一種錦雞兒屬植物樹皮超臨界提取物、提取方法及用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種錦雞兒屬植物樹皮超臨界提取物、提取方法及用途，屬于醫(yī)藥領(lǐng) 域。
【背景技術(shù)】
[0002] 錦雞兒屬（Caragana Fabr.)植物系落葉灌木，是歐-亞草原植物亞區(qū)的典型植 被，在我國主要分布在黃河流域以北干燥地區(qū)，一般將其栽培種通稱檸條。目前，檸條是我 國西北、華北、東北西部水土保持和固沙造林的重要樹種之一，也是一種良好的飼草飼料。
[0003] 關(guān)于錦雞兒屬植物的藥用價(jià)值，中醫(yī)認(rèn)為該屬植物具有滋陰養(yǎng)血、健脾、促進(jìn)血液 循環(huán)等功效，常用其根或花入藥，煮成湯劑用于治療血管性高血壓、風(fēng)濕、關(guān)節(jié)炎和婦科疾 ?。ㄙZ敏如等，中國民族藥志要[M]，北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2005 :131-132)。現(xiàn)代研 究表明，該屬植物中存在寡聚二苯乙烯、三萜、黃酮等類成分，顯示出抗炎、抗腫瘤、抗病 毒、降壓等多種藥理活性（劉紅霞等，錦雞兒屬植物化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]，中 國藥學(xué)雜志，2004, 39 :327-330)。
[0004] 然而，目前還鮮有對(duì)該屬植物樹皮藥理作用進(jìn)行研究的報(bào)道。楊中鐸等從甘蒙 錦雞兒的樹皮中分離得到7個(gè)化合物，并確定了其中具有乙酰膽堿酯酶抑制活性的成份 (甘蒙錦雞兒中乙酰膽堿酯酶抑制劑的分離及結(jié)構(gòu)鑒定[J]，蘭州理工大學(xué)學(xué)報(bào)，2015,41 : 78-80)，其采用的提取方法為傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑萃取法，耗時(shí)較長，需使用氯仿等有毒溶劑。
[0005] 梓條錦雞兒（C. korshinskii Kom.)是錦雞兒屬的一種多年生落葉灌木，目前對(duì)其 進(jìn)行的研究主要集中在生理生態(tài)作用、飼料開發(fā)利用、能源等方面，而藥理作用方面的研究 較少，迄今尚未見有關(guān)于該植物樹皮提取物的公開報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明提供了一種錦雞兒屬植物樹皮提取物，以及該提取物在制備抗真菌藥物中 的用途。本發(fā)明還提供了一種采用超臨界C02萃取法提取錦雞兒屬植物樹皮的方法。
[0007] 本發(fā)明提供了一種錦雞兒屬植物樹皮提取物，它是由錦雞兒屬（Caragana Fabr.) 植物樹皮為原料提取制備而成，提取物中包含重量百分比為1. 91~2. 42%的β -谷甾醇。
[0008] 進(jìn)一步的，所述的提取物包含重量百分比為2. 13%的β-谷甾醇。
[0009] 優(yōu)選的，所述的錦雞兒屬植物為梓條錦雞兒（C. korshinskii Kom.)、小葉錦雞兒 (C.microphylla Lam.)或紅花錦雞兒（C. rosea Turcz·)。
[0010] 進(jìn)一步優(yōu)選的，所述的錦雞兒屬植物為梓條錦雞兒（C. korshinskii Kom.)。
[0011] 本發(fā)明提供了一種所述提取物的制備方法，它包括如下步驟：
[0012] a、取錦雞兒屬植物的新鮮或/和干燥樹皮，粉碎；
[0013] b、置于超臨界0)2萃取裝置中提取，制備得到錦雞兒屬植物樹皮提取物。
[0014] 進(jìn)一步的，所述超臨界C02萃取的條件為：壓力20-35MPa，溫度35-60°C，提取2-6 小時(shí)。
[0015] 優(yōu)選的，所述超臨界C02萃取的條件為：壓力25MPa，溫度50°C，提取2-4小時(shí)。
[0016] 本發(fā)明提供了所述提取物在制備抗真菌藥物中的用途。
[0017] 進(jìn)一步的，所述的藥物是抗須癬毛癬菌的藥物。
[0018] 本發(fā)明還提供了一種抗真菌藥物組合物，其特征是：它是由所述的提取物為活性 成份，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成份制備而成的制劑。
