一種α-淀粉酶抑制劑及其提取方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種α-淀粉酶抑制劑及其提取方法與應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 阻止產(chǎn)生熱量來源的淀粉的消化吸收，對肥胖和相關(guān)疾病將有很大改善。a_淀粉 酶可對淀粉的進(jìn)行水解，因此，研究開發(fā)對a-淀粉酶具有抑制作用的物質(zhì)，是一種預(yù)防和 治療肥胖的有效途徑?，F(xiàn)在市場上占有率較高的減肥藥物主要是一些化學(xué)類藥物，但化學(xué) 類藥物通常伴隨著一定的副作用。而天然產(chǎn)物具有高效、低毒、無副作用等優(yōu)勢。部分植物 多酚類化合物能抑制淀粉酶，阻礙機(jī)體對淀粉的消化吸收，減少熱量的攝入，從而促進(jìn)減輕 體重，在很大程度上減少碳水化合物的攝入量，因此淀粉酶抑制劑具有幫助減肥和保持體 重的藥理潛力。此外，淀粉酶抑制劑將降低碳水化合物的攝入，影響了碳水化合物的吸收， 從而抑制餐后血糖升高，降低餐后血糖對胰島素的影響。這種調(diào)制機(jī)制可被用于糖尿病的 臨床治療。抑制a-淀粉酶還可增加回腸未消化的碳水化合物的積累而延遲胃排空。因此， 抑制淀粉酶還可以調(diào)節(jié)胃腸道功能和腸肽釋放，加強(qiáng)飽腹感，減少食物攝入量。由于植物來 源的天然多酚類化合物具有結(jié)構(gòu)多樣性、低毒性、來源廣泛等特點(diǎn)，因此從植物中篩選新的 副作用小的α-淀粉酶抑制劑一直是研究熱點(diǎn)。
[0003] 因此，現(xiàn)有技術(shù)還有待于改進(jìn)和發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 鑒于上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種α-淀粉酶抑制劑及其提 取方法與應(yīng)用，旨在解決現(xiàn)有減肥藥物主要是一些化學(xué)類藥物，而化學(xué)類藥物有一定副作 用的問題。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下： 一種α-淀粉酶抑制劑，其中，所述α-淀粉酶抑制劑為苯丙素苷，所述苯丙素苷的結(jié) 構(gòu)通式如下：
其中，當(dāng)R2=H時(shí)，1^=1?3=0!1;當(dāng)R2=rha時(shí)，1^=1?3=0!1 ;當(dāng)R2=rha時(shí)，1^=1?3=!1;當(dāng)R2=H時(shí)，R!=OH，R3=H;當(dāng)R2=H時(shí)，R!=R3=H。
[0006] 所述的α-淀粉酶抑制劑，其中，所述苯丙素苷來源于紫莖女貞干葉。
[0007] -種如上所述的α-淀粉酶抑制劑的提取方法，其中，包括步驟：取紫莖女貞干 葉，搗碎，熱回流提取，靜置過濾，減壓濃縮，得提取物，反復(fù)操作2~3次，將所得上清液合 并，合并的上清液經(jīng)Diaion柱層析分離，得到苯丙素苷。
[0008] 所述的α-淀粉酶抑制劑的提取方法，其中，所述熱回流提取的溶劑為乙醇。
[0009] 所述的α-淀粉酶抑制劑的提取方法，其中，反復(fù)操作3次。
[0010] -種如上所述的α-淀粉酶抑制劑的應(yīng)用，其中，將所述苯丙素苷用于抑制α-淀 粉酶的活性。
[0011] 所述的α-淀粉酶抑制劑的應(yīng)用，其中，所述苯丙素苷用于抑制α-淀粉酶時(shí)，所 述苯丙素苷的半抑制濃度為1.〇2mg/mL。
[0012] 有益效果：本發(fā)明上述結(jié)構(gòu)的苯丙素苷是一種天然化合物，而非化學(xué)合成物。所述 苯丙素苷對α-淀粉酶有顯著的抑制效果，從而有效抑制α-淀粉酶對淀粉的分解催化作 用，阻礙機(jī)體對淀粉的消化吸收、減少熱量的攝入，從而促進(jìn)減輕體重。與其他減肥化學(xué)藥 物不同，本發(fā)明所述苯丙素苷不作用于機(jī)體的中樞神經(jīng)，副作用小。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 本發(fā)明提供一種α-淀粉酶抑制劑及其提取方法與應(yīng)用，為使本發(fā)明的目的、技 術(shù)方案及效果更加清楚、明確，以下對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具 體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0014] 本發(fā)明提供一種α-淀粉酶抑制劑，其中，所述α-淀粉酶抑制劑為苯丙素苷，所 述苯丙素苷的結(jié)構(gòu)通式如下：
