一種蓮子心氯仿提取物及其制備方法和用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種蓮子心氯仿提取物，所述蓮子心氯仿提取物采用以下步驟制得：選取干燥的蓮子心作為原料，磨成粉末；采用甲醇或乙醇加熱回流提取2～4次，收集提取物；將提取物離心處理，收集上層液，然后將上層液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干，收集殘余物；將殘余物溶解于鹽酸溶液中，用石油醚萃取2～4次，除去油脂，收集濾出液；將濾出液的pH值調(diào)節(jié)至9-11，然后用氯仿萃取，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即蓮子心氯仿提取物。該提取物經(jīng)過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)能夠舒張氣道平滑肌，能夠用于緩解哮喘患者氣道阻塞，因此上述蓮子心氯仿提取物能夠應(yīng)用于在制備治療支氣管哮喘藥物中。
【專利說明】一種蓮子心氯仿提取物及其制備方法和用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明提供了一種蓮子心氯仿提取物，該提取物用于制備預(yù)防或治療支氣管哮喘方面的藥物，屬于中醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]支氣管哮喘(以下簡稱“哮喘”)是一種常見的多發(fā)性慢性呼吸道疾病，其發(fā)病機(jī)制目前尚不完全清楚。目前全球至少有3億以上，我國有近3000萬哮喘患者，哮喘已成為僅次于癌癥的世界第二大致死和致殘疾病。在“我國哮喘疾病發(fā)病狀況、治療進(jìn)展及哮喘管理十年進(jìn)步新聞通報(bào)”發(fā)布會(huì)上公布的最新一項(xiàng)調(diào)查顯示，自1990年至2000年，中國大陸哮喘疾病發(fā)病率從0.91%上升到1.97% (上升了一倍多)。2010年北京、重慶、廣州三個(gè)城市的同期調(diào)查資料顯示:兒童哮喘的患病率分別為3.15%,7.45%,2.09%，與10年前的2.69%、4.63%、1.33%相比，均呈明顯上升趨勢。目前哮喘疾病的有效控制率低下，總體狀況不容樂觀，其主要原因是隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展生活水平的提高，環(huán)境變化加快，汽車尾氣、工業(yè)廢氣、家庭裝修、食品添加劑、家養(yǎng)寵物等過敏原越來越多，這都必然導(dǎo)致哮喘的發(fā)病率越來越高。因此亟待尋找能更安全有效的治療哮喘的藥物。
[0003]氣道阻塞是哮喘的重要病理特征，而氣道平滑肌的異常收縮是導(dǎo)致這一癥狀的主要原因。目前支氣管擴(kuò)張劑如β2_受體激動(dòng)劑被廣泛應(yīng)用于臨床，但治療效果有限，30-45%哮喘病人的肺功能無法得到改善，即使癥狀有所緩解，停止治療后病情亦容易反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重者更需要住院治療。這給患者本人和家庭造成了極大的痛苦，同時(shí)也加重了社會(huì)經(jīng)濟(jì)的負(fù)擔(dān)和損失。
[0004]蓮拉丁學(xué)名Nelumbo nucifera Gaertn,屬多年水生草本植物,為原雙子葉植物睡蓮目睡蓮科植物，在我國主要分布于湖南、湖北、江西、福建、江蘇、浙江等地。蓮子心是蓮的成熟種子的綠色胚芽，其味清苦，具有極好的降血壓去血脂功能。蓮子心的化學(xué)成分包含蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿、荷葉堿、前荷葉堿、牛角花素、甲基紫堇杷靈、去甲基烏藥堿、水犀草甙、金絲桃甙、蕓香甙等黃酮類、β_谷留醇、β_谷留醇脂肪酸酯、棕櫚酸、不飽和酮酸及葉綠素等。現(xiàn)代藥理研究表明蓮子心中的活性成分具有抗高血壓、抗氧化、抗炎以及抑制丁酰膽鹼酯酶的作用。目前利用蓮子心氯仿提取物舒張氣道平滑肌治療哮喘方面的研究，尚未見國內(nèi)外有相關(guān)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種蓮子心氯仿提取物，該提取物經(jīng)過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)能夠舒張氣道平滑肌，能夠用于緩解哮喘患者氣道阻塞，因此上述蓮子心氯仿提取物能夠應(yīng)用于在制備治療支氣管哮喘藥物中。
[0006]實(shí)現(xiàn)本發(fā)明上述目的所采用的技術(shù)方案為:
[0007]—種蓮子心氯仿提取物，所述蓮子心氯仿提取物采用以下步驟制得:
[0008](I)、選取干燥的蓮子心作為原料，磨成粉末；
[0009](2)、采用甲醇或乙醇加熱回流提取2?4次，收集提取物；
[0010](3)、將提取物離心處理，收集上層液，然后將上層液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干，收集殘余物；
[0011](4)、將殘余物溶解于鹽酸溶液中，用石油醚萃取2?4次，除去油脂，收集濾出液；
[0012](5)、將濾出液的pH值調(diào)節(jié)至9-11，然后用氯仿萃取，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即蓮子心氯仿提取物。
[0013]步驟(2)中采用體積濃度為95%的乙醇加熱回流提取三次。
[0014]步驟(4)中將殘余物溶解于質(zhì)量濃度為2%的鹽酸溶液中，用石油醚萃取3次。
[0015]步驟(5)中用氨水將濾出液的pH值調(diào)節(jié)至10。
[0016]本申請的發(fā)明人針對以上提取物進(jìn)行了生物活性試驗(yàn)，具體研究結(jié)論如下:
[0017]蓮子心氯仿提取物抑制高鉀引起氣道平滑肌收縮。
[0018]蓮子心氯仿提取物抑制乙酰膽堿弓I起氣道平滑肌收縮。
