一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，包括以下步驟：S1：準(zhǔn)備重量份為5?8份的透明質(zhì)酸鈉和20?25份的去離子水，將透明質(zhì)酸鈉和去離子水混合，在10?15℃下反應(yīng)11?14h，制得透明質(zhì)酸鈉溶液；S2：準(zhǔn)備重量份為6?9份的PLGA納米顆粒和4?7份的偶氮二異丁脒鹽酸鹽，將PLGA納米顆粒加入透明質(zhì)酸鈉溶液中，在15?20℃下反應(yīng)10?15min，然后加入偶氮二異丁脒鹽酸鹽，在20?25℃下反應(yīng)20?30min，制得透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液；S3：將透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液注入至待修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷處，然后經(jīng)紫外點(diǎn)光源照射，得到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架。本發(fā)明能夠高效快速的制備復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架，方法簡單，使用方便，成本低。
【專利說明】
一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及藥物和醫(yī)療器械技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著我國進(jìn)入老齡社會，膝關(guān)節(jié)軟骨損傷病人越來越多；目前對于此類疾病尚無好的治療方法；目前臨床上常用的軟骨下骨打孔，骨軟骨移植以及自身軟骨細(xì)胞移植只能部分緩解癥狀，不能達(dá)到重建軟骨缺損的目的，使用此類方法得到的修復(fù)組織主要成分為I型膠原蛋白，與原有透明軟骨的II型膠原蛋白相比在生物學(xué)特性上相差甚遠(yuǎn)。
[0003]在軟骨缺損處再生修復(fù)組織，重建軟骨缺損的基本原理為:募集自身或者引入外源性的干細(xì)胞、較原始細(xì)胞于軟骨缺損處，并在相關(guān)生長因子等作用下分化為軟骨組織;關(guān)節(jié)腔中有多種類型的間充質(zhì)干細(xì)胞可以被招募到軟骨缺損處進(jìn)行損傷修復(fù)，如骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、關(guān)節(jié)滑液中的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞以及髕下脂肪墊來源的脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞等;體液以及血液等均有誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞定向迀徙的能力，而軟骨微環(huán)境中的各種因子具有誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞定向分化的能力;但是，由于自身體內(nèi)誘導(dǎo)因子作用效能的局限性以及缺乏細(xì)胞生長的三維空間環(huán)境，因而，不能產(chǎn)生和原有軟骨組織類似的修復(fù)組織，為了解決軟骨再生這一難題，國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界在過去幾十年間進(jìn)行了大量的探索和研究；如研究各種生長因子來促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化;研究基因轉(zhuǎn)染技術(shù)來獲得成軟骨能力更強(qiáng)的種子細(xì)胞;研究新型的組織工程支架在體外構(gòu)建組織工程化軟骨進(jìn)而植入體內(nèi)等;但是，這些方法都存在各種局限性:生長因子由于免疫原性不能體內(nèi)使用，基因轉(zhuǎn)染技術(shù)存在安全性和致瘤性問題，組織工程化軟骨植入與原有組織很難整合等；因而，目前這些方法都沒有很好的解決問題;近年來，在軟骨缺損處植入能募集并誘導(dǎo)自身間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化的三維支架是有光明前途的治療方式;植入三維多孔支架尤其是植入能緩釋藥物的支架材料因能招募更多的間充質(zhì)干細(xì)胞并增強(qiáng)誘導(dǎo)效能，因而治療軟骨再生帶來了巨大的希望，具有廣泛的社會經(jīng)濟(jì)意義。
[0004]目前，研究應(yīng)用較多的支架材料多為PLGA、PGA、膠原蛋白、纖維蛋白等，這些支架材料特點(diǎn)為能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生大量的I型膠原蛋白，而非II型膠原蛋白，因而不利于間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化;而在藥物緩釋支架的研究領(lǐng)域，用來被緩釋的藥物多為生長因子，此類藥物價(jià)格昂貴，而且具有免疫原性，體內(nèi)應(yīng)用有帶來動物源性疾病的風(fēng)險(xiǎn)；因而，尋找到合適形式的、能促進(jìn)細(xì)胞分泌軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的支架材料以及安全有效、可以體內(nèi)使用的誘導(dǎo)藥物是解決軟骨再生問題的關(guān)鍵。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]基于【背景技術(shù)】存在的技術(shù)問題，本發(fā)明提出了一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法。
[0006]本發(fā)明提出的一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，包括以下步驟: S1:準(zhǔn)備重量份為5-8份的透明質(zhì)酸鈉和20-25份的去離子水，將透明質(zhì)酸鈉和去離子水混合，在10-15 °C下反應(yīng)11 -14h，制得透明質(zhì)酸鈉溶液；
S2:準(zhǔn)備重量份為6-9份的PLGA納米顆粒和4-7份的偶氮二異丁脒鹽酸鹽，將PLGA納米顆粒加入透明質(zhì)酸鈉溶液中，在15-20°C下反應(yīng)10-15min，然后加入偶氮二異丁脒鹽酸鹽，在20-25 °C下反應(yīng)20-30min，制得透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液；
S3:將透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液注入至待修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷處，然后經(jīng)紫外點(diǎn)光源照射，得到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架。
[0007]優(yōu)選地，所述SI中，準(zhǔn)備重量份為6-7份的透明質(zhì)酸鈉和21-24份的去離子水，將透明質(zhì)酸鈉和去離子水混合，在11_14°C下反應(yīng)12-13h，制得透明質(zhì)酸鈉溶液。
[0008]優(yōu)選地，所述S2中，準(zhǔn)備重量份為7-8份的PLGA納米顆粒和5-6份的偶氮二異丁脒鹽酸鹽，將PLGA納米顆粒加入透明質(zhì)酸鈉溶液中，在16-19°C下反應(yīng)Il-Hmin，然后加入偶氮二異丁脒鹽酸鹽，在21-24°C下反應(yīng)22-28min，制得透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液。
[0009]優(yōu)選地，所述S3中，將透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液填充至待修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷處，然后經(jīng)紫外點(diǎn)光源照射，得到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架。
