本發(fā)明涉及醫(yī)藥，更具體地，涉及一種去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、據(jù)《2020年全球癌癥統(tǒng)計報告》報道，2020年全球估計有1930萬新發(fā)癌癥病例和1000萬癌癥死亡病例，其中肝癌是第三大死因。以肝細胞癌為代表的肝癌是全球第六大高發(fā)癌癥，具有死亡率高、生存期短(中位生存期僅11個月)、早期診斷率低、病程發(fā)展快、惡性程度高、預(yù)后差等特點，給全球健康造成了嚴重的負擔。尤其在中國，肝細胞癌(hcc)的發(fā)病率高達35/100000，承擔著全球近一半的hcc治療負擔，hcc防治之路任重道遠。

2、去甲斑蝥素(norcantharidin，nctd)是斑蝥素(cantharidin，ctd)的去甲基化衍生物。其在治療腫瘤方面具有獨特的優(yōu)勢，是治療肝癌、食管癌、胃癌和賁門癌等多種消化道癌癥的首選輔助藥物，其中以原發(fā)性肝癌為主。nctd不僅可以通過下調(diào)nf-κb信號通路激活水平，起到細胞凋亡、抑制細胞分泌炎癥因子的作用，還可以抑制腫瘤細胞增殖，升高白細胞，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)且不產(chǎn)生骨髓抑制。另外，nctd還可以改善肝功能，用于治療肝炎、肝硬化及乙肝病毒。綜上，作為代表性的中藥強效抗腫瘤成分，去甲斑蝥素具有多種生物活性，且為目前唯一具有升高白細胞作用的抗腫瘤成分，具有很大的開發(fā)價值。

3、但去甲斑蝥素水溶性差，半衰期短，在體內(nèi)易被快速清除，并伴有明顯的腎毒性和心臟毒性，極大限制了其臨床應(yīng)用。目前，去甲斑蝥素主要以去甲斑蝥素片劑和注射劑應(yīng)用于臨床。去甲基化雖然明顯減輕了斑蝥素的毒性，但并未完全消除。臨床使用時部分患者口服每日超過30mg時即出現(xiàn)不良反應(yīng)，主要表現(xiàn)為惡心、嘔吐、頭暈等癥狀。去甲斑蝥酸鈉注射液臨床上推薦用法用量為：靜脈注射，用5％葡萄糖注射液稀釋后，緩慢靜脈推注，一次10～30mg。由于注射液為堿性溶液，其ph值約為8～10，遠大于血液ph值(7.35～7.45)，因此對血管壁刺激較大，易引起化學(xué)性靜脈炎；且由于藥物本身具有較強刺激性，亦可引起血管痙攣，血液減少，使局部血管中去甲斑蝥酸鈉濃度增大，加重靜脈炎，且若輸液速度大于血液流速，則靜脈炎的發(fā)生率明顯增高。因此，去甲斑蝥酸鈉注射液在臨床用于外周淺靜脈輸液時，發(fā)生淺靜脈炎的比例相當高，有的病人拒絕用該藥治療，極大的影響了藥物在臨床上的正常使用。

4、近年來，研究者正利用新型制劑的靶向性、緩控釋等作用特點，增強靶向給藥性，減少藥物在腎臟分布和對泌尿系統(tǒng)的刺激作用，使其在腫瘤疾病中發(fā)揮更顯著的療效。主要包括制備成微球，納米粒，脂質(zhì)體以及微乳。專利cn101229125a制備了一種含有去甲斑蝥酸鈉的微乳注射劑，其載藥量最高只有76μg/ml。同時，制備過程與普通脂肪乳劑相似，且無粒徑大小說明。專利cn115054578a制備了一種去甲斑蝥素納米脂質(zhì)載體，其包封率雖高達74％，但載藥量較低，難以滿足臨床用藥的劑量要求。專利cn107753429a制備了一種具有肝靶向作用的去甲斑蝥素脂質(zhì)體，其包封率僅為28％，且穩(wěn)定性差，需凍干保存，相關(guān)實驗數(shù)據(jù)也并未證明其肝靶向作用。專利cn115671048a制備了一種去甲斑蝥素脂質(zhì)體與乳劑的復(fù)合體，制備工藝及輔料復(fù)雜。

5、因此，雖目前已公開了多種不同劑型的去甲斑蝥素制劑，但這些制劑仍存在包封率及載藥量低，制備工藝復(fù)雜，無顯著靶向性等缺陷，且上述專利中尚未陳述制劑的藥動學(xué)數(shù)據(jù)及有益的藥效數(shù)據(jù)，無法考證進一步開發(fā)生產(chǎn)的可行性，仍有諸多問題需進一步改善。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷，提供一種去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液及其制備方法和應(yīng)用，解決了去甲斑蝥素自身的血管刺激性，腎毒性，心臟毒性，半衰期短，以及去甲斑蝥素脂質(zhì)體包封率及載藥量低的問題，同時保證脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，實現(xiàn)增效減毒的目的。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

