專利名稱：腎康注射液及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療慢性腎功能衰竭的腎康注射液及其制備工藝。
目前用中藥治療慢性腎功能衰竭多是采用口服用藥，其不足之處在于吸收緩慢，生物利用度低，療程長，療效差，尤其對(duì)腎功能損害中度以上療效更差，且胃腸反應(yīng)較大，不宜長期應(yīng)用。
本發(fā)明的目的在于提供一種治療慢性腎功能衰竭的腎康注射液及其制備工藝，它能直接用于靜脈注射，作用迅速，生物利用度高，療程短，療效好，尤其對(duì)腎功能損害中度以上的病人有較好效果。
本發(fā)明由大黃、丹參、黃芪、紅花提取制成的注射液，其配方用量是大黃70-150g、丹參60-120g、黃芪150-280g、紅花80-150g。制備時(shí)，先將大黃、丹參按配方量煎煮→一次醇沉→除鞣→二次醇沉→三次醇沉→稀釋，再將黃芪、紅花按配方量煎煮→一次醇沉→二次醇沉→稀釋，合并以上二組稀釋液，經(jīng)精濾→分裝→滅菌→質(zhì)檢→包裝而成。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于藥物直接通過靜脈注射，作用迅速，生物利用度高，療程短，療效好，具有益氣固本，化瘀泄?jié)嶂π?，適用于慢性腎功能衰竭，尤其對(duì)腎功能中度以上損害有較好效果。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究表明高劑量(50％的腎康注射液0.8ml/100g)、中劑量(25％的腎康注射液0.8ml/100g)的腎康注射液可以明顯降低慢性腎功能衰竭(CRF)大鼠和血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平，減輕進(jìn)行性加重的氮質(zhì)血癥，升高血紅蛋白(Hb)，改善貧血，對(duì)腺嘌呤CRF大鼠尚可提高白蛋白(ALB)水平，使腎臟肥大減輕，腎系數(shù)明顯減小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果詳見下表1-5。
表1 腎康注射液對(duì)腺嘌呤所致CRF大鼠血清尿素氮的影響劑量 BUN(mmol/L，X±SD)組別(g/kg) 治療前 治療1W 治療3W 治療5W正常 - 6.8±0.5 7.2±0.6 7.0±1.06.9±0.8(10)(10) (10)(10)模型 - 19.8±4.0ΔΔΔ25.2±4.5ΔΔΔ31.3±5.1ΔΔΔ42.2±6.0ΔΔΔ(12)(12) (12)(12)腎康液4 19.4±3.823.8±4.1 25.1±6.0*33.2±7.4**(12)(12) (12)(12)腎康液2 19.8±4.322.7±3.8 26.2±6.2*35.6±8.0*(12)(12) (12)(12)腎康液1 20.0±3.524.1±4.3 28.7±7.1 38.1±8.1(12)(12) (12)(12)地塞米松 0.02 19.7±3.222.1±3.7 25.4±8.1*35.1±7.0*(mg/kg)(12)(12) (11)(10)模型組與正常組比較△△△P＜0.01與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01表2 腎康注射液對(duì)腺嘌呤所致CRF大鼠血清肌酐的影響劑量Cr(μmol/L，X±SD)組別(g/kg) 洽療前 治療1W 治療3W 治療5W正常 - 54.3±9.1 55.3±5.8 61.3±8.3 53.0±8.4(10) (10) (10) (10)模型 - 152.5±35.1ΔΔΔ181.9±35.2ΔΔΔ212.0±48.2ΔΔΔ229.0±38.1ΔΔΔ(12) (12) (12) (12)腎康液4 156.1±36.6 171.9±38.7 