其中，當(dāng)R2=H時(shí)，1^=1?3=0!1;當(dāng)R2=rha時(shí)，1^=1?3=0!1 ;當(dāng)R2=rha時(shí)，1^=1?3=!1;當(dāng)R2=H時(shí)，R!= 0H，R3=H;當(dāng)R2=H時(shí)，R!=R3=H。
[0015] 具體地，當(dāng)R2=H時(shí)，1^=1?3=0!1，苯丙素苷為Acteoside;當(dāng)R2=rha時(shí)，1^=1?3=0!1，苯 丙素苷為1^8即11印111'〇81(16 4;當(dāng)1?2=1'113時(shí)，1?1=1?3=!1，苯丙素苷為1^8即11印111'〇81(16 13;當(dāng) R2=H時(shí)，R!= 0H，R3=H，苯丙素苷為LigupurpurosideC;當(dāng)R2=H時(shí)，R!=R3=H，苯丙素苷為 Osmanthuside。
[0016] 本發(fā)明上述結(jié)構(gòu)的苯丙素苷是一種天然化合物，而非化學(xué)合成物。所述苯丙素苷 對α-淀粉酶有顯著的抑制效果，從而有效抑制α-淀粉酶對淀粉的分解催化作用，阻礙機(jī) 體對淀粉的消化吸收、減少熱量的攝入，從而促進(jìn)減輕體重。與其他減肥化學(xué)藥物不同，本 發(fā)明所述苯丙素苷不作用于機(jī)體的中樞神經(jīng)，副作用小。
[0017] 植物中多酚類化合物可作為獲取α-淀粉酶抑制劑的重要來源，將獲取的α-淀 粉酶抑制劑用于抑制α-淀粉酶的活性，減少機(jī)體對淀粉的消化吸收，從而減輕體重。且植 物來源的天然多酚類化合物具有結(jié)構(gòu)多樣性、低毒性、來源廣泛等特點(diǎn)，因此，本發(fā)明從植 物中篩選新的副作用小的α-淀粉酶抑制劑。優(yōu)選地，本發(fā)明從小葉苦丁茶中提取α-淀粉 酶抑制劑，小葉苦丁茶是一種保健茶飲料，具有清熱解暑、消渴、化食解膩，降壓減肥和活血 化瘀等營養(yǎng)保健功效，為木樨科屬紫莖女貞（Ligustrumpurpurascens)的植物葉。因此， 本發(fā)明從紫莖女貞干葉中提取α-淀粉酶抑制劑，即本發(fā)明的苯丙素苷來源于紫莖女貞干 葉，紫莖女貞干葉中提取的上述苯丙素苷是一種天然化合物，而非化學(xué)合成物。
[0018] 基于上述α-淀粉酶抑制劑，本發(fā)明還提供一種如上任一所述的α-淀粉酶抑制 劑的提取方法，其中，包括步驟： 取紫莖女貞干葉，搗碎，熱回流提取，靜置過濾，減壓濃縮，得提取物，反復(fù)操作2~3次， 將所得上清液合并，合并的上清液經(jīng)Diaion柱層析分離，得到苯丙素苷。
[0019] 優(yōu)選地，所述熱回流提取的溶劑可以為乙醇，也可以為甲醇、丙酮等。本發(fā)明靜置 過濾和減壓濃縮過程反復(fù)操作2~3次，優(yōu)選地，反復(fù)操作3次，以提高提取效率。
[0020] 基于上述α-淀粉酶抑制劑，本發(fā)明還提供一種如上所述的α-淀粉酶抑制劑的 應(yīng)用，其中，將所述苯丙素苷用于抑制α-淀粉酶的活性。本發(fā)明的苯丙素苷是一種非競 爭性抑制劑，能與α-淀粉酶非共價(jià)結(jié)合，導(dǎo)致酶蛋白構(gòu)象發(fā)生變化，從而影響α-淀粉酶 的活性。優(yōu)選地，苯丙素苷的半抑制濃度（IC5。）為1.02mg/mL，所述半抑制濃度是指被測量 的α-淀粉酶抑制劑在抑制50%α-淀粉酶時(shí)所對應(yīng)的濃度，所述半抑制濃度也稱為半抑制 率。
[0021] 下面以具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。 實(shí)施例
[0022] (1)苯丙素苷的提取 取紫莖女貞干葉，搗碎，乙醇熱回流提取，靜置過濾，減壓濃縮，得提取物，反復(fù)操作3 次，將所得上清液合并，合并的上清液經(jīng)Diaion柱層析分離，得到苯丙素苷。
[0023] (2)酶活力的測定 α-淀粉酶酶活力測定采用Bernfeld法，以可溶性淀粉作底物，取濃度為2mg/mL的a_淀粉酶溶液0. 25mL在37°C水浴孵化lOmin后，加入質(zhì)量濃度為1. 5%可溶性淀粉0. 5mL， 37°C反應(yīng)5min后加入lmL3, 5-二硝基水楊酸（DNS試劑），沸水浴加熱lOmin，迅速冷卻， 在520nm波長測定吸光度值。
[0024] 抑制率和半抑制率IC5。:在消化酶反應(yīng)體系中加入不同濃度的苯丙素苷，按照酶 活力測定方法，測定抑制率和半抑制率； 抑制率％ = (A52。對照-A52。苯丙素苷）/A52。對照XIOOo