[0019]本發(fā)明的有益效果:通過對實(shí)驗(yàn)小鼠離體氣管環(huán)張力的檢測發(fā)現(xiàn)，蓮子心氯仿提取物具有有效的氣管平滑肌舒張作用，有望應(yīng)用于緩解哮喘患者氣道阻塞。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0020]圖1為本實(shí)施例中蓮子心氯仿部提取物對高鉀引起氣道平滑肌收縮的作用圖；
[0021]圖2為本實(shí)施例中蓮子心氯仿部提取物對乙酰膽堿引起氣道平滑肌收縮的作用圖。

【具體實(shí)施方式】
[0022]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做詳細(xì)具體的說明，但是本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于以下實(shí)施例。
[0023]1、蓮子心氯仿提取物的制備:
[0024]蓮子心來自湖北洪湖。選取干燥的蓮子心作為原料，磨成粉末；采用體積濃度為95 %的乙醇加熱回流提取三次，收集提取物；將提取物離心處理，收集上層液，然后將上層液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干，收集殘余物；將殘余物溶解于質(zhì)量濃度為2%的鹽酸溶液中，用石油醚萃取3次，除去油脂，收集濾出液；用氨水將濾出液的pH值調(diào)節(jié)至10，然后用氯仿萃取，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即蓮子心氯仿提取物，約為原材料干重的0.71 %。氯仿提取物溶解于DMSO中用于生物活性實(shí)驗(yàn)檢測。
[0025]2、小鼠氣管的體外分離:
[0026]雄性成年的BALB/c小鼠頸椎脫臼法處死，將口腔和四肢釘在解剖板上，噴灑75%的酒精后剪開胸腔，暴露出心肺組織，移除心臟之后取下從喉結(jié)至肺部的一整段組織，將取下的組織馬上浸泡于 PSS 溶液(NaCl 135mM, KCl 5mM, MgCl2 ImM, CaCl2 2mM, HEPES1mM, glucose 1mM, pH 7.4)中，然后在轉(zhuǎn)移至膠板上進(jìn)行進(jìn)一步修剪。在SZM體視顯微鏡下用維納斯剪小心去除氣管外周的結(jié)締組織及內(nèi)腔中的殘留血液。
[0027]3、小鼠氣道平滑肌的張力檢測方法:
[0028]將小鼠氣管剪成長約5_的氣管環(huán)后與掛鉤連接，小心銜接張力換能器后置于內(nèi)有6mL PSS并持續(xù)通氧的37°C的恒溫水浴槽中.前負(fù)荷調(diào)至500mg，開始平衡，平衡期間，每15min換液I次，共換液4次。平衡完畢后使用80mM高鉀溶液或100 μ M乙酰膽堿(ACh)溶液進(jìn)行預(yù)刺激，充分刺激組織活性后換液洗脫，至恢復(fù)至基線，30min后即可開始試驗(yàn)。
[0029]實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
[0030](I)蓮子心氯仿提取物抑制高鉀引起氣道平滑肌收縮
[0031]如圖1，離體小鼠氣管環(huán)在80mM高鉀溶液中發(fā)生穩(wěn)定持續(xù)的預(yù)收縮，當(dāng)加入蓮子心氯仿提取物后收縮的氣管環(huán)張力逐漸下降，隨著蓮子心氯仿提取物濃度的增加氣管環(huán)張力逐漸恢復(fù)為收縮前水平。表明蓮子心氯仿部提取物可完全舒張高鉀引起氣道平滑肌收縮，且該藥物作用呈現(xiàn)劑量依賴性。
[0032](2)蓮子心氯仿部提取物抑制乙酰膽堿引起氣道平滑肌收縮
[0033]如圖2，離體小鼠氣管環(huán)在ΙΟΟμΜ ACh溶液中發(fā)生穩(wěn)定持續(xù)的預(yù)收縮，當(dāng)加入蓮子心氯仿部提取物后收縮的氣管環(huán)張力逐漸下降，隨著蓮子心氯仿提取物濃度的增加氣管環(huán)張力逐漸恢復(fù)為收縮前水平。表明蓮子心氯仿部提取物可完全舒張ACh引起氣道平滑肌收縮，且該藥物作用呈現(xiàn)劑量依賴性。
【權(quán)利要求】
1.一種蓮子心氯仿提取物，其特征在于:所述蓮子心氯仿提取物采用以下步驟制得: (1)、選取干燥的蓮子心作為原料，磨成粉末； (2)、采用甲醇或乙醇加熱回流提取2?4次，收集提取物； (3)、將提取物離心處理，收集上層液，然后將上層液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干，收集殘余物；(4)、將殘余物溶解于鹽酸溶液中，用石油醚萃取2?4次，除去油脂，收集濾出液； (5)、將濾出液的邱值調(diào)節(jié)至9-11，然后用氯仿萃取，收集萃取液并蒸干后制得浸膏，即蓮子心氯仿提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蓮子心氯仿提取物，其特征在于:步驟(2)中采用體積濃度為95%的乙醇加熱回流提取三次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蓮子心氯仿提取物，其特征在于:步驟(4)中將殘余物溶解于質(zhì)量濃度為2%的鹽酸溶液中，用石油醚萃取3次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蓮子心氯仿提取物，其特征在于:步驟(5)中用氨水將濾出液的邱值調(diào)節(jié)至10。
5.權(quán)利要求1所述的蓮子心氯仿提取物在制備治療支氣管哮喘藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P11/06GK104306455SQ201410628019
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年11月7日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月7日
【發(fā)明者】劉慶華, 陳微微, 談麗 申請人:中南民族大學(xué)