[0019] 進(jìn)一步的，所述的制劑是外用制劑、口服制劑或注射制劑。
[0020] 本發(fā)明提供了一種錦雞兒屬植物樹皮提取物，以及該提取物在制備抗真菌藥物中 的用途，擴(kuò)大了錦雞兒屬植物的資源利用范圍，避免了資源浪費(fèi)。藥效實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明提取 物抗真菌作用顯著，具有潛在的臨床使用價(jià)值。本發(fā)明還提供了一種采用超臨界C02萃取 法提取錦雞兒屬植物樹皮的方法，克服了傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法耗時(shí)較長、需使用有毒溶 劑等問題。
[0021] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0022] 以下通過實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說明】
[0023] 圖1本發(fā)明提取物GC-MS分析結(jié)果譜圖
[0024] 圖2本發(fā)明提取物紅外光譜圖
[0025] 圖3本發(fā)明提取物抑菌圈圖
【具體實(shí)施方式】
[0026] 本發(fā)明【具體實(shí)施方式】中使用的原料、設(shè)備均為已知產(chǎn)品，通過購買市售產(chǎn)品獲得。
[0027] 實(shí)施例1本發(fā)明提取物的制備
[0028] (1)取檸條錦雞兒鮮樹皮剪碎、稱重2. 43kg、裝料、密封；
[0029] (2)設(shè)定超臨界萃取條件：萃取壓力25MPa，萃取溫度50°C，萃取時(shí)間3h ; (3)收 集提取物52. 8g。
[0030] 實(shí)施例2本發(fā)明提取物的檢測(cè)
[0031] 樣品：〇.〇68g本發(fā)明提取物，用正己烷溶解至5ml，過濾進(jìn)樣（有部分樣品不溶 解）
[0032] 儀器及檢測(cè)條件：

[0040] GC-MS分析結(jié)果：見圖1。通過GC-MS數(shù)據(jù)庫譜圖比對(duì)，確認(rèn)保留時(shí)間為56. 934min 處為β-谷留醇信號(hào)峰，其含量百分比為2. 13%。
[0041] 以下通過藥效實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明的有益效果。
[0042] 試驗(yàn)例1本發(fā)明提取物的抗菌實(shí)驗(yàn)
[0043] 以下是將實(shí)施例1制備的提取物進(jìn)行藥效試驗(yàn)，具體如下：
[0044] (1)活性實(shí)驗(yàn)一一抑菌圈
[0045] SDA培養(yǎng)基：蛋白胨10g，葡萄糖20g，瓊脂18g，純水1L。
[0046] 菌種活化：將配制的SDA培養(yǎng)基倒斜面，用接種針挑取適量須癬毛癬菌菌絲接種 于斜面上，33°C培養(yǎng)3-5天，備用。
[0047] 抑菌圈：
[0048] ①配置SDA培養(yǎng)基，121°C滅菌30min，倒平板備用；
[0049] ②取活化的菌種用純水配制濃度107~10 8個(gè)/mL的菌懸液；
[0050] ③用滅菌的棉簽蘸取菌懸液，均勻涂抹于備好的平板上，每個(gè)平板涂抹3次；
[0051] 分別取適量本發(fā)明提取物直接置于涂抹菌懸液的平板中央，放在33°C的條件下培 養(yǎng)4~5天，觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，見圖3。
[0052] (2) MIC 測(cè)定
[0053] SD培養(yǎng)基：蛋白胨10g，葡萄糖20g，純水1L。
[0054] SDA培養(yǎng)基配制方法同（1)。
[0055] 菌種活化：將配制的SDA培養(yǎng)基倒斜面，用接種針挑取適量須癬毛癬菌菌絲接種 于斜面上，33°C培養(yǎng)3-5天，備用。
[0056] MIC 測(cè)定：
[0057] ①配置SD培養(yǎng)基，121°C滅菌30min，備用；
[0058] ②取活化的菌種用純水配制濃度107~10 8個(gè)/mL的菌懸液；