[0025]A52。為520nm波長下的吸光度值。
[0026] 結(jié)果表明：苯丙素苷對α-淀粉酶有顯著的抑制效果，在苯丙素苷濃度為3mg/mL 時(shí)對α-淀粉酶的抑制率達(dá)到72%。，半抑制濃度為1. 02mg/mL。
[0027] 綜上所述，本發(fā)明提供的一種α-淀粉酶抑制劑及其提取方法與應(yīng)用，本發(fā)明所 述苯丙素苷是一種天然化合物，而非化學(xué)合成物。所述苯丙素苷對α-淀粉酶有顯著的抑 制效果，從而有效抑制腸道中α-淀粉酶對淀粉的分解催化作用，達(dá)到減少淀粉吸收、控制 和治療肥胖的目的。與其他減肥化學(xué)藥物不同，本發(fā)明所述苯丙素苷不作用于中樞神經(jīng)，副 作用小。
[0028] 應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明的應(yīng)用不限于上述的舉例，對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說，可 以根據(jù)上述說明加以改進(jìn)或變換，所有這些改進(jìn)和變換都應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的保 護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種a-淀粉酶抑制劑，其特征在于，所述a-淀粉酶抑制劑為苯丙素巧，所述苯丙 素巧的結(jié)構(gòu)通式如下：其中，當(dāng)Rz=H時(shí)，Ri=Rs=OH;當(dāng)R2=rha時(shí)，Ri=Rs=OH;當(dāng)R2=rha時(shí)，Ri=Rs=H;當(dāng)Rz=H時(shí)，Ri= 0H，Rs=H;當(dāng)Rz=H時(shí)，Ri=Rs=Hd2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的a-淀粉酶抑制劑，其特征在于，所述苯丙素巧來源于紫莖女 貞干葉。3. -種如權(quán)利要求1所述的a-淀粉酶抑制劑的提取方法，其特征在于，包括步驟：取 紫莖女貞干葉，搗碎，熱回流提取，靜置過濾，減壓濃縮，得提取物，反復(fù)操作2~3次，將所得 上清液合并，合并的上清液經(jīng)Diaion柱層析分離，得到苯丙素巧。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的a-淀粉酶抑制劑的提取方法，其特征在于，所述熱回流提取 的溶劑為乙醇。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的a-淀粉酶抑制劑的提取方法，其特征在于，反復(fù)操作3次。6. -種如權(quán)利要求1所述的a-淀粉酶抑制劑的應(yīng)用，其特征在于，將所述苯丙素巧用 于抑制a-淀粉酶的活性。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的a-淀粉酶抑制劑的應(yīng)用，其特征在于，所述苯丙素巧用于抑 制a-淀粉酶的活性時(shí)，所述苯丙素巧的半抑制濃度為1. 02mg/mL。
【專利摘要】本發(fā)明公開一種α-淀粉酶抑制劑及其提取方法與應(yīng)用，所述α-淀粉酶抑制劑為苯丙素苷，所述苯丙素苷的結(jié)構(gòu)通式如下：其中，當(dāng)R2=H時(shí)，R1=R3=OH；當(dāng)R2=rha時(shí)，R1=R3=OH；當(dāng)R2=rha時(shí)，R1=R3=H；當(dāng)R2=H時(shí)，R1=OH，R3=H；當(dāng)R2=H時(shí)，R1=R3=H。本發(fā)明上述結(jié)構(gòu)的苯丙素苷是一種天然化合物，而非化學(xué)合成物。所述苯丙素苷對α-淀粉酶有顯著的抑制效果，從而有效抑制α-淀粉酶對淀粉的分解催化作用，阻礙機(jī)體對淀粉的消化吸收、減少熱量的攝入，從而促進(jìn)減輕體重。與其他減肥化學(xué)藥物不同，本發(fā)明所述苯丙素苷不作用于機(jī)體的中樞神經(jīng)，副作用小。
【IPC分類】C07H15/18, A61P3/04, C07H1/08, A61K31/7032
【公開號】CN105362281
【申請?zhí)枴緾N201510704829
【發(fā)明人】吳序櫟, 賀震旦, 吳海強(qiáng)
【申請人】深圳大學(xué)
【公開日】2016年3月2日
【申請日】2015年10月27日