本發(fā)明涉及一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體及制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、納米藥物遞送系統(tǒng)由于其獨特的物理化學(xué)特性和生物學(xué)特性，在腫瘤靶向治療中顯示出巨大潛力。外泌體作為一種天然的納米級囊泡，由細(xì)胞分泌產(chǎn)生，在細(xì)胞間通信中發(fā)揮重要作用。外泌體因其良好的生物相容性、靶向性和低免疫原性被認(rèn)為是理想的藥物載體。其中，植物源性外泌體具有來源豐富、制備簡單、免疫原性低等優(yōu)點，此外，植物來源的外泌體具有良好的口腔穩(wěn)定性，并能在體內(nèi)保持完整性。肝細(xì)胞癌是全球發(fā)病率和死亡率較高的惡性腫瘤，對于中晚期患者，阿霉素等化療藥物是主要的治療方式，但其全身毒性和藥物耐受性限制了療效。外泌體遞送系統(tǒng)可以提高化療藥物的靶向性，減少全身毒性。

2、甜葉菊是一種傳統(tǒng)藥用植物，其葉片富含多種生物活性成分，如黃酮、多酚和糖苷，具有抗氧化、抗炎和抗腫瘤活性。目前尚無研究探索甜葉菊外泌體作為藥物載體的研究，此外，植物來源的外泌體擁有與動物外泌體相似的結(jié)構(gòu)，來源廣發(fā)，價格便宜，含有多種天然藥效成分。所以，對中藥植物外泌體的研究及其重要。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種對于肝癌細(xì)胞具有良好的抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡功能的負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體及制備方法和應(yīng)用。

2、本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：

3、一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其特征是：在提取純化的甜葉菊外泌體表面負(fù)載有阿霉素。

4、負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體具有近球形結(jié)構(gòu)，甜葉菊外泌體的平均粒徑是241.40nm，負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體粒徑是176.16nm。

5、一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：包括以下步驟：s1：制備甜葉菊外泌體，新鮮甜葉菊葉片高速破壁獲得甜葉菊汁液，通過差速超速離心獲得甜葉菊外泌體；s2：甜葉菊外泌體純化，利用蔗糖濃度梯度法分離純化外泌體；s3：負(fù)載阿霉素，在pbs體系中，將外泌體混懸液與阿霉素共孵育，將混合體系超聲分散得到均質(zhì)溶液。

6、s1的具體方法：采集新鮮甜葉菊洗凈后高速破壁20分鐘，得到的甜葉菊汁液；再3000rpm離心30分鐘，去除沉渣收集上清10000rpm離心30分鐘，再次收集上清15000rpm離心1小時，收集沉淀物甜葉菊外泌體。

7、s2的具體方法：利用8%、30%、45%和60%的蔗糖濃度梯度法，15000rpm離心1小時純化外泌體，純化后的外泌體利用pbs緩沖液重懸，保存于-80℃。

8、s3的具體方法：在pbs體系中，將外泌體混懸液與阿霉素以1:3v/v共孵育4h，混合體系超聲循環(huán)6次，每次30s，每次30w，循環(huán)之間冷卻時間為2分鐘，最終得到甜葉菊外泌體負(fù)載阿霉素的均質(zhì)溶液。

9、一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體在制備治療耐阿霉素肝細(xì)胞癌的藥物中的應(yīng)用。

10、本發(fā)明中的甜葉菊外泌體含有多種生物活性化合物，包括4-羥基肉桂酸、兒茶酚和對苯二酚等多酚。這些化合物具有顯著的抗氧化和抗炎特性，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)；本發(fā)明的甜葉菊外泌體負(fù)載阿霉素，對于肝癌細(xì)胞具有良好的抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的功能，達(dá)到治療肝癌的目的。

11、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果：

12、1.?本發(fā)明中制備獲得的一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其中甜葉菊外泌體含有的活性成分具有殺菌抗炎效果，可以緩解或減輕腫瘤組織的炎癥反應(yīng)，提供更有效和安全的治療選擇。

13、2.?本發(fā)明中制備獲得的一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，阿霉素作為一種中晚期肝癌化療藥物，能夠在甜葉菊外泌體作為藥物載體的情況下，高效靶向的遞送到肝癌細(xì)胞和組織，促進(jìn)藥物的治療效果，減少對其他正常組織的毒性作用。

14、3.?本發(fā)明中制備獲得的一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體具有高效性和靶向性，有助于藥物的遞送，促進(jìn)肝癌的治療效果。

技術(shù)特征：

1.一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其特征是：在提取純化的甜葉菊外泌體表面負(fù)載有阿霉素。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其特征是：負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體具有近球形結(jié)構(gòu)，甜葉菊外泌體的平均粒徑是241.40nm，負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體粒徑是176.16nm。

3.一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：包括以下步驟：s1：制備甜葉菊外泌體，新鮮甜葉菊葉片高速破壁獲得甜葉菊汁液，通過差速超速離心獲得甜葉菊外泌體；s2：甜葉菊外泌體純化，利用蔗糖濃度梯度法分離純化外泌體；s3：負(fù)載阿霉素，在pbs體系中，將外泌體混懸液與阿霉素共孵育，將混合體系超聲分散得到均質(zhì)溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：s1的具體方法：采集新鮮甜葉菊洗凈后高速破壁20分鐘，得到的甜葉菊汁液；再3000rpm離心30分鐘，去除沉渣收集上清10000rpm離心30分鐘，再次收集上清15000rpm離心1小時，收集沉淀物甜葉菊外泌體。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：s2的具體方法：利用8%、30%、45%和60%的蔗糖濃度梯度法，15000rpm離心1小時純化外泌體，純化后的外泌體利用pbs緩沖液重懸，保存于-80℃。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體的制備方法，其特征是：s3的具體方法：在pbs體系中，將外泌體混懸液與阿霉素以1:3v/v共孵育4h，混合體系超聲循環(huán)6次，每次30s，每次30w，循環(huán)之間冷卻時間為2分鐘，最終得到甜葉菊外泌體負(fù)載阿霉素的均質(zhì)溶液。

7.一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體在制備治療耐阿霉素肝細(xì)胞癌的藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體及制備方法和應(yīng)用，所述在提取純化的甜葉菊外泌體表面負(fù)載有阿霉素是在提取純化的甜葉菊外泌體表面負(fù)載有阿霉素。本發(fā)明中制備獲得的一種負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體，其中甜葉菊外泌體含有的活性成分具有殺菌抗炎效果，可以緩解或減輕腫瘤組織的炎癥反應(yīng)，提供更有效和安全的治療選擇。本發(fā)明獲得的負(fù)載阿霉素的甜葉菊外泌體藥物載體具有高效性和靶向性，有助于藥物的遞送，促進(jìn)肝癌的治療效果。

技術(shù)研發(fā)人員：王峰,馮偉,戚菁,曹學(xué)敏,李祎,楊君伶
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南通大學(xué)附屬醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6