本發(fā)明涉及微生物，具體而言，涉及一種乳酸菌細(xì)菌素及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、單核細(xì)胞增生李斯特菌(listeria?monocytogenes)是一種革蘭氏陽性的人獸共患致病菌，也是對人類健康威脅性最強(qiáng)的食源性致病菌之一。單核細(xì)胞增生李斯特菌可引起李斯特菌病和胃腸炎，導(dǎo)致腦膜炎、流產(chǎn)、敗血癥等病癥。單核細(xì)胞增生李斯特菌的感染性和危害性使其治療措施顯得尤為重要。傳統(tǒng)治療上述食源性致病菌的方法是抗生素療法，但由于抗生素的濫用，耐多藥的致病菌對抗生素如青霉素、環(huán)丙沙星等已經(jīng)表現(xiàn)出廣泛的耐藥性，這使得開發(fā)新的治療手段迫在眉睫。隨著食品工業(yè)科技的不斷發(fā)展，人們更傾向于綠色、溫和、天然環(huán)保的抑菌方式，天然抗菌劑的出現(xiàn)，如來自動物的乳過氧化物酶、乳鐵蛋白、溶菌酶、來自植物的精油和草藥提取物，以及來自微生物的細(xì)菌素為人們提供了新的思路。

2、乳酸菌(lactic?acid?bacteria)可以分泌具有抑菌活性的代謝產(chǎn)物，如有機(jī)酸、細(xì)菌素和h2o2等，從而抑制致病菌的生長。nisin和pediocin是研究最多的可作為商業(yè)天然防腐劑的細(xì)菌素。細(xì)菌素是菌株如乳酸乳球菌和糞腸球菌的核糖體中合成的細(xì)菌素。

3、鑒于此，特提出本發(fā)明。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的之一包括提供一種乳酸菌細(xì)菌素。

2、本發(fā)明的目的之二包括提供上述乳酸菌細(xì)菌素的制備方法。

3、本發(fā)明的目的之三包括提供上述乳酸菌細(xì)菌素在制備抑菌產(chǎn)品中的應(yīng)用。

4、本發(fā)明的目的之四包括提供一種抑菌產(chǎn)品。

5、本發(fā)明解決其技術(shù)問題是采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的：

6、本發(fā)明提出一種乳酸菌細(xì)菌素，該乳酸菌細(xì)菌素從戊糖乳植物桿菌中提取獲得，該戊糖乳植物桿菌的保藏編號為cctcc?no：m?2022431。

7、可選地，上述乳酸菌細(xì)菌素分子量約為5988da。

8、可選地，上述乳酸菌細(xì)菌素的氨基酸序列如seq?id?no:1所示。

9、本發(fā)明還提供了一種乳酸菌細(xì)菌素的制備方法，其通過戊糖乳植物桿菌發(fā)酵產(chǎn)物獲取，或者通過化學(xué)合成方式獲取。

10、可選地，上述制備方法包括：將戊糖乳植物桿菌的發(fā)酵液離心取上清液，向上清液中加入硫酸銨使上清液中硫酸銨的飽和度分別為80％～100％，再次離心后取沉淀，然后依次進(jìn)行重溶、透析和冷凍干燥，獲得細(xì)菌素粗品。

11、可選地，戊糖乳植物桿菌發(fā)酵液的制備包括：將戊糖乳植物桿菌接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。

12、可選地，發(fā)酵培養(yǎng)基包含：蛋白胨10g/l，牛肉浸粉8g/l，酵母提取物4g/l，葡萄糖20g/l，無水山梨醇單油酸酯1ml/l，磷酸氫二鉀2g/l，三水醋酸鈉5g/l，檸檬酸三銨2g/l，七水硫酸鎂0.2g/l，四水硫酸錳0.05g/l。

13、可選地，制備方法還包括對細(xì)菌素粗品進(jìn)行純化，純化包括：將細(xì)菌素粗品溶解后再用sephadex?g-50凝膠層析柱對其進(jìn)行分離，再次透析和冷凍干燥后即可獲得乳酸菌細(xì)菌素。

14、此外，本發(fā)明還提出一種上述乳酸菌細(xì)菌素在制備抑菌產(chǎn)品中的應(yīng)用。

15、可選地，上述抑菌產(chǎn)品包括抑制單核細(xì)胞增生李斯特菌生長的抑菌劑。

16、本發(fā)明還提出一種抑菌產(chǎn)品，其包含上述乳酸菌細(xì)菌素。

17、本發(fā)明具有以下有益效果：

18、本發(fā)明從保藏編號為cctcc?no：m?2022431的戊糖乳植物桿菌中提取到一種細(xì)菌素，該細(xì)菌素具有熱穩(wěn)定性，并且能夠耐受低溫，在很寬的ph范圍內(nèi)保持其活性。同時，該細(xì)菌素能夠抑制食源性致病菌單核細(xì)胞增生李斯特菌的生長增殖，由于來源于可食用的四川泡菜中，所以該細(xì)菌素對人類身體無害，還能夠?yàn)轭A(yù)防或治療食源性致病菌造成的疾病提供新的研究方向，因此具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種乳酸菌細(xì)菌素，其特征在于，所述乳酸菌細(xì)菌素從戊糖乳植物桿菌中提取獲得，所述戊糖乳植物桿菌的保藏編號為cctcc?no：m2022431。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳酸菌細(xì)菌素，其特征在于，所述乳酸菌細(xì)菌素分子量約為5988da。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳酸菌細(xì)菌素，其特征在于，所述乳酸菌細(xì)菌素的氨基酸序列如seq?id?no:1所示。

4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的乳酸菌細(xì)菌素的制備方法，其特征在于，所述乳酸菌細(xì)菌素從所述戊糖乳植物桿菌的發(fā)酵產(chǎn)物中提取獲得，或者通過化學(xué)合成方式獲取。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，包括：將所述戊糖乳植物桿菌的發(fā)酵液離心取上清液，向所述上清液中加入硫酸銨，使上清液中硫酸銨的飽和度為80％～100％，再次離心后取沉淀，然后依次進(jìn)行重溶、透析和冷凍干燥，獲得細(xì)菌素粗品。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述戊糖乳植物桿菌發(fā)酵液的制備包括：將所述戊糖乳植物桿菌接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括對細(xì)菌素粗品進(jìn)行純化，所述純化包括：將所述細(xì)菌素粗品溶解后再用sephadex?g-50凝膠層析柱對其進(jìn)行分離，再次透析和冷凍干燥后即可獲得所述乳酸菌細(xì)菌素。

8.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的乳酸菌細(xì)菌素在制備抑菌產(chǎn)品中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抑菌產(chǎn)品包括抑制單核細(xì)胞增生李斯特菌生長的抑菌劑。

10.一種抑菌產(chǎn)品，其特征在于，包含權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的乳酸菌細(xì)菌素。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種乳酸菌細(xì)菌素及其制備方法和應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明從保藏編號為CCTCC?NO：M?2022431的戊糖乳桿菌中提取到一種細(xì)菌素，該細(xì)菌素具有熱穩(wěn)定性，并且能夠耐受低溫，在很寬的pH范圍內(nèi)保持其活性。同時，該細(xì)菌素能夠抑制食源性致病菌單核細(xì)胞增生李斯特菌的生長增殖，由于來源于可食用的四川泡菜中，所以該細(xì)菌素對人類身體無害，還能夠?yàn)轭A(yù)防或治療食源性致病菌造成的疾病提供新的研究方向，因此具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：吳重德,徐步青,米婷,金垚,周榮清
受保護(hù)的技術(shù)使用者：四川大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2