為(1～5):(1～5)。

24、在本申請(qǐng)可選的實(shí)施方式中，淀粉栓塞微球的制備方法包括：將微球骨架材料配制成水相，微球骨架材料包括內(nèi)核材料和殼層材料，內(nèi)核材料的親水性大于殼層材料的親水性；水相包括三偏磷酸鈉和三聚磷酸鈉；將水相和油相混合形成反相懸浮聚合體系，后進(jìn)行聚合反應(yīng)，得到淀粉栓塞微球。測(cè)試方法包括：獲得淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量和磷質(zhì)量之和與孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，以確定淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程。

25、在上述技術(shù)方案中，對(duì)于采用含磷物質(zhì)(即三偏磷酸鈉和三聚磷酸鈉)制備的淀粉栓塞微球，通過獲取淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量和磷質(zhì)量之和與孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，可以更加準(zhǔn)確地反映出淀粉栓塞微球的降解隨孵育的時(shí)間的變化情況，進(jìn)而可以較為準(zhǔn)確地模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)的真實(shí)降解過程。

26、可選地，根據(jù)公式(3)獲得淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量和磷質(zhì)量之和m總；公式(3)如下：

27、m總＝ms+me+ma+mb

28、式中，ms為：孵育的過程中，去除的所有模擬液中的糖的總質(zhì)量；me為：對(duì)孵育的體系離心后的上清液中糖的質(zhì)量；ma為：孵育的過程中，去除的所有模擬液中的磷的總質(zhì)量；mb為：對(duì)孵育的體系離心后的上清液中磷的質(zhì)量。

技術(shù)特征：

1.一種模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，所述預(yù)設(shè)時(shí)間為18～24h。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，所述孵育在搖床中進(jìn)行，所述搖床的轉(zhuǎn)速為60～80rpm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，根據(jù)公式(1)獲得所述淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量mt；

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，所述測(cè)試方法包括：根據(jù)所述淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量與所述孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，獲得所述淀粉栓塞微球的降解率與所述孵育的時(shí)間之間的關(guān)系，以確定所述淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程；

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，測(cè)試所述去除的所有所述模擬液中的糖的濃度，以確定所述ms；測(cè)試所述上清液中的糖的濃度，以確定所述me；

7.根據(jù)權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，在所述孵育前，對(duì)所述淀粉栓塞微球進(jìn)行預(yù)處理；所述預(yù)處理的步驟包括：將所述淀粉栓塞微球經(jīng)生理鹽水置換，離心后收集沉淀物，從所述沉淀物中獲取所述淀粉栓塞微球；

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，將預(yù)設(shè)體積的所述淀粉栓塞微球置于所述模擬液中進(jìn)行所述孵育；

9.根據(jù)權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，所述淀粉栓塞微球具有核殼結(jié)構(gòu)，所述淀粉栓塞微球的內(nèi)核材料的降解速度大于所述淀粉栓塞微球的殼層材料的降解速度；

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，其特征在于，所述淀粉栓塞微球的制備方法包括：

技術(shù)總結(jié)
本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N模擬淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程的測(cè)試方法，屬于栓塞微球技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括：將淀粉栓塞微球置于模擬液中孵育；孵育過程中，每隔預(yù)設(shè)時(shí)間去除原來的模擬液并添加新的模擬液；獲得淀粉栓塞微球中減少的糖質(zhì)量與孵育時(shí)間的關(guān)系，以確定淀粉栓塞微球在體內(nèi)的降解過程。模擬液中含有豬胰腺α?淀粉酶和Tris?HCl緩沖液；Tris?HCl緩沖液pH為7.35～7.45；豬胰腺α?淀粉酶在模擬液中的酶活力濃度與所模擬的體內(nèi)血漿中的α?淀粉酶的酶活力濃度相同；孵育溫度為36～38℃；預(yù)設(shè)時(shí)間≤24h。本申請(qǐng)?zhí)峁┑姆椒軌蜉^為準(zhǔn)確地模擬出淀粉栓塞微球在體內(nèi)的真實(shí)降解過程，有助于淀粉栓塞微球的開發(fā)和優(yōu)化。

技術(shù)研發(fā)人員：孫宏濤,劉梅芳,薛甲,林漪,李琪,丁曉曉
受保護(hù)的技術(shù)使用者：科睿馳（深圳）醫(yī)療科技發(fā)展有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6