[0010]本發(fā)明中，所述一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法的注射用修飾透明質(zhì)酸鈉凝膠，為高效交聯(lián)凝膠，交聯(lián)劑用量少，具有增強(qiáng)的穩(wěn)定性和內(nèi)聚性，具有優(yōu)異的流變學(xué)性能，塑形性好且易于注射，體內(nèi)保留時(shí)間長，填充效果好，而且仍能保持生物相容性，本發(fā)明能夠高效快速的制備復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架，方法簡單，使用方便，成本低。
【附圖說明】
[0011 ]下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方法對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0012]圖1為本發(fā)明一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法的結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0013]下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步解說。
[0014]實(shí)施例一
本實(shí)施例提出了一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，包括以下步驟:
S1:準(zhǔn)備重量份為5份的透明質(zhì)酸鈉和20份的去離子水，將透明質(zhì)酸鈉和去離子水混合，在10°C下反應(yīng)llh，制得透明質(zhì)酸鈉溶液；
S2:準(zhǔn)備重量份為6份的PLGA納米顆粒和4份的偶氮二異丁脒鹽酸鹽，將PLGA納米顆粒加入透明質(zhì)酸鈉溶液中，在15°C下反應(yīng)lOmin，然后加入偶氮二異丁脒鹽酸鹽，在20°C下反應(yīng)20min，制得透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液；
S3:將透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液注入至待修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷處，然后經(jīng)紫外點(diǎn)光源照射，得到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架。
[0015]實(shí)施例二
本實(shí)施例提出了一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，包括以下步驟:
S1:準(zhǔn)備重量份為6份的透明質(zhì)酸鈉和23份的去離子水，將透明質(zhì)酸鈉和去離子水混合，在13°C下反應(yīng)12h，制得透明質(zhì)酸鈉溶液；
S2:準(zhǔn)備重量份為7份的PLGA納米顆粒和5份的偶氮二異丁脒鹽酸鹽，將PLGA納米顆粒加入透明質(zhì)酸鈉溶液中，在18°C下反應(yīng)13min，然后加入偶氮二異丁脒鹽酸鹽，在23°C下反應(yīng)25min，制得透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液；
S3:將透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液注入至待修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷處，然后經(jīng)紫外點(diǎn)光源照射，得到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架。
[0016]實(shí)施例三
本實(shí)施例提出了一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，包括以下步驟:
S1:準(zhǔn)備重量份為8份的透明質(zhì)酸鈉和25份的去離子水，將透明質(zhì)酸鈉和去離子水混合，在15°C下反應(yīng)14h，制得透明質(zhì)酸鈉溶液；
S2:準(zhǔn)備重量份為9份的PLGA納米顆粒和7份的偶氮二異丁脒鹽酸鹽，將PLGA納米顆粒加入透明質(zhì)酸鈉溶液中，在20°C下反應(yīng)15min，然后加入偶氮二異丁脒鹽酸鹽，在25°C下反應(yīng)30min，制得透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液；
S3:將透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液注入至待修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷處，然后經(jīng)紫外點(diǎn)光源照射，得到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架。
[0017]以上所述，僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: S1:準(zhǔn)備重量份為5-8份的透明質(zhì)酸鈉和20-25份的去離子水，將透明質(zhì)酸鈉和去離子水混合，在10-15 °C下反應(yīng)11 -14h，制得透明質(zhì)酸鈉溶液； S2:準(zhǔn)備重量份為6-9份的PLGA納米顆粒和4-7份的偶氮二異丁脒鹽酸鹽，將PLGA納米顆粒加入透明質(zhì)酸鈉溶液中，在15-20°C下反應(yīng)10-15min，然后加入偶氮二異丁脒鹽酸鹽，在20-25 °C下反應(yīng)20-30min，制得透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液； S3:將透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液注入至待修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷處，然后經(jīng)紫外點(diǎn)光源照射，得到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，其特征在于，所述SI中，準(zhǔn)備重量份為6-7份的透明質(zhì)酸鈉和21-24份的去離子水，將透明質(zhì)酸鈉和去離子水混合，在11 -14 °C下反應(yīng)12-13h，制得透明質(zhì)酸鈉溶液。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，其特征在于，所述S2中，準(zhǔn)備重量份為7-8份的PLGA納米顆粒和5-6份的偶氮二異丁脒鹽酸鹽，將PLGA納米顆粒加入透明質(zhì)酸鈉溶液中，在16-19°C下反應(yīng)ll-14min，然后加入偶氮二異丁脒鹽酸鹽，在21-24 °C下反應(yīng)22-28min，制得透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架的制備方法，其特征在于，所述S3中，將透明質(zhì)酸鈉凝膠復(fù)合物溶液填充至待修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷處，然后經(jīng)紫外點(diǎn)光源照射，得到修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨損傷的凝膠支架。
【文檔編號】A61L27/52GK106075574SQ201610577602
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年7月21日 公開號201610577602.2, CN 106075574 A, CN 106075574A, CN 201610577602, CN-A-106075574, CN106075574 A, CN106075574A, CN201610577602, CN201610577602.2
【發(fā)明人】王雅
【申請人】王雅