171.3±40.1*190.0±40.7*(12) (12) (12) (12)腎康液2 158.7±40.5 175.8±36.1 188.4±39.3 195.5±40.5*(12) (12) (12) (12)腎康液1 160.9±36.9 175.1±43.7 196.8±47.9 216.1±45.6(12) (12) (12) (12)地塞米松 0.02 149.8±35.6 162.6±38.1 168.1±46.2*185.6±35.9*(mg/kg) (12) (12) (11) (10)模型組與正常組比較△△△P＜0.001與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01
表1、表2結(jié)果表明大鼠灌服腺嘌呤兩周后，血BUN、Cr已經(jīng)升高，顯著高于正常大鼠(p＜0.001)，表明CRF已形成，分組并開始進(jìn)行治療。繼續(xù)給大鼠灌服腺嘌呤，其BUN、Cr繼續(xù)上升，至造型7周，模型組大鼠BUN、Cr分別上升至正常大鼠的6.1倍與4.3倍，表明該模型呈現(xiàn)進(jìn)行性加重的氮質(zhì)血癥，給予腎康注射液尾靜脈注射治療的大鼠，其血BUN、Cr隨著模型組大鼠BUN、Cr的升高亦逐漸升高，但上升速度與幅度要低于模型組，治療3周與5周時(shí)，高、中劑量組的BUN、Cr水平明顯低于模型組(p＜0.05或p＜0.01)，表明腎康注射液具有降低腺嘌呤CRF大鼠的血BUN、Cr，改善氮質(zhì)血癥的作用。
表3腎康注射液對(duì)腺嘌呤所致CRF大鼠血紅蛋白的影響劑量 Hb(g/L，X±SD)組別(g/kg) 治療前 治療3W治療5W正常- 157.1±6.6 155.0±5.3 161.0±13.5(10) (10)(10)模型- 152.3±8.3 139.5±10.0ΔΔΔ123.1±15.4ΔΔΔ(12) (12)(12)腎康液 4 151.5±8.3 144.3±8.0 140.5±15.3*(12) (12)(12)腎康液 2 153.8±8.7 145.5±10.1137.8±14.5*(12) (12)(12)腎康液 1 152.1±9.4 136.1±10.1133.1±14.6(12) (12)(12)地塞米松0.02153.2±10.1 136.4±16.4136.8±19.0(mg/kg)(12) (11)(10)模型組與正常組比較△△△P＜0.001與模型組比較*P＜0.05由表3可見大鼠灌服腺嘌呤兩周后，Hb水平已有所下降，隨著給予腺嘌呤日數(shù)的增加，Hb亦隨之降低，于造型5周與7周時(shí)，模型組大鼠Hb水平顯著低于正常大鼠(p＜0.001)。腎康注射液治療組大鼠Hb雖然也在逐漸降低，但下降速度較慢，高、中劑量組在治療5周時(shí)，其Hb水平顯著高于同期模型組(p＜0.05)。表明較大劑量的腎康注射液可以減輕腺嘌呤CRF大鼠的貧血癥狀。
表4 腎康注射液對(duì)腺嘌呤所致CRF大鼠血清白蛋白的影響劑量 ALB(g/L，X±SD)組別(g/kg) 治療前治療3W 治療5W正常 - 42.3±2.8 42.0±3.1 41.6±3.0(10) (10) (10)模型 - 40.9±3.0 38.6±3.2Δ37.6±3.7Δ(12) (12)(12)腎康液 4 40.2±3.7 39.9±3.7 40.5±2.9*(12) (12) (12)腎康液 2 40.0±3.4 40.0±3.9 38.3±3.6(12) (12) (12)腎康液 1 39.7±3.4 39.5±3.7 37.8±3.5(12) (12) (12)模型組與正常組比較△P＜0.05與模型組比較*P＜0.05由表4可見模型組大鼠在造型5周與7周時(shí)，血清白蛋白明顯降低(與正常大鼠比較p＜0.05)，高劑量的腎康注射液可以改善CRF時(shí)的低蛋白血癥，治療5周時(shí)血清白蛋白水平顯著高于模型組(p＜0.05)。中、低劑量作用不明顯。