[0059] ③將本發(fā)明提取物用吐溫80溶解配成一定濃度的母液，然后用滅菌的SD培養(yǎng)基 將其分別稀釋。取24支洗凈滅菌的試管，每個(gè)濃度4個(gè)平行，每根試管分別取3. 8mL上述 含提取物的培養(yǎng)基，再加入200 μ L菌懸液，使混合液中提取物的最終濃度分別為1024 μ g/ mL、512 μ g/mL、256 μ g/mL、128 μ g/mL、64 μ g/mL。另設(shè)一組生長對(duì)照直接取 3. 8mL SD 培養(yǎng) 基，再加入200 μ L菌懸液。置于30°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5~7天，通過測(cè)定其生物量來確定 MIC值。結(jié)果見表1。
[0060] 表1本發(fā)明提取物不同濃度下的抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0062] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明：本發(fā)明提取物具有較好的抗真菌活性；當(dāng)濃度為256 μ g/ml時(shí)，抑 制真菌生長率可達(dá)到50%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種錦雞兒屬植物樹皮提取物，其特征是：它是由錦雞兒屬（Caragana Fabr.)植物 樹皮為原料提取制備而成，提取物中包含重量百分比為1.91%~2.42%的(6-谷甾醇。2. 如權(quán)利要求1所述的提取物，其特征是：包含重量百分比為2. 13%的0 -谷甾醇。3. 如權(quán)利要求1或2所述的提取物，其特征是：所述的錦雞兒屬植物為檸條錦雞 兒（C.korshinskii Kom.)、小葉錦雞兒（C.microphylla Lam.)或紅花錦雞兒（C.rosea Turcz.)〇4. 一種權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的提取物的制備方法，其特征是：包括如下步驟： a、 取錦雞兒屬植物的新鮮或/和干燥樹皮，粉碎； b、 置于超臨界0)2萃取裝置中提取，制備得到錦雞兒屬植物樹皮提取物。5. 如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征是：所述超臨界CO 2萃取的條件為：壓力 20-35MPa，溫度 35-60°C，提取 2-4 小時(shí)。6. 如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征是：所述超臨界CO 2萃取的條件為：壓力 25MPa，溫度50°C，提取3小時(shí)。7. 權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的提取物在制備抗真菌藥物中的用途。8. 如權(quán)利要求7所述的用途，其特征是：所述的藥物是抗須癬毛癬菌的藥物。9. 一種抗真菌藥物組合物，其特征是：它是由權(quán)利要求1-4任意一項(xiàng)所述的提取物為 活性成份，加入藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成份制備而成的制劑。10. 如權(quán)利要求9所述的藥物組合物，其特征是：所述的制劑是外用制劑、口服制劑或 注射制劑。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種錦雞兒屬植物樹皮提取物，它是由錦雞兒屬(Caragana？Fabr.)植物樹皮為原料提取制備而成，提取物中包含重量百分比為1.91％～2.42％的β-谷甾醇。藥效實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明提取物抗真菌作用顯著，具有潛在的臨床使用價(jià)值。本發(fā)明還提供了一種采用超臨界CO2萃取法提取錦雞兒屬植物樹皮的方法，克服了傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法耗時(shí)較長、需使用有毒溶劑等問題。
【IPC分類】A61K36/48, A61K129/00, A61P31/10
【公開號(hào)】CN105232614
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510807840
【發(fā)明人】白波, 曾智, 王小艷, 索有瑞, 徐恒
【申請(qǐng)人】中國科學(xué)院西北高原生物研究所
【公開日】2016年1月13日
【申請(qǐng)日】2015年11月19日