3、一種去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，包括以下質(zhì)量份數(shù)的組分：

4、5份～15份的去甲斑蝥素、50份～200份的磷脂、30份～40份的dspe-mpeg2000、25份～50份的膽固醇和79.1份～118.6份的醋酸鈣。

5、本發(fā)明還公開了一種如上述的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液的制備方法，包括以下步驟：

6、(1)將去甲斑蝥素溶于60℃～100℃的水中，加堿調(diào)節(jié)ph至9～11，在60℃～80℃下加熱20min～40min后加酸調(diào)節(jié)ph至3～4，得到預(yù)處理后的去甲斑蝥素；

7、(2)將磷脂、dspe-mpeg2000和膽固醇溶于有機溶劑中，減壓蒸發(fā)除去所述有機試劑，得到脂質(zhì)薄膜，隨后加入醋酸鈣進行水化、整粒處理，得到大單層脂質(zhì)體，隨后將所述大單層脂質(zhì)體外水相置換為ph為3～7的硫酸鈉水溶液，以形成脂質(zhì)體膜內(nèi)外ph梯度，得到空白脂質(zhì)體；

8、(3)將所述空白脂質(zhì)體和所述預(yù)處理后的去甲斑蝥素混合進行載藥，得到所述去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液。

9、本發(fā)明還公開了一種如上述的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，或如上述的制備方法制備得到的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

10、實施本發(fā)明實施例，將具有如下有益效果：

11、本發(fā)明采用薄膜水化法制備空白脂質(zhì)體，醋酸鈣主動載藥法提高制劑包封率，制得的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液包封率達到85％～99.3％范圍內(nèi)，且長期穩(wěn)定性良好，不需要凍干保存，極大的簡化了生產(chǎn)工藝，降低生產(chǎn)成本。

12、本發(fā)明進一步通過共價鍵偶聯(lián)法將乳鐵蛋白與脂質(zhì)體連接，制得的乳鐵蛋白修飾的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，與市售去甲斑蝥酸鈉注射液相比，具有明顯的肝癌細胞靶向性優(yōu)勢，其粒徑均勻，長期穩(wěn)定性和血漿穩(wěn)定性良好。

13、藥動學(xué)與藥效學(xué)實驗結(jié)果表明該制劑顯著降低注射時血管刺激性以及對其他器官的損傷，延長藥物作用時間，抗腫瘤效果明顯優(yōu)于市售制劑，實現(xiàn)增效減毒的目的。

技術(shù)特征：

1.一種去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，其特征在于，包括以下質(zhì)量份數(shù)的組分：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，其特征在于，所述磷脂與所述膽固醇的質(zhì)量比為2:1～4:1；

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，其特征在于，還包括以下質(zhì)量份數(shù)的組分：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，其特征在于，所述dspe-mpeg2000與所述dspe-mpeg2000-cooh的摩爾比為7:1～12:1。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，其特征在于，所述去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液中藥脂比(w/w)為1:10～1:20，去甲斑蝥素脂質(zhì)體的平均粒徑為100nm～200nm，90％粒徑累積值≤220nm，含量為標示量的95％～105％，包封率為85％～99.9％，乳鐵蛋白連接率為40％～65％。

6.一種如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述醋酸鈣的濃度為100mm～150mm；

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述制備方法還包括以下步驟：

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，edc、nhs和dspe-peg2000-cooh的摩爾比為9:9:1～12:12:1；

10.一種如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液，或如權(quán)利要求6-9中任意一項所述的制備方法制備得到的去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種去甲斑蝥素脂質(zhì)體注射液及其制備方法和應(yīng)用，注射液包括以下質(zhì)量份數(shù)的組分：5份～15份的去甲斑蝥素、50份～200份的磷脂、30份～40份的DSPE?mPEG<subgt;2000</subgt;、25份～50份的膽固醇和79.1份～118.6份的醋酸鈣。本發(fā)明通過薄膜水化法制備空白脂質(zhì)體，醋酸鈣主動載藥法提高制劑包封率，制得的制劑可通過提高藥物的靶向性和延長藥物體內(nèi)作用時間顯著增強其抗腫瘤效果，并降低藥物對血管的刺激性以及對其他器官的損傷，實現(xiàn)增效減毒的目的。

技術(shù)研發(fā)人員：尹湉,張宇,何海冰,茍靖欣,唐星,慕寅玲
受保護的技術(shù)使用者：沈陽藥科大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9