由表5可見口服腺嘌呤的大鼠存留右腎肥大，重量明顯增加，模型組的腎系數(shù)平均為正常的4.4倍。腎康注射液治療組大鼠的腎系數(shù)均要小于模型組，以高、中劑量組為顯著(p＜0.01與p＜0.05)，但仍然明顯高于正常組。靜注地塞米松可以減輕腺膘呤引起的腎臟長大，其腎系數(shù)明顯小于模型組。
表5 腎康注射液對(duì)腺嘌呤所致CRF大鼠腎系數(shù)的影響劑量 動(dòng)物數(shù) 腎系數(shù)(mg/100g體重，X+SD)組別(g/kg) (只)(右側(cè))正常- 10 352.5+35.4模型- 12 1551.8±171.6ΔΔΔ腎康液 4 12 1295.7±232.5ΔΔΔ**腎康液 2 12 1338.8±229.1ΔΔΔ*腎康液 1 12 1354.1±453.0ΔΔΔ地塞米松0.02(mg/kg)101322.7±204.8ΔΔΔ**與正常組比較△P＜0.001與模型組比較*P＜0.05，**＜0.01病理觀察表明腎康注射液能夠減輕腎小球過度肥大，抑制系膜細(xì)胞與系膜基質(zhì)增生，明顯降低腎小球的硬化率，減輕腎小管過度擴(kuò)張與上皮細(xì)胞的損傷，減輕間質(zhì)纖維化，促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞的修復(fù)和線粒體增生。
臨床研究表明腎康注射液對(duì)腎功能失代償期及尿毒癥期有良好效果，臨床觀察結(jié)果見表6(治療組用腎康注射液，對(duì)照組用腎安靜滴)。
表6 按病情程度分層兩組療效對(duì)比治療組 對(duì)照組分期 P例數(shù) 顯效 有效 無效 總有效率 例數(shù) 顯效 有效 無效 總有效率腎功能代償期7 4 3 0 100％ 31 2 0100％ ＞0.05腎功能失代償期 6210475 92％ 28 2 8 18 35.7％＜0.05尿毒癥期7313392171.2％ 48 1 1730 37.5％＜0.05兩組療效比較，除腎功能代償期，腎功能失代償期及尿毒癥期均以治療組為優(yōu)，P＜0.05。
綜上所述，腎康注射液可以減輕CRF大鼠代償腎單位的進(jìn)行性損傷和腎功能的進(jìn)行性減退，從而延緩CRF的進(jìn)程。臨床觀察對(duì)腎功能失代償期及尿毒癥期有良好效果。


圖1是本發(fā)明的選料組份方框圖；圖2是本發(fā)明的制備工藝流程方框圖。
圖中1是大黃，2是丹參，3是黃芪，4是紅花，5是煎煮A，6是一次醇沉A，7是除鞣，8是二次醇沉A，9是三次醇沉A，10是稀釋A，11是煎煮B，12是一次醇沉B，13是二次醇沉B，14是稀釋B，15是混合，16是精濾，17是分裝，18是滅菌，19是質(zhì)檢，20是包裝。
下面結(jié)合附圖以具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說明本發(fā)明的配方和用量是大黃(1)70-150g、丹參(2)60-120g、黃芪(3)150-280、紅花(4)80-150g；煎煮A(5)按配方量將精選的大黃(1)、丹參(2)用日常用水沖洗，再用蒸餾水沖淋，分別用蒸餾水7倍、7倍和6倍煎三次，沸浸后30分鐘濾過，合并濾液并濃縮至167ml，即為煎煮A(5)的濃縮液；一次醇沉A(6)將上煎煮A(5)的濃縮液加95％乙醇500ml，密閉放置一夜，濾至澄明，回收乙醇，揮盡醇至無醇味，即為一次醇沉A(6)提取液；除鞣(7)將一次醇沉A(6)提取液用蒸餾水稀釋至84ml，加4％的明膠液，充分?jǐn)嚢韬笕∩倭繙y鞣質(zhì)至無正反應(yīng)，即為除鞣液；二次醇沉A(8)將除鞣液加95％乙醇250ml，密閉放置一夜，濾至澄明，回收乙醇，揮盡醇至無醇味，即為二次醇沉A(8)提取液；三次醇沉A(9)將二次醇沉A(8)提取液用蒸餾水稀釋至41ml，冷藏，濾至澄明，加95％乙醇250ml，調(diào)PH7.5，密閉放置一夜，揮盡醇至無醇味，即為三次醇沉A(9)提取液；
稀釋A(10)將三次醇沉A(9)提取液用蒸餾水稀釋至84ml，冷藏，濾至澄明，即為稀釋A(10)液；煎煮B(11)按配方量將精選的黃芪(3)、紅花(4)用日常用水沖洗，再用蒸餾水沖淋，分別用蒸餾水8倍、8倍煎二次，沸浸后45分鐘濾過，合并濾液并濃縮至167ml，即為煎煮B(11)的濃縮液；一次醇沉B(12)將煎煮B(11)的濃縮液加95％乙醇500ml，密閉靜置一夜，濾至澄明，回收乙醇，揮盡醇至無醇味，用蒸餾水稀釋至84ml，冷藏，濾至澄明，即為一次醇沉B(12)提取液；二次醇沉B(13)將一次醇沉B(12)提取液加95％乙醇500ml，密閉放置一夜，濾至澄明，回收乙醇，揮盡醇至無醇味，即為二次醇沉B(13)提取液；稀釋B(14)將二次醇沉B(13)提取液用蒸餾水稀釋至84ml，冷藏，濾至澄明，即為稀釋B(14)液；混合(15)將上述稀釋A(10)液與稀釋B(14)液按1∶1混合，加入總量0.63活性碳，100℃流通蒸汽熱處理30分鐘，冷藏，濾至澄明；精濾(16)將混合(15)過濾液加注射用水稀釋至約50％濃度，用氫氧化鈉調(diào)PH7.5，加注射水至總量1000ml，通過0.45um微孔膜精濾；分裝(17)將經(jīng)精濾(16)后的液體分裝成20ml安瓿或100ml高溫瓶中；滅菌(18)將分裝(17)后的20ml安瓿或100ml高溫瓶于100℃流通蒸汽滅菌1小時(shí)；質(zhì)檢(19)將滅菌(18)后的20ml安瓿或100ml高溫瓶進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)；包裝(20)將經(jīng)質(zhì)檢(19)合格后的產(chǎn)品包裝即得成品。
權(quán)利要求
1.一種治療慢性腎功能衰竭的腎康注射液，其特征在于它是由下述原料配方和用量提取制成的注射液大黃(1)70-150g 丹參(2)60-120g 黃芪(3)150-280g 紅花(4)80-150g。
2.一種腎康注射液的制備工藝，其特征在于它是將大黃(1)、丹參(2)經(jīng)煎煮A(5)，即分別用蒸餾水7倍、7倍和6倍煎三次，沸浸后30分鐘濾過，合并濾液濃縮至167ml，經(jīng)一次醇沉A(6)、除鞣(7)、二次醇沉A(8)、三次醇沉A(9)、稀釋A(10)；再將黃芪(3)、紅花(4)經(jīng)煎煮B(11)，即分別用蒸餾水8倍、8倍煎二次，沸浸后45分鐘濾過，合并濾液濃縮至167ml，經(jīng)一次醇沉B(12)、二次醇沉B(13)、稀釋B(14)，然后將稀釋A(10)液與稀釋B(14)液按1∶1混合，再經(jīng)精濾(16)、分裝(17)、滅菌(18)、質(zhì)檢(19)、包裝(20)而成。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種腎康注射液及其制備工藝。它是先將丹參等藥煎煮，經(jīng)一次醇沉、除鞣、二次醇沉、三次醇沉、稀釋，再將黃芪等藥煎煮，經(jīng)一次醇沉、二次醇沉、稀釋，然后將二次稀釋液混合，經(jīng)精濾、分裝、滅菌、質(zhì)檢、包裝而成。適用于慢性腎功能衰竭，尤其對(duì)腎功能中度以上損害有較好效果，可降低血尿素氮、肌酐，延緩慢性腎功能衰竭的病程進(jìn)展。且有靜脈注射，作用迅速，生物利用度高，療程短，療效好等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61P13/00GK1146358SQ9611762
公開日1997年4月2日 申請(qǐng)日期1996年7月16日 優(yōu)先權(quán)日1996年7月16日
發(fā)明者葉傳蕙, 馮菊農(nóng), 易明娟, 徐萬薏, 王安娜, 楊永勝, 李明權(quán), 舒惠